抗生素效價的測定-微生物檢定法講解

抗生素效價的測定-微生物檢定法吳爽講師●生化藥物和生物制品●生物藥物的有效性是指單位劑量的生物藥物應(yīng)能產(chǎn)生的特定生物效應(yīng)?！裼行栽u價需采用能夠測定藥品生物學(xué)活性的生物技術(shù)方法。●常用的有效性測定技術(shù)：

生物測定法、生物活性測定法和效價測定法●用于確證藥品的真?zhèn)魏托r。生物藥物定義抗生素效價的測定-微生物檢定法●《中國藥典》2015年版四部

通則3400生物測定法●27種技術(shù)一、生物測定法抗生素效價的測定-微生物檢定法（一）生物活性測定法二、生物活性/效價測定法●《中國藥典》2015年版四部

通則1200生物活性測定法●17種技術(shù)

生化藥物的效價/活力測定技術(shù)抗生素效價的測定-微生物檢定法●抗生素微生物檢定法二、生物活性/效價測定法●在適宜條件下，根據(jù)量反應(yīng)平行線原理設(shè)計，通過檢測抗生素對微生物的抑制作用，計算抗生素活性（效價）的方法?！褚钥股氐目咕钚詾橹笜?biāo)，測定原理與臨床應(yīng)用一致，直接反映抗生素的醫(yī)療價值，試驗(yàn)靈敏度較高，供試品用量較小，對產(chǎn)品純度限度要求較寬?！瘛吨袊幍洹贩椒ǎ汗艿?、濁度法抗生素效價的測定-微生物檢定法（1）檢定原理二、生物活性/效價測定法●量反應(yīng)平行線原理：因標(biāo)準(zhǔn)品和供試品為同種抗生素，在相同試驗(yàn)條件下，標(biāo)準(zhǔn)品溶液和供試品溶液對試驗(yàn)菌所得的量反應(yīng)曲線，在一定劑量范圍內(nèi)互相平行?！駲z定方法：一劑量法（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）、二劑量法、三劑量法等?！窨股匚⑸餀z定法抗生素效價的測定-微生物檢定法（2）試驗(yàn)菌二、生物活性/效價測定法●管碟法

枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、藤黃微球菌、

大腸桿菌、啤酒酵母、肺炎克雷伯菌、支氣管炎博德特菌●濁度法

金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、白念珠菌●抗生素微生物檢定法抗生素效價的測定-微生物檢定法（3）管碟法二、生物活性/效價測定法●利用抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴(kuò)散作用，比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品兩者對接種的試驗(yàn)菌產(chǎn)生抑菌圈的大小，以測定供試品效價的一種方法?！駠H上抗生素藥品檢定的經(jīng)典方法?！?/p>

《中國藥典》法定方法：二劑量法和三劑量法?！窨股匚⑸餀z定法抗生素效價的測定-微生物檢定法（3）管碟法二、生物活性/效價測定法雙碟底層、菌層牛津杯二劑量法三劑量法測量各個抑菌圈的直徑（或面積）●抗生素微生物檢定法抗生素效價的測定-微生物檢定法（4）濁度法二、生物活性/效價測定法●利用抗生素在液體培養(yǎng)基中對試驗(yàn)菌生長的抑制作用，通過測定培養(yǎng)后細(xì)菌濁度值的大小，比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品對試驗(yàn)菌生長抑制的程度，以測定供試品效價的一種方法?！?/p>

《中國藥典》法定方法：

標(biāo)準(zhǔn)曲線法、二劑量法或三劑量法?！窨股匚⑸餀z定法微生物比濁法測定儀抗生素效價的測定-微生物檢定法【實(shí)例】《中國藥典》2015年版硫酸鏈霉素【含量測定】方法：精密稱取本品適量，加滅菌水定量制成每1ml中約含1000單位的溶液，照抗生素微生物檢定法（通則1201)測定。1000鏈霉素單位相當(dāng)于1mg的C21H39N7O12。分析：按照“抗生素微生物檢定試驗(yàn)設(shè)計表”規(guī)定，鏈霉素的試驗(yàn)菌為枯草芽孢桿菌，培養(yǎng)條件為Ⅰ號培養(yǎng)基、35～37℃、14～16小時，選擇鏈霉素標(biāo)準(zhǔn)品（理論計算值798.3U/mg），抗生素濃度范圍0.6～1.6U/ml?？股匦r的測定-微生物檢定法（二）生物活性/效價測定法二、生物活性/效價測定法●《中國藥典》2015年版四部