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文檔簡介

PAGEPAGE39生物安全題一、單選題1生物實(shí)驗(yàn)中的一次性手套及沾染EB致癌物質(zhì)的物品,應(yīng)()。A丟棄在普通垃圾箱內(nèi)B統(tǒng)一收集和處理C隨意放在實(shí)驗(yàn)室D立即燒毀B2實(shí)驗(yàn)室常用于皮膚或普通實(shí)驗(yàn)器械的消毒液有()。A75%乙醇B福爾馬林(甲醛)C來蘇兒(甲酚)D漂白粉(次氯酸鈉)A3在分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、基因工程等實(shí)驗(yàn)中,常見藥品()是致癌物質(zhì)?實(shí)驗(yàn)中不能讓藥品接觸到皮膚上。A單體丙烯酰胺B甲叉雙丙稀酰胺C溴化乙錠(EB)D十二烷基磺酸鈉C4實(shí)驗(yàn)室生物安全性問題不僅涉及到動物間疾病的傳播,最主要還關(guān)系到什么?A實(shí)驗(yàn)成敗B實(shí)驗(yàn)室污染C人民身體健康D動物死亡C5關(guān)于紫外線消毒,下列說法不正確的是()。A它可以是固定式的,也可以是活動式的,但距離被照射物不超過1.2m為宜B紫外線消毒方便實(shí)用,但不能徹底滅菌,特別是對細(xì)菌的芽孢殺滅效果較差C紫外線對人體有傷害作用,不可直視,更不能在開著的紫外燈光下工作D紫外線可用于所有病原微生物的消毒D6移液時,當(dāng)有生物污染性物質(zhì)濺出,為防止擴(kuò)散應(yīng)()。A立即用浸過消毒劑的布或紙?zhí)幚?,然后將被污染的物品進(jìn)行高壓消毒B立即用布或紙?zhí)幚鞢立即采用高壓消毒D立即用浸過消毒劑的布或紙?zhí)幚鞟7依照實(shí)驗(yàn)室生物安全國家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定,什么場所不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動?A一級、二級實(shí)驗(yàn)室B三級實(shí)驗(yàn)室C四級實(shí)驗(yàn)室D五級實(shí)驗(yàn)室A8在微生物實(shí)驗(yàn)中,一些污染或盛有有害細(xì)菌和病毒的器皿,可()。A不需要經(jīng)消毒和高壓滅菌處理后就再利用B不需要經(jīng)消毒和高壓滅菌處理后就直接棄掉C經(jīng)消毒和高壓滅菌處理后,再利用D集中存放待統(tǒng)一處理C9在微生物實(shí)驗(yàn)中,一些不要的菌種等可()。A直接向下水管道傾倒B不需要經(jīng)消毒和高壓滅菌處理后,直接棄掉C經(jīng)消毒和高壓滅菌處理后,再棄掉D經(jīng)紫外線照射后直接棄掉C10如果在微生物實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)意外事故(如菌種管打破等),應(yīng)立即用什么來清潔桌面、洗手等,及時殺滅細(xì)菌和病毒,避免污染面擴(kuò)大?A用消毒劑(84消毒劑)B用普通自來水C用純凈水D乙醇A11恒溫培養(yǎng)箱的使用最高溫度為()。A60B100C45D80A12紫外線消毒方便實(shí)用,紫外燈可以是固定式,也可以是活動式的,但離被照射物不應(yīng)超過多少距離?A1.2mB1.8mC2.2mD3.2mA13在生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行有害微生物和轉(zhuǎn)基因操作,應(yīng)使用()。A生物安全柜B凈化工作臺C普通實(shí)驗(yàn)臺D通風(fēng)柜A14采用下列哪種方法對受污染的移液管消毒滅菌后,再用自來水沖洗及去離子水沖凈?A適宜的消毒劑中浸泡和高壓滅菌鍋中B高壓消毒鍋中C適宜的消毒劑中浸泡D肥皂水中浸泡A15使用移液管時下列哪種操作是正確的?A可以用移液管反復(fù)吸入和抽出傳染性物質(zhì)B一根移液管未經(jīng)清洗,可吸取多種溶液C可以將任何傳染性物質(zhì)的液體吹入空氣D用洗耳球吹吸移液管D16關(guān)于使用高壓滅菌器注意事項(xiàng)不正確是()。A注意防護(hù),防止?fàn)C傷,待溫度降下后再開蓋B禁止器皿蓋著蓋子進(jìn)行高壓滅菌,易產(chǎn)生爆裂C定期檢查排水桶、排水管D一次高壓滅菌物品盡可能裝滿D17使用高壓滅菌器時,以下哪個要求是不必要的?A滅菌器腔內(nèi)裝載要松散,以便蒸汽作用均勻B必須穿防護(hù)服和戴手套C滅菌器的排水過濾器應(yīng)經(jīng)常拆下清洗D待溫度降至80°C以下時才能打開高壓滅菌器B18以下哪種不是生物醫(yī)學(xué)類實(shí)驗(yàn)室中必備的消毒溶液?A0.5%的次氯酸鈉溶液B1.0%的來蘇爾溶液C75%乙醇溶液及棉球D10%氨水D19被病原微生物污染的玻璃器皿,應(yīng)先放在什么設(shè)備中進(jìn)行消毒滅菌?A烘箱B高壓滅菌鍋C加熱真空烘箱D微波爐B20全自動高壓滅菌器的使用哪項(xiàng)是正確的()。A同類物品裝放一起B(yǎng)液體和固體物品分開存放C敷料與器械同時滅菌時,應(yīng)將敷料放在下層D常用各種物品的滅菌時間為20-30min(110-121℃B21一本實(shí)驗(yàn)原始記錄本的封面被細(xì)菌污染,適宜的消毒方法是()。A干烤B高壓蒸汽滅菌法C75%酒精浸泡D紫外線照射D22生物安全柜操作時廢物袋以及盛放廢棄吸管的容器放置要求不正確的是()。A廢物袋以及盛放廢棄吸管的容器等必須放在安全柜內(nèi)而不應(yīng)放在安全柜之外B體積大的放在生物安全柜一側(cè)即可C污染的吸管、容器等應(yīng)先在放于安全柜中裝有消毒液的容器中消毒1h以上,方可處理D消毒后的廢棄物方可轉(zhuǎn)入醫(yī)療廢物專用垃圾袋中進(jìn)行高壓滅菌等處理B23下列不屬于實(shí)驗(yàn)室一級防護(hù)屏障的是:A生物安全柜B防護(hù)服C口罩D緩沖間D24下列哪些措施不是減少氣溶膠產(chǎn)生的有效方法:A規(guī)范操作B戴眼罩C加強(qiáng)人員培訓(xùn)D改進(jìn)操作技術(shù)B25運(yùn)輸高致病性原微生物菌(毒)種或者樣本須有不少于2人護(hù)送,并采取相應(yīng)的防護(hù)措施,以下哪種運(yùn)輸方式目前是不允許的:A城市鐵路B飛機(jī)C專車D輪船A26二級生物安全實(shí)驗(yàn)室必須配備的設(shè)備是:A生物安全柜和培養(yǎng)箱B生物安全柜和水浴箱C生物安全柜和高壓滅菌器D離心機(jī)和高壓滅菌器C27PCR實(shí)驗(yàn)室要求嚴(yán)格分區(qū),一般分為以下四區(qū):A主實(shí)驗(yàn)區(qū)、樣本置備區(qū)、產(chǎn)物擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)B試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本置備區(qū)、產(chǎn)物擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)C主實(shí)驗(yàn)區(qū)、樣本置備區(qū)、產(chǎn)物擴(kuò)增區(qū)、試劑準(zhǔn)備區(qū)D主實(shí)驗(yàn)區(qū)、試劑準(zhǔn)備區(qū)、產(chǎn)物擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)B28作為甲類傳染病的霍亂進(jìn)行大量活菌的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)該在哪種級別的實(shí)驗(yàn)室ABSL-1BBSL-2CBSL-3DBSL-4B29避免感染性物質(zhì)擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)操作的注意點(diǎn)是A微生物接種環(huán)直徑應(yīng)為2~3mm并且完全閉合,柄的長度不應(yīng)超過6cmB應(yīng)該使用密閉的微型電加熱滅菌接種環(huán),最好使用一次性的、無需滅菌的接種環(huán)C小心操作干燥的痰標(biāo)本,以免產(chǎn)生氣溶膠D以上都對D30高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本在運(yùn)輸過程中發(fā)生被盜、被搶、丟失、泄露時,承運(yùn)單位、護(hù)送人、保藏機(jī)構(gòu)應(yīng)立即采取必要的控制措施,以下多少小時內(nèi)向有關(guān)部門報(bào)告的時間是A1小時B2小時內(nèi)C3小時D4小時B31生物安全柜在使用前需要檢查正常指標(biāo),不包括A噪聲B氣流量C負(fù)壓在正常范圍D風(fēng)A32微生物對消毒因子的抗力從高到低的順序是A細(xì)菌芽孢、分枝桿菌、親水性病毒、真菌孢子、真菌繁殖體、細(xì)菌繁殖體、親脂性病毒B細(xì)菌芽孢、真菌孢子、分枝桿菌、親水性病毒、真菌繁殖體、細(xì)菌繁殖體、親脂性病毒C細(xì)菌芽孢、分枝桿菌、真菌孢子、親水性病毒、真菌繁殖體、細(xì)菌繁殖體、親脂性病毒D真菌孢子、細(xì)菌芽孢、分枝桿菌、親水性病毒、真菌繁殖體、細(xì)菌繁殖體、親脂性病毒B33脫卸個人防護(hù)裝備的順序是A外層手套→防護(hù)眼鏡→防護(hù)服→口罩帽子→內(nèi)層手套B防護(hù)眼鏡→外層手套→口罩帽子→防護(hù)服→內(nèi)層手套C防護(hù)服→防護(hù)眼鏡→口罩帽子→外層手套→內(nèi)層手套D口罩帽子→外層手套→防護(hù)眼鏡→內(nèi)層手套→防護(hù)服A34二級生物安全實(shí)驗(yàn)室硬件設(shè)施方面必須具備的條件A送排風(fēng)系統(tǒng)B三區(qū)兩緩布局CUPS電源D自動閉門系統(tǒng)D35生物安全柜內(nèi)少量灑溢,沒有造成嚴(yán)重后果屬于A嚴(yán)重差錯B一般差錯C一般實(shí)驗(yàn)室感染事故D嚴(yán)重實(shí)驗(yàn)室感染事故B36下列哪種不是實(shí)驗(yàn)室暴露的常見原因A因個人防護(hù)缺陷而吸入致病因子或含感染性生物因子的氣溶膠B被污染的注射器或?qū)嶒?yàn)器皿、玻璃制品等銳器刺傷、扎傷、割傷C在生物安全柜內(nèi)加樣、移液等操作過程中,感染性材料灑溢D在離心感染性材料及致病因子過程中發(fā)生離心管破裂、致病因子外溢導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)人員暴露C37實(shí)驗(yàn)動物按對攜帶的微生物控制程度分成不同的等級,國際分級為A.普通動物、悉生動物、無菌動物B.普通動物、清潔動物、無菌動物C.普通動物、清潔動物、悉生動物D.普通動物、無特定病原體動物、無菌動物D38在參照國際標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上,從我國實(shí)驗(yàn)動物實(shí)際情況出發(fā)常將實(shí)驗(yàn)動物分為以下幾級A.普通動物、悉生動物、無菌動物B.普通動物、悉生動物、清潔動物、無菌動物C.普通動物、無特定病原體動物、無菌動物D.普通動物、清潔動物、無特定病原體動物、無菌動物D39國內(nèi)分級法與國際分級法相比,在普通動物與無特定病原體動物間增加了一類等級動物:A.悉生動物B.無特定病原體動物C.清潔級動物D.無菌動物C40以下不屬于實(shí)驗(yàn)動物攜帶的人畜共患傳染病病原體的是:A.狂犬病毒B.漢坦病毒C.梅毒螺旋體D.馬爾堡病毒C41結(jié)核分枝桿菌可以通過何種途徑侵入易感機(jī)體,以下說法正確的是:A.呼吸道B.消化道C.皮膚損傷D.以上說法都對D42以下不能引起人畜共患病的沙門菌是:A.鼠傷寒沙門菌B.腸炎沙門菌C.副傷寒沙門菌D.豬霍亂沙門菌C43深部真菌的易感動物有:A.人B.貓C.猴D.以上都對D44以下可以引起實(shí)驗(yàn)動物攜帶的人畜共患傳染病病原體的是:A.狂犬病毒B.漢坦病毒C.猴痘病毒.以上都對D45動物實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù)分幾級?A.一級B.二級C.三級D.四級D46在安全柜型生物安全四級實(shí)驗(yàn)室,生物安全四級病原微生物感染的實(shí)驗(yàn)動物應(yīng)飼養(yǎng)在什么級別安全柜內(nèi)?A.一級生物安全柜B.二級生物安全柜C.三級生物安全柜D.四級生物安全柜C47動物實(shí)驗(yàn)的基本操作規(guī)范涉及:A.實(shí)驗(yàn)動物的飼養(yǎng)管理B.實(shí)驗(yàn)動物的操作與處理內(nèi)容C.實(shí)驗(yàn)操作后的護(hù)理D.以上都對D48病原菌分離的培養(yǎng)物,何種結(jié)果需要121℃30分鐘高壓消毒A.陽性結(jié)果B.陰性結(jié)果C.以上兩種均不需要D.以上兩種均需要D49關(guān)于實(shí)驗(yàn)動物護(hù)理的基本原則,以下說法錯誤的是:A.實(shí)驗(yàn)動物的飼養(yǎng)和使用應(yīng)遵守國家有關(guān)的法律和規(guī)定。B.動物實(shí)驗(yàn)可以在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)任何的區(qū)域進(jìn)行。C.使用過程中要求保證周圍環(huán)境和實(shí)驗(yàn)人員的安全。D.完善標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,避免或減輕因?qū)嶒?yàn)對動物造成的不適或痛苦。B50高壓蒸汽滅菌的紗布敷料、棉球打開未用完,最長保存期為:A.24小時B.10小時C.48小時D.2小時A51新潔爾滅是實(shí)驗(yàn)室常用消毒劑,其濃度為:A.0.01%B.0.1%C.1%D.10%B52輻射滅菌法不包括:A.紫外線B.紅外線C.微波D.燃燒D53紫外線照射消毒時間一般為:A.10min以上B.20min以上C.30min以上D.15min以上C54紫外線照射以多少納米波長最為有效:A.250-256nmB.200-300nmC.260-280nmD.260-266nmD55有些不耐100℃的物質(zhì),用間歇滅菌:將物品先用___加熱1h,然后置37℃保存A.30~40℃B.45~55℃C.75~80℃D.85C56手術(shù)室、無菌室的空氣消毒,常采用下列哪種方法A.來蘇爾噴灑B.高錳酸鉀液噴灑C.70%酒精噴灑D.紫外線照射D57常規(guī)微生物操作規(guī)程中的安全操作要點(diǎn),以下哪一項(xiàng)是錯誤的?()A.禁止非工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室B.禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物C.所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室之前不必進(jìn)行滅菌D.以移液器吸取液體,禁止口吸C58關(guān)于生物安全實(shí)驗(yàn)室個人責(zé)任,其中錯誤的是()。A.食品、飲料及類似物品只應(yīng)在指定的區(qū)域中準(zhǔn)備和食用B.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止吸煙C.禁止在工作區(qū)域內(nèi)使用化妝品和處理隱性眼鏡,長發(fā)應(yīng)束在腦后,工作時若戴有戒指、耳環(huán)、手表、手鐲、項(xiàng)鏈和其它珠寶應(yīng)將其置于個人防護(hù)裝備內(nèi)D.所有實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)接受免疫以預(yù)防其可能被所接觸的生物因子感染,應(yīng)按有關(guān)規(guī)定保存免疫紀(jì)錄和免疫前血清D59采集病原微生物樣本應(yīng)當(dāng)具備的條件,其中不正確的是:()。A.具有與采集病原微生物樣本所需要的生物安全防護(hù)水平相適應(yīng)的設(shè)備B.具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能的工作人員C.具有有效的防止病原微生物擴(kuò)散和感染的措施D.具有疑似某種病原微生物感染癥患者整個臨床病期均可采集樣本D二、多選題1對人類而言,下列那種情況屬于生物威脅的來源?A各種致病微生物、轉(zhuǎn)基因生物B外來生物入侵C工廠煙囪排放的空氣污染D生物恐怖事件ABD2實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的內(nèi)容包括()。A安全設(shè)備、個體防護(hù)裝置和措施B嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序和規(guī)程C實(shí)驗(yàn)室的特殊設(shè)計(jì)和建設(shè)要求D實(shí)驗(yàn)樓宇智能化系統(tǒng)ABC3以下哪幾項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的目的?A保護(hù)試驗(yàn)者不受實(shí)驗(yàn)對象侵染B確保實(shí)驗(yàn)室其他工作人員不受實(shí)驗(yàn)對象侵染C確保周圍環(huán)境不受其污染D保證得到理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果ABC4以下關(guān)于二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室的注意事項(xiàng)中,正確的是()。A必須使用生物安全柜等專用安全設(shè)備B工作人員在試驗(yàn)時應(yīng)穿工作服,戴防護(hù)眼鏡C工作人員手上只有在皮膚破損或皮疹時,才應(yīng)戴手套D必須具備噴淋裝置、洗眼器等應(yīng)急防護(hù)設(shè)施ABD5生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中個人防護(hù)用品包括()。A口罩、帽子、一次性手套B防護(hù)鏡C防護(hù)服D紙巾ABC6高致病性病原微生物是指A第一病原微生物B第二病原微生物C第三病原微生物D第四病原微生物AB7一下哪些具有感染性:A病人血液B病原體的培養(yǎng)物C動物尸體D廢棄的疫苗ABC8病原微生物的危害程度分類應(yīng)主要考慮以下哪些因素A微生物的致病性B微生物的傳播方式和宿主范圍C當(dāng)?shù)厮邆涞挠行Х雷o(hù)措施D當(dāng)?shù)厮邆涞挠行е委煷胧〢BCD9生物安全二級實(shí)驗(yàn)室門應(yīng)該標(biāo)有國際通用的生物危害標(biāo)志,應(yīng)包括以下哪些內(nèi)容:A通用的生物危害性標(biāo)志B傳染因子C實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或其他人的姓名、電話D進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的特殊要求ABCD10哪些人員應(yīng)該接受實(shí)驗(yàn)室生物安全培訓(xùn)A實(shí)驗(yàn)室管理人員B實(shí)驗(yàn)室清潔工C實(shí)驗(yàn)室修理工D鄰近實(shí)驗(yàn)室工作人員.ABC11實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)該盡力培訓(xùn)檔案,培訓(xùn)檔案應(yīng)包括哪些內(nèi)容:A培訓(xùn)內(nèi)容B培訓(xùn)時間C培訓(xùn)教師D考核結(jié)果ABCD12以下哪項(xiàng)是我國有關(guān)基因工程操作的管理規(guī)定A《基因工程安全管理辦法》B《農(nóng)業(yè)生物基因工程安全管理實(shí)施辦法》C《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理?xiàng)l例》D《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因安全評價管理辦法》AB13哪些人可作為實(shí)驗(yàn)室活動的生物危害評估的評估人:A設(shè)施技術(shù)負(fù)責(zé)人B實(shí)驗(yàn)室主任C項(xiàng)目負(fù)責(zé)人D設(shè)施、機(jī)構(gòu)安全委員會和生物安全工作人員ABCD14生物危害評估報(bào)告應(yīng)包括哪些內(nèi)容?A危害程度分類B背景資料C實(shí)驗(yàn)室活動及其危害性與預(yù)防措施D工作人員素質(zhì)ABCD三、判斷題1生物安全主要指在進(jìn)行生物學(xué)研究和教學(xué)過程中采取適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)設(shè)施、設(shè)備、防護(hù)原則及技術(shù)操作等以減少或消除有潛在危險性的因子暴露及意外釋放,從而保證人類和環(huán)境的安全。對2污染的(感染的)鋒利物品,如注射針頭、解剖刀片和碎玻璃;應(yīng)當(dāng)放置到不容易被刺破的帶蓋的容器中,把它們當(dāng)作傳染性物質(zhì)處理。對3一般實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境設(shè)施條件,達(dá)不到動物實(shí)驗(yàn)室國家標(biāo)準(zhǔn),不能作為動物實(shí)驗(yàn)的場地。對4為了防止污染,有些實(shí)驗(yàn)需要戴一次性手套。所以在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室就要戴手套,并一直戴著做所有事情。錯5開展病原微生物實(shí)驗(yàn)時,可用超凈工作臺替代生物安全柜。錯6無菌室使用前,將全部要接種的物品移入無菌室緩沖間,并用75%酒精棉球擦拭干凈,最后將物品送入工作臺上,開啟紫外燈進(jìn)行物品表面消毒滅菌30min左右。對7實(shí)驗(yàn)室應(yīng)時常監(jiān)測生物安全柜以確保其性能符合相關(guān)要求。應(yīng)保存檢查記錄和任何功能性測試結(jié)果,并在安全柜上標(biāo)記檢查證明。對8每次微生物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,必須用普通自來水清潔實(shí)驗(yàn)桌面,并需徹底洗手等。錯9凡是《基因工程實(shí)驗(yàn)》操作所用的一切塑料器具(eppendorf管、tip等),在使用前都應(yīng)裝入盒子和瓶子中滅菌,可以直接用手裝盒或裝瓶。錯10發(fā)酵實(shí)驗(yàn)期間,要保持室內(nèi)地面、桌面、操作臺及其各種物品和器具的清潔衛(wèi)生,同時也要保持發(fā)酵罐體外及其管路的衛(wèi)生,做到無灰塵、無污垢。對11發(fā)酵實(shí)驗(yàn)過程中要嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行,要注意水、電、汽(氣)安全,厲行節(jié)約,嚴(yán)禁跑冒滴漏。要注意不要將酸堿等液體滴到儀器設(shè)備表面,避免造成儀器表面污染或腐蝕。對12當(dāng)冷凍離心機(jī)用完后,不要馬上關(guān)閉離心機(jī)蓋子,應(yīng)敞開一段時間,待冷凍造成的霜自然晾干后,再關(guān)閉離心機(jī)蓋子。對13在需用橡膠或塑料手套的生化類實(shí)驗(yàn)中,不用經(jīng)常檢查手套有無破損。錯14每次微生物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,必須清潔消毒實(shí)驗(yàn)桌面,并需徹底洗手等。對15在微生物實(shí)驗(yàn)中,一定要有“有菌觀念”和“無菌操作意識”,操作中一定要按正確的程序嚴(yán)格無菌操作,一方面避免感染,另一方面加強(qiáng)自我防護(hù)。對16當(dāng)生物安全柜內(nèi)發(fā)生少量感染性材料溢灑時,應(yīng)用吸收紙巾立即處理,并立即用浸滿消毒液的毛巾或紗布對生物安全柜及其內(nèi)部的所以物品進(jìn)行擦洗。工作面消毒后應(yīng)更換手套,不論是摘下手套還是更換手套都要洗手。對17高壓滅菌鍋滅菌時,待滅菌的物品可與含有腐蝕性抑制劑或化學(xué)試劑的物質(zhì)放在一起滅菌。錯微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理手冊實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系文件目錄序號名稱備注1實(shí)驗(yàn)室人員和項(xiàng)目準(zhǔn)入制度2人員培訓(xùn)考核制度3人員健康監(jiān)護(hù)制度4生物安全檢查制度5實(shí)驗(yàn)室人員生物安全行為規(guī)范6事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度7實(shí)驗(yàn)室生物危險標(biāo)識使用規(guī)定8實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理制度9實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種和生物樣本安全保管和檔案管理制度10實(shí)驗(yàn)室廢棄物管理制度11實(shí)驗(yàn)室消毒隔離制度12實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急處置預(yù)案13實(shí)驗(yàn)活動生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程一.實(shí)驗(yàn)室人員和項(xiàng)目準(zhǔn)入制度1.目的規(guī)范生物安全二級實(shí)驗(yàn)室的使用和管理,保證操作人員,實(shí)驗(yàn)對象和環(huán)境安全,確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。2.適用范圍適用于檢驗(yàn)科生物安全二級實(shí)驗(yàn)室安全運(yùn)轉(zhuǎn)及在此環(huán)境下的所有檢測工作。3.職責(zé)進(jìn)入生物安全二級實(shí)驗(yàn)室從事檢測工作的所有人員嚴(yán)格按照本規(guī)定執(zhí)行。4.具體要求:4.1概述4.1.1生物安全二級實(shí)驗(yàn)室用于對檢驗(yàn)者和環(huán)境有中度潛在危險樣品的各項(xiàng)實(shí)驗(yàn),必須符合下列規(guī)定:4.1.1.1具備操作資質(zhì)的人員可在生物安全二級實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作,其他任何人未經(jīng)許可禁止進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。4.1.1.2在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的一切活動,必須遵照生物安全手冊的規(guī)定進(jìn)行。4.1.1.3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)污染的空氣需通過高效過濾器后方能排出室外。4.1.1.4實(shí)驗(yàn)室內(nèi)產(chǎn)生的污水,必須經(jīng)過消毒后方可進(jìn)入公共污水系統(tǒng)。4.1.1.5實(shí)驗(yàn)室的所有廢棄品,必須通過高壓滅菌后才能處理和清洗。必須攜出實(shí)驗(yàn)室的中間實(shí)驗(yàn)材料、更換維修的儀器設(shè)備、也只有在確保無病原微生物污染的條件下,才能攜出實(shí)驗(yàn)室。4.1.1.6實(shí)驗(yàn)室內(nèi)準(zhǔn)備二級全排式生物安全柜,所有可能造成污染的能夠置于生物安全柜內(nèi)的實(shí)驗(yàn)操作,置其內(nèi)進(jìn)行,以保證實(shí)驗(yàn)室內(nèi)空間的安全。4.1.2實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的安全性要求本手冊規(guī)定的各項(xiàng)要求,首先是為了保證實(shí)驗(yàn)室的安全運(yùn)行,包括防止實(shí)驗(yàn)室工作人員的感染、防止實(shí)驗(yàn)室操作的病原微生物對環(huán)境的污染、防止檢測樣品的污染,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。4.1.3實(shí)驗(yàn)室工作的質(zhì)量要求本手冊規(guī)定的各項(xiàng)要求,同時也是為了保證實(shí)驗(yàn)室的工作質(zhì)量,即:實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的各項(xiàng)結(jié)果和數(shù)據(jù),必須準(zhǔn)確可靠:實(shí)驗(yàn)室出具的檢驗(yàn)報(bào)告,必須明確完整。4.2實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程4.2.1啟動實(shí)驗(yàn)室開始工作前半小時。開啟實(shí)驗(yàn)室主電源,使實(shí)驗(yàn)室及生物安全柜投入運(yùn)行。開啟順序:①開啟屋頂風(fēng)機(jī)②開啟全排風(fēng)③開啟空調(diào)④開啟安全柜⑤打開房間紫外線燈。4.2.2個人防護(hù)工作人員按照下列要求進(jìn)行個人防護(hù),才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室區(qū)域:(1)在更衣室中換穿工作服和工作鞋。(2)在清潔區(qū)內(nèi),根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求做好防護(hù)。(3)實(shí)驗(yàn)中需使用腐蝕性試劑時,在膠乳手套外加帶一次性塑料手套;需要進(jìn)行可能造成污染材料飛濺的操作時,需加戴防護(hù)面罩。4.2.3進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室4.2.3.1工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時,每進(jìn)入一道門,應(yīng)將此門關(guān)好,再開啟下一道門。4.2.3.2進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后,關(guān)閉房間紫外線燈。4.2.3.3檢查實(shí)驗(yàn)室運(yùn)轉(zhuǎn)是否正常。4.2.3.4做好開始實(shí)驗(yàn)的各項(xiàng)準(zhǔn)備。4.2.4啟用標(biāo)本、試劑一切準(zhǔn)備工作就緒后,才將標(biāo)本和試劑從冰箱中取出,直接放入生物安全柜中。用完立即歸位,使其在冰箱外停留的時間盡可能短。4.2.5操作4.2.5.1嚴(yán)格按照試劑使用說明進(jìn)行操作。洗滌時避免液體材料飛濺。吸取、稀釋液體時,將吸管插入試管底部,用吸球緩慢吸取,避免產(chǎn)生汽泡或汽溶膠。4.2.5.2離心時,應(yīng)使用雙蓋封閉式離心機(jī)和全封閉試管,每管離心液總量低于最高容量1個刻度單位:平衡時不得有液體滲陋到管套中,離心機(jī)使用后立即用消毒液擦洗消毒。4.2.6觀察結(jié)果不打開容器的觀察允許在生物安全柜外進(jìn)行,否則,必須在生物安全柜內(nèi)觀察結(jié)果。4.2.7準(zhǔn)予攜出實(shí)驗(yàn)室的材料確保不含感染性的實(shí)驗(yàn)材料,才可以從實(shí)驗(yàn)室攜出。容器表面應(yīng)用75%乙醇消毒。4.2.8實(shí)驗(yàn)室清潔每一實(shí)驗(yàn)步驟完成后,均應(yīng)清理臺面。所有用過的試劑均應(yīng)歸還原位;使過的吸管等長形器材放入儲存污物的盒內(nèi);鋒利品放入專用的污物盒;紙巾軟物品放入污物袋;在臺面上噴灑75%乙醇,保持20分鐘,然后以紙巾擦干。實(shí)驗(yàn)室的其他表面,也應(yīng)經(jīng)常用75%乙醇擦拭。4.2.9污染物品處理放置污染物品的容器裝滿時,應(yīng)更換新的容器。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,對用過的污染物品進(jìn)行高壓消毒。4.2.10更換工作服。工作完畢的更衣順序是,先用消毒液浸泡手套5分鐘,然后依次除去口罩、防護(hù)服、鞋套,放入高壓消毒袋內(nèi),再次浸泡手套后除去手套,用75%酒精棉球擦面部裸露部位。4.2.11實(shí)驗(yàn)室消毒每次工作完畢,生物安全柜內(nèi)用75%酒精擦拭臺面,消毒液消毒地面,開啟紫外線燈照射1小時后,逐一關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室送風(fēng)和通風(fēng)設(shè)備{關(guān)閉順序與開啟順序相反}。4.3實(shí)驗(yàn)記錄與實(shí)驗(yàn)報(bào)告4.3.1實(shí)驗(yàn)記錄在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)使用鉛筆書寫。記錄內(nèi)容應(yīng)簡明扼要,包括實(shí)驗(yàn)日期,實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)的基本條件等提示記憶的內(nèi)容,并較詳細(xì)地記載觀察到的實(shí)際現(xiàn)象及數(shù)據(jù)結(jié)果。要求字跡應(yīng)清晰,數(shù)字成行成列,以避免錄入錯誤。4.3.2實(shí)驗(yàn)記錄帶出實(shí)驗(yàn)室將上述記錄在紙張上的實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)用80福爾馬林,密閉熏蒸消毒6小時后方可帶出實(shí)驗(yàn)室。或閣著實(shí)驗(yàn)室玻璃窗由清潔區(qū)工作人員抄錄一份。4.3.3實(shí)驗(yàn)記錄錄入計(jì)算機(jī)實(shí)驗(yàn)記錄必須在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后24小時內(nèi)錄入計(jì)算機(jī)。記錄準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)報(bào)告和錄入時間。再按照由實(shí)驗(yàn)室?guī)С龅臅鴮懹涗?,?zhǔn)確地記載實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)。錄入后,書寫記錄保存1周,以備查驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)記錄錄入后,一般不得修改。因數(shù)據(jù)記錄錯誤,錄入錯誤,或?qū)嶋H觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果改變,必須更改記錄時,不要刪除已經(jīng)錄入的描述和數(shù)據(jù),而應(yīng)錄入新的描寫和數(shù)據(jù),并注明更改原因。4.3.4實(shí)驗(yàn)室記錄備份每月一次,將上月計(jì)算機(jī)的實(shí)驗(yàn)記錄做出備份,備份的實(shí)驗(yàn)記錄不得修改。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)定期檢查實(shí)驗(yàn)記錄,核對備份與原始的實(shí)驗(yàn)記錄,對記錄中的缺陷提出修改意見。4.3.5實(shí)驗(yàn)記錄的保存年限實(shí)驗(yàn)記錄保存一年。已使用的實(shí)驗(yàn)記錄(出具報(bào)告,發(fā)表論文,或以其他方式引用),在使用后再保存一年。如無特殊必要,備份的實(shí)驗(yàn)記錄一般永久保存。4.3.6出具實(shí)驗(yàn)報(bào)告在需要出具正式實(shí)驗(yàn)報(bào)告的場合,報(bào)告由實(shí)驗(yàn)者填寫署名,交實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人記錄核對后簽字,再由單位簽發(fā)人簽字并加蓋公章發(fā)出。4.4標(biāo)本保管規(guī)則4.4.1標(biāo)本進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室4.4.1.1出實(shí)驗(yàn)室采集的標(biāo)本,本實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)一登記編號,能反映出標(biāo)本的來源、種類、性質(zhì)、目的等相關(guān)信息。4.4.1.2有關(guān)單位送檢的標(biāo)本由實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)一登記編號,注明送檢單位、送檢時間、種類、性質(zhì)、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡认嚓P(guān)信息。4.4.2標(biāo)本的保管根據(jù)標(biāo)本的性質(zhì)、目的進(jìn)行保存,每分標(biāo)本分兩份,一份檢測時使用,另一份備用。標(biāo)本因各種原因損失時,啟用后備標(biāo)本,并重新備份。4.4.3標(biāo)本的銷毀確定不用的標(biāo)本,采用高壓滅菌后焚燒的方式銷毀。4.5實(shí)驗(yàn)室裝備保養(yǎng)4.5.1實(shí)驗(yàn)室定期保養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的定期保養(yǎng)按照提供實(shí)驗(yàn)室設(shè)備廠商的規(guī)定進(jìn)行,主要是對機(jī)械和電器部分進(jìn)行維護(hù)。4.5.2實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的保養(yǎng)和維護(hù)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的儀器設(shè)備的保養(yǎng)由實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行。維護(hù)有專業(yè)人員進(jìn)行。生物安全柜的濾器必須按說明書規(guī)定的時間定期由專業(yè)人員更換,其它儀器設(shè)備也應(yīng)根據(jù)實(shí)際需要清潔保養(yǎng)。4.5.3實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的維修更換儀器設(shè)備需要更新,需要離開實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行維修,或損壞需要更換,以及必須臨時進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室使用,使用完畢后必須撤出實(shí)驗(yàn)室的貴重儀器,在撤出實(shí)驗(yàn)室之前必須以恰當(dāng)?shù)姆绞絿?yán)格消毒,方可處理或重新投入使用。4.6意外情況處理4.6.1實(shí)驗(yàn)室意外事件的處理原則4.6.1.1造成或可能造成實(shí)驗(yàn)室污染,但未造成人身傷害的實(shí)驗(yàn)室報(bào)告,由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人處理。例如實(shí)驗(yàn)過程中。由于標(biāo)本、試劑益處濺落造成操作臺或地面的污染等,應(yīng)立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾,待消毒液徹底浸泡30分鐘后,對污染的物品進(jìn)行清理。清理后的物品高壓滅菌。并填寫生物安全2級實(shí)驗(yàn)室意外情況登記與處理記錄表,實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)指導(dǎo)這些處理活動,并檢查處理效果。4.6.1.2實(shí)驗(yàn)室事故可能造成氣溶膠污染,如壓力容器或管道破裂、離心機(jī)事故等,應(yīng)立即關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室,張貼禁止入內(nèi)的標(biāo)識。用消毒液噴霧和紫外線照射污染的區(qū)域,24小時再進(jìn)行終末消毒,實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人除立即采取對應(yīng)措施外,應(yīng)向上級部門報(bào)告,并填寫意外情況登記與處理記錄表。4.6.1.3實(shí)驗(yàn)室工作人員在沒有強(qiáng)毒微生物時,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)受到意外傷害,如割傷、燒傷、燙傷等,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)昏倒或發(fā)生身體嚴(yán)重不適,也有實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人處理。令受到傷害的人員立即停止工作,用消毒液清洗未破損的平凡表面,傷口以碘伏消毒,眼睛用無菌生理鹽水沖洗。由在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)人員或派人迅速著裝進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,清除造成傷害的原因,清理實(shí)驗(yàn)材料,幫助受傷人員緊急處理并撤離實(shí)驗(yàn)室。受到傷害的人員應(yīng)進(jìn)行治療并休息,在身體狀況未恢復(fù)之前,不得重新進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作。實(shí)驗(yàn)室在經(jīng)過整理,消除了造成傷害的故障之后,方可重新使用。4.6.1.4傷害事故可能導(dǎo)致被強(qiáng)毒微生物感染,例如針頭刺破、銳器割傷、黏膜暴露等途徑接觸到感染性液體,或在操作過程中發(fā)生培養(yǎng)物、污染材料濺落身體表面,意外接種等情況,首先進(jìn)行局部處理,用肥皂和水清洗污染的皮膚,擠壓傷口盡可能擠出損傷處的血液,用肥皂和清水沖洗,用消毒液浸泡或涂抹消毒,并包扎傷口。暴露的黏膜應(yīng)盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)向上級部門報(bào)告,對受傷害者進(jìn)行隔離觀察,同時根據(jù)情況預(yù)防性用藥,并寫出職業(yè)暴露后預(yù)防感染的評價和處理方案。4.6.2實(shí)驗(yàn)室人員的隔離觀察發(fā)生可疑的實(shí)驗(yàn)室感染事故時,應(yīng)對被感染的人員進(jìn)行隔離觀察。如果判定為法定的傳染病感染,應(yīng)按[傳染病防治法]的規(guī)定報(bào)告,同時給予有效的隔離治療人員培訓(xùn)考核制度1.目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員的培訓(xùn)考核2.適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3、人員培訓(xùn)考核制度3.1.實(shí)驗(yàn)室工作人員的培訓(xùn)新工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前,必須經(jīng)過培訓(xùn),取得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作的資格。培訓(xùn)由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人組織進(jìn)行,并指定熟悉實(shí)驗(yàn)室工作的人員擔(dān)任輔導(dǎo)。培訓(xùn)內(nèi)容包括:(1)相關(guān)檢驗(yàn)的國家診斷標(biāo)準(zhǔn)、處理原則以及本手冊內(nèi)容。(2)實(shí)驗(yàn)室所有設(shè)備的使用方法。(3)個人防護(hù)方法。(4)實(shí)驗(yàn)室基本技術(shù)。(5)實(shí)驗(yàn)室消毒凈化的方法。3.2.實(shí)驗(yàn)室工作人員的資格考試新工作人員經(jīng)過培訓(xùn)后,由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人組織考核。通過考核后,還須與有資格的工作人員一同工作3個月,才能獲得獨(dú)立進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室操作的正式資格。人員健康監(jiān)護(hù)制度1.目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員的健康監(jiān)護(hù)2.適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3、人員健康監(jiān)護(hù)制度3.1工作人員從事工作前必須進(jìn)行HIV抗體和甲肝、乙肝、丙肝等肝炎病毒標(biāo)記物的檢測,每半年進(jìn)行一次HIV抗體復(fù)檢,并保留血樣一年以上。3.2工作人員應(yīng)每年進(jìn)行一次體檢,并將可能涉及生物安全危害的體檢結(jié)果存檔,以便判斷生物安全危害是否發(fā)生。3.3實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立人員健康監(jiān)護(hù)檔案,檔案內(nèi)容包括既往病史、檢測結(jié)果、免疫接種史等,以便對從事涉及生物安全危害人員的健康狀況進(jìn)行跟蹤。3.4實(shí)驗(yàn)室工作人員的適合工作狀態(tài)實(shí)驗(yàn)室工作人員必須在身體狀況良好的情況下,才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作。出現(xiàn)下列情況,不應(yīng)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室:身體出現(xiàn)開放性損傷;患發(fā)熱性疾病:感冒、上呼吸道感染;其他導(dǎo)致抵抗力下降的狀況:妊娠、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)連續(xù)工作4小時以上或其他原因造成的疲勞狀態(tài)。生物安全檢查制度1.目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室生物安全,保證設(shè)備正常運(yùn)行。2.適用范圍適用于生物安全涉及的儀器設(shè)備(比如生物安全柜等)3、生物安全檢查制度實(shí)驗(yàn)室內(nèi),每2個月以細(xì)菌培養(yǎng)的方式進(jìn)行安全性檢測。生物安全柜內(nèi)放置平板培養(yǎng)基2個,實(shí)驗(yàn)室4角和中間各放置1個,半污染區(qū)放置2個。將平皿敞開5分鐘,然后蓋上,每平板菌落數(shù)平均不得超過2個,超過標(biāo)準(zhǔn),需要對實(shí)驗(yàn)室或污染部位進(jìn)行甲醛熏蒸消毒。實(shí)驗(yàn)室人員生物安全行為規(guī)范1.目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室人員的生物安全行為規(guī)范2.適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3生物安全組織管理與行為規(guī)范3.1組織框架圖單位法人{(lán)或授權(quán)}負(fù)責(zé)人↓實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人↓生物安全員↓實(shí)驗(yàn)室工作人員3.2各類人員相應(yīng)行為規(guī)范3.2.1單位法人{(lán)或授權(quán)}負(fù)責(zé)人(1)負(fù)責(zé)組織生物安全實(shí)驗(yàn)室的立項(xiàng)、選址,施工隊(duì)的資質(zhì)驗(yàn)證。(2)負(fù)責(zé)成立生物安全委員會負(fù)責(zé)生物安全,制定管理制度,監(jiān)督有關(guān)法規(guī)和操作規(guī)程的執(zhí)行情況。(3)負(fù)責(zé)組織對造成外環(huán)境污染、實(shí)驗(yàn)室污染、人身傷害事故的調(diào)查與處理。3.2.2實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人(1)組織制定安全手冊、操作規(guī)程等文件。(2)按照上述文件要求組織實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)工作,保證實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的安全和實(shí)驗(yàn)室工作質(zhì)量的準(zhǔn)確可靠。(3)組織進(jìn)入生物安全二級實(shí)驗(yàn)室的人員進(jìn)行業(yè)務(wù)培訓(xùn),保證工作人員熟知微生物的操作規(guī)程和技術(shù),掌握實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的特殊要求并熟練操作,對培訓(xùn)的結(jié)果進(jìn)行考核,決定進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作人員的資格。3.2.3生物安全員(1)對技術(shù)方法、化學(xué)品、材料與設(shè)備定期進(jìn)行內(nèi)部安全檢查,確保其符合國家和地方的有關(guān)安全與衛(wèi)生政策與標(biāo)準(zhǔn)。一旦發(fā)現(xiàn)不安全因素,立即停止工作并上報(bào)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。(2)與有關(guān)人員討論研究安全政策的問題。(3)確認(rèn)所有工作人員都具有進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作的資格。(4)為所有人員提供連續(xù)性的安全要教育與指導(dǎo)。(5)針對操作程序、技術(shù)方法和各種條件要求的變更,以及新設(shè)備的引進(jìn),為全體工作人員提供最新的安全文獻(xiàn)和信息資料。(6)定期檢查實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)技術(shù)參數(shù),組織對實(shí)驗(yàn)室裝備的常規(guī)保養(yǎng)。(7)所有可能涉及潛在傳染性或有毒物質(zhì)泄露的意外事件與事故,即使沒有人員受傷或暴露,也要予以調(diào)查,并向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人員和安全委員會報(bào)告調(diào)查結(jié)果和提出建議。(8)當(dāng)任何實(shí)驗(yàn)室工作人員的疾病或缺勤與工作有關(guān),并被記錄為可能的實(shí)驗(yàn)室獲得性感染時,協(xié)助隨訪調(diào)查其疾病或缺勤情況。(9)確保在發(fā)生傳染性物質(zhì)濺灑其他事件時,監(jiān)督消毒凈化程序得到正確執(zhí)行;并對這類意外事件和事故進(jìn)行詳細(xì)的書面記錄。(10)確保任何需要修理和維護(hù)的儀器設(shè)備在消毒與凈化之后方可運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。生物安全員由主管檢驗(yàn)師以上的人員承擔(dān),必須具備如下資質(zhì):具有實(shí)際工作的經(jīng)驗(yàn);對操作的微生物有全面、完整的了解;具有組織實(shí)驗(yàn)室工作的能力;對工作有高度的責(zé)任心。3.2.4實(shí)驗(yàn)室工作人員(1)生物安全二級實(shí)驗(yàn)室,只允許進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室目的規(guī)定的操作,與此無關(guān)的活動一律不得進(jìn)行。(2)必須按規(guī)定進(jìn)行個人防護(hù),方得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。(3)保持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的整潔,每項(xiàng)工作完成之后,必須清理和清潔臺面,離開實(shí)驗(yàn)室(4)注意個人的健康狀況,出現(xiàn)身體不適情況,應(yīng)及時向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告。(5)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止飲食、吸煙、訪客和喧嘩。實(shí)驗(yàn)室工作人員的技術(shù)要求(1)必須了解實(shí)驗(yàn)室安全原理,熟悉本手冊的各項(xiàng)規(guī)定,熟記緊急情況下的正確應(yīng)對措施。(2)掌握病原微生物操作的基本要求,正確、安全地實(shí)用標(biāo)本,避免污染,以獲得準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(3)必須熟悉相關(guān)實(shí)驗(yàn)的國家標(biāo)準(zhǔn),能夠完成標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的任務(wù)。(4)一旦發(fā)生意外,立即向生物安全員匯報(bào)。4、個人防護(hù)程序4.1個人防護(hù)用品的使用要求4.1.1口罩:應(yīng)使用N95型口罩或1216層棉紗口罩,最好使用防濺口罩{如31860型}如有胡須應(yīng)刮去,使用應(yīng)始終保持口罩與臉緊貼。一次性使用口罩應(yīng)在使用后4小時丟棄,不能重復(fù)使用,不能與他人共同使用。如口罩遭到分泌物飛濺或弄濕,應(yīng)嚴(yán)格洗手后,帶上清潔手套更換。4.1.2防護(hù)面罩:實(shí)驗(yàn)人員在進(jìn)行工作時應(yīng)佩帶防護(hù)面罩,防護(hù)面罩要求透亮度好,有較好的防飛濺功能,重復(fù)使用前應(yīng)進(jìn)行徹底消毒。4.1.3防護(hù)服:實(shí)驗(yàn)人員工作時應(yīng)穿戴一次性防護(hù)服。最好是連體式,防水及抗靜電性能好,無過濾作用。袖口、腳踝口應(yīng)為彈性收口,面部、腰部應(yīng)有彈性收口或拉繩收口。4.1.4手套和鞋套:鞋套應(yīng)為一次性防水鞋套。手套為一次性膠乳手套,須戴兩副,外層手套應(yīng)根據(jù)需要及時更換。4.2個人防護(hù)用品的穿戴順序4.2.1進(jìn)入清潔區(qū)前穿上普通白大衣和實(shí)驗(yàn)室專用鞋。4.2.2進(jìn)入清潔區(qū)時穿戴一次性口罩,手術(shù)帽,一次性隔離衣、兩副膠乳手套和兩副一次性鞋套。注意將手套和鞋套分別套在袖口和褲口外。4.2.3戴N95口罩及防護(hù)面罩、穿防水隔離服、防水鞋套、再戴外層手套。4.3個人防護(hù)用品脫卸順序4.3.1完成實(shí)驗(yàn)后,在半污染區(qū)先用75%乙醇溶液消毒外層手套,然后脫掉外層手套{在脫另一只手套時,手指只能接觸手套的里部}。4.3.2著內(nèi)層手套依次脫掉防護(hù)面罩、N95口罩、防水鞋套及防水隔離服{脫隔離服時,不要接觸隔離服的外表面,應(yīng)從里反脫,以保里面超外}。將脫掉的物品放入專用消毒袋中就地高壓消毒。防護(hù)面罩等重復(fù)使用的物品立即放入消毒液內(nèi),按有關(guān)規(guī)定消毒處理。4.3.3脫掉外層一次性鞋套,用75%乙醇溶液消毒內(nèi)層手套。4.3.4戴者手套脫掉一次性口罩、手術(shù)帽、內(nèi)層鞋套、然后脫掉一次性隔離衣及手套,放入消毒袋高壓消毒。4.3.5用消毒巾擦拭面部,用碘伏徹底消毒雙手,并用流動水沖洗。事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度1、目的糾正檢驗(yàn)工作中的差錯,及時處理責(zé)任事故,吸取事故的教訓(xùn),確保檢驗(yàn)設(shè)備和人員的安全。2、范圍適用于檢驗(yàn)工作中出現(xiàn)的事故分析報(bào)告、調(diào)查和處理。3、職責(zé)3.1事故責(zé)任部門負(fù)責(zé)人填寫事故報(bào)告單,報(bào)告事故發(fā)生的原因及采取的措施。3.2業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科和有關(guān)科室負(fù)責(zé)人協(xié)助中心負(fù)責(zé)人做好事故的調(diào)查處理工作。4、工作程序4.1事故分類凡違反各項(xiàng)規(guī)定所造成的事故均為責(zé)任事故,按其經(jīng)濟(jì)損失和人身傷害和大小分為以下幾種:大小事故界限表損失情況小事故一般事故大事故重大事故經(jīng)濟(jì)損失≤100元100~1000元1000~10000元≥10000元人身傷亡一人受傷,休工≤3日一人受傷,休工3日以上兩人受傷或一人受傷,休工1-6個月三人以上受傷,休工一年以上,或一人致殘或死亡。4.2事故的處理4.2.1事故發(fā)生后,應(yīng)立即采取有效措施,防止事態(tài)擴(kuò)大,搶救受傷人員和儀器設(shè)備,報(bào)告上級領(lǐng)導(dǎo)。4.2.2事故發(fā)生3日內(nèi),事故責(zé)任人寫出事故發(fā)生原因、經(jīng)過及教訓(xùn)、責(zé)任,并由發(fā)生事故科室填寫事故報(bào)告單,報(bào)業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科和行政管理科。4.2.3事故發(fā)生后5日內(nèi),由業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科和行政管理科協(xié)助中心負(fù)責(zé)人主持召開事故分析會,對事故進(jìn)行分析并對事故責(zé)任人作出處理。事故責(zé)任科室采取糾正措施,防止類似事故再發(fā)生。4.2.4重大事故發(fā)生后一周內(nèi),由檢驗(yàn)科負(fù)責(zé)人向上級主管部門送交事故處理專題報(bào)告。4.2.5事故報(bào)告處理單等記錄材料由業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科歸檔保存。大事故和重大事故記入事故責(zé)任人技術(shù)檔案。實(shí)驗(yàn)室生物危險標(biāo)識使用規(guī)定1.目的規(guī)范生物安全二級實(shí)驗(yàn)室的使用和管理。2.適用范圍適用于生物安全二級實(shí)驗(yàn)室。3.具體要求:3.1在具有生物安全二級實(shí)驗(yàn)室門口加貼專門的生物安全警示標(biāo)識,以避免無關(guān)人員進(jìn)入相關(guān)區(qū)域,造成感染的危險。3.2在有可能對人員造成威脅的生物標(biāo)本儲存處加貼生物安全警示標(biāo)識,以防無關(guān)人員將危險標(biāo)本帶入安全區(qū)域?qū)θ藛T造成威脅。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理制度1.目的確保生物安全二級實(shí)驗(yàn)室的正常運(yùn)行、實(shí)驗(yàn)人員、物品和環(huán)境的安全2.適應(yīng)范圍適應(yīng)于生物安全二級實(shí)驗(yàn)室。3.職責(zé)進(jìn)入生物安全二級實(shí)驗(yàn)室工作的所有工作人員嚴(yán)格遵照本管理制度執(zhí)行。4.基本制度4.1在主實(shí)驗(yàn)室設(shè)置清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)。入口處貼有醒目的生物危險標(biāo)志。4.2非實(shí)驗(yàn)室有關(guān)人員和物品不得進(jìn)入。4.3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得進(jìn)食和飲水,或者進(jìn)行其他與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的活動。4.4實(shí)驗(yàn)室工作人員、外來合作者、進(jìn)修和學(xué)習(xí)人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室及其崗位之前必須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人的批準(zhǔn)。4.5實(shí)驗(yàn)過程中,嚴(yán)格按有關(guān)操作程序操作,降低剪除和氣溶膠的產(chǎn)生。4.6用移液器吸取液體,嚴(yán)禁口吸。4.7實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須是經(jīng)受過專業(yè)培訓(xùn)的技術(shù)人員。在獨(dú)立進(jìn)行工作前還需在中高級實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員指導(dǎo)下進(jìn)行上崗培訓(xùn),達(dá)到合格標(biāo)準(zhǔn),方可開始工作。4.8實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須被告知實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險并接受實(shí)驗(yàn)室安全教育,自愿從事實(shí)驗(yàn)室工作。4.9實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室的所有制度、規(guī)定和操作規(guī)程。4.10實(shí)驗(yàn)室的工作人員在開始工作前必須留本底血清進(jìn)行有關(guān)的檢測,以后定期復(fù)檢。如有疫苗必須進(jìn)行免疫注射。4.11所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室前必須經(jīng)可行的消毒方法進(jìn)行消毒。4.12工作前應(yīng)消毒,活性物質(zhì)濺出后要隨時消毒。5.實(shí)驗(yàn)室特殊管理制度5.1進(jìn)行感染性實(shí)驗(yàn)室時,應(yīng)禁止他人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,或必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意方可入內(nèi),免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的人員不許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,或必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)同意方可入內(nèi)。5.2實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前必須進(jìn)行有效的培養(yǎng)和模擬訓(xùn)練。掌握預(yù)防暴露和暴露后的消毒處理程序。5.3實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)接受必要的免疫接種和相應(yīng)的抗體水品測定。5.4實(shí)驗(yàn)室事故處理:工作人員在操作過程中發(fā)生意外,如針刺和切傷、皮膚污染、感染性標(biāo)本濺及體表和口鼻眼內(nèi)、衣物污染實(shí)驗(yàn)臺面等均視為安全事故,應(yīng)視事故類型的不同情況,立即進(jìn)行緊急處理。具體措施按《實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急處置預(yù)案》執(zhí)行。5.5填寫意外情況登記與處理記錄表,并按規(guī)定報(bào)告給有關(guān)部門。5.6處特殊情況外,禁止在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用銳器。5.7剩余的標(biāo)本應(yīng)密封后置于適當(dāng)條件下保存。5.8實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)使用鑒定合格的二級生物安全柜。5.9實(shí)驗(yàn)設(shè)備在運(yùn)出修理或維修前必須嚴(yán)格消毒,方可運(yùn)出。實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種和生物樣本安全保管和檔案管理制度1.目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種和生物樣本的保管和檔案管理2.適用范圍實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種和生物樣本的處理和檔案管理3、實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種和生物樣本的保管3.1按國家規(guī)定可以保存的菌(毒)種,由指定的專人負(fù)責(zé)登記、保存和管理。按期傳代、鑒定,必須在無菌室或接種罩內(nèi)進(jìn)行,并做好有關(guān)記錄。在保存過程中發(fā)現(xiàn)菌(毒)種變異或死亡,應(yīng)及時上報(bào)科長和中心主任。3.2本區(qū)檢出的地方菌(毒)株應(yīng)及時上報(bào),因工作需要暫時保留的菌(毒)株也應(yīng)按上級規(guī)定的時間進(jìn)行銷毀處理。新發(fā)現(xiàn)的菌(毒)株,要做好原始記錄,并上報(bào)主管部門復(fù)核確認(rèn)。3.3菌(毒)種必須每種設(shè)一記錄卡,其內(nèi)容包括:名稱、編號、來源、分離日期、引進(jìn)日期、鑒定日期、鑒定結(jié)果、鑒定者、審核者、傳代情況、所用培養(yǎng)基、保存方法、溫度、使用轉(zhuǎn)移及銷毀情況、保存者、部門負(fù)責(zé)人等。3.4向上級主管部門申請索取菌(毒)種和向下級有關(guān)部門發(fā)放菌(毒)種時,應(yīng)有2人參加辦理,嚴(yán)格執(zhí)行國家有關(guān)規(guī)定,手續(xù)要完備,并認(rèn)真做好記錄備查。3.5一、二類菌(毒)種,應(yīng)派專人向提供單位領(lǐng)取,不得郵寄;三類菌(毒)種的郵寄必須持有郵寄單位證明,并按照菌(毒)種郵寄與包裝的有關(guān)規(guī)定辦理。3.6未經(jīng)上級批準(zhǔn),任何單位及個人不得以工作之便,進(jìn)行國際間各類菌(毒)種交流,做好菌(毒)種安全防范工作。4、檔案管理制度4.1、非實(shí)驗(yàn)室人員不得隨意查看實(shí)驗(yàn)室記錄4.2、實(shí)驗(yàn)室人員負(fù)責(zé)妥善保存各種樣品登記本、報(bào)告單及實(shí)驗(yàn)室原始記錄,不得擅自修改和銷毀4.3、專人負(fù)責(zé)保管感染者檔案4.4、未經(jīng)領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)不得向無關(guān)人員或單位提供任何實(shí)驗(yàn)室及感染者信息4.5、HIV抗體初篩實(shí)驗(yàn)室檢測的陽性結(jié)果不是最終結(jié)果,須進(jìn)一步確認(rèn),確認(rèn)前不得出具陽性報(bào)告及告知受檢者本人或有關(guān)單位實(shí)驗(yàn)室廢棄物管理制度1.目的規(guī)范廢棄物處理2.適用范圍尖銳器具和其他廢棄物的處理。3.具體方法:3.1尖銳器具的處理3.1.1尖銳器具,如針、注射器等,除特殊情況外,禁止在實(shí)驗(yàn)室使用,盡可能用塑料器材代替玻璃器材。3.1.2注射和吸取感染性材料時,盡可能使用一次性注射器。用過的針頭禁止折段、剪段、折段、重新蓋帽或從注射器上取下,禁止用手直接操作。用過的針頭、注射器直接放入防刺破的盛廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅(jiān)壁容器中,進(jìn)行高壓消毒處理。3.1.3盡可能使用帶針頭套的的注射器、無針頭的系統(tǒng)和其他安全裝置。3.1.4打碎的玻璃器具,禁止用手直接清理,必須使用其他工具,如掃把、簸箕、夾子或鑷子等。盛污染針、銳器及碎玻璃的容器在丟棄前必須徹底消毒。3.2廢棄物的處理3.2.1實(shí)驗(yàn)后的廢棄物如不及時處置則會污染環(huán)境,從而對人造成危害,因此有關(guān)人員必須嚴(yán)格按照規(guī)定執(zhí)行。3.2.2實(shí)驗(yàn)樣本在處理和進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測時產(chǎn)生的廢棄物,如一次性針頭、離心管、平皿等應(yīng)放入適當(dāng)?shù)娜萜骱蛧?yán)格防漏的高壓袋內(nèi),待實(shí)驗(yàn)結(jié)束后立即就地高壓消毒。3.2.3實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的污染性液體物質(zhì)、廢棄的液體標(biāo)本等放在盛有消毒液的嚴(yán)格防滲漏的專用容器中,并及時加蓋。3.2.4進(jìn)行實(shí)驗(yàn)所必須使用的容器,如針頭、一次性注射器、玻璃器具、手術(shù)刀片等,放入專用的堅(jiān)壁容器內(nèi),加蓋密封。3.2.5以上所有盛裝廢棄物的容器,在每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,就地高壓消毒。3.2.6高壓鍋應(yīng)有專人負(fù)責(zé),嚴(yán)格按使用說明操作,確保在121條件下,高壓30分鐘,以達(dá)到消毒要求。3.2.7所有實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢棄物,必須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒后方能運(yùn)出實(shí)驗(yàn)區(qū),并送至指定地點(diǎn)集中焚燒處理。十一、實(shí)驗(yàn)室消毒隔離制度1.目的規(guī)范微生物實(shí)驗(yàn)室和生物安全二級實(shí)驗(yàn)室的消毒隔離工作。2.適用范圍微生物實(shí)驗(yàn)室和生物安全二級實(shí)驗(yàn)室。3.職責(zé)所有工作人員都必須遵從本規(guī)程。4.具體步驟4.1實(shí)驗(yàn)室基本要求4.1.1實(shí)驗(yàn)室相對獨(dú)立,實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)包括實(shí)驗(yàn)間及緩沖間,明確劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū),并有明顯標(biāo)識。4.1.2各區(qū)域交叉處應(yīng)設(shè)置有效氯2000的含氯消毒劑溶液浸濕的腳墊。4.1.3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有物品應(yīng)專用,須帶出時必須嚴(yán)格消毒。4.1.4實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿戴好個人防護(hù)用品,如隔離衣、防護(hù)眼睛、口罩、一次性手套等。實(shí)驗(yàn)過程中注意自身防護(hù),并防止操縱過程中的交叉污染。4.1.5培養(yǎng)基、組織、體液等必須放在防漏密閉的容器中儲運(yùn)。4.1.6血清學(xué)試驗(yàn)、樣品的處理和分裝應(yīng)在BSL-2安全柜內(nèi)進(jìn)行。4.1.7樣品離心使用密封的離心杯,以防濺出。4.1.8實(shí)驗(yàn)過程中使用的器材、實(shí)驗(yàn)廢棄物均應(yīng)按廢棄物處理程序進(jìn)行消毒處理。4.1.9當(dāng)傳染性標(biāo)本溢出或?yàn)R出后,應(yīng)有專業(yè)人員立即消毒和清理。4.1.10實(shí)驗(yàn)完畢,先消毒物體表面,再按規(guī)定程序脫下個人防護(hù)用品放入包裝袋內(nèi)就地高壓消毒,并進(jìn)行空氣消毒。4.1.11離開實(shí)驗(yàn)室前,必須按有關(guān)規(guī)定消毒雙手。4.2消毒方法4.2.1儀器等表面消毒:工作結(jié)束后,用含有效氯1000的消毒液或75%乙醇溶液擦拭消毒,作用20分鐘以上。4.2.2實(shí)驗(yàn)器材的分類消毒:將使用后的銳器方入防刺破、防滲漏的密閉專用銳器處置盒內(nèi),121℃高壓消毒30分鐘。其他器材方入有效氯為2000mg/L的含氯消毒液內(nèi)浸泡1小時以上。處理時應(yīng)避免皮膚損傷。4.2.3工作臺等物體表面消毒:工作完畢,用含有效氯2000mg/L的消毒液或75%乙醇溶液擦拭消毒,作用20分鐘以上。4.2.4個人防護(hù)用品消毒:實(shí)驗(yàn)結(jié)束,將隔離衣、口罩、帽子、手套、鞋套等121℃高壓消毒30分鐘。防護(hù)鏡浸泡在75%乙醇或有效氯為1000mg/L的含氯消毒劑中,作用30-60分鐘。4.2.5手的消毒:用典伏或75%的乙醇擦拭,作用1-3分鐘。4.2.6空氣消毒:每次實(shí)驗(yàn)前后用紫外燈照射消毒,每次不少于1小時,每立方米空間安裝紫外燈瓦數(shù)≥1.5W,距紫外燈1米處照射強(qiáng)度≥70W/㎡。4.2.7這張消毒:應(yīng)用80ml/m3福爾馬林,密閉熏蒸消毒6小時后方可帶出。4.2.8地面消毒:工作結(jié)束,應(yīng)用含有有效2000mg/L的消毒液噴灑拖地。4.2.9廢棄物的處理:實(shí)驗(yàn)的廢棄物應(yīng)放入適當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi),就地121℃高壓消毒30分鐘,消毒后的廢棄物集中收集、焚燒處理。5.實(shí)驗(yàn)室高壓消毒安全操作5.1使用前應(yīng)了解并掌握高壓鍋的原理及操作規(guī)則,以及不正確使用而導(dǎo)致的災(zāi)難性后果。5.2按照操作規(guī)程使用高壓鍋5.2.1接通電源,合上高壓滅菌器左側(cè)總電源開關(guān)。5.2.2注入加熱用水,注水至加熱器罩的水位水準(zhǔn)器配件尖端浸入水中為止。5.2.3設(shè)定滅菌溫度,先按“編集”鍵,然后按上下鍵調(diào)節(jié)到滅菌所需溫度,然后按“實(shí)行”鍵,把所設(shè)溫度存進(jìn)程序。5.2.4設(shè)定滅菌時間,先按“編集”鍵,然后按上下鍵調(diào)節(jié)到滅菌所需時間,然后按“實(shí)行”鍵,把所設(shè)時間存進(jìn)程序。5.2.5按“實(shí)行”鍵執(zhí)行滅菌程序,此時“滅菌”燈閃爍。5.2.6當(dāng)滅菌程序執(zhí)行完成,滅菌程序自動停止運(yùn)行。5.2.7在確認(rèn)壓力表的顯示壓力降到0刻度時,打開高壓滅菌器頂蓋,取出滅菌樣品。5.3高壓鍋操作人員在使用高壓鍋時不得離開崗位;在日常使用過程中,必須嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行,并按照規(guī)定進(jìn)行設(shè)備的維護(hù)。每1年保養(yǎng)一次,每月檢測一次消毒效果。5.4高壓鍋的物品不得放的過滿,否則影響滅菌效果。放好被消毒滅菌的物品后,高壓鍋的蓋子或門必須擰緊。5.5定期檢查高壓鍋,以確保其正常工作,防止意外事故發(fā)生,保證消毒滅局效果。5.6高壓滅菌安全操作步驟5.6.1在滅菌前將雙層的高壓滅菌帶包好,廢物在滅菌袋中的體積不能超過袋子體積的3/4,滅菌袋用橡皮帶捆好,但不能扎得太死,否則蒸汽不能進(jìn)入所料袋內(nèi)影響滅菌效果。5.6.2實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的所有廢物應(yīng)該及時就地滅菌處理。如果滅菌器正在使用或優(yōu)于其它原因不能馬上使用,則廢物必須放在滅菌袋內(nèi)捆好并放在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),在存放期間確保袋子無損壞。5.6.3當(dāng)高壓鍋消毒滅菌盜時間后,取出物品放在廢物收集處。5.6.4當(dāng)開始滅菌時必須確信滅菌國內(nèi)水量合適,高壓溫度和時間設(shè)置正確。滅菌應(yīng)保持在121℃30分鐘,時間和溫度不得超過設(shè)定值,否則滅菌袋會融化,清理困難。十二、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急處置預(yù)案1.目的規(guī)范緊急情況的處理工作。2.適用范圍微生物實(shí)驗(yàn)室和微生物安全二級實(shí)驗(yàn)室。3.職責(zé)遇有緊急情況所有工作人員嚴(yán)格按此規(guī)程處理。4.具體要求:4.1造成或可能造成實(shí)驗(yàn)室污染,但未造成人身傷害的實(shí)驗(yàn)室事故,由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人處理。例如實(shí)驗(yàn)過程中,由于標(biāo)本、試劑溢出濺落造成操作臺或地面的污染等,應(yīng)立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾,等消毒液徹底浸泡30分鐘后,對污染的物品進(jìn)行處理。清理后的物品高壓滅菌。并填寫生物安全二級實(shí)驗(yàn)室意外情況登記與處理記錄表,實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)指導(dǎo)這些處理行動,并檢查處理效果。4.2在沒有強(qiáng)毒微生物時,再實(shí)驗(yàn)室內(nèi)受到意外傷害,例如割傷、燒傷、燙傷等,由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人處理。令受到傷害的人員立即停止工作,用消毒液清洗未破損的皮膚表面,傷口以碘伏消毒,眼睛用洗眼器反復(fù)沖洗。有在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作人員或派人迅速著裝進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,清除造成傷害的原因,清理實(shí)驗(yàn)材料,幫助受傷人員緊急處理并撤離實(shí)驗(yàn)室。受到傷害的人員應(yīng)立即就醫(yī),并將受傷原因及接觸微生物的情況通報(bào)負(fù)責(zé)人。對其進(jìn)行恰當(dāng)而完整的病史記錄。在其身體狀況未恢復(fù)之前,不得重新進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作。實(shí)驗(yàn)室在經(jīng)過整理,消除了造成傷害的故障之后,方可重新使用。4.3傷害事故可能導(dǎo)致被強(qiáng)毒微生物感染,例如針頭刺破、銳器割傷、粘膜暴露等途徑接觸到感染性液體,首先進(jìn)行局部處理,用肥皂和水清洗污染的皮膚,擠壓傷口盡可能擠出損傷處的血液,用肥皂或清水沖洗,用消毒液浸泡或涂抹消毒,并包扎傷口。在操作過程中發(fā)生培養(yǎng)物、污染材料濺落身體表面等情況,首先使用噴淋裝置,盡快將污染物沖洗掉,然后再進(jìn)行局部處理。暴露的粘膜應(yīng)盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)向上級部門報(bào)告,對受傷害者進(jìn)行隔離觀察,同時根據(jù)情況預(yù)防性用藥,并寫出職業(yè)暴露后預(yù)防感染的評價和處理方案。4.4實(shí)驗(yàn)室事故可能造成氣溶膠污染,如壓力容器或管道破裂等,立即關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室,疏散現(xiàn)場的所有人員,對所有暴露人員提出相應(yīng)的醫(yī)學(xué)建議。立即通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人及生物安全員。至少在1小時內(nèi),任何人員不得進(jìn)入現(xiàn)場,以便氣溶膠的消散記空氣中較重微粒的沉降。張貼禁止入內(nèi)的警示標(biāo)志。在生物安全員的監(jiān)督下進(jìn)行消毒、凈化處理;執(zhí)行這項(xiàng)工作時應(yīng)當(dāng)穿戴合適的防護(hù)服及呼吸防護(hù)用具。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人員除立即采取對應(yīng)措施外,應(yīng)向上級部門報(bào)告,填寫意外情況登記與處理記錄表。4.5培養(yǎng)物等傳染性物質(zhì)的破碎被傳染性物質(zhì)物質(zhì)污染的小玻璃瓶及其他容器破碎時,用布或紙巾覆蓋,爾后將消毒劑傾倒其上,放置30分鐘。其后即可清除掉,玻璃碎片應(yīng)當(dāng)用鑷子清理。污染區(qū)域應(yīng)當(dāng)用消毒劑清洗。破碎物品清理時如果使用了簸箕,應(yīng)將其進(jìn)行高壓滅菌或用有效的消毒劑浸泡24小時。清理使用過的布、紙巾、抹布及拖把,放入污染廢棄物容器中。上述步驟均應(yīng)佩戴手套。4.6如果實(shí)驗(yàn)室的紀(jì)錄表格、其他印刷品或書面材料遭到污染,在妥善轉(zhuǎn)抄后或烤后,應(yīng)當(dāng)將其棄入污染廢棄物容器。4.7試管破碎于密閉式安全離心杯中所有密閉式安全離心杯在生物安全過程中裝載和卸載。如果懷疑發(fā)生了破損,應(yīng)當(dāng)將其蓋子擰松;爾后,將整個離心杯高壓滅菌。4.8蓄意破壞堅(jiān)固、厚重的門、牢靠的鎖具以及限制出入,都是合適的防范措施。發(fā)現(xiàn)蓄意破壞情況后報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人及生物安全員,視破壞種類按照上述方法進(jìn)行處理,并詳細(xì)填寫意外情況登記與處理記錄表。十三、實(shí)驗(yàn)活動生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(一)艾滋病初篩檢測實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程1.目的保證艾滋病病毒抗體ELISA實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。2.適用范圍艾滋病病毒抗體ELISA實(shí)驗(yàn)。3.具體要求3.1樣品采集樣品采集安試劑盒要求采集。采血時注意安全,用一次性注射器謹(jǐn)慎操作,防止發(fā)生刺傷和造成外界污染。血樣如即時用可存于普通冰箱,如要長期保存,分離血清置于-20℃及以下。同時做好記錄。3.2樣品運(yùn)送樣品轉(zhuǎn)送,除特殊需要外,必須是血清或血漿,置于帶有蓋帽的試管內(nèi),或?qū)⑺芰显嚬苡镁凭珶舴馑?,防止樣品流出。試管上?biāo)明姓名、時間、編號,將試管放入專門帶蓋的容器內(nèi),容器的材料要易于消毒處理,在所放試管周圍上下墊有軟性物質(zhì),以免碰碎,容器外標(biāo)有HIV檢測專用字樣和生物危害標(biāo)志。路途較遠(yuǎn)或氣候炎熱時,容器應(yīng)置于4℃以下運(yùn)送。這樣同時附送檢單。3.3樣品登記和處理3.3.1收到樣品后,及時填寫標(biāo)本登記記錄表,送樣人、收樣人簽字,如已進(jìn)行過初檢,登記初檢結(jié)果和實(shí)驗(yàn)方法及所用試劑情況。3.3.2對從其他實(shí)驗(yàn)室送來的樣品,檢查并注明送檢單與標(biāo)本記錄的符合、樣品管破損、溢漏等情況。如有溢漏應(yīng)立即將尚存的血樣移出,并對管壁和盛器消毒。檢查并記錄樣品的質(zhì)量有無嚴(yán)重溶血、細(xì)菌污染、血脂過多以及黃疸等情況。3.3.3對實(shí)驗(yàn)室自采的樣品,最好將血液先放置1-2個小時,再用3000離心15分鐘,吸出上清液備用,如在幾天內(nèi)檢測可放在2-8℃冰箱中,如要貯存,置于-20℃冰箱。3.4實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備3.4.1將試劑從冰箱中取出,按試劑盒要求時間恢復(fù)室溫。3.4.2檢查并記錄冰箱、溫箱溫度。3.4.3按照試劑盒要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)原始記錄表,標(biāo)明空白、陰性對照、陽性對照、外部質(zhì)控血清以及檢測樣本的位置:登記日期和實(shí)驗(yàn)起止時間,記錄環(huán)境條件及試劑盒廠家、批號、效期:整個實(shí)驗(yàn)過程中每一步操作都要在原始記錄表上詳細(xì)登記。3.4.4按照試劑盒的要求配置洗液及其他所需要的試劑。3.5加樣和稀釋根據(jù)樣品數(shù)量將合適數(shù)量的酶標(biāo)板條固定在板架上,為了不損壞洗扳機(jī),每道上的酶標(biāo)板條必須保持完整{不足部分可用廢棄的微孔添充},檢查加樣器加樣刻度是否與試劑盒要求的加樣量相符,按照原始記錄表表明的位置加入各種質(zhì)控品和檢測樣品,注意:空白只加標(biāo)本稀釋液。加樣量和稀釋度嚴(yán)格按照試劑盒說明書規(guī)定的操作,一般先加樣品稀釋液后再加入樣品。加樣要準(zhǔn)確,小心不要使吸頭碰著酶標(biāo)板空上是包被抗原。為保證加樣的準(zhǔn)確,最好使用多孔道加樣器,使用時注意防止吸頭間的交叉污染。3.6溫育貼好封板膜,按照試劑盒要求的溫度和時間進(jìn)行溫育,最好選擇濕育方法。3.7洗板開啟洗板機(jī)前,先檢查洗板機(jī)廢液瓶是否已排空,開啟后先用蒸餾水沖洗管道,再換上洗液瓶。按照試劑盒的要求,選擇、修改洗扳方式、洗滌次數(shù)和浸泡時間,根據(jù)所用酶標(biāo)板的條數(shù)確定洗板道數(shù),根據(jù)酶標(biāo)板的位置調(diào)節(jié)洗頭的位置,然后開始洗板,洗板結(jié)束后用蒸餾水沖洗管道。3.8加酶結(jié)合物對于二步法ELISA實(shí)驗(yàn)需加酶結(jié)合物,按試劑盒要求完成。3.9加底物洗好板后應(yīng)立即加底物,需加自配的底物應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。3.10終止反應(yīng)在規(guī)定的時間內(nèi)用試劑盒中的或根據(jù)要求自行配置的終止液終止反應(yīng)。3.11酶標(biāo)儀讀物按照試劑盒的要求選擇濾光片,確定空白孔位置,選擇合適達(dá)的打印報(bào)告格式,讀數(shù)并打印結(jié)果。3.12所用儀器在使用后及時填寫使用記錄。3.13結(jié)果判斷計(jì)算3.13.1根據(jù)試劑盒說明書要求的陰陽對照OD值范圍判斷實(shí)驗(yàn)

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