國(guó)境口岸蠅類、蜚蠊攜帶重要病原體檢測(cè)方法 第11部分：寄生蟲（包囊）

國(guó)境口岸蠅類、蜚蠊攜帶重要病原體檢測(cè)方法第11部分：寄生蟲卵(包囊)1)肥胖帶絳蟲(牛肉縫蟲)卵(EggofTacmiasaginata);m)溶組織內(nèi)阿米巴包囊(CystofEatamacbuhistolyira);m)藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(賈第蟲)包囊(CystofGiardialamdia)。4樣品的檢測(cè)4.1器材及試劑4.1.1器材：金屬網(wǎng)(40日/時(shí)～60目/時(shí))、紗布、研磨器、離心機(jī)、離心管、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、浮聚瓶、金屬環(huán)等。4.1.2試劑；氯化鈉、硫酸鋅、碘化鉀、碘等(參見附錄A)4.2檢測(cè)方法4.2.1離心沉淀法將待檢樣品故入研磨器.加入適量的蒸餾水，研磨成勻漿。將勻漿液用紗布(2層～3層)或金屬網(wǎng)(40目/時(shí)～60目/時(shí))過濾，去除大的組織碎片或其他雜質(zhì)。將過濾液轉(zhuǎn)人離心管，離心5min(2000r/min)。棄上清液，取沉渣涂片鏡檢。本方法對(duì)多數(shù)蠕蟲卵的檢測(cè)效果較好，但對(duì)比重較小的鉤蟲卵和原蟲包囊則效果較差。4.2.2醛醚沉淀法待檢樣品故入研磨器，加入適量的蒸餾水，研磨成勻漿。將勻漿液用紗布(2層～3層)或金屬網(wǎng)(40目/時(shí)～60目/時(shí))過濾，去除大的組織醉片或其他雜質(zhì)。將過濾液轉(zhuǎn)人離心管，離心5min(2000r/min)。奔上清液，加入10%的甲醛7mL。5min后加入乙醚3mL。充分混合，離心5min(2000r/min)。管內(nèi)自上而下分為4層，棄上3層，取管底沉渣涂片鏡檢。本方法對(duì)多數(shù)蝠蟲卵和部分原蟲包囊的檢測(cè)效果較好，但對(duì)藍(lán)氏賈第鞭毛蟲包囊的檢測(cè)效果較差。4.2.3飽和鹽水浮聚法將待檢樣品放入研磨器，加入適量的飽和鹽水，研磨成勻紫。將勻黎液置于浮聚瓶?jī)?nèi)《浮聚瓶為圓簡(jiǎn)狀，高3.5cm,直徑約2cm),用滴管滴加飽和鹽水至略高出杯口而不外溢為宜。在瓶口覆蓋一載玻片，使其與液面完全接觸但無氣泡產(chǎn)生，靜置20min。平提載玻片并迅速翻轉(zhuǎn)，置顯微鏡下觀察。該法對(duì)鉤蟲卵的檢測(cè)效果較好。也適合對(duì)其他線蟲卵的檢測(cè)，但不適合檢測(cè)吸蟲卵和原蟲包囊。4.2.4硫酸鋅浮聚法待檢樣品放入研磨器，加入適量的蒸餾水，研磨成勻漿。將勻漿液用紗布(2層～3層)或金屬網(wǎng)(40目/時(shí)～60目/時(shí))過濾，去除大的組織碎片或其他雜質(zhì)。將過濾液轉(zhuǎn)入離心管，離心5min(2000r/min)。棄上清液，加入適量的33%硫酸鋅溶液，充分混勻后再加33%硫酸鋅溶液至距管口1em處，離心1min(2000r/min)。用金屬環(huán)吊取浮面上的液體2次～3次.將吊取物置于載玻片上鏡檢。如檢測(cè)原蟲包囊，加碘液染色并覆以蓋玻片。本方法適合于檢查原蟲包囊和多數(shù)蝸蟲卵(主要為線蟲卵》。5結(jié)果判斷將涂片置于光學(xué)顯微鏡下，選擇合適的倍數(shù)進(jìn)行鏡檢，并根據(jù)寄生蟲卵(包囊)的形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行種(資料性附錄)常見寄生蟲卵(包囊)形態(tài)學(xué)特征B.1似蚓蟈線蟲卵受精卵為橢圓形。大小為(45μm～75pm)×(35μm～50pm)。卵殼厚而透明，殼的表面有一層凹凸不平的蛋白質(zhì)膜，呈棕黃色。卵內(nèi)含大而圓的卵細(xì)胞，卵細(xì)胞兩端與卵殼之間有新月形的空隙。未受精卵形狀不規(guī)則，一般為長(zhǎng)橢圓形。大小為(88am~93pm》×(39μm~44pm)。殼質(zhì)層與蛋白質(zhì)膜較受精蟈蟲卵薄，卵殼內(nèi)含有許多折光性很強(qiáng)的屈光顆粒。B.2十二指腸鉤口線蟲和美洲板口線蟲卵橢圓形，殼薄，無色透明。大小為(56μm～76pm)×(36μm～40μm)。組胞，以4個(gè)最為常見。卵殼與卵細(xì)胞間有明顯的間隙。兩種鉤蟲卵形態(tài)學(xué)很相似，不易區(qū)分，B.3蠕形住腸線蟲卵無色透明，大小為(50μm~60μm)×(20μm~30ym)。在光學(xué)顯微鏡下常見兩側(cè)不對(duì)稱，一側(cè)較平，一側(cè)稍凸。在掃描電鏡下.較凸的一側(cè)有2條縱橫的嵴，立體構(gòu)型為不完全對(duì)稱的長(zhǎng)橢球形。卵殼較厚，無色透明，分3層，最內(nèi)為脂層，中間為殼質(zhì)層，最外層為光滑的蛋白質(zhì)膜。剛排除的蟲卵，內(nèi)含一胚蚴。B.4毛首鞭形線蟲卵似腰鼓形，大小為(50pm～54em)×(22μm～23μm),黃褐色。卵殼較厚，內(nèi)有脂層，中為殼質(zhì)層，外為卵黃膜。蟲卵兩端各具一透明塞狀突起，稱為蓋塞。蓋塞分為3層，但其殼質(zhì)層因含蛋白質(zhì)成分較卵殼少而呈透明狀。B.5華支睪吸蟲卵大小與形狀似芝麻粒，黃褐色，大小為(27pm～35ym)×(12μm～20pm),是人體寄生蟲卵(包囊)中較小的一種蟲卵。該蟲卵前端略窄，有一小蓋。蓋與卵殼相接處，卵殼增厚形成肩峰。卵后端飩圓，有一不明顯的小突起。B.6布氏差片吸蟲卵長(zhǎng)橢圓形，淡黃色，大小約為(130μm～140pm)×(80gm～85μm)。是人體內(nèi)寄生蟲卵中較大的一種蟲卵。卵殼薄，卵的一端有一個(gè)不明顯的小蓋，卵內(nèi)含有1個(gè)卵細(xì)胞和多個(gè)卵黃球。7FertilizedEggofAscarisLambritoidesUnfertilizedEggofAscarisLambricwidesEggofHookwormEggofEaterobiwsvermicalEggofTricharistrichinEggofFasciolopxisbaskiEggofSchistosowajapowicumEggofClmorchissinensisEggofParagowimaswwstermaniEggofSchistoowahaeat9圖C.11曼氏血吸蟲卵EggofSchistoowamansowi圖C.12帶瞭蟲蟲卵EggofTapewormImmatureeyststainedwithironhemato圖C.13不同染色條件下的溶組織內(nèi)阿米巴包囊TheCystofEntamro