現(xiàn)代生物科技-2021年高考生物真題模擬試題專(zhuān)項(xiàng)匯編

現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題一一2021年高考生物真題模擬試題專(zhuān)項(xiàng)匯編

[2021年山東卷，4]1.我國(guó)考古學(xué)家利用現(xiàn)代人的DNA序列設(shè)計(jì)并合成了一種類(lèi)似磁鐵的

"引子"，成功將極其微量的古人類(lèi)DNA從提取自土壤沉積物中的多種生物的DNA中識(shí)別并

分離出來(lái)，用于研究人類(lèi)起源及進(jìn)化。下列說(shuō)法正確的是（）

A."引子"的徹底水解產(chǎn)物有兩種

B.設(shè)計(jì)“引子"的DNA序列信息只能來(lái)自核DNA

C.設(shè)計(jì)"引子"前不需要知道古人類(lèi)的DNA序列

D.土壤沉積物中的古人類(lèi)雙鏈DNA可直接與"引子"結(jié)合從而被識(shí)別

【2021年山東卷，5】2.利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將含有基因修飾系統(tǒng)的T-DNA插入到水稻細(xì)胞

M的某條染色體上，在該修飾系統(tǒng)的作用下，一個(gè)DNA分子單鏈上的一個(gè)C脫去氨基變?yōu)?/p>

U,脫氨基過(guò)程在細(xì)胞M中只發(fā)生一次。將細(xì)胞M培育成植株N。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.N的每一個(gè)細(xì)胞中都含有T-DNA

B.N自交，子一代中含T-DNA的植株占利

C.M經(jīng)n（n>l）次有絲分裂后，脫氨基位點(diǎn)為A-U的細(xì)胞占l/2n

D.M經(jīng)3次有絲分裂后，含T-DNA且脫氨基位點(diǎn)為A-T的細(xì)胞占比

【2021年山東卷，15】3.一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇，一個(gè)抗決定簇只能刺激機(jī)

體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱(chēng)為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白

p72注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中

直接分離出多抗。下列說(shuō)法正確的是（）

A.注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響大

B.單抗制備過(guò)程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合

C.利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗

D.p72部分結(jié)構(gòu)改變后會(huì)出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況

[2021年6月浙江卷,2014.采用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可將增強(qiáng)型綠色熒光蛋白（EGFP）

基因定點(diǎn)插入受精卵的Y染色體上，獲得轉(zhuǎn)基因雄性小鼠。該轉(zhuǎn)基因小鼠與野生型雌性小鼠

交配，通過(guò)觀(guān)察熒光可確定早期胚胎的性別。下列操作錯(cuò)誤的是（）

A.基因編輯處理的受精卵在體外培養(yǎng)時(shí)，不同發(fā)育階段的胚胎需用不同成分的培養(yǎng)液

B.基因編輯處理的受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)至2細(xì)胞期，須將其植入同期發(fā)情小鼠的子宮，才可獲

得表達(dá)EGFP的小鼠

C.分離能表達(dá)EGFP的胚胎干細(xì)胞，通過(guò)核移植等技術(shù)可獲得大量的轉(zhuǎn)基因小鼠

D.通過(guò)觀(guān)察早期胚胎的熒光，能表達(dá)EGFP的即為雄性小鼠胚胎

[2021年1月浙江卷，1815.下圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程示意圖。下列敘述正確的是

()

①切取組織②制備細(xì)胞懸浮液③原代培養(yǎng)④傳代培養(yǎng)

A.步驟①的操作不需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行

B.步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離

C.步驟③到④生物分瓶操作前常用胰蛋白酶處理

D.步驟④培養(yǎng)過(guò)程中不會(huì)發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化

【2021年天津河北區(qū)模擬，1216.CD47是一種跨膜糖蛋白。它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)

節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含

量比正常細(xì)胞高1.6-5倍，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。為證明抗CD47的單

克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，科學(xué)家按照如下流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。

CD47等BAL玳小鼠勺臂裝雜為御111gTiW元體

留雌②③]加油

實(shí)蜓a(bǔ)：巨噬細(xì)胞珊■瘤細(xì)胞共培養(yǎng)體系

④悒“

巨陵細(xì)胞的吞噬指數(shù)

下列敘述不正確的是()

A.經(jīng)篩選可得到既能產(chǎn)生抗CD47抗體又能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞

B.對(duì)照組應(yīng)在巨噬細(xì)胞+正常細(xì)胞共培養(yǎng)體系中加入單克隆抗體

C.多次進(jìn)行步驟①的目的是獲得更多分泌抗CD47抗體的漿細(xì)胞

D.步驟②中可以利用聚乙二醇或滅活的病毒誘導(dǎo)完成細(xì)胞融合

【2021年全國(guó)乙卷，3817.【生物一選修3現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題】

用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人類(lèi)需要的生物產(chǎn)品。在此

過(guò)程中需要使用多種工具酶，其中4種限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)如圖所示。

GAATTCCCCGGGCTGCAGGATATC

CTTAAGGGGCCCGACGTCCTATAG

tt

限制醉：EcoRISmaIPstI￡coRV

回答下列問(wèn)題：

（1）常用的DNA連接酶有E-c。"DNA連接酶和T4DNA連接酶。上圖中酶切割后

的DNA片段可以用E-coliDNA連接酶連接，上圖中酶切割后的DNA片段可以用

T&DNA連接酶連接。

（2）DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是o

（3）DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征。如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點(diǎn)，可以

保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能;質(zhì)粒DNA分子上有,便于

外源DNA插入；質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因（如某種抗生素抗性基因），利用抗生素可篩

選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞，方法是。

（4）表達(dá)載體含有啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是指。

【2021年湖南卷，2218.M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)?，F(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)

驗(yàn)，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過(guò)核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技

術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A,流程如圖所示，回答下列問(wèn)題：

F

成纖維細(xì)胞去核卵母細(xì)胞

，胚胎培養(yǎng)

早期胚胎

、胚胎移植

代孕母親

I

克隆動(dòng)物A

（1）在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過(guò)程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是,這類(lèi)

酶能將特定部位的兩個(gè)核甘酸之間的斷開(kāi)。

（2）在無(wú)菌、無(wú)毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí)，需要定期更

換培養(yǎng)液，目的是。

（3）與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是

。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細(xì)胞,在形態(tài)上表現(xiàn)為

（答出兩點(diǎn)即可），功能上具有。

（4）鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：以免疫小鼠的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融

合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡(jiǎn)要寫(xiě)出利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是

否失活的實(shí)驗(yàn)思路：。

【2021年廣東卷，22】9.非細(xì)胞合成技術(shù)是一種運(yùn)用合成生物學(xué)方法，在細(xì)胞外構(gòu)建多酶催

化體系，獲得目標(biāo)產(chǎn)物的新技術(shù)，其核心是各種酶基因的挖掘、表達(dá)等。中國(guó)科學(xué)家設(shè)計(jì)了

4步酶促反應(yīng)非細(xì)胞合成路線(xiàn)（如圖），可直接用淀粉生產(chǎn)肌醇（重要的醫(yī)藥食品原料），以

期解決高溫強(qiáng)酸水解方法造成的嚴(yán)重污染問(wèn)題，并可以提高產(chǎn)率。

a-葡聚糖磷酸葡萄1-磷酸肌

,——,磷酸化酶,------------糖變位酶-------------，醇合成酶

畫(huà)｝萬(wàn)一｛1-璘酸-葡萄糖管『6.磷酸-葡萄糖|--------

磷酸鹽磷酸肌醇

航研一丞艇用1-磷酸-肌醇卜——

回答下列問(wèn)題：

（1）研究人員采用PCR技術(shù)從土壤微生物基因組中擴(kuò)增得到目標(biāo)酶基因。此外，獲得酶基

因的方法還有。（答出兩種即可）

（2）高質(zhì)量的DNA模板是成功擴(kuò)增出目的基因的前提條件之一。在制備高質(zhì)量DNA模板

時(shí)必須除去蛋白，方法有。（答出兩種即可）

（3）研究人員使用大腸桿菌BL21作為受體細(xì)胞，pET20b為表達(dá)載體分別進(jìn)行4種酶的表

達(dá)。表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)，首先應(yīng)制備細(xì)胞。為了檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)出

酶蛋白，需要采用的方法有。

（4）依圖所示流程，在一定的溫度、pH等條件下，將4種酶與可溶性淀粉溶液混合組成一

個(gè)反應(yīng)體系。若這些酶最適反應(yīng)條件不同，可能導(dǎo)致的結(jié)果是o在

分子水平上，可以通過(guò)改變,從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)對(duì)酶特性的改造

和優(yōu)化。

【2021年河北卷，24】10.采礦污染和不當(dāng)使用化肥導(dǎo)致重金屬鎘（Cd）在土壤中過(guò)量積累。

利用植物修復(fù)技術(shù)將土壤中的Cd富集到植物體內(nèi)，進(jìn)行后續(xù)處理（例如，收集植物組織器

官異地妥善儲(chǔ)存），可降低土壤中Cd的含量。為提高植物對(duì)Cd污染土壤的修復(fù)能力，研究

者將酵母液泡Cd轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（YCF1）基因?qū)胧茉囍参?，并檢測(cè)了相關(guān)指標(biāo)。

回答下列問(wèn)題：

（1）為獲取YCF1基因，將酵母細(xì)胞的全部DNA提取、切割后與載體連接，導(dǎo)入受體菌的

群體中儲(chǔ)存，這個(gè)群體稱(chēng)為。

（2）將DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時(shí)，所需要的兩種酶是。構(gòu)建的重組

基因表達(dá)載體中必須含有標(biāo)記基因，其作用是。

（3）進(jìn)行前期研究時(shí)，將含有YCF1基因的重組載體導(dǎo)入受試雙子葉植物印度芥菜，采用最

多的方法是o研究者進(jìn)一步獲得了轉(zhuǎn)YCF1基因的不育楊樹(shù)株系，采用不育株系作

為實(shí)驗(yàn)材料的目的是。

（4）將長(zhǎng)勢(shì)一致的野生型和轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)苗移栽到Cd污染的土壤中，半年后測(cè)定植株干重

（圖1）及不同器官中Cd含量（圖2）。據(jù)圖1可知，與野生型比，轉(zhuǎn)基因植株對(duì)Cd具有

更強(qiáng)的（填"耐性"或"富集能力"）；據(jù)圖2可知，對(duì)轉(zhuǎn)基因植株的進(jìn)行

（5）己知YCF1特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的液泡膜上。據(jù)此分析，轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)比野生型能

更好地適應(yīng)高Cd環(huán)境的原因是。相較于草本植物，采用楊樹(shù)這種喬木作為Cd污

染土壤修復(fù)植物的優(yōu)勢(shì)在于（寫(xiě)出兩點(diǎn)即可）。

【2021年全國(guó)甲卷，38111.PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測(cè)。為檢測(cè)病人是否感染

了某種病原菌，醫(yī)生進(jìn)行了相關(guān)操作：①分析PCR擴(kuò)增結(jié)果；②從病人組織樣本中

提取DNA；③利用PCR擴(kuò)增DNA片段；④采集病人組織樣本?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）若要得到正確的檢測(cè)結(jié)果，正確的操作順序應(yīng)該是（用數(shù)字序號(hào)

表示）。

（2）操作③中使用的酶是。PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、

_______三步，其中復(fù)性的結(jié)果是。

（3）為了做出正確的診斷，PCR反應(yīng)所用的引物應(yīng)該能與特異性結(jié)合。

（4）PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是指。該技術(shù)目前被廣泛地應(yīng)用于疾病

診斷等方面。

【2021年6月浙江卷，29（-）］12.回答下列（一）（二）小題：

（一）回答與甘蔗醋制作有關(guān)的問(wèn)題：

（1）為了獲得釀造甘蔗醋的高產(chǎn)菌株，以自然發(fā)酵的甘蔗渣為材料進(jìn)行篩選。首先配制醋

酸菌選擇培養(yǎng)基：將適量的葡萄糖、KH2P0八MgSO4溶解并定容，調(diào)節(jié)pH,再高壓蒸汽滅

菌，經(jīng)后加入3%體積的無(wú)水乙醇。然后將10g自然發(fā)酵的甘蔗渣加入選擇培養(yǎng)

基，震蕩培養(yǎng)24h。用將少量上述培養(yǎng)液涂布到含CaCO3的分離培養(yǎng)基上，在

30°培養(yǎng)48h。再挑取分離培養(yǎng)基上具有的單菌落若干，分別接種到與分離培

養(yǎng)基成分相同的培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h后，置于4°C冰箱中保存。

（2）優(yōu)良產(chǎn)酸菌種篩選。將冰箱保存的菌種分別接入選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)一段時(shí)間后，取合

適接種量的菌液在30°C、150r/min條件下震蕩培養(yǎng)。持續(xù)培養(yǎng)至培養(yǎng)液中醋酸濃度不再上

升，或者培養(yǎng)液中含量達(dá)到最低時(shí)，發(fā)酵結(jié)束。篩選得到的優(yōu)良菌種除了產(chǎn)酸量

高外，還應(yīng)有（答出2點(diǎn)即可）等特點(diǎn)。

（3）制醋過(guò)程中，可將甘蔗渣制作成固定化介質(zhì)，經(jīng)后用于發(fā)酵。其固定化方

法為O

（-）斑馬魚(yú)是一種模式動(dòng)物，體外受精發(fā)育，胚胎透明、便于觀(guān)察，可用于水質(zhì)監(jiān)測(cè)、基

因功能分析以及藥物毒性與安全性評(píng)價(jià)等。

（1）由于人類(lèi)活動(dòng)產(chǎn)生的生活污水日益增多，大量未經(jīng)處理的污水直接排入河流、湖泊會(huì)

引起水體，導(dǎo)致藻類(lèi)大量繁殖形成水華。取水樣喂養(yǎng)斑馬魚(yú)，可用斑馬魚(yú)每周的

體重和死亡率等指標(biāo)監(jiān)測(cè)水體污染程度。

（2）為了研究某基因在斑馬魚(yú)血管發(fā)育過(guò)程中的分子調(diào)控機(jī)制，用DNA連接前將該基因連

接到質(zhì)粒載體形成,導(dǎo)入大腸桿菌菌株DH5a中。為了能夠連接上該目的基因、

并有利于獲得含該目的基因的DH5a陽(yáng)性細(xì)胞克隆，質(zhì)粒載體應(yīng)含有

（答出2點(diǎn)即可）。提取質(zhì)粒后，采用法，將該基因?qū)氚唏R魚(yú)受精卵細(xì)胞中，

培養(yǎng)并觀(guān)察轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)胚胎血管的發(fā)育情況。

（3）為了獲取大量斑馬魚(yú)胚胎細(xì)胞用于藥物篩選，可用分散斑馬魚(yú)囊胚的內(nèi)細(xì)

胞團(tuán)，取分散細(xì)胞作為初始材料進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加成纖維細(xì)胞作為

,以提高斑馬魚(yú)胚胎細(xì)胞克隆的形成率。

[2021年1月浙江卷,29(-)113.回答下列(一)、(二)小題:

(一)某環(huán)保公司從淤泥中分離到一種高效降解富營(yíng)養(yǎng)化污水污染物的細(xì)菌菌株，制備了固定

化菌株。

(1)從淤泥中分離細(xì)菌時(shí)常用劃線(xiàn)分離法或法，兩種方法均能在固體培養(yǎng)基上形成

。對(duì)分離的菌株進(jìn)行誘變、和鑒定，從而獲得能高效降解富營(yíng)養(yǎng)化污水污

染物的菌株。該菌株只能在添加了特定成分X的培養(yǎng)基上繁殖。

(2)固定化菌株的制備流程如下；①將菌株與該公司研制的特定介質(zhì)結(jié)合；②用蒸儲(chǔ)水去除

;③檢驗(yàn)固定化菌株的。菌株與特定介質(zhì)的結(jié)合不宜直接采用交聯(lián)法和

共價(jià)偶聯(lián)法，可以采用的2種方法是o

(3)對(duì)外，只提供固定化菌株有利于保護(hù)該公司的知識(shí)產(chǎn)權(quán)，推測(cè)其原因是o

(二)三葉青為蔓生的藤本植物，以根入藥。由于野生三葉青對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境要求非?？量?，以及

生態(tài)環(huán)境的破壞和過(guò)度的采挖，目前我國(guó)野生三葉青已十分珍稀。

(1)為保護(hù)三葉青的多樣性和保證藥材的品質(zhì)，科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理，利

用技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了三葉青的林下種植。

(2)依據(jù)基因工程原理，利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片，葉片產(chǎn)生酚類(lèi)化合物，

誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上Wr系列基因表達(dá)形成和限制性核酸內(nèi)切酶等，進(jìn)而從質(zhì)粒

上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段(T-DNA).T-DNA進(jìn)入葉片細(xì)胞并整合到染色體上,

T-DNA上系列基因表達(dá)，產(chǎn)生相應(yīng)的植物激素，促使葉片細(xì)胞持續(xù)不斷地分裂形成

,再分化形成毛狀根。

(3)剪取毛狀根，轉(zhuǎn)入含頭抱類(lèi)抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添

加抗生素的主要目的是。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮培養(yǎng),

通過(guò)控制搖床的和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的,獲得大量毛狀根，用于提

取藥用成分。

【2021年西藏拉薩模擬，12】14.利用乳腺生物反應(yīng)器獲取藥用蛋白具有產(chǎn)量高、成本低等

優(yōu)點(diǎn)。如圖為培育轉(zhuǎn)基因奶牛獲得人血清白蛋白的流程。

牛

奶

其

他

蛋

白

受精卵普通奶牛轉(zhuǎn)基因奶牛

請(qǐng)回答：

（I）PCR擴(kuò)增人血清白蛋白基因使用的酶是。要使人血清白蛋白基因在轉(zhuǎn)基因

奶牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)，應(yīng)將其與基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組。

（2）基因工程的核心步驟是，將目的基因?qū)肱Ｊ芫阉玫姆椒ㄊ?/p>

（3）體外受精前精子要進(jìn)行處理，過(guò)程②包括技術(shù)和胚胎移植技術(shù);

可用技術(shù)獲得多只與該轉(zhuǎn)基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢。

（4）若要檢測(cè)牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用技術(shù)。

[2021年天津河?xùn)|區(qū)模擬，12】15.多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）可自動(dòng)化重復(fù)進(jìn)行圖1所示的

①?③步驟，每完成一次①?③步驟稱(chēng)為完成一個(gè)循環(huán)。

lIHIIMillllllKIIINMIItlHHNttMMIIIIIIMMCI

h

P

圖1

（1）完成PCR過(guò)程所用的Taq酶作用于鍵,完成該過(guò)程的三次循環(huán)后產(chǎn)生的DNA

分子中含有引物B的比例為o

（2）某研究小組擬用PCR技術(shù)和引物（填引物的序號(hào)）從圖2所示DNA分子中

擴(kuò)增出編碼蛋白質(zhì)H的基因，并開(kāi)展后續(xù)研究。

引物1用物2

C._____________a■______y

,CACGGATCCTCCCAGGAATTCGTACGAATTCGGTACC-

『GTGCCTAGGAG______GGTCCTTAAGCATG_?CTTAAGCCATGG_________“

11Q

編碼蛋白質(zhì)H的基因t

引物3引物4

圖2

（3）通過(guò)上述PCR反應(yīng)獲得編碼蛋白質(zhì)H的基因片段后，擬將其插入質(zhì)粒pZHYl中構(gòu)建重

組DNA分子pZHY2?已知在pZHYl上存在EcoRI、BamHI、KpnI、XbaI4種限制酶的識(shí)

別序列（如表），則應(yīng)選用的限制酶組合是?

EcoRIBamHIKpnIXbaI

G4/AATTCGJGATCCGGTAC4/CTJCTAGA

CTTAATGCCTAGtGCtCATGGAGATC個(gè)T

A.BamHI和EcoRIB.EcoRI和XbaI

C.EcoRI和KpnID.BamHI和KpnI

(4)將重組DNA分子pZHY2導(dǎo)入大腸桿菌后，就可通過(guò)大規(guī)模培養(yǎng)大腸桿菌，然后制備純

化的蛋白質(zhì)H。若要制備抗蛋白質(zhì)H的單克隆抗體，相關(guān)說(shuō)法中錯(cuò)誤的有?(多

選)

A.可以用上述步驟所得純化的蛋白質(zhì)H作為抗原

B.從動(dòng)物的脾臟收集B淋巴細(xì)胞，并使之與雜交瘤細(xì)胞融合

C.單克隆抗體是經(jīng)選擇性培養(yǎng)基的篩選所得到的B淋巴細(xì)胞，進(jìn)行培養(yǎng)而產(chǎn)生的抗體

D.電刺激可用于制備單克隆抗體和植物體細(xì)胞雜交，也可用于動(dòng)物體細(xì)胞核移植

答案以及解析

1.答案：c

2.答案：D

3.答案：D

4.答案：B

解析：本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)。早期胚胎發(fā)育的不同過(guò)程需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不同，A項(xiàng)

正確；受精卵發(fā)育至桑根胚或囊胚，才能進(jìn)行胚胎移植，B項(xiàng)錯(cuò)誤；核移植技術(shù)可用于克隆

動(dòng)物，C項(xiàng)正確；由題意可知，將EGFP基因插入Y染色體，故能表達(dá)該基因的是雄性，D

項(xiàng)正確。

5.答案：C

解析：A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程需要在無(wú)菌操作，故步驟①的操作需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行，A

錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程需要用胰蛋白的或膠原蛋白酶處理動(dòng)物組織，分散成單個(gè)細(xì)胞,

制成細(xì)胞懸液，B錯(cuò)誤；C、傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，使之分散成

單個(gè)細(xì)胞，再分瓶培養(yǎng)，C正確；D、步驟④為傳代培養(yǎng)過(guò)程，該過(guò)程中部分細(xì)胞可能發(fā)生

細(xì)胞轉(zhuǎn)化，核型改變，D錯(cuò)誤。

6.答案：B

7.答案：（1）EcoRI、PstI；EcoRI、SmaI、PstI、EcoRV

（2）磷酸二酯鍵

（3）自我復(fù)制；限制酶切割位點(diǎn)；將待篩選的宿主細(xì)胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中，能

夠生長(zhǎng)的是含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞

（4）RNA聚合酶識(shí)別、結(jié)合并啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的DNA片段

解析：本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)。

（1）題圖中EcoRI和PstI切割后得到的DNA片段屬于黏性末端，SmaI和EcoRV切割

后得到的DNA片段屬于平末端，ECO/7DNA連接酶只能連接兩個(gè)黏性末端，T,DNA連接酶可

以連接兩個(gè)黏性末端或平末端。

（2）DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間連接，形成磷酸二酯鍵。

（3）質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點(diǎn)，可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能自我復(fù)制；質(zhì)粒DNA分

子上有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，便于外源DNA片段插入；質(zhì)粒DNA分子上的抗生素抗

性基因可使導(dǎo)入的宿主細(xì)胞抗某種抗生素，故用含該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞，能夠存

活的即為含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞。

（4）啟動(dòng)子是指位于基因首端的一段特殊DNA序列，是RNA聚合酶識(shí)別及結(jié)合的部位，

能驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需要的蛋白質(zhì)。

8.答案：（1）限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）；磷酸二酯鍵

（2）清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害

（3）動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其

全能性十分困難；細(xì)胞體積小，細(xì)胞核較大，核仁明顯；發(fā)育的全能性

（4）B；取動(dòng)物A和克隆動(dòng)物A的肝細(xì)胞，分別提取蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原一抗體雜交

解析：本題考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的有關(guān)知識(shí)。

（1）切割DNA的工具是限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶），它能夠識(shí)別DNA分子的某種特定

核甘酸序列，并且使每一條鏈中的特定部位的兩個(gè)核甘酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。

（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)

胞自身造成危害。

（3）動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)

其全能性十分困難，因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。從早期胚胎中

分離出的胚胎干細(xì)胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小、細(xì)胞核較大、核仁明顯；在功能上具有發(fā)育

的全能性，即可以分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。

（4）以免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的

單克隆抗體。若要用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否失活，則可從動(dòng)物A和克隆動(dòng)物

A肝細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)，分別與此抗體進(jìn)行抗原一抗體雜交，若動(dòng)物A有蛋白質(zhì)表達(dá)，而克

隆動(dòng)物A無(wú)相應(yīng)蛋白質(zhì)表達(dá)，則M基因失活。

9.答案：（1）從基因文庫(kù)中獲取、人工合成（或化學(xué)合成或鳥(niǎo)槍法或逆轉(zhuǎn)錄法）

（2）酶解法、鹽析法（或高溫或加熱）

（3）感受態(tài)；抗原一抗體雜交、測(cè)定醐活性

（4）酶活性下降，肌醇合成量少（或酶失活，肌醇完全不能合成）；酶的基因序列（或基因）

解析：本題考查目的基因的獲取、DNA與蛋白質(zhì)的分離、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、目的基因

的檢測(cè)、蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識(shí)。

（1）目的基因的獲取方法包括從基因文庫(kù)中獲取、PCR擴(kuò)增和人工合成等。

（2）DNA與蛋白質(zhì)的分離方法有利用DNA和蛋白質(zhì)在鹽溶液和酒精中的溶解度不同進(jìn)行分

離（鹽析法）；利用DNA和蛋白質(zhì)對(duì)蛋白酶的耐受力不同進(jìn)行分離（酶解法）；在不超過(guò)80℃

的高溫下加熱，使蛋白質(zhì)變性失活，達(dá)到分離的目的等。

（3）將目的基因?qū)爰?xì)菌時(shí)，需要用Ca2+處理細(xì)菌，使其處于感受態(tài)。檢測(cè)目的基因表達(dá)

與否，需要對(duì)其表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，本題的表達(dá)產(chǎn)物為酶蛋白，故可以測(cè)定酶活性，也可以

檢測(cè)蛋白質(zhì)，方法為抗原一抗體雜交。

（4）淀粉在四種酶依次催化下形成肌醇，但是四種酶的最適條件不同，在一定條件下進(jìn)行

反應(yīng)，有些酶的活性不高或失活，因此，產(chǎn)生的肌醇量少或完全不合成。在分子水平上可以

通過(guò)改變酶的基因序列進(jìn)而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。

10.答案：（1）基因組文庫(kù)

（2）限制酶和DNA連接酶；便于目的基因的檢測(cè)和篩選

（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；防止外源基因傳給其他植物，造成基因污染

（4）耐性；葉

（5）能特異性的將Cd轉(zhuǎn)運(yùn)至液泡中；楊樹(shù)的根系發(fā)達(dá)，有利于吸收土壤中的Cd；楊樹(shù)屬

于多年生木本植物，可多次收集葉片對(duì)Cd進(jìn)行處理

解析：本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)。

（1）將酵母細(xì)胞的全部DNA提取、切割后與載體連接，導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，這個(gè)群

體含有酵母菌的全部基因，因此稱(chēng)為基因組文庫(kù)。

（2）構(gòu)建重組載體時(shí)，需要用限制酶切割供體DNA和質(zhì)粒以產(chǎn)生相應(yīng)的黏性末端，然后用

DNA連接酶進(jìn)行連接。構(gòu)建的重組基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因，可用于檢測(cè)目的基因是否

導(dǎo)入受體細(xì)胞，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。

（3）將重組載體導(dǎo)入雙子葉植物，采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。采用不育株系作為實(shí)

驗(yàn)材料可防止外源基因傳給其他植物，造成基因污染。

（4）由題圖1可知，與野生型相比，轉(zhuǎn)基因植株地上部分、地下部分和植株干重均增加，

即轉(zhuǎn)基因植株在Cd污染的土壤中生長(zhǎng)較好，說(shuō)明轉(zhuǎn)基因植株對(duì)Cd具有更強(qiáng)的耐性。由題

圖2可知，轉(zhuǎn)基因植株的葉中Cd含量最高，對(duì)其進(jìn)行后續(xù)處理對(duì)于緩解土壤Cd污染最為

方便有效。

（5）由于YCFI特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的液泡膜上，可推測(cè)轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)能特異性的將Cd

轉(zhuǎn)運(yùn)至液泡中，適應(yīng)高Cd環(huán)境。相較于草本植株，楊樹(shù)的根系發(fā)達(dá)，有利于吸收土壤中的

Cd,且楊樹(shù)屬于多年生木本植物，可多次收集葉片對(duì)Cd進(jìn)行處理。

11.答案：（1）④②③①

（2）DNA聚合酶；延伸；引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與單鏈DNA結(jié)合

（3）病原菌DNA

（4）在生物體外大量快速擴(kuò)增特定DNA片段的技術(shù)

解析：本題考查PCR技術(shù)的相關(guān)知識(shí)。

（1）若要得到正確的檢測(cè)結(jié)果，正確順序是④采集病人組織樣本今②從病人組織樣本中

提取DNA玲③利用PCR擴(kuò)增DNA片段）①分析PCR擴(kuò)增結(jié)果。

（2）操作③中使用的酶是熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（7bq酶），PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為

變性、復(fù)性、延伸三步，其中復(fù)性就是利用堿基互補(bǔ)配對(duì)形成氫鍵，結(jié)果是兩種引物分別與

2條單鏈DNA模板結(jié)合。

（3）為了做出正確的診斷，PCR反應(yīng)所用的引物應(yīng)該能與病原菌DNA特異性結(jié)合。

（4）PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是指在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)，可

短期內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因。

12.答案：（一）（1）冷卻；玻璃刮刀；較大透明圈；斜面

（2）乙醇；耐酒精度高、耐酸高

（3）滅菌；吸附法

（二）（1）富營(yíng)養(yǎng)化

（2）重組DNA分子；限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列、抗生素抗性基因；顯微注射

（3）胰蛋白酶；原代；飼養(yǎng)層細(xì)胞

解析：本題考查微生物的培養(yǎng)和篩選、基因工程的相關(guān)知識(shí)。

（一）（1）高壓蒸汽滅菌后需經(jīng)過(guò)冷卻再加入無(wú)水乙醇，以免溫度過(guò)高使乙醇揮發(fā)；稀釋涂

布平板法的步驟:首先將培養(yǎng)的菌液稀釋?zhuān)缓笕∫欢康南♂屢悍旁跓o(wú)菌的固體培養(yǎng)基上,

用無(wú)菌的玻璃刮刀把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上；醋酸菌產(chǎn)生的醋酸會(huì)與培養(yǎng)基中的

CaC03反應(yīng)形成透明圈，因此需挑取分離培養(yǎng)基上具有較大透明圈的單菌落若干；菌種的臨

時(shí)保藏一般是將菌種接種到固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下長(zhǎng)成菌落后在4