農(nóng)藥殘留檢測技術課件

農(nóng)藥殘留檢測技術目錄課外閱讀退出第一章緒論學習指南觀察思考課外閱讀復習自測退出本章演示文稿本章目錄

第一章緒論一、農(nóng)藥殘留和殘留毒性1、農(nóng)藥殘留的定義2、農(nóng)藥殘留的來源3、農(nóng)藥殘留毒性二、農(nóng)藥殘留分析1、分析特點2、分析方法和程式3、分析方法的選擇本節(jié)首頁退出本章

1、農(nóng)藥定義

廣義：農(nóng)業(yè)上使用的化學品狹義：用於防治農(nóng)、林有害生物的化學藥劑，以及為改善其理化性狀而用的輔助劑。一、農(nóng)藥殘留和殘留毒性本節(jié)首頁退出本章

2、農(nóng)藥殘留的定義農(nóng)藥→生物體、農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)境→農(nóng)藥親體→毒理學意義→雜質(zhì)、代謝轉(zhuǎn)化產(chǎn)物、反應物→衍生物的總稱。一、農(nóng)藥殘留和殘留毒性本節(jié)首頁退出本章

3、農(nóng)藥殘留的來源

水空氣土壤環(huán)境因數(shù)人為一、農(nóng)藥殘留和殘留毒性本節(jié)首頁退出本章

4、農(nóng)藥殘留毒性因攝入或長時間重複暴露農(nóng)藥殘留而對人、畜以及有益生物產(chǎn)生急性或慢性中毒。一、農(nóng)藥殘留和殘留毒性本節(jié)首頁退出本章

5、農(nóng)藥殘留毒性的類型①化學穩(wěn)定性：六六六、DDT②三致性：致癌、致畸、致突變③環(huán)境激素化合物④遲發(fā)性神經(jīng)毒性一、農(nóng)藥殘留和殘留毒性本節(jié)首頁退出本章

6、農(nóng)藥的降解（半衰期）①溶解性：地下水②環(huán)境因數(shù)：溫度、降水、陽光、風③稀釋作用：植物的吸收一、農(nóng)藥殘留和殘留毒性本節(jié)首頁退出本章

1、分析特點①殘留水準低（kg、g、mg……）②分析過程的複雜性③技術要求提高二、農(nóng)藥殘留分析本節(jié)首頁退出本章

2、分析方法和程式。分析方法：①單殘留②多殘留二、農(nóng)藥殘留分析同一類農(nóng)藥多種農(nóng)藥本節(jié)首頁退出本章

2、分析方法和程式。分析程式：①樣品採集②樣品預處理③樣品製備④分析測定二、農(nóng)藥殘留分析本節(jié)首頁退出本章

3、分析方法的選擇因素

①農(nóng)藥的理化特性、送檢樣人的要求；②單殘留或多殘留方法；③最大殘留限量、方法檢測限、總誤差；④分析方法的有效性；⑤分析時間和費用。二、農(nóng)藥殘留分析本節(jié)首頁退出本章1、容許最大限量（Permissiblelevel）在新鮮食品中允許的最大殘留限界。知識窗PL=

S×F

X×50

X：日攝取量（ppm）S：安全係數(shù)F：食品的消費量本節(jié)首頁退出本章2、可接受的日攝入量(ADI)（AcceptableDailyIntake）指在一生中，對消費者健康沒有可感知危險的日攝入量。單位為：mg/kg/day。知識窗本節(jié)首頁退出本章3、臨時可接受日攝入量（TADI）

指可以獲得足夠的以致額外的生化、毒性以及其他所需數(shù)據(jù)，而確定的有限時期內(nèi)可接受的日攝入量。知識窗TADI

＞ADI本節(jié)首頁退出本章4、最大殘留限制(MRL)

指由食品營養(yǎng)標準委員會推薦的，食品或動物飼料中允許的農(nóng)藥殘留物的最大濃度（毫克/公斤）。是根據(jù)在毒理學上認為可以接受的食品農(nóng)藥殘留量制定的。知識窗本節(jié)首頁退出本章①安全、環(huán)保、高效、經(jīng)濟②新技術（樣品處理技術）③檢測上採用多殘留分析方法④酶聯(lián)免疫技術⑤分析方法的標準化⑥品質(zhì)和健康意識三、發(fā)展和任務本節(jié)首頁退出本章復習思考題復習自測1、什麼是農(nóng)藥殘留和殘留毒性？農(nóng)藥殘留有哪些來源？2、農(nóng)藥殘留分析的任務和目的是什麼？3、選擇農(nóng)藥殘留方法時要特別考慮哪些問題？4、農(nóng)藥殘留分析的複雜性體現(xiàn)在哪些方面？本節(jié)首頁退出本章第二章農(nóng)藥殘留樣品的

採集

學習指南觀察思考課外閱讀復習自測退出本章演示文稿本章目錄目的要求通過本章的學習，目的是使學生掌握水、土壤、食品、飼料等樣品的採集方法，瞭解採集的一些相關知識。學習要點

一般掌握：樣品的取樣方法；樣品的預處理方法等。重點掌握：不同樣品的採集要求和標準，記錄和貯藏等知識。學習指南本節(jié)首頁退出本章第二章農(nóng)藥殘留樣品的採集

一、樣品的種類二、取樣方法三、樣品的包裝、記錄和貯存四、樣品的預處理本節(jié)首頁退出本章

1、主觀樣品為研究農(nóng)藥殘留量與各種因素的關係，從設計的實驗區(qū)域內(nèi)採集的樣品。

2、客觀樣品

監(jiān)測樣品和執(zhí)法樣品，測定的農(nóng)藥殘留種類是未知的或施藥背景不清楚的樣品。一、樣品的種類本節(jié)首頁退出本章1、實驗室樣品從群體採集的送到殘留分析實驗室的樣品。2、檢測樣品實驗室經(jīng)過縮分減量或經(jīng)過精製後的樣品。3、檢測樣份從檢測樣品中稱取的用於分析的樣品。4、檢測溶液經(jīng)過提取、淨化後進入待測狀態(tài)。知識窗本節(jié)首頁退出本章

1、取樣原則

①代表性②方法與目的保持一致③精度要求④防止化學變化或丟失⑤防止污染二、取樣方法本節(jié)首頁退出本章

2、取樣方法

①靜態(tài)群體中取樣②靜態(tài)群體中取樣二、取樣方法本節(jié)首頁退出本章

3、農(nóng)藥殘留田間試驗及取樣

①農(nóng)藥殘留田間試驗的目的和要求②農(nóng)藥殘留田間試驗的內(nèi)容

a、農(nóng)藥殘留動態(tài)試驗

b、施藥因素與最終殘留量水準相關性

c、農(nóng)藥殘留田間試驗樣品的採集二、取樣方法本節(jié)首頁退出本章

4、商品取樣分類

①監(jiān)測調(diào)查取樣：隨機、概率、分佈水準②執(zhí)法取樣：強制性、超標與否二、取樣方法本節(jié)首頁退出本章

5、商品取樣量要求

①小的或輕的產(chǎn)品→1.0~1.5Kg②中等大小產(chǎn)品→2.0~2.5Kg③大的產(chǎn)品→4.0~5.0Kg④肉、禽、魚→1.0~1.5Kg⑤穀物和製品→0.5~1.0Kg二、取樣方法本節(jié)首頁退出本章

6、不同樣品的採集要求

①根莖類蔬菜→採集整個果實②葉類蔬菜→除去腐爛和枯萎部分③豆類→整個果實④果類蔬菜→去除莖部⑤穀物→整個籽粒⑥肉類→整體二、取樣方法本節(jié)首頁退出本章三、樣品的包裝、記錄和貯存本節(jié)首頁退出本章標籤（2個）編號：樣品名稱：採樣時間：地點：要求：溫度濕度光照單獨存放四、樣品的預處理本節(jié)首頁退出本章①粉狀物②穀物③小體積水果和蔬菜④大體積水果和蔬菜⑤液體樣品⑥土壤對含水量較高的樣品採樣方法①肉：放人鉸肉機中鉸勻②水果蔬菜等，放入高速組織搗碎器攪勻③蛋類食品，去殼後用打蛋器打勻。④對於包裝食品，取出各種調(diào)味品後，再製備均勻。知識窗本節(jié)首頁退出本章復習思考題復習自測1、什麼是實驗室樣品？樣品採集的原則和要求有哪些？2、農(nóng)藥殘留監(jiān)測取樣的目的和要求各是什麼？3、樣品採集後要注意哪些問題？4、如何對土壤樣品進行預處理？本節(jié)首頁退出本章第三章樣品製備

學習指南觀察思考課外閱讀復習自測退出本章演示文稿本章目錄目的要求樣品前處理在色譜分析過程中是一個既耗時又極易引進誤差的步驟，樣品處理的好壞直接影響色譜分析的最終結果，因此，為了提高分析測定效率，改善和優(yōu)化色譜分析樣品製備方法和技術是一個重要問題。通過本章的學習，目的是使學生掌握溶劑萃取、固相萃取、超臨界流體萃取、微波萃取以及衍生化技術等色譜分析用樣品的前處理方法，瞭解有關樣品前處理儀器的一些相關知識。學習要點溶劑萃取技術；蒸餾及精餾技術；固相萃取技術；氣體萃取技術；超臨界流體萃取技術；微波萃取技術；衍生化技術技能要點溶劑萃取技術；蒸餾及精餾技術；相萃取技術；超臨界流體萃取技術；波萃取技術學習目標學習指南本節(jié)首頁退出本章第三章樣品製備第一節(jié)概論第二節(jié)溶劑萃取技術

第三節(jié)固相萃取技術第四節(jié)蒸餾及濃縮技術第五節(jié)微波；衍生化；超臨界萃取技術本節(jié)首頁退出本章第一節(jié)概論一、進展和發(fā)展趨勢二、樣品處理的原則三、樣品製備原理四、樣品製備（提?。┪?、常用樣品製備技術本節(jié)首頁退出本章樣品前處理：採樣技術和樣品製備技術。採集→樣品→適合分析的形態(tài)。過程→耗時、繁瑣、誤差前處理不好→需要靈敏度高、測定範圍寬的檢測器和分離效率高的分離柱。一、進展和發(fā)展趨勢本節(jié)首頁退出本章①製備過程中避免組分發(fā)生化學變化；②要防止和避免欲測定組分的沾汙；③盡可能減少無關化合物引入製備過程；④盡可能簡單易行。二、樣品處理的原則本節(jié)首頁退出本章三、樣品製備原理

利用殘留農(nóng)藥與樣品基質(zhì)的物理化學差異，使其從檢測系統(tǒng)有干擾作用的樣品基質(zhì)中提取分離出來（相似相溶）。

極性-溶解度、分配係數(shù)；揮發(fā)性-蒸汽壓。本節(jié)首頁退出本章（一）、分子的極性和水溶性1、極性提取、淨化條件的依據(jù)。相似相溶原理：使用與農(nóng)藥極性相近的溶劑為提取劑，使殘留農(nóng)藥在溶劑中達到最大溶解度。極性判斷：電負性、雙鍵、對稱性表示：氧化鋁吸附劑上洗脫供試溶質(zhì)的能力本節(jié)首頁退出本章2、水溶性農(nóng)藥的極性決定其在溶劑中的溶解性。影響溶解性的其他因素①溫度：高→溶解性高②含鹽量：鹽會降低有機物的溶解度。③pH：影響可解離的農(nóng)藥的溶解度（一）、分子的極性和水溶性本節(jié)首頁退出本章極性溶劑強度溶劑溶解度（20～25℃）溶劑在水中（%）水在溶劑中（%）非極性強反相弱正相正己烷0.000950.0111異辛烷微溶微溶四鹵化碳0.0770.010三鹵甲烷0.8150.072二鹵甲烷2-四氫呋喃任意混溶任意混溶乙醚6.041.468乙酸乙酯8.082.94丙酮任意混溶任意混溶乙腈任意混溶任意混溶異丙醇任意混溶任意混溶甲醇任意混溶任意混溶水任意混溶任意混溶極性弱反相強正相醋酸任意混溶任意混溶（二）、分配定律分配定律：在一對互不相溶的兩相溶劑系統(tǒng)中，由於物質(zhì)在非極性相和極性相中的溶解度不同，當達到平衡時，物質(zhì)在該兩相中的濃度比在一定條件下為常數(shù)的定律。KD

（分配係數(shù)）=[A]非極性相

/[B]極性相

本節(jié)首頁退出本章（三）、揮發(fā)性與蒸汽壓揮發(fā)性：液態(tài)或固態(tài)物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)闅鈶B(tài)的物理性能。揮發(fā)性決定：物質(zhì)在氣-液或氣-固兩相中的分佈。分為沸點和蒸汽壓。蒸汽壓：固態(tài)、液態(tài)→氣態(tài)本節(jié)首頁退出本章四、樣品製備（提?。?/p>

提取是指通過溶解、吸附（吸著）或揮發(fā)等方式將樣品中的殘留農(nóng)藥分離出來的操作步驟，也叫萃取。避免：強酸、強鹼、高溫、劇烈操作極性-溶解度、分配係數(shù)；揮發(fā)性-蒸汽壓。本節(jié)首頁退出本章五、常用樣品製備技術溶劑萃取蒸餾技術固相萃取微波萃取衍生化超臨界萃取樣品製備本節(jié)首頁退出本章第二節(jié)溶劑萃取技術溶劑萃?。喝芙庑圆町悾x用對殘留農(nóng)藥溶解度大的溶劑，將分析物從樣品基質(zhì)中提取出來的方法。關鍵：選擇合適的提取溶劑。本節(jié)首頁退出本章一、分類液-液萃取液-固萃取液-氣萃?。ㄈ芤何眨┹腿ο?/p>

本節(jié)首頁退出本章二、液-液萃取兩種不相容的液體水溶劑：親水化合物進入到水相中。有機溶劑：疏水性化合物將進入有機相中的程度就越大。本節(jié)首頁退出本章（一）、液-液萃取原理利用樣品中不同組分分配在兩種不混溶的溶劑中溶解度或分配比的不同來達到分離、提取或純化的目的。有機相水相本節(jié)首頁退出本章（二）、Nernst分配定律（1）KD=co／caq有機物質(zhì)在有機溶劑中的溶解度一般比在水相中的溶解度大，分配係數(shù)越大，水相中的有機物可被萃取。本節(jié)首頁退出本章（二）、Nernst分配定律（2）式中，m0是被萃取溶液中溶質(zhì)（X）的總含量，

mn是經(jīng)過n次萃取後，X在溶劑中的剩餘量，

V是被萃取溶液的體積，

VB是每次萃取所用溶劑B的體積（均為VB），

n是等量萃取的次數(shù)。本節(jié)首頁退出本章（三）、液-液萃取步驟（1）溶劑體積為樣品溶液的30％～35％。振盪幾次打開活塞Gas蒸氣逸出（也叫放氣）本節(jié)首頁退出本章（三）、液-液萃取步驟（2）絮狀物（乳化）有機相水相水相和絮狀物靜置分層激烈振搖1～2min本節(jié)首頁退出本章（三）、液-液萃取步驟（3）有機相3～5次本節(jié)首頁退出本章（四）、產(chǎn)生乳化的原因由於液-液萃取過程中劇烈振動，經(jīng)常發(fā)生乳化現(xiàn)象，特別是那些含脂肪的樣品。原因：體系的性質(zhì)、離子濃度、有機相粘度、萃取溫度、pH等。溫度越低，有機相粘度越大，離子濃度越高越易產(chǎn)生乳化。本節(jié)首頁退出本章（五）、破乳的常用方法通過改變KD;改變?nèi)軇┗蚧瘜W平衡作用的添加劑;緩衝劑調(diào)節(jié)pH;鹽調(diào)節(jié)離子強度等。本節(jié)首頁退出本章①離心法破乳。2000r／min，2min；②無水硫酸鈉研磨法破乳；③蒸幹法，蒸幹後，再用有機溶劑萃取。不適用揮發(fā)性物質(zhì)的萃取。A、高度乳化（即全部乳化）本節(jié)首頁退出本章B、中度乳化（乳化率達50％）①電解質(zhì)破乳。加入無機鹽，通過提高體系中水相的比重使兩相分層；

破乳率與加入電解質(zhì)的量成正比。②lmol／L的鹽酸；③無水乙醇溶解兩相液滴；④無水硫酸鈉漏斗過濾。本節(jié)首頁退出本章C、輕度乳化（兩相間形成一薄乳化層）①玻璃棒攪動，削弱吸附作用；②靜置一定的時間後，可自然分層。因為乳濁液是液體雜質(zhì)以微小珠滴散佈在液體溶劑中的一種分散體系，是熱力學不穩(wěn)定體系。本節(jié)首頁退出本章三、液-固萃取固體→萃取溶劑→振盪（加熱）→離心/過濾→分離→欲萃取組分進入溶劑。本節(jié)首頁退出本章（一）、萃取過程

溶解和擴散的過程

分子擴散：固體樣品表面/溶劑接解處影響因素：溫度、分子大小和液體介質(zhì)的黏度。對流擴散：遠離固體樣品表面處的擴散影響因素：流動液體的速度和狀態(tài)，液體的黏度、樣品表面的性質(zhì)等。②①

索氏萃取裝置和K-D濃縮器本節(jié)首頁退出本章（二）、萃取裝置四、不同樣品中殘留農(nóng)藥的提取1、水樣2、氣體樣品3、植物和動物樣品4、土壤樣品本節(jié)首頁退出本章五、萃取劑的選擇1、萃取劑的選擇性（極性）2、穩(wěn)定性、毒性3、沸點：40~80℃者為宜

4、萃取劑回收的難易與經(jīng)濟性5、色譜檢測器的回應

本節(jié)首頁退出本章復習思考題復習自測1、什麼叫液-液萃取，其基本原理是什麼？在進行液-液萃取操作時應注意什麼？2、影響液-固萃取的因素有哪些？3、在液-液萃取過程中根據(jù)乳化程度不同各採用什麼方法消除乳化？4、簡述不同樣品中殘留農(nóng)藥的提取方法。本節(jié)首頁退出本章第三章樣品製備

學習指南觀察思考課外閱讀復習自測退出本章演示文稿本章目錄目的要求樣品前處理在色譜分析過程中是一個既耗時又極易引進誤差的步驟，樣品處理的好壞直接影響色譜分析的最終結果，因此，為了提高分析測定效率，改善和優(yōu)化色譜分析樣品製備方法和技術是一個重要問題。通過本章的學習，目的是使學生掌握溶劑萃取、固相萃取、超臨界流體萃取、微波萃取以及衍生化技術等色譜分析用樣品的前處理方法，瞭解有關樣品前處理儀器的一些相關知識。學習要點溶劑萃取技術；蒸餾及精餾技術；固相萃取技術；氣體萃取技術；超臨界流體萃取技術；微波萃取技術；衍生化技術技能要點溶劑萃取技術；蒸餾及精餾技術；固相萃取技術；超臨界流體萃取技術；波萃取技術學習目標學習指南本節(jié)首頁退出本章第三節(jié)固相萃取技術一、固相萃取概念二、固相萃取原理五、HPLC與SPE的比較三、裝置及操作程式

四、溶劑的選擇本節(jié)首頁退出本章六、固相微萃取七、氣體萃?。斂占夹g）

一、固相萃取(SPE)概念本節(jié)首頁退出本章SPE：SolidPhaseExtraction是一種液相色譜分離，利用固體吸附劑將液體樣品中的目標化合物與干擾化合物分離，達到分離和富集目標化合物的目的。慢中等快淋洗液二、固相萃取的模式及原理本節(jié)首頁退出本章反相固相萃取正相固相萃取離子交換固相萃取①陰離子交換②陽離子交換（一）、反相固相萃取本節(jié)首頁退出本章流動相：極性（水溶液）或中等極性固定相：非極性。分離對象：中等到非極性物質(zhì)。本節(jié)首頁退出本章分析物中的CH鍵+矽膠表面官能團→吸附→極性溶液中的有機分析物→保留在SPE。用非極性溶劑解吸吸附在固定相中的目標物質(zhì)。1、反相固相萃取原理本節(jié)首頁退出本章2、常用反相固相萃取柱LC-18、LC-8：標準的單鍵合矽膠ENVI-18、ENVI-8：聚合鍵合類填料ENVI-ChromP：苯乙烯：疏水

ENVI-Carb：含碳

本節(jié)首頁退出本章（二）、正相固相萃取流動相：非極性、中等極性固定相：極性。分析物質(zhì)：極性、中等極性、非極性本節(jié)首頁退出本章1、正相固相萃取原理

保留取決於分析物的極性官能團與吸附劑表面的極性官能團之間的相互作用。用比樣品本身更極性的溶劑洗脫吸附的分析物質(zhì)。本節(jié)首頁退出本章①極性官能團鍵合矽膠

LC-CN，LC-NH2，

LC-Diol②極性吸附物質(zhì)

LC-Si，LC-Florisil，

ENVI-Florisil，LC-Alumina2、常用正相固相萃取柱知識窗流動相①②本節(jié)首頁退出本章（三）、離子交換固相萃取適用於帶有電荷的化合物（水溶液、有機溶液）。原理：靜電吸引，化合物上的帶電荷基團與鍵合矽膠上的帶電荷基團之間的吸引。分為：陰離子交換和陽離子交換。1、陰離子（負電荷）交換本節(jié)首頁退出本章LC-SAX、LC-NH2：脂肪族季銨類鹽+矽膠2、陽離子交換本節(jié)首頁退出本章LC-SCX：磺酸基；LC-WCX：羧酸基團本節(jié)首頁退出本章（四）溶劑極性的影響①目標化合物在極性/非極性溶劑中的溶解度，這主要涉及淋洗液的選擇。②目標化合物有無可能離子化（可用調(diào)節(jié)pH值實現(xiàn)離子化）。本節(jié)首頁退出本章（四）溶劑極性的影響③目標化合物有無可能與吸附劑形成共價鍵。④在吸附劑上吸附點的競爭程度，關係到能否很好分離。三、固相萃取的裝置及操作程式本節(jié)首頁退出本章固相萃取的裝置篩板篩板篩板本節(jié)首頁退出本章1、固相萃取的裝置本節(jié)首頁退出本章1、固相萃取的裝置本節(jié)首頁退出本章2、操作程式（1）、活化吸附劑

萃取之前要用適當?shù)娜軇┝芟葱≈?，以使吸附劑保持濕潤，可以吸附目標化合物或干擾化合物。本節(jié)首頁退出本章2、操作程式（2）、上樣（吸附）樣品倒入活化後的固相萃取小柱，然後利用抽真空，加壓或離心的方法使樣品進入吸附劑。本節(jié)首頁退出本章2、操作程式3、洗滌（去除雜質(zhì)）在樣品進入吸附劑，目標化合物被吸附後，可先用較弱的溶劑將弱保留干擾化合物洗掉。本節(jié)首頁退出本章2、操作程式4、洗脫和收集再用較強的溶劑將目標化合物洗脫下來，加以收集。本節(jié)首頁退出本章活化吸附劑進

樣洗滌洗脫我來說！四、SPE分離機制與溶劑的選擇分離機制典型的弱溶劑（保留條件）典型的強溶劑（洗脫條件）反相SPE緩衝液或低濃度的甲醇或乙腈乙腈、甲醇或溶劑與水的混合物正相SPE正己烷、甲苯等二氯甲烷、甲醇等陽離子交換SPE低離子強度緩衝液(<0.1mol/L)高離子強度緩衝液（＞0.1mol/L)低反離子強度高反離子強度陰性離子交換SPE低離子強度緩衝液（<0.1mol/L)高離子強度緩衝液(>0.1mol/L)本節(jié)首頁退出本章五、HPLC與SPE的比較HPLCSPE硬體（柱子）不銹鋼柱塑膠柱顆粒度(um)540顆粒形狀球型(均勻）球型（不均勻）塔板數(shù)20～25，000＜1001、柱子的比較

柱接頭

螺帽柱管

過濾片型號：C18柱管篩板固定相尖端？N=L/H2、塔板數(shù)的比較本節(jié)首頁退出本章六、固相微萃取

SPME不是將待測物質(zhì)全部分離出來，通過在樣品與固相塗層間的平衡來達到分離。方法：玻璃纖維浸入樣品中→殘留農(nóng)藥→擴散→吸附→平衡→取出玻璃纖維→洗脫→分析。本節(jié)首頁退出本章

固相微萃取裝置本節(jié)首頁退出本章

固相微萃取裝置關鍵：石英纖維上塗吸附劑原則：目標化合物是非極性時選擇非極性塗層；目標化合物是極性時選擇極性塗層。

使用方法本節(jié)首頁退出本章七、氣體萃?。斂占夹g）本節(jié)首頁退出本章七、氣體萃?。斂占夹g）本節(jié)首頁退出本章七、氣體萃?。斂占夹g）取樣品基質(zhì)（液體和固體）上方的氣相部分進行色譜分析。用途：痕量高揮發(fā)性物質(zhì)的分析測定，氣體是揮發(fā)性物質(zhì)的最理想的溶劑。本節(jié)首頁退出本章1、特點①操作簡單②可自動化③可變因素多④靈敏度高：檢出限可達10-12水準。本節(jié)首頁退出本章2、分類靜態(tài)頂空：在一個密閉的容器中，樣品與樣品上方氣體（1/2）達到平衡。動態(tài)頂空：

“連續(xù)氣體萃取”方法，不必兩相達到平衡。經(jīng)捕集濃縮後進行測定。本節(jié)首頁退出本章3、靜態(tài)頂空過程本節(jié)首頁退出本章4、動態(tài)頂空過程捕集阱中捕集濃縮。“烘烤”：載氣的流動方向與熱解吸時的流動方向相反。復習思考題復習自測1、固相萃取概念、原理2、HPLC與SPE的比較3、固相萃取的裝置及操作程式

1、活化吸附劑2、進樣3、洗滌4、洗脫本節(jié)首頁退出本章第三章樣品製備

學習指南觀察思考課外閱讀復習自測退出本章演示文稿本章目錄目的要求樣品前處理在色譜分析過程中是一個既耗時又極易引進誤差的步驟，樣品處理的好壞直接影響色譜分析的最終結果，因此，為了提高分析測定效率，改善和優(yōu)化色譜分析樣品製備方法和技術是一個重要問題。通過本章的學習，目的是使學生掌握溶劑萃取、固相萃取、超臨界流體萃取、微波萃取以及衍生化技術等色譜分析用樣品的前處理方法，瞭解有關樣品前處理儀器的一些相關知識。學習要點溶劑萃取技術；蒸餾、淨化及濃縮技術；固相萃取技術；氣體萃取技術；超臨界流體萃取技術；微波萃取技術；衍生化技術技能要點溶劑萃取技術；蒸餾、淨化及濃縮技術；固相萃取技術；超臨界流體萃取技術；波萃取技術學習目標學習指南本節(jié)首頁退出本章第四節(jié)蒸餾和濃縮技術一、蒸餾和精餾三、濃縮二、淨化本節(jié)首頁退出本章一、蒸餾和精餾本節(jié)首頁退出本章一種材料在不同溫度下的飽和蒸氣壓變化是蒸餾分離的基礎。蒸餾1、（半）揮發(fā)性雜質(zhì)：不揮發(fā)/難揮發(fā)→主體留下2、（半）揮發(fā)主體蒸發(fā)→不揮發(fā)/難揮發(fā)→雜質(zhì)留下。一、蒸餾和精餾本節(jié)首頁退出本章1、簡單蒸餾2、減壓蒸餾3、水蒸汽蒸餾4、精餾（一）、簡單蒸餾本節(jié)首頁退出本章液體樣品→加熱冷凝→回流→回流液冷凝→收集→流出液1、簡單蒸餾要求本節(jié)首頁退出本章①圓底燒瓶②沸點差別＞50℃。③加熱溫度：40~150℃④加熱溫度不能比蒸餾物質(zhì)的沸點高出30℃本節(jié)首頁退出本章2、簡單蒸餾裝置組成：蒸餾燒瓶、溫度計、冷凝器、收集器和加熱裝置等。備註：液體裝入燒瓶後，加熱之前，加入沸石。（二）、減壓蒸餾本節(jié)首頁退出本章沸點：蒸氣壓=外界大氣壓時的溫度。沸點：隨外界壓力的降低而降低。減壓蒸餾：真空泵降低表面壓力（沸點）高沸點：0.13～26.7kPa條件下減壓蒸餾。1、壓力換算本節(jié)首頁退出本章1atmos=1013mBar1Kpa=0.146psi1Psi=68.948mbar1atmos=？Kpa

1-電爐；2-克萊森瓶；3-毛細管；4-螺旋止水夾；5-溫度計；6-細銅絲；7-冷凝器；8-接受瓶；9-接收管；10-轉(zhuǎn)動把；11-壓力計；12-安全瓶；13-三通管閥門；14-接抽氣機2、減壓蒸餾裝置(三）、水蒸汽蒸餾本節(jié)首頁退出本章對象：有機物具備條件：幾乎不溶於水、不會發(fā)生化學變化、在100℃下蒸汽壓有大於1.3kPa。本節(jié)首頁退出本章盛水量為75％液體樣品1/3。燒瓶傾斜45o冷凝管：30o

。

水蒸氣蒸餾裝置被蒸餾的材料根本不會加熱到比蒸汽的溫度還高。二、淨化（純化）本節(jié)首頁退出本章樣品經(jīng)萃取→被測成分→萃取液→含有雜質(zhì)→干擾測定?！腿∫骸m當處理→除去雜質(zhì)→純化。（一）干擾雜質(zhì)的性質(zhì)本節(jié)首頁退出本章1、脂類：脂肪酸、醇→溶於有機溶劑2、色素：溶於極性較強的溶劑3、其他：硫→ECD、FPD

塑膠管→有機溶劑（二）、淨化方法本節(jié)首頁退出本章1、過濾2、柱層析法3、液-液分配法（又稱萃取法）4、吹掃共餾法5、沉澱淨化法6、化學淨化法本節(jié)首頁退出本章1、樣品過濾過濾：樣品中除去顆粒物用0.45μm或

0.22μm濾膜去除干擾物濾膜有機濾膜：白色無機濾膜：綠色2、柱層析法本節(jié)首頁退出本章利用被測物質(zhì)與干擾物質(zhì)在固體吸附劑表面的吸附力不同而達到分離的目的。農(nóng)藥一般先被淋洗出來，達到與雜質(zhì)分離的目的。柱層柱類型本節(jié)首頁退出本章①弗羅裏矽土柱：乙醚/石油醚②氧化鋁柱：乙醚/正己烷③矽膠柱：④活性碳柱：乙腈/苯本節(jié)首頁退出本章3、液-液分配法是利用物質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑中極性不同，將有機污染物從抽提液轉(zhuǎn)移到另一種溶劑中達到分離。①具備以下條件

本節(jié)首頁退出本章⑴對被測物（農(nóng)藥、獸藥、真菌毒素等）有較大的溶解性；⑵對色素、脂肪、蠟質(zhì)等雜質(zhì)有較小的溶解性。②萃取液與提取液本節(jié)首頁退出本章極性較雜的質(zhì)大，用強極性溶劑溶解。如極性較大的氯仿、甲醇等溶劑來萃取石油醚等極性較小的抽提液。本節(jié)首頁退出本章4、沉澱淨化法低溫下，脂肪和蠟質(zhì)形成結晶，從溶解度較高的農(nóng)藥提取物中除去。步驟:丙酮提取→80℃→沉澱→淨化本節(jié)首頁退出本章5、化學淨化法針對動物樣品用強酸、強鹼將樣品基體消解掉。留下農(nóng)藥母體並淨化，應用對象：有機氯農(nóng)藥三、濃縮和富集本節(jié)首頁退出本章目的：使供測定的樣品達到儀器能夠檢測的濃度，或進行溶劑轉(zhuǎn)換。濃縮：通過減少樣品溶液中的溶劑或水分而使組分的濃度升高。富集：利用液-固萃取的方法濃縮某種組分。本節(jié)首頁退出本章1、注意事項（1）、農(nóng)藥損失（2）、樣品污染本節(jié)首頁退出本章2、濃縮和富集方法方法（1）減壓蒸餾：旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（2）氣流吹蒸：空氣或氮氣（3）K-D濃縮器濃縮（4）真空離心濃縮法（1）旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀本節(jié)首頁退出本章包括旋轉(zhuǎn)燒瓶、冷凝器、溶劑接收瓶、真空設備、加熱源等。溶劑可以回收。溶劑分子式常壓條件時沸點密度g/cm340℃下沸騰時壓力mbar）丙酮C3H6O560.790556苯C6H6800.877236甲苯C7H81110.86777氯仿CHCl3621.483474正己烷C6H14690.660335環(huán)己烷C6H12810.779235醋酸C2H4O21181.04944乙醇C2H6O790.789175乙酸乙酯C4H8O2770.900240甲醇CH4O650.791337乙醚C4H10O350.714-水H2O1001.00072（2）氣流吹蒸法本節(jié)首頁退出本章利用空氣或氮氣流將溶劑帶出樣品，一般在加熱條件下進行。用於少量液體的濃縮，蒸汽壓較高的組分易損失。氮吹儀的注意事項本節(jié)首頁退出本章①不能用於燃點低於100℃的物質(zhì)②氮氣、氧氣純度高於99%③不能用於酸、堿物質(zhì)的濃縮④酸性用碳酸氫鈉溶解中和⑤一天一換水浴的水復習思考題復習自測本節(jié)首頁退出本章1、壓力換算2、淨化方法3、濃縮和富集4、氮吹儀的注意事項第三章樣品製備

學習指南觀察思考課外閱讀復習自測退出本章演示文稿本章目錄目的要求樣品前處理在色譜分析過程中是一個既耗時又極易引進誤差的步驟，樣品處理的好壞直接影響色譜分析的最終結果，因此，為了提高分析測定效率，改善和優(yōu)化色譜分析樣品製備方法和技術是一個重要問題。通過本章的學習，目的是使學生掌握溶劑萃取、固相萃取、超臨界流體萃取、微波萃取以及衍生化技術等色譜分析用樣品的前處理方法，瞭解有關樣品前處理儀器的一些相關知識。學習要點溶劑萃取技術；蒸餾及精餾技術；固相萃取技術；氣體萃取技術；超臨界流體萃取技術；微波萃取技術；衍生化技術

技能要點溶劑萃取技術；蒸餾及精餾技術；固相萃取技術；超臨界流體萃取技術；波萃取技術學習目標學習指南本節(jié)首頁退出本章第五節(jié)超臨界萃取技術等一、超臨界萃取技術二、微波萃取技術三、超聲波輔助萃取本節(jié)首頁退出本章四、衍生化技術五、生物大分子的細胞破碎與蛋白質(zhì)的去除一、超臨界萃取技術本節(jié)首頁退出本章臨界溫度：32℃一、超臨界萃取技術

本節(jié)首頁退出本章1、三相點和臨界點本節(jié)首頁退出本章臨界點：液、氣兩相呈平衡狀態(tài)的點。臨界溫度：在臨界點時的溫度。臨界壓力：在臨界點時的壓力。2、超臨界流體

本節(jié)首頁退出本章物體處於其臨界溫度和臨界壓力以上時的狀態(tài)。氣體：粘稠度、表面張力低，溶解能力強，萃取功能高。壓力↑，溶解能力↑。液體：體積小。流體名稱分子式臨界壓力(bar)臨界溫度(℃)臨界密度(g/cm3)二氧化碳CO272.931.20.433水H2O217.6374.20.332氨NH3112.5132.40.235乙烷C2H648.132.20.203氧化二氮N2O71.736.50.4503、超臨界流體的性質(zhì)4、特點本節(jié)首頁退出本章⑴在35～40℃下提?、魄瑴Q的提取方法⑶CO2是一種不活潑的氣體。⑷迴圈使用，降低成本。⑸參數(shù)可以調(diào)節(jié)流動相二、微波萃取本節(jié)首頁退出本章微波金屬水分二、微波萃取本節(jié)首頁退出本章二、微波萃取本節(jié)首頁退出本章1、微波本節(jié)首頁退出本章頻率：300—300000MHz的電磁波。穿透：玻璃、塑膠、陶瓷等絕緣體。當微波作用於水和酸性物質(zhì)時，將被極性分子所吸收，因而物質(zhì)很快被加熱。2、工作原理本節(jié)首頁退出本章吸收微波→細胞內(nèi)部溫度↑，→細胞內(nèi)部壓力超過細胞壁膨脹承受能力→細胞破裂→有效成分自由流出。本節(jié)首頁退出本章3、影響因素㈠萃取溫度的影響㈡萃取溶劑的影響㈢樣品杯：聚四氟乙烯本節(jié)首頁退出本章三、超聲波輔助萃取能量→外部向內(nèi)部→傳遞。超聲波使溶液形成氣泡（空化效應）→爆裂→溫度和壓力↑，→增強化學反應能力。本節(jié)首頁退出本章三、超聲波輔助萃取優(yōu)點：價廉快速，簡便安全，批量處理樣品。四、衍生化技術本節(jié)首頁退出本章化學反應→定量生成→適於分析。1、衍生化的目的本節(jié)首頁退出本章①靈敏度與選擇性②改善色譜分離：揮發(fā)性、降低與色譜材料的相互作用③理化穩(wěn)定性2、分類本節(jié)首頁退出本章柱前衍生化：為了分離柱後衍生化：為了檢測3、氣相色譜的衍生化本節(jié)首頁退出本章（1）矽烷化衍生化方法（2）酯化衍生化方法（3）鹵化衍生化方法（4）酚化衍生化方法方法（1）、矽烷化衍生化方法本節(jié)首頁退出本章利用醇，酚，酸，胺等與矽烷化試劑反應，形成揮發(fā)性的矽烷衍生物R3Si—X+H—R`R3Si—R`+H—X（2）酯化衍生化方法本節(jié)首頁退出本章大多數(shù)有機酸揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性差。在GC分析之前衍生為相應的酯。①甲醇法②重氮甲烷法③三氟乙酸配法①甲醇法本節(jié)首頁退出本章甲醇法有機酸與甲醇在催化劑的存在下加熱，可以發(fā)生酯化反應，生成有機酸的甲酯RCOOH+CH3OH催化劑RCOOCH3+H2O△②重氮甲烷法本節(jié)首頁退出本章與有機酸反應，生成有機酸的甲酯，重氮甲烷不穩(wěn)定，有爆炸性，有毒。RCOOH+CH2N2RCOOCH3+N2（3）、鹵化衍生化方法本節(jié)首頁退出本章引入鹵原子→ECD檢測器→也改善揮發(fā)性和穩(wěn)定性。

鹵素的作用是加成或取代

本節(jié)首頁退出本章4、液相色譜的衍生化1.紫外衍生化反應2．螢光衍生化反應3．電化學衍生化反應本節(jié)首頁退出本章（1）紫外衍生化反應苯甲醯氯+胺、醇、酚→苯甲酸酯類衍生物（２００～３６０ｎｍ）

苯甲醯化反應本節(jié)首頁退出本章（2）螢光衍生化反應在目標化合物上接上能發(fā)出螢光的生色基團，如螢光素。本節(jié)首頁退出本章5、製備衍生物的反應罐瓶五、生物大分子的細胞破碎與蛋白質(zhì)的去除本節(jié)首頁退出本章（一）、生物樣品植物：營養(yǎng)成分、農(nóng)藥殘留等動物：體內(nèi)的藥物及代謝產(chǎn)物、糖類、維生素、氨基酸等微生物：待測物的位置本節(jié)首頁退出本章體液或細胞外：採用萃取方法。也可將干擾組分（如蛋白質(zhì)、DNA、多糖等等）沉澱除去。生物細胞內(nèi)：首先將細胞破碎，再採用萃取或沉澱等方法。本節(jié)首頁退出本章（二）、細胞的破碎目的：就是為了破壞細胞的外殼，使細胞內(nèi)含物有效地釋放出來，獲得有效的提取。本節(jié)首頁退出本章1、細胞的破碎方法①組織較柔軟：勻漿器研磨②組織較韌：鉸碎→勻漿③纖維組織：搗碎器破碎或加砂研磨。④微生物堅韌的細胞壁：用自溶、冷熱交替、加砂研磨、超聲波和加壓處理。1、細胞的破碎方法本節(jié)首頁退出本章2、機械法（機械切力）①高速組織搗碎機：20000r／min。對象：動植物組織②勻漿器：鉸碎組織。對生物大分子破壞較少。③研磨：玻璃砂。本節(jié)首頁退出本章3、物理法（物理作用）①反復凍融法：-15～-20℃。②冷熱交替法：90℃維持數(shù)分鐘，立即置於冰浴中冷卻。③超聲波處理法：用於微生物。④加壓破碎法：加氣壓或水壓，可使90％以上細胞被壓碎。本節(jié)首頁退出本章4、化學及生物化學法（化學試劑或酶）①自溶法：在一定條件（pH、溫度），利用自身的酶系將細胞破壞。②溶菌酶處理：具有專一地破壞細菌細胞壁的功能。本節(jié)首頁退出本章Antifungalactivity例：溶菌酶處理本節(jié)首頁退出本章（三）、蛋白質(zhì)的去除目的：蛋白質(zhì)的存在，常常嚴重干擾分析1、加熱法2、鹽析法3、膜分離法4、高速離心5、有機溶劑沉澱法本節(jié)首頁退出本章1、加熱法欲測組分熱穩(wěn)定性好時採用。加熱到90℃。蛋白沉澱後可用離心或過濾除去，能除去熱變性蛋白。本節(jié)首頁退出本章2、鹽析法原理：利用不同蛋白質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度不同程度的降低來沉澱除去蛋白質(zhì)。在低鹽濃度下，蛋白質(zhì)溶解度隨著鹽濃度升高而增加，稱為鹽溶作用。當鹽濃度不斷升高時，不同蛋白質(zhì)的溶解度又以不同程度下降，並先後析出沉澱，稱為鹽析作用。本節(jié)首頁退出本章3、膜分離法超濾：靠薄膜兩側(cè)壓力差作為推動力來分離不同分子量的物質(zhì)。將欲測小分子化合物和大分子蛋白質(zhì)分離。本節(jié)首頁退出本章4、高速離心物質(zhì)沉降係數(shù)、品質(zhì)、浮力因數(shù)等不同，用離心力使物質(zhì)分離、濃縮、提純的方法。小中大復習思考題復習自測1、超臨界流體萃取有哪些特點？2、微波萃取和超聲波萃取區(qū)別？3、柱前衍生化與柱後衍生化的目的各是什麼？4、細胞破碎的具體方法5、蛋白質(zhì)的去除方法本節(jié)首頁退出本章第三章樣品製備

學習指南觀察思考課外閱讀復習自測退出本章演示文稿本章目錄一、超臨界萃取技術

本節(jié)首頁退出本章二、微波萃取本節(jié)首頁退出本章微波金屬水分本節(jié)首頁退出本章三、超聲波輔助萃取能量→外部向內(nèi)部→傳遞。超聲波使溶液形成氣泡（空化效應）→爆裂→溫度和壓力↑，→增強化學反應能力。四、衍生化技術本節(jié)首頁退出本章化學反應→定量生成→適於分析。五、生物大分子的細胞破碎與蛋白質(zhì)的去除本節(jié)首頁退出本章（一）、生物樣品植物：營養(yǎng)成分、農(nóng)藥殘留等動物：體內(nèi)的藥物及代謝產(chǎn)物、糖類、維生素、氨基酸等微生物：待測物的位置本節(jié)首頁退出本章體液或細胞外：採用萃取方法。也可將干擾組分（如蛋白質(zhì)、DNA、多糖等等）沉澱除去。生物細胞內(nèi)：首先將細胞破碎，再採用萃取或沉澱等方法。（二）、細胞的破碎本節(jié)首頁退出本章（二）、細胞的破碎目的：就是為了破壞細胞的外殼，使細胞內(nèi)含物有效地釋放出來，獲得有效的提取。本節(jié)首頁退出本章1、細胞的破碎方法本節(jié)首頁退出本章1、細胞的破碎方法1、細胞的破碎方法本節(jié)首頁退出本章2、物理法（物理作用）①反復凍融法：－15～－20℃。②冷熱交替法：90℃（數(shù)分鐘）→冷卻。③超聲波處理法：用於微生物。④加壓破碎法：本節(jié)首頁退出本章3、化學及生物化學法（化學試劑或酶）①自溶法：在一定條件（pH、溫度），利用自身的酶系將細胞破壞。②溶菌酶處理：具有專一地破壞細菌細胞壁的功能。本節(jié)首頁退出本章Antifungalactivity例：溶菌酶處理本節(jié)首頁退出本章（三）、蛋白質(zhì)的去除目的：蛋白質(zhì)的存在，常常嚴重干擾分析1、加熱法2、鹽析法3、膜分離法4、高速離心5、有機溶劑沉澱法本節(jié)首頁退出本章1、加熱法90℃→離心或過濾→除去熱變性蛋白。本節(jié)首頁退出本章2、鹽析法原理：利用不同蛋白質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度不同程度的降低來沉澱除去蛋白質(zhì)。鹽濃度蛋白質(zhì)溶解度鹽溶作用鹽析作用本節(jié)首頁退出本章3、膜分離法超濾：靠薄膜兩側(cè)壓力差分離小分子化合物大分子蛋白質(zhì)本節(jié)首頁退出本章4、高速離心靠物質(zhì)沉降係數(shù)、品質(zhì)、浮力因數(shù)等不同進行分離小中大六、淨化（純化）本節(jié)首頁退出本章樣品經(jīng)萃取→被測成分→萃取液→含有雜質(zhì)→干擾測定?！腿∫骸m當處理→除去雜質(zhì)→純化。（一）干擾雜質(zhì)的性質(zhì)本節(jié)首頁退出本章1、脂類：脂肪酸、醇→溶於有機溶劑2、色素：溶於極性較強的溶劑3、其他：硫→ECD、FPD

塑膠管→有機溶劑（二）、淨化方法本節(jié)首頁退出本章本節(jié)首頁退出本章1、樣品過濾過濾：除去顆粒物用0.45或

0.22μm濾膜濾膜有機濾膜：白色、黃色無機濾膜：綠色、藍色2、柱層析法本節(jié)首頁退出本章柱層柱類型本節(jié)首頁退出本章①弗羅裏矽土柱：乙醚/石油醚②氧化鋁柱：乙醚/正己烷③矽膠柱：④活性碳柱：乙腈/苯本節(jié)首頁退出本章3、液-液分配法①具備以下條件

本節(jié)首頁退出本章⑴對被測物（農(nóng)藥、獸藥、真菌毒素等）有較大的溶解性；⑵對色素、脂肪、蠟質(zhì)等雜質(zhì)有較小的溶解性。②萃取液與提取液本節(jié)首頁退出本章極性較大的雜質(zhì)，用強極性溶劑溶解。如極性較大的氯仿、甲醇等溶劑來萃取石油醚等極性較小的抽提液。本節(jié)首頁退出本章4、沉澱淨化法低溫下，脂肪和蠟質(zhì)形成結晶。步驟:丙酮提取→80℃→沉澱→淨化本節(jié)首頁退出本章5、化學淨化法針對動物樣品用強酸、強鹼將樣品基體消解掉。留下農(nóng)藥母體並淨化，應用對象：有機氯農(nóng)藥三、濃縮和富集本節(jié)首頁退出本章目的：使供測定的樣品達到儀器能夠檢測的濃度，或進行溶劑轉(zhuǎn)換。濃縮：通過減少樣品溶液中的溶劑或水分而使組分的濃度升高。富集：利用液-固萃取的方法濃縮某種組分。本節(jié)首頁退出本章1、注意事項（1）、農(nóng)藥損失（2）、樣品污染本節(jié)首頁退出本章2、濃縮和富集方法方法（1）減壓蒸餾：旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（2）氣流吹蒸：空氣或氮氣（3）K-D濃縮器濃縮（4）真空離心濃縮法（1）旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀本節(jié)首頁退出本章旋轉(zhuǎn)燒瓶冷凝器溶劑接收瓶真空設備加熱源溶劑分子式常壓條件時沸點密度g/cm340℃下沸騰時壓力mbar）丙酮C3H6O560.790556苯C6H6800.877236甲苯C7H81110.86777氯仿CHCl3621.483474正己烷C6H14690.660335環(huán)己烷C6H12810.779235醋酸C2H4O21181.04944乙醇C2H6O790.789175乙酸乙酯C4H8O2770.900240甲醇CH4O650.791337乙醚C4H10O350.714-水H2O1001.00072（2）氣流吹蒸法本節(jié)首頁退出本章空氣、氮氣、濃縮、蒸汽壓氮吹儀的注意事項本節(jié)首頁退出本章①不能用於燃點低於100℃的物質(zhì)②氮氣、氧氣純度高於99%③不能用於酸、堿物質(zhì)的濃縮④酸性用碳酸氫鈉溶解中和⑤一天一換水浴的水1、淨化方法2、濃縮和富集3、氮吹儀的注意事項4、細胞破碎的具體方法5、蛋白質(zhì)的去除方法復習思考題復習自測本節(jié)首頁退出本章第四章農(nóng)藥殘留分析的品質(zhì)控制

學習指南觀察思考課外閱讀復習自測退出本章演示文稿本章目錄目的要求農(nóng)藥殘留分析品質(zhì)控制的目的是使分析結果達到預定的標準和精確程度。為了達到這一預定目的應採取的措施和工作步驟都是事先規(guī)劃好了的。通過一系列的規(guī)約加以確定，並要求有關分析人員按照規(guī)約操作，由此使分析過程處於受檢狀態(tài)。學習要點農(nóng)藥殘留分析實驗室的基礎條件；農(nóng)藥標準物質(zhì)；農(nóng)藥殘留分析重要環(huán)節(jié)的品質(zhì)控制技能要點各種規(guī)格的試劑的淨化處理學習目標學習指南本節(jié)首頁退出本章第四章農(nóng)藥殘留分析的

品質(zhì)控制

第一節(jié)實驗室的基礎條件第二節(jié)農(nóng)藥標準物質(zhì)第三節(jié)殘留分析方法的可靠性的確認第四節(jié)農(nóng)殘分析品質(zhì)控制第五節(jié)分析結果的表達和數(shù)據(jù)處理本節(jié)首頁退出本章第一節(jié)實驗室的基礎條件本節(jié)首頁退出本章一、試劑要求本節(jié)首頁退出本章（一）、純水製備蒸餾水：水與雜質(zhì)的沸點不同，難免有痕量的金屬離子。去離子水：交換樹脂獲得的純水稱離子交換或。本節(jié)首頁退出本章各種水的比較特純水＞1.8x10799.99999水的種類電阻率Ω·cm用途普通純水5x105，常量分析優(yōu)質(zhì)純水＞1x106AA本節(jié)首頁退出本章（二）、試劑特級光（色）譜純S.P白色級別名稱代號標志一級優(yōu)級純GuarantteReagent綠色二級分析純AnalysisReagent紅色三級化學純ChemicalReagent藍色本節(jié)首頁退出本章1、試劑的鑒別圖片本節(jié)首頁退出本章2、試劑的淨化時間(minors)回應信號(mv)要求：濃縮進樣5ul，雜峰高度不應超過1mm。本節(jié)首頁退出本章（1）、氧化鋁（SPE用）550℃→4h130℃→5h本節(jié)首頁退出本章（2）、活性碳活性碳→農(nóng)鹽酸→1h（加熱煮沸）→中性→烘乾。600℃→2h105℃→4h本節(jié)首頁退出本章（3）、石油醚沸程：60~90℃密度：0.65淨化方法：①吸附→蒸餾②回流→蒸餾③分液（漏斗）本節(jié)首頁退出本章（4）、丙酮沸點：55~57℃密度：0.78淨化方法：脫水→棕色瓶本節(jié)首頁退出本章（5）、乙腈沸點：81.6℃密度：0.78惰性液體淨化方法：無水碳酸鈉→高錳酸鉀→蒸餾本節(jié)首頁退出本章二、環(huán)境條件本節(jié)首頁退出本章三、人員要求①學歷②專業(yè)知識背景（background）③敬業(yè)能力④操作能力⑤勤快、不恥下問本節(jié)首頁退出本章四、管理制度①樣品管理②試劑管理③儀器管理④數(shù)據(jù)管理⑤檢驗報告管理本節(jié)首頁退出本章第二節(jié)農(nóng)藥標準物質(zhì)StandardsampleStandardmaterialStandardreferencematerialCertifiedreferencematerial本節(jié)首頁退出本章一、分級一級：均勻性、穩(wěn)定性、朔源性二級：滿足一般測量需要（日常）共同點：有證標準物質(zhì)本節(jié)首頁退出本章一、分級農(nóng)藥純品：反映化合物特性的高純度物質(zhì)。與標準物質(zhì)的關係：農(nóng)藥標準物質(zhì)的原材料。本節(jié)首頁退出本章二、基本要求①含量②物力常數(shù)③溶液④GC/HPLC鑒定本節(jié)首頁退出本章三、標簽名稱：BHC中文名：六六六用途：殺蟲劑別名：Hexakor分子量：288分子式：本節(jié)首頁退出本章第三節(jié)分析方法的可靠性的確認選擇檢測標準的原則國家標準地方標準行業(yè)標準企業(yè)標準本節(jié)首頁退出本章一、方法的靈敏度靈敏度：單位濃度（品質(zhì)）/相應量最小檢出量：3×空白的背景信號最低測定濃度：10×空白的背景信號未檢出：＜LOD本節(jié)首頁退出本章準確度：測定值與真值（假定）之間符合程度的度量二、方法的準確度本節(jié)首頁退出本章

回收率實驗準確度評價方法100801ug/g？本節(jié)首頁退出本章精密度：測定值之間的一致程度三、方法的精密度平行性重複性再現(xiàn)性準確度和精密度1.準確度和精密度——分析結果的衡量指標。

(

1)準確度──分析結果與真實值的接近程度準確度的高低用誤差的大小來衡量；誤差一般用絕對誤差和相對誤差來表示。(2)精密度──幾次平衡測定結果相互接近程度精密度的高低用偏差來衡量，偏差是指個別測定值與平均值之間的差值。(3)兩者的關係精密度是保證準確度的先決條件；精密度高不一定準確度高；兩者的差別主要是由於系統(tǒng)誤差的存在。本節(jié)首頁退出本章第四節(jié)農(nóng)殘分析品質(zhì)控制1、接受日期和有效日期2、污染和干擾3、前處理過程中的損失4、回收率測定和校準本節(jié)首頁退出本章第五節(jié)

結果的表達和數(shù)據(jù)處理π=3.1415926…….？本節(jié)首頁退出本章1、結果的記錄和取捨(1)有效數(shù)據(jù)(2)有效數(shù)據(jù)運用法則

①記錄測量數(shù)字時：②有效數(shù)位確定後：③當被捨棄的第一位等於5時：④當?shù)谝晃挥行?shù)字≥時⑤表示測定結果的精確度時：本節(jié)首頁退出本章2、真值和平均值①算數(shù)平均值②均方根平均值③幾何平均值④中位值⑤加權平均值本節(jié)首頁退出本章3、異常數(shù)據(jù)的取捨①4σ法

|可疑值–不包括可疑值在內(nèi)的平均值|≥4σ②2.5σ法

|可疑值–不包括可疑值在內(nèi)的平均值|≥2.5σ③Q檢驗法本節(jié)首頁退出本章4、測定結果的整理①一般處理②可靠性區(qū)間的計算③界值判斷結果④平均值的實驗本節(jié)首頁退出本章4、測定結果的整理成績百分比復習思考題復習自測1、如何理解和區(qū)別農(nóng)藥標準物質(zhì)和農(nóng)藥純品？2、簡述農(nóng)藥標準物質(zhì)在農(nóng)藥殘留測定中的作用。3、農(nóng)藥標準物質(zhì)如何分級和定值的？4、常用化學試劑的級別，標籤的顏色如何？哪些在農(nóng)藥殘留分析中使用？5、簡述農(nóng)藥殘留分析常用試劑的淨化及處理方法。6、農(nóng)藥殘留分析方法的可靠性如何衡量？本節(jié)首頁退出本章第五章農(nóng)藥殘留

測定方法學習指南觀察思考課外復習自測退出本章演示文稿本章目錄目的要求：掌握GC/HPLC中各種參數(shù)的設置方法，如色譜柱、柱溫、進樣方式以及檢測器的選擇等。學習要點

一般掌握：

GC/HPLC的結構；進樣系統(tǒng)；儀器的維護及故障診斷技術等。

重點掌握：最佳分析條件的設置，常見異常峰的優(yōu)化。學習指南本節(jié)首頁退出本章第五章農(nóng)藥殘留測定方法第一節(jié)氣相色譜儀一、氣路系統(tǒng)二、進樣系統(tǒng)三、分離系統(tǒng)四、檢測系統(tǒng)五、檢測條件的優(yōu)化本節(jié)首頁退出本章第二節(jié)液相色譜儀一、流動相系統(tǒng)二、進樣系統(tǒng)三、分離系統(tǒng)四、檢測系統(tǒng)五、檢測條件的優(yōu)化第一節(jié)氣相色譜儀一、氣路系統(tǒng)（一）、氣源與載氣種類本節(jié)首頁退出本章1、惰性（不與樣品或固定相反應）2、容易得到並易純化3、滿足檢測器要求常用載氣：N2

H2

He

Ar輔助氣：氧氣或空氣（二）、氣體的淨化本節(jié)首頁退出本章1、氣體不純的不良影響①樣品失真或消失②柱失效③對固定液保留特性的影響④對檢測器的影響（二）、氣體的淨化本節(jié)首頁退出本章氧氣捕集器：氧氣破壞色譜柱，降低ECD

檢測器的功能。（三）、氣體管路本節(jié)首頁退出本章①專用銅管或不銹鋼管。②塑膠管會滲透O2和其他污染物。③管子使用前先用溶劑沖洗，載氣吹幹。④每用完3瓶氣，應更換篩檢程式。⑤每隔一定時間，對所有外加接頭檢漏。二、樣品的進樣系統(tǒng)與進樣技術本節(jié)首頁退出本章作用:使樣品以一種可重複可再現(xiàn)的方式契入到氣相色譜柱中。被引入的樣品應具有代表性，除特殊要求外樣品引入過程不應發(fā)生任何化學反應。（一）、進樣方式本節(jié)首頁退出本章針進樣：手動進樣；自動進樣閥進樣：氣體進樣閥；液體進樣閥其他進樣裝置：吹掃捕集；頂空1、針進樣應使樣品象一個塞子一樣地被進樣。為了得到重複性好的，尖銳的峰形，進樣動作應迅速且穩(wěn)定。2、針進樣技術比較3、進樣墊顏色耐高溫性使用次數(shù)灰色

耐高溫，低流失

400℃/250次白色

耐高溫，低流失350℃/250次綠色

耐高溫、耐用

350℃/150次紅色

耐高溫，易老化400℃/150次注：以島津公司產(chǎn)品為例知識窗色譜柱進樣墊通用技術使用輕觸點--不能過緊。保持清潔。避免污染--指紋、油脂等。檢查使用的密封墊是否有裂紋、碎片、或其他的損壞。知識窗進樣墊相關問題應在推薦溫度範圍內(nèi)避免：洩漏、降解、樣品丟失、出現(xiàn)鬼峰減少或者避免鬼峰的出現(xiàn)：進樣口帶有隔墊吹掃功能。應使用耐高溫的相應進樣墊。作用：可重複，可再現(xiàn)的方式契入色譜柱中。被引入的樣品應具有代表性，除特殊要求外樣品引入過程不應發(fā)生任何化學反應。本節(jié)首頁退出本章（二）、進樣口類型進樣口類型氣路控制本節(jié)首頁退出本章分流/不分流進樣口EPC與non-EPC隔墊吹掃填充進樣口EPC與non-EPC冷柱頭進樣口只有EPC程式升溫汽化進樣口只有EPC揮發(fā)進樣口只有EPC分流/不分流進樣口

本節(jié)首頁退出本章分流方式是特為毛細管柱GC設計的樣品引入方式1、分流進樣①進樣前

防止樣品歧視現(xiàn)象②進樣時刻

③樣品與載氣混合為了保證分流比的概念真實有效，樣品（溶劑+分析物）必須與載氣充分混合，形成一個均勻的混合物。這一混合物的一小部分將會從進樣口的底部進入色譜柱，而大部分的混合物則會從分流出口流出。④襯管超載如果進樣量過大，溶劑會膨脹為很大的體積，致使進樣口襯管超載。其結果必將導致樣品從吹掃出口流出而造成樣品損失，同時也會造成載氣輸入管路的污染。知識窗本節(jié)首頁退出本章1、襯管超載的後果其結果必將導致樣品從吹掃出口流出而造成樣品損失，同時也會造成載氣輸入管路的污染。知識窗本節(jié)首頁退出本章2、溶劑膨脹計算公式微升=22400×A×B×CA=密度/分子量B=15/(15+柱前壓psi）C=（進樣口溫度+273）/273知識窗本節(jié)首頁退出本章3、溶劑膨脹計算例子知識窗4、常用溶劑的膨脹率進樣口溫度為250℃，柱前壓為13psi本節(jié)首頁退出本章⑤分流比計算分流出口流量=？⑥總流量本節(jié)首頁退出本章隔墊：1～3ml或3～

6ml分流流量：分流流量/柱流量如100：1或50：1柱流量：受柱前壓控制，流量與壓力在一定範圍內(nèi)呈正相關關係⑦如何實現(xiàn)分流2、不分流進樣系統(tǒng)

①進樣前

進樣閥關閉關閉分流閥使氣流不能從襯管外逃出。由於柱前壓並未改變，所以柱流量將會保持恒定。原來吹過襯管的氣流現(xiàn)在必為通過隔墊吹掃管路流出。②

進樣時刻

分流閥關閉樣品會擴展到進樣口的底部。使用250uL的襯管以及柱流量，很容易使襯管超載，特別是當進樣體積大於1uL且使用非烴類溶劑時。③

樣品的汽化

分流閥關閉由於樣品組分與溶劑的擴散率的不同（更小體積/低分子量），組分在襯管中分層。與載氣混合成為低臨界狀態(tài)，這是因為保存時間長且?guī)缀跛械臉悠范冀?jīng)過襯管而進入到色譜柱中了。通過使用某一種“捕集”技術可將樣品聚集在柱頭。④

樣品的注入

分流閥關閉到此被分析物轉(zhuǎn)移入柱已經(jīng)完成。仍有一些溶劑留在襯管之中。如果依然保持分流閥關閉，則餘下的所有溶劑都轉(zhuǎn)移入柱子中，那麼溶劑色譜峰將會嚴重拖尾。④

樣品的注入

分流閥關閉將分流閥從關閉位置轉(zhuǎn)為開啟狀態(tài)以將留在襯管中的剩餘溶劑吹出襯管。這個過程將會有效地減小溶劑峰的拖尾，以保證先流出峰的定量更加真實可信。⑤

樣品注完

分流閥開啟襯管的體積太小以及通過襯管的流量太低可能會導致使用非烴類溶劑的樣品進樣量過大。對於不分流進樣來說，進樣量過大會造成定量結果的準確性與精確性雙方面的明顯誤差。⑥

樣品超載

分流閥關閉⑦溶劑效應：設定柱溫的初始溫度低於溶劑的沸點，致使溶劑在柱關上冷凝，相當於膨脹了固定相並捕集分析物。本節(jié)首頁退出本章樣品進入色譜柱後，減少分流出口的載氣流量以節(jié)約載氣。柱前壓和柱流速仍保持不變，只有分流出口的流量減少?？捎渺斗至骱筒环至鞣绞?。節(jié)省載氣啟動的時間應選在樣品進入色譜柱後。（三）、節(jié)省載氣裝置知識窗本節(jié)首頁退出本章尾吹毛細管柱內(nèi)流動相流速低，流量小，組分會因柱後死體積突然增加而發(fā)生嚴重的縱向擴散，從而導致峰形展寬，有可能使在柱中以分離的組分在柱後再次重疊，影響分離。也可在使用FID時受阻於引入的H2壓力而出柱困難。增加尾吹氣將改善這一狀況。（四）、分流平板此部件須非常清潔1、在溶劑中超聲處理-常用樣品或清洗劑2、使用金屬紗布擦磨清潔-高光潔度可提高其功效-不要幹擦3、用溶劑清洗

-避開氯化溶劑

-先惰性洗滌-甲苯

-再用醇類清洗-甲醇（五）、毛細管襯管未去活性的襯管的清洗1)移去玻璃毛2)在溶劑或酸液中超聲振盪3)清洗且乾燥4)更換去活性的玻璃毛5)去活性-矽烷化6)乾燥7)精心維護襯管的內(nèi)表面避免劃傷

毛細管襯管結構圖@此部件須非常清潔本節(jié)首頁退出本章（六）、進樣口系統(tǒng)中注意點1、進樣口常見問題非代表性樣品、堵塞、溫度不正確、污染、洩漏2、操作條件的選擇1)汽化室溫度的選擇2)進樣墊的材料與處理3)進樣量本節(jié)首頁退出本章3、進樣口的日常維護更換隔墊清洗或更換進樣針進行洩漏測試和維修清洗或更換襯管/內(nèi)插件清洗或更換分流平板和金屬墊片(SSI)本節(jié)首頁退出本章4、自動進樣器日常維護

清洗/更換進樣針清洗掉針引導器和附近表面上的灰塵和污染物確保樣品盤安裝螺絲固定好了保證所有的電纜線都連接良好復習自測1、進樣墊類型與特點2、分流/不分流進樣口工作原理3、溶劑膨脹計算公式4、總流量包含哪些？本節(jié)首頁退出本章第五章農(nóng)藥殘留

測定方法學習指南觀察思考課外閱讀復習自測退出本章演示文稿本章目錄三、分離系統(tǒng)分離的過程示意圖（一）、色譜柱的類型本節(jié)首頁退出本章1、色譜柱類型的比較本節(jié)首頁退出本章a、柱效和柱長是10倍b、理論塔板數(shù)是填充柱的100倍c、柱負荷量低於填充柱①柱的性能本節(jié)首頁退出本章②工作壓力本節(jié)首頁退出本章③常用的柱選擇方法a、欲分離樣品b、首先試用手邊現(xiàn)有的柱子c、向同事請教d、從文獻中查到相近應用的方法e、如果不是太清楚，先使用一個非極性柱,如HP-1或HP-52、柱分離指標柱效:

色譜柱形成尖銳峰的能力分離度:

色譜柱將兩個峰彼此分開的能力（1）、如何提高柱效本節(jié)首頁退出本章①使用內(nèi)徑更小的柱子。②減小進樣量。③選用更長的柱子。④使用程式升溫。（2）分離度計算及提高方法本節(jié)首頁退出本章3、色譜柱概論①柱子切勿劃傷。高溫加熱→從劃痕處斷裂。②長期不用→堵上柱子兩端→不被污染。*當使用毛細管柱時，一定注意保護眼睛。

（1）、保存

本節(jié)首頁退出本章（2）、色譜柱老化目的：預先老化以除去柱中殘留的溶劑。①老化對象-新買的柱子。-長期沒用過的柱子。-操作條件改變時。-分析對象改變時。本節(jié)首頁退出本章②毛細管柱老化原則-溫度足夠高以去除不揮發(fā)物質(zhì)。-溫度足夠低以保護柱子，防止柱流失。-老化溫度越低老化時間應越長。本節(jié)首頁退出本章③毛細管柱老化方法a、柱只接進樣口，不接檢測器，把檢測器口堵住,檢測器不在工作狀態(tài)。b、並確證有載氣通過柱子。c、設定老化溫度、流量、時間。d、可設爐溫程式升溫，以使較好老化。e、需幾小時或幾十小時，不要通H2氣。本節(jié)首頁退出本章④危害色譜柱的因素a、不分流進樣方式使柱前1-2米的固定相移位。b、載氣或樣品品質(zhì)太差。c、固定相容易被載氣中的氧氣所氧化。d、分析高水