氣相色譜法完整版本

氣相色譜法1基本原理色譜法是利用混合物不同組分在固定相和流動相中分配系數(shù)(或吸附系數(shù)、滲透性等)的差異，使不同組分在作相對運(yùn)動的兩相中進(jìn)行反復(fù)分配，實(shí)現(xiàn)分離的分析方法。氣——固色譜中被分離物隨著載氣的流動，被測組分在吸附劑表面進(jìn)行吸附，脫附，再吸附，再脫附……這樣反復(fù)的過程不同物質(zhì)在色譜柱中的保留時(shí)間不同而達(dá)到分離的目的。

氣——液色譜中被分離物隨著載氣的流動，被測組分在固定液中進(jìn)行溶解，揮發(fā)，再溶解，再揮發(fā)……的過程，使不同物質(zhì)在色譜柱中的保留時(shí)間不同而達(dá)到分離的目的。2氣相色譜儀的組成氣相色譜儀由氣路系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、柱分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)組成。

H2,N2或Ar氣路系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)檢測系統(tǒng)分離系統(tǒng)溫控系統(tǒng)2.1儀器及性能要求

儀器應(yīng)按國家技術(shù)監(jiān)督局氣相色譜儀檢定規(guī)程（JJG700-1999）的要求作定期檢定。2.2氣路系統(tǒng)載氣有氮，氦，氫等，常用氦或氮作載氣。氮?dú)饧兌茸詈檬褂?9.9%的高純氮。但填充柱以火焰離子化檢測器也可以采用99.9%純氮。實(shí)際工作中要在氣源與儀器之間連接氣體凈化裝置。2.2.1氣源氣體中的雜質(zhì)主要是一些永久氣體、低分子有機(jī)化合物和水蒸汽，一般采用裝有分子篩的過濾器以吸附有機(jī)雜質(zhì)，采用變色硅膠除去水蒸氣。要定期更換凈化裝置中的填料，分子篩可以重新活化后再使用?；罨椒ㄊ菍⒎肿雍Y從過濾裝置中取出，置于坩鍋中，在馬福爐內(nèi)加熱到400-600℃，活化4-6小時(shí)。硅膠變紅時(shí)也要進(jìn)行活化，方法是在烘箱中，140℃左右加熱2小時(shí)即可。大部分

GC儀器本身帶有氣體凈化器，但也要注意定期更換填料。即使這樣的儀器，也應(yīng)該在氣源和儀器之間附加一個(gè)凈化裝置。目前氮?dú)夂蜌錃鈿庠粗饕懈邏轰撈亢蜌怏w發(fā)生器兩種，高壓鋼瓶的氣體純度高，質(zhì)量好，但是更換不方便。氣體發(fā)生器使用方便，但應(yīng)注意氣體的純度。另外，空氣壓縮機(jī)是以實(shí)驗(yàn)室空氣為氣體來源的，且一些空氣壓縮機(jī)可能將油帶入氣體，故有機(jī)雜質(zhì)含量可能會高一些，要注意經(jīng)常更換凈化裝置。2.2.2氣路連接、氣流指示和調(diào)節(jié)如果采用高壓鋼瓶，在安裝氣瓶減壓閥時(shí)，應(yīng)先將瓶口聯(lián)結(jié)處的灰塵擦干凈，將瓶口向外，旋轉(zhuǎn)閥門開關(guān)放氣數(shù)次，吹除灰塵，將減壓閥用扳手?jǐn)Q緊，再用聯(lián)接管將減壓閥出口聯(lián)至氣相色譜儀。用檢漏液（表面活性劑溶液）檢查連接處氣密性。2.2.3氣流的測量與氣體的流速氣體的流速是以單位時(shí)間內(nèi)通過色譜柱或檢測器的氣體體積大小來表示（ml/min）?，F(xiàn)代儀器有電子流量檢測器和電子壓力控制器，可編程控制柱頭壓力和載氣流量。2.3進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)包括樣品引入裝置（如手動微量注射器，自動進(jìn)樣器以及頂空進(jìn)樣器）和氣化室（進(jìn)樣口）。進(jìn)樣量的大小、進(jìn)樣時(shí)間的長短，直接影響到柱的分離和最終定量結(jié)果。臨沂市藥品檢驗(yàn)所2.3.1進(jìn)樣口和進(jìn)樣模式2.3.3.1

填充柱進(jìn)樣口是目前最為常用、也是最簡單、最容易操作的GC進(jìn)樣口，該進(jìn)樣口的作用就是提供一個(gè)樣品氣化室，所有氣化的樣品都被載氣帶入色譜柱進(jìn)行分離。進(jìn)樣口可以配置、也可以不配置隔墊吹掃裝置。這種進(jìn)樣口可連接玻璃或不銹鋼填充柱，還可連接大口徑毛細(xì)管柱作直接進(jìn)樣分析。2.3.1.2分流/不分流進(jìn)樣口是最常用的毛細(xì)管柱進(jìn)樣口。它既可用作分流進(jìn)樣，也可用作不分流進(jìn)樣。與填充柱進(jìn)樣口相比，該進(jìn)樣口有分流氣出口及其控制裝置，除了進(jìn)樣口前有一個(gè)控制閥外，在分流氣路上還有一個(gè)柱前壓調(diào)節(jié)閥，而且二者使用的襯管結(jié)構(gòu)不同。分流進(jìn)樣適合于大部分可揮發(fā)樣品，能夠有效的防止柱污染。分流進(jìn)樣的適用范圍寬，靈活性很大，分流比可調(diào)范圍廣，為毛細(xì)管GC的首選進(jìn)樣方式。分流進(jìn)樣的進(jìn)樣量一般不超過2μl，最好控制在0.5μl以下，常用的分流比為10∶1-200∶1，樣品濃度大或進(jìn)樣量大時(shí)，分流比可相應(yīng)增大，反之則減小。采用分流進(jìn)樣時(shí)要注意分流歧視現(xiàn)象（是指在一定分流比條件下，不同樣品組分的實(shí)際分流比是不同的，這就會造成進(jìn)入色譜柱的樣品組成不同于原來的樣品組成，從而影響定量分析的準(zhǔn)確度）。不均勻氣化是分流歧視的主要原因之一，另外一個(gè)原因是不同樣品組分在載氣中的擴(kuò)散速度不同，所以，盡量使樣品快速氣化是消除分流歧視的重要措施，包括采用較高的氣化溫度，也包括使用合適的襯管。一般來說：分流比越大，越有可能造成分流歧視。具體分析中要消除分流歧視，還應(yīng)注意色譜柱的初始溫度盡可能的高一些，另外，在安裝色譜柱時(shí)要保證柱入口端超過了分流點(diǎn)，二是要保證柱入口端處于氣化室襯管的中央。通常在實(shí)際工作中，只是在分流進(jìn)樣不能滿足分析要求時(shí)（主要是靈敏度要求），才考慮使用不分流進(jìn)樣。2.3.3.1冷柱頭進(jìn)樣冷柱頭進(jìn)樣是將樣品直接注入處于室溫或更低溫度下的色譜柱上，然后再逐步升高溫度使樣品組分依次氣化通過色譜柱進(jìn)行分離，這樣就可以避免樣品的熱分解及氣化室死體積對樣品的稀釋與擴(kuò)散作用，適用于分析熱不穩(wěn)定化合物。此操作需要特殊的注射器，而且容易有大量的不揮發(fā)樣品結(jié)在色譜柱進(jìn)口端造成色譜柱的污染。2.3.1.4程序升溫氣化進(jìn)樣

程序升溫氣化（PTV）進(jìn)樣是將液體或氣體樣品注射入處于低溫的進(jìn)樣口襯管內(nèi)，然后按設(shè)定程序升高進(jìn)樣口溫度。此進(jìn)樣方式不需要特殊注射器，可有多種操作模式，即分流模式、不分流模式和溶劑消除模式。PTV進(jìn)樣有以下優(yōu)點(diǎn)：1消除了注射器針頭的樣品歧視，這與冷柱上進(jìn)樣類似；2可以實(shí)現(xiàn)大體積進(jìn)樣（LVI）3抑制了進(jìn)樣口歧視（即分流歧視）4可除去溶劑和低沸點(diǎn)組分，實(shí)現(xiàn)樣品濃縮；不揮發(fā)物質(zhì)可滯留在襯管中，保護(hù)了色譜柱。5進(jìn)樣適合于大部分樣品的分析，特別是開發(fā)方法或篩選樣品時(shí)應(yīng)首先考慮這種進(jìn)樣方式。2.3.1.5大體積進(jìn)樣采用比常規(guī)，大幾十到幾百倍的進(jìn)樣量（5~500μl），能夠有效成倍的提高分析靈敏度，同時(shí)可以降低對樣品處理的要求。在冷柱上進(jìn)樣口和程序化升溫進(jìn)樣口（PTV）可以實(shí)現(xiàn)大體積進(jìn)樣。通常，采用PTV進(jìn)樣口進(jìn)行大體積進(jìn)樣，分析過程中要注意經(jīng)常檢查隔墊并及時(shí)更換。2.3.1.6頂空進(jìn)樣技術(shù)氣相色譜頂空進(jìn)樣技術(shù)廣泛應(yīng)用于藥物中的殘留有機(jī)溶劑分析。頂空進(jìn)樣是通過樣品基質(zhì)上方的氣體成分來測定這些組分在原樣品中的含量，是一種簡單而有效的樣品凈化方法。根據(jù)取樣和進(jìn)樣方式的不同，頂空進(jìn)樣分為靜態(tài)和動態(tài)。靜態(tài)頂空就是將樣品溶液密封在一個(gè)容器（平衡瓶）中，在一定溫度下（平衡溫度）加熱一段時(shí)間（平衡時(shí)間）使氣液兩相達(dá)到平衡，然后取氣相部分進(jìn)入GC分析，藥物中的殘留有機(jī)溶劑分析通常采用這種頂空進(jìn)樣方法。動態(tài)頂空進(jìn)樣是利用流動的氣體（通常采用氦氣）將樣品中的揮發(fā)性成分“吹掃”出來，再用一個(gè)捕集器將吹掃出來的物質(zhì)吸附下來，然后經(jīng)熱解吸附將樣品送入GC進(jìn)行分析，這種技術(shù)通常叫做吹掃一捕集（purgetrap）進(jìn)樣技術(shù)，在環(huán)境分析中最為常用。在進(jìn)行藥物中殘留有機(jī)溶劑檢查時(shí)，應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的沸點(diǎn)選擇平衡溫度。對沸點(diǎn)較高的殘留溶劑，通常選擇較高的平衡溫度；但此時(shí)應(yīng)兼顧供試品的熱分解特性，盡量避免供試品產(chǎn)生的揮發(fā)性熱分解產(chǎn)物對測定的干擾。平衡時(shí)間一般不應(yīng)少于30分鐘，以保證供試品溶液的氣一液兩相有足夠的時(shí)間達(dá)到平衡。平衡的時(shí)間也不宜過長，通常不應(yīng)超過60分鐘，否則可能使頂空瓶的氣密性變差導(dǎo)致定量準(zhǔn)確性的降低。對照品溶液與供試品溶液必須使用相同的頂空進(jìn)樣條件。頂空樣品瓶最好只用一次，若要反復(fù)使用，建議的清洗方法是：先用洗滌劑清洗（太臟的瓶子可用洗液浸泡），然后用蒸餾水洗，再用色譜純甲醇沖洗，置于烘箱中烘干備用。頂空進(jìn)樣分為手動進(jìn)樣和自動進(jìn)樣，由于手動進(jìn)樣的壓力，溫度以及進(jìn)樣量難以控制，導(dǎo)致分析結(jié)果的重現(xiàn)性差，建議采用自動頂空進(jìn)樣器。2.3.1.7熱裂解進(jìn)樣技術(shù)將待測樣品置于裂解裝置內(nèi)，在嚴(yán)格控制的條件下加熱使之迅速裂解成可揮發(fā)的小分子產(chǎn)物，然后將裂解產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到色譜柱直接進(jìn)行分離分析。熱裂解進(jìn)樣技術(shù)通常應(yīng)用于材料和生物大分子分析。2.3.2氣化室襯管容積是影響分析質(zhì)量的重要參數(shù)，基本要求是襯管容積至少要等于樣品中溶劑在設(shè)定溫度、壓力下氣化后的體積。在實(shí)際工作中要注意襯管容積與樣品的匹配性。2.3.3進(jìn)樣密封硅橡膠墊應(yīng)先加熱老化，除去揮發(fā)性物質(zhì)再用，并注意經(jīng)常更換，另外也要注意經(jīng)常更換襯管上端的密封硅橡膠圈。2.4柱箱柱箱溫度的波動會影響色譜分析結(jié)果的重現(xiàn)性，因此要求柱箱控溫精度應(yīng)在1℃，柱箱溫度波動小于±0.1℃。溫度控制分恒溫和程序升溫兩種，前者用于簡單組分分析，后者用于復(fù)雜多組分分析。2.5檢測器

氣相色譜的檢測器有：火焰離子化檢測器（FID）；熱導(dǎo)檢測器（TCD）；電子俘獲檢測器（ECD）；火焰光度檢測器（FPD）；氮磷檢測器（NPD）；光離子化檢測（PID）；紅外光譜檢測器（IRD）和質(zhì)譜檢測器（MSD）等。在藥物分析中火焰離子化檢測器(FID)是最常用的檢測器。2.5.1檢測器操作條件及注意事項(xiàng)

FID檢測器需用5種不同的氣體：載氣、氫氣和空氣，由于毛細(xì)管柱的柱內(nèi)載氣流量太低（常規(guī)柱為1-5ml/min），不能滿足檢測器的最佳操作條件，所以使用毛細(xì)管柱時(shí)要采用輔助氣（尾吹氣），即在色譜柱后增加一路載氣直接進(jìn)入檢測器，就可保證檢測器在高靈敏度狀態(tài)下工作，尾吹氣的另一個(gè)重要作用是消除檢測器死體積的柱外效應(yīng)。一般情況下，氮?dú)猓ㄎ泊禋?載氣）、空氣和氫氣三者的比例接近或等于1:10:1（如：氮?dú)?0-40ml/min，空氣300-400ml/min，氫氣30-40ml/min）時(shí)，F(xiàn)ID的靈敏度最高。2.5.1.1

氣體流速

2.5.1.2檢測器溫度溫度對FID檢測器的靈敏度和噪聲的影響不顯著，為防止檢測器被污染，檢測器溫度設(shè)置應(yīng)不低于色譜柱實(shí)際工作的最高溫度，一般情況下，檢測器的溫度不應(yīng)低于150℃。2.5.2ＴＣＤ操作條件及注意事項(xiàng)檢測器溫度和載氣流速的波動影響穩(wěn)定性，故必須穩(wěn)定。檢測器溫度一般設(shè)定與柱溫相同或高于柱溫。２.５.２.１２.５.２.２載氣種類對ＴＣＤ的靈敏度影響較大。原則上講，載氣與被測物的傳熱系數(shù)之差越大越好，故理想的載氣為氦氣。若不需高靈敏度時(shí)，也可采用氮。氫的熱導(dǎo)系數(shù)大，也可作為分析某些品種的載氣，但必須注意通風(fēng)和安全。在檢測器通電之前，一定要確保載氣已經(jīng)通過了檢測器，否則，熱絲就有可能被燒斷。同時(shí)，關(guān)機(jī)時(shí)一定要先關(guān)檢測器電源，然后關(guān)載氣。任何時(shí)候進(jìn)行有可能切斷通過ＴＣＤ的載氣流量的操作，都要先關(guān)閉檢測器電源。２.５.２.３載氣中含有氧氣時(shí)，會使熱絲壽命縮短，所以，用ＴＣＤ時(shí)載氣必須徹底去除氧。而且不要使用聚四氟乙烯作載氣輸送管，因?yàn)樗鼤B透氧。２.５.２.４２.５.３ＥＣＤ操作條件及注意事項(xiàng)ＥＣＤ是靈敏度最高的氣相色譜檢測器。ＥＣＤ的放射源一般采用６３Ｎｉ，ＥＣＤ的操作溫度一般為２５０～３００℃，通常不應(yīng)低于２５０℃。采用氚為放射源時(shí)，操作溫度不超過１８０℃。２.５.３.１ＥＣＤ可以采用氮?dú)庾鳛檩d氣，也可以采用含５％甲烷的氬氣作為載氣。ＥＣＤ對電負(fù)性成分靈敏度高，故要求載氣純度高，至少要在９９.９９％以上，檢測器的溫度對響應(yīng)值有較大影響，要求檢測器的溫度波動必須精密控制在±（０.１～０.３）℃之間，以保證響應(yīng)值的測量精密度在１％之內(nèi)。２.５.３.２ＥＣＤ要避免與氧氣或濕汽接觸，否則噪聲會明顯增大。因此，載氣和尾吹氣都要求很好地凈化。２.５.３.３因?yàn)椋牛茫亩加蟹派湓?，故檢測器出口一定要用管道接到室外，最好接到通風(fēng)出口。沒有經(jīng)過特殊培訓(xùn)的人，不能自己拆開ＥＣＤ每６個(gè)月要進(jìn)行一次放射性泄漏檢查。２.５.３.４２.６色譜柱色譜分析的好壞主要決定于色譜柱。氣相色譜柱按照色譜柱內(nèi)徑的大小和長度，可分為填充柱和毛細(xì)管柱，前者的內(nèi)徑在２～４ｍｍ，長度為１～１０ｍ左右；后者內(nèi)徑在０．２～０．５ｍｍ，長度一般在２５～１００ｍ。柱形有Ｕ形、螺旋形。２．６．１填充柱用作填充色譜柱管的材料通常有不銹鋼管、玻璃管等。常用有不銹鋼管和玻璃管，不銹鋼管主要優(yōu)點(diǎn)是堅(jiān)固、耐用，但不適用于不穩(wěn)定的化合物，玻璃管無以上缺點(diǎn)，但易破碎。柱長常用２～３ｍ，以２ｍ最為常用。柱徑一般為２～４ｍｍ，細(xì)徑柱的柱效比粗徑柱高。柱形狀有Ｕ型和螺旋型，使用U型柱時(shí)柱效高。填充柱的柱管在使用前應(yīng)該經(jīng)過清洗處理。２．６．１．１柱材、柱長與柱徑氣相色譜柱填料分為三大類：吸附劑類、多孔性高分子微球和涂布固定液的硅藻土類載體（載體也稱擔(dān)體）。吸附劑常用于氣體分析，在此不作敘述?，F(xiàn)將其余兩類作簡要介紹：2.6.2填料2.6.2.1多孔性高分子微球（GDX）它是以苯環(huán)為主鏈的交聯(lián)高分子，常用苯乙烯和二乙烯基苯的共聚物，采用不同的制備條件和原料，可合成具有不同極性的微球。商品不同型號的微球，適用于不同極性的化合物。國際上微球商品名稱有Porapack-P、Q、R、S、T等，其極性按P、Q、R、S、T的順序增加，另有chromosorb等型號。國內(nèi)商品有天津試劑二廠生產(chǎn)的GDX1-5型、上海試劑廠生產(chǎn)的有機(jī)擔(dān)體401-501型等。微球具有交聯(lián)結(jié)構(gòu)，機(jī)械強(qiáng)度好，填充過程中不會破碎，有很寬的溫度使用范圍（78~240℃），可用于分析永久氣體或短鏈極性化合物、醇、酸和胺類等。微球可以直接裝填，但因微球帶有靜電，裝填不易，為此可用丙酮潤濕過的紗布來擦拭填充漏斗，以消除靜電，使填充順利進(jìn)行。2.6.2.2硅藻土載體是將天然硅藻土粉碎，并壓成磚型，在900℃以上煅燒，由于生成氧化鐵而產(chǎn)生紅色。紅色載體表面積大（4m2/g），孔穴密集，孔徑?。?μm），結(jié)構(gòu)緊密，機(jī)械強(qiáng)度好，但表面活性中心多，吸附性較大，適用于非極性固定液，適用于分析非極性或弱極性物質(zhì)，若分析極性物質(zhì)時(shí)會有色譜峰拖尾現(xiàn)象。在藥物分析中較少使用，商品有上海試劑廠生產(chǎn)的201載體，chromosorbP等。2.6.2.2.1紅色載體在天然硅藻土中加入少量碳酸鈉助熔劑，在900℃高溫煅燒后，氧化鐵變成了無色的硅酸鈉鐵絡(luò)合物，使原來淺灰色的天然硅藻土變成白色。白色載體的表面積?。?m2/g），孔徑粗（9μm），結(jié)構(gòu)疏松，機(jī)械強(qiáng)度不如紅色載體。但其表面活性中心顯著減少，吸附性小，適用于極性固定液，可用于分析極性或氫鍵型化合物。藥物分析選用此類擔(dān)體為宜。2.6.2.2.2白色載體此類載體國產(chǎn)有101系列，分為酸洗和硅烷化的白色載體，國際上有chromosorbW等，最好的有：chromosorb750、chromosorbWHP、chromosorbWAW-DMCS、GASChromQ等。常用硅烷化處理的載體。2.6.3固定液對固定液的要求：在操作范圍內(nèi)蒸氣壓低，熱穩(wěn)定性好，選擇性高，即對兩個(gè)沸點(diǎn)相同或相近但屬于不同類型的化合物有盡可能高的分離能力。固定液的種類很多，根據(jù)藥物分析情況，常用的固定液列于表1。

固定液的選擇取決于樣品的組成。一般按“相似相溶”的原則，即組分的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)與固定液相似時(shí)，在固定液中的溶解度最大，因而保留時(shí)間最長；反之，溶解度小，保留時(shí)間短。如烴類化合物最好使用烴類固定液；而極性化合物用極性固定液，如醇類用聚乙二醇等。但選擇原則不是一成不變的。需結(jié)合具體的試驗(yàn)情況綜合考慮。2.7毛細(xì)管柱毛細(xì)管柱由于分離效能高，分析速度快，樣品用量少等特點(diǎn)，自從1958年以來有了很大的發(fā)展，但柱易碎裂，安裝不方便，受到一定的限制，自從1979年出現(xiàn)了彈性石英毛細(xì)管色譜柱（FSOT）以來，由于是采用石英在高溫下特殊拉制而成，化學(xué)惰性好、強(qiáng)度大，有一定彈性且不易折斷，安裝，使用方便。目前，國內(nèi)外已經(jīng)有各種各樣的商品柱，能夠滿足不同的試驗(yàn)要求，毛細(xì)管柱的使用日益廣泛。表2提供了商品柱及其同類固定相的名稱、組成、性質(zhì)及應(yīng)用。以上介紹的常用固定相，可以解決藥物分析中的很多實(shí)際問題。2.7.2FSOT柱的選擇大多數(shù)分析工作可以在聚二甲基硅氧烷和聚乙二醇-20M上完成。在進(jìn)行樣品分析時(shí)，首先選用非極性固定相，因?yàn)檫@種柱性能好，如柱效高、對氧不敏感、最高使用溫度高、柱壽命長等優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)然，必要時(shí)應(yīng)選用極性較高的固定相，以增加組分與固定液的相互作用，達(dá)到較好的分離效果。2.7.2.1固定相2.7.2.2柱內(nèi)徑與固定相液膜厚度內(nèi)徑0.25mm，液膜厚0.25μm的柱是常用柱，兼顧了柱效和樣品容量。為了增加樣品容量，可選擇內(nèi)徑較大、液膜較厚的柱，如內(nèi)徑0.35mm，液膜厚0.50μm的柱。另外有一種用于快速GC分析的微徑柱，內(nèi)徑不大于0.1mm，液膜厚度不超過0.50μm，柱長一般為)#H左右，采用快速GC可比常規(guī)毛細(xì)管柱的分析速度提高3~10倍，而且柱效也有很大提高。大口徑柱（不小于0.53mm）是一類特殊的毛細(xì)管柱，它的液膜厚度一般較大（1~5μm)，故有較大的柱容量，在一定程度上可代替填充柱，且具有較高的柱效，對儀器及操作者的要求較低，定量分析的再現(xiàn)性也較填充柱有所提高。2.7.2.3柱長商品柱一般有12m、25m、30m三種，一般分析工作中使用25m長柱較多，復(fù)雜樣品需用較長的柱。如樣品中組分不多，性質(zhì)不同，則用短柱比較有利，這樣可以加快分析速度，減少固定相流失。2.7.2.4柱的老化、維護(hù)與保存與填充柱一樣，新毛細(xì)管柱需要老化，以除去殘留溶劑及低分子量的聚合物。此外，用過的柱也應(yīng)定期老化，尤其是出現(xiàn)基線漂移，某些色譜峰開始拖尾時(shí)，應(yīng)該進(jìn)行老化以除去樣品中的難揮發(fā)物在柱頭的積累。為了延長柱的使用壽命，要用高純度的載氣，載氣中的氧氣含量不宜高于1×10-6g/g，并且利用凈化器除去較低級別氣體中的氧氣和碳?xì)浠衔镫s質(zhì)，定期更換氣體凈化器填料。要及時(shí)更換毛細(xì)管柱密封墊以確保整個(gè)系統(tǒng)必須沒有泄漏，并且要確保樣品中不存在非揮發(fā)性物質(zhì)，因?yàn)檠鹾臀廴疚飳潭ㄒ旱姆纸庥写呋饔?，會?dǎo)致柱流失增強(qiáng)。毛細(xì)管柱的前端及末端數(shù)厘米最易損壞，如不揮發(fā)物的積累，進(jìn)樣溶劑的侵蝕，高溫以及機(jī)械損傷等?？梢栽谘b柱之前切除這段受損害的部分，由于長度僅幾厘米，不至于影響總的柱效，切除時(shí)切口應(yīng)平整。毛細(xì)管柱如不使用，應(yīng)小心存放，可用硅橡膠塊將兩端封閉，置于盒中。2.8色譜數(shù)據(jù)采集處理及儀器控制系統(tǒng)由于微電子技術(shù)的不斷發(fā)展，特別是計(jì)算機(jī)的出現(xiàn)，當(dāng)今的氣相色譜儀一般都采用計(jì)算機(jī)（工作站軟件）進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和處理，同時(shí)也對色譜儀的自動進(jìn)樣器、柱溫、檢測器、溫度、載氣流速和壓力等色譜參數(shù)進(jìn)行設(shè)定和控制，使氣相色譜分析自動化。因商品規(guī)格型號不同，具體操作也不盡相同，用戶可以根據(jù)儀器說明書進(jìn)行操作，這里不作介紹。3開機(jī)操作3.1檢查儀器上的電源開關(guān)，均應(yīng)處于“關(guān)”的位置。3.2選好合適的色譜柱，柱的兩端應(yīng)堵有盲堵。3.3取下盲堵，分清入口端及出口端，套好石墨密封圈及固定螺母，小心裝于儀器上，擰緊固定螺母，但也勿過緊，以不漏氣為合適。換下的色譜柱，應(yīng)堵上盲堵保存。3.4開啟載氣鋼瓶上總閥調(diào)節(jié)減壓閥至規(guī)定壓力。注意：如果采用氮?dú)獍l(fā)生器作為載氣氣源，則應(yīng)提前2~3小時(shí)打開氮?dú)獍l(fā)生器進(jìn)行平衡。要注意經(jīng)常更換載氣凈化器中的填料（因?yàn)榈獨(dú)獍l(fā)生器產(chǎn)生的氮?dú)庵醒醯暮枯^高），另外，由于ECD對載氣中的氧特別敏感，所以采用ECD作為檢測器時(shí)，不宜用氮?dú)獍l(fā)生器作為載氣氣源，應(yīng)該采用高純氮鋼瓶作為氣源。3.5用檢漏液（表面活性劑溶液）檢查柱連接處是否漏氣，如有漏氣應(yīng)檢查柱兩端的石墨密封圈或再略加緊固定螺母。3.6打開各部分電路開關(guān)，打開色譜工作站，設(shè)定進(jìn)樣口（汽化室）、柱溫箱、檢測器溫度和載氣流量等色譜參數(shù)。開始加熱。3.7待各部分設(shè)定參數(shù)恒定后，開啟氫鋼瓶總閥、空氣壓縮機(jī)總閥，（或者打開氫氣+空氣發(fā)生器開關(guān)），同載氣操作。3.8按下點(diǎn)火按鈕（對于FID檢測器來說）（有些儀器在檢測器溫度達(dá)到一定溫度后有自動點(diǎn)火功能），應(yīng)有“撲”的點(diǎn)火聲，用玻璃片置FID檢測器氣體出口處，檢視玻璃片上應(yīng)有水霧，表示已點(diǎn)著火，同時(shí)顯示屏上應(yīng)有響應(yīng)信號。注意：對于帶有自動點(diǎn)火功能的儀器來說，有時(shí)工作站已顯示點(diǎn)火成功，但是實(shí)際沒有點(diǎn)火，所以每次試驗(yàn)都應(yīng)該用玻璃片進(jìn)行檢視，以確保點(diǎn)火成功。3.9調(diào)節(jié)儀器的放大器靈敏度等，走基線，待基線穩(wěn)定度達(dá)到可以接受的范圍內(nèi)，即可進(jìn)樣分析。氣相色譜常用的進(jìn)樣方法有手動進(jìn)樣、自動進(jìn)樣、頂空進(jìn)樣（多為自動）等，在用微量注射器手動進(jìn)樣時(shí)，精密度決定于操作的熟練程度，各步操作應(yīng)盡量一致。好的進(jìn)樣技術(shù)的主要技術(shù)要求如下（針對常規(guī)液體樣品）：3.9.2注射速度要快注射速度慢時(shí)會使樣品的汽化過程變長，導(dǎo)致樣品進(jìn)入色譜柱的初始譜帶變寬。正確的注射方法應(yīng)當(dāng)是：取樣后，一手持注射器，（注意防止氣化室的高氣壓將針芯吹出，另一只手保護(hù)針尖（防止插入隔墊時(shí)彎曲），先小心地將注射針頭穿過隔墊，隨即以最快的速度將注射器插到底，與此同時(shí)迅速將樣品注射入氣化室（注意不要使針芯彎曲），然后快速拔出注射器。推注樣品所用時(shí)間越短越好，注射器在氣化室中停留的時(shí)間不宜長，而最重要的是留針時(shí)間應(yīng)嚴(yán)格控制前后一致。3.9.3避免樣品之間的相互干擾取樣之前先用樣品溶劑洗針至少3次（抽滿針管的三分之二，再排出），再用要分析的樣品溶液洗針至少3次，然后取樣（多次上下抽動），這樣基本上可以消除樣品之間的相互干擾（記憶效應(yīng)）。3.9.4減少注射歧視所謂注射歧視是指注射針插入GC進(jìn)樣口時(shí)，針尖內(nèi)的溶劑和樣品中的易揮發(fā)組分首先開始汽化；無論注射速度多快，不同沸點(diǎn)的組分總是有汽化速度的差異，從而造成定量分析的誤差。所以必要時(shí)應(yīng)使用熱針技術(shù)進(jìn)樣或溶劑沖洗進(jìn)樣技術(shù)。前者是指取樣前先將注射針插入汽化室預(yù)熱一定時(shí)間，然后再按正常方法進(jìn)樣；后者則是取樣前先在注射器中抽入一定量的溶劑，再抽取樣品。這樣再注射樣品時(shí)，溶劑有可能將樣品全部沖洗進(jìn)入汽化室。相比之下，溶劑沖洗進(jìn)樣的操作較為簡單有效，但應(yīng)注意所用溶劑量太大會造成色譜柱超載。3.9.5介紹一種進(jìn)樣方法三明治式進(jìn)樣分析完畢后，待各組分流出后，先關(guān)閉氫氣和空氣，再進(jìn)行降溫操作，將進(jìn)樣口、柱溫箱、檢測器、以及頂空進(jìn)樣器的溫度均設(shè)為40℃（或更低），待到各組件的溫度降到40℃以下時(shí)，依次關(guān)閉載氣，關(guān)工作站和氣相色譜儀。如果要取下色譜柱，則取下后應(yīng)將柱兩端用盲堵堵上，放在盒內(nèi)，妥善保存。4樣品的測定4.1儀器系統(tǒng)適用性試驗(yàn)應(yīng)符合藥典附錄的要求。4.2供試品及對照品溶液的配制精密稱取供試品和對照品各2份，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定方法，準(zhǔn)確配制供試品溶液和對照品溶液，按規(guī)定用內(nèi)標(biāo)法或外標(biāo)法進(jìn)行測定。4.3預(yù)試驗(yàn)初次測定該品種時(shí)，可先經(jīng)預(yù)試驗(yàn)以確定儀器參數(shù)，根據(jù)預(yù)試驗(yàn)情況，可適當(dāng)調(diào)節(jié)柱溫，載氣流速，進(jìn)樣量，進(jìn)樣口和檢測器溫度等，使色譜峰的保留時(shí)間、分離度、峰面積或峰高的測量能符合要求。4.4正式測定正式測定時(shí)，每份校正因子測定溶液（或?qū)φ掌啡芤海└鬟M(jìn)樣2次，2份共4個(gè)校正因子響應(yīng)值的平均標(biāo)準(zhǔn)偏差不得大于2.0%。多份供試品測定時(shí)，每隔5批應(yīng)再進(jìn)對照品2次，核對一下儀器有無改變。5原始記錄氣相色譜