光動(dòng)力治療原理

光子醫(yī)學(xué)治療原理

----光動(dòng)力治療主要內(nèi)容光動(dòng)力治療概念光動(dòng)力治療發(fā)展概況光動(dòng)力治療的基本原理光敏藥物光動(dòng)力治療的應(yīng)用光動(dòng)力反應(yīng)的機(jī)制光動(dòng)力治療的評(píng)價(jià)當(dāng)前進(jìn)展及未來方向什么是光動(dòng)力治療光動(dòng)力學(xué)療法（PhotodynamicTherapy,PDT）:某些外源性的光敏劑也稱生物染料（如血卟啉、丫啶等），能夠被腫瘤或病變組織攝取、并在其中潴留；在特定波長光的照射下，通過O2的參與，能夠發(fā)生光敏化反應(yīng)，從而破壞光敏劑所在的腫瘤或病變組織，這一系列的化學(xué)反應(yīng)過程被稱為光動(dòng)力學(xué)過程，利用這個(gè)過程治療疾病，稱為光動(dòng)力學(xué)療法光動(dòng)力治療過程示意圖光動(dòng)力治療發(fā)展史古中國、埃及、印度人治療白癜風(fēng)。1898年，Moller報(bào)告可見光對(duì)某些皮膚病有治療作用1900年，Raad發(fā)現(xiàn)用丫啶橙染色以后的草履蟲對(duì)光敏感，可導(dǎo)致草履蟲死亡。1904年，Tappeiner進(jìn)行了大量研究，第一次提出了“光動(dòng)力學(xué)作用（Photodynamic）”這個(gè)術(shù)語，用來描述生物組織中需要氧氣、光敏劑和光的反應(yīng)。1909年，Hausman第一個(gè)描述了光動(dòng)力作用，他用光照射注射了卟啉（Hematoporphyrin,HP）的老鼠，發(fā)現(xiàn)反應(yīng)程度直接依賴于光敏劑劑量和光劑量。光動(dòng)力治療發(fā)展史1924年，Policard在紫外光下，他觀測(cè)到腫瘤組織發(fā)出的橘紅色熒光，第一個(gè)認(rèn)為卟啉在人和動(dòng)物腫瘤中的診斷價(jià)值。1948年，F(xiàn)igger發(fā)現(xiàn)外源性血卟啉可迅速聚集在增生或新生的組織中，特別是腫瘤組織，從此首次肯定了血卟啉與腫瘤組織有特別的親和力。1961年，Lipson和Baldes將血卟啉用化學(xué)處理制成血卟啉衍生物，進(jìn)一步提高了腫瘤中的熒光反應(yīng)和殺傷能力，而且大大減少血卟啉的劑量。每千克體重只用2.5~5.0mg即可達(dá)到診斷和治療目的。光動(dòng)力治療發(fā)展史1966年，Lipson報(bào)道使用血卟啉衍生物用于發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤，并且首次用于治療乳腺癌。70年代中期，Dougherty等對(duì)血卟啉鈉鹽的生物化學(xué)和細(xì)胞損傷機(jī)制進(jìn)行了一系列研究，為PDT的臨床應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。1981年，同仁醫(yī)院在國內(nèi)成功地治療了第一例左下瞼基底下細(xì)胞癌的病人，現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)展到治療和診斷肺癌、胃癌、腸癌等。在目前的治療病種之多及接受治療者之眾超過了任何一個(gè)國家。光動(dòng)力治療發(fā)展史1996年，被美國FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床，而且在美國、日本、英國、法國、德國、加拿大等發(fā)達(dá)國家用于多種腫瘤治療取得很大成功2003年5月，中國SFDA批準(zhǔn)這一治療系統(tǒng)進(jìn)入臨床應(yīng)用PDT治療過程給藥：皮試、靜脈（5mg/kg體重計(jì)算劑量)、或者局部給藥（PDT藥物）選擇性吸收：PDT藥物在腫瘤組織中長時(shí)間聚集光照：當(dāng)血卟啉鈉鹽被激發(fā)時(shí)，有特征峰630nm,690nm，體表病灶可直接用濾光片觀察，選擇合適波長的光源；光化學(xué)反應(yīng)：PDT藥物在光的誘導(dǎo)下產(chǎn)生單態(tài)氧殺死癌細(xì)胞藥物清除，降低光敏反應(yīng)光動(dòng)力反應(yīng)破壞細(xì)胞的機(jī)制PDT藥物吸收光單重態(tài)系間轉(zhuǎn)換三重態(tài)I型反應(yīng)過程Ⅱ型反應(yīng)過程3P*+H2O*OH或H2O23P*+3O2

1P+1O2*氧化細(xì)胞成份細(xì)胞產(chǎn)生毒性光動(dòng)力作用致細(xì)胞毒理反應(yīng)機(jī)制PDT藥物吸收光能后被激發(fā)到單重態(tài)通過系間轉(zhuǎn)換過渡到壽命較長的三重態(tài)，它決定著氧的活性細(xì)胞毒理的兩種反應(yīng)類型I型反應(yīng)過程：光敏劑與水或生物分子發(fā)生的電子（或氫）傳遞反應(yīng)，產(chǎn)生了自由基、過氧化氫或超氧化氫，從而殺死細(xì)胞；Ⅱ型反應(yīng)過程：光敏劑的三重態(tài)與基態(tài)分子氧發(fā)生能量傳遞產(chǎn)生單重態(tài)氧，單重態(tài)氧是一種高反應(yīng)活性的物質(zhì)，能高效地氧化生物分子，殺死腫瘤細(xì)胞。

自由基學(xué)說認(rèn)為激發(fā)態(tài)血卟啉鈉鹽直接與生物分子作用或?qū)⒛芰哭D(zhuǎn)移給氧和水，使之形成自由基，通過自由基引起生物分子的一系列連鎖反應(yīng)，造成腫瘤細(xì)胞的死亡。單態(tài)氧細(xì)胞毒理學(xué)說1976年，Weishaupt等報(bào)導(dǎo)用620~640nm光輻照含有血卟啉鈉鹽的癌組織時(shí)，在能量的轉(zhuǎn)移過程中，由光動(dòng)力學(xué)作用產(chǎn)生單態(tài)氧

HPD+hv

1HPD*HPD*

3HPD*3HPD*+3O2

1O2*+HPD

1O2*+腫瘤細(xì)胞

氧化反應(yīng)

1O2*

3O2兩者同存也有人認(rèn)為兩種機(jī)理的作用同時(shí)存在，這取決于血卟啉鈉鹽的濃度和聚焦程度，濃度低時(shí)以單態(tài)氧為主，濃度高時(shí)以自由基為主。PDT治療的必備條件光源及光傳輸裝置單色光的選擇性吸收與光纖耦合合適光照劑量表面：25-200J/cm2深部：100-400J/cm2功率：1-2W光敏劑應(yīng)具備的條件光敏化劑中能夠促使光與組織產(chǎn)生光敏作用的物質(zhì)，光敏化作用中，其本身起著能量轉(zhuǎn)化作用而不被消耗選擇性好：選擇性聚集于癌或癌前病變組織兩性分子疏水性：易穿透細(xì)胞膜，便于定位親水性：能隨血流擴(kuò)散波長特異性：最大吸收峰應(yīng)位于組織穿透深度較大的紅光區(qū)域光敏劑應(yīng)具備的條件光毒性小：對(duì)自然光的吸收小，副作用小高量子產(chǎn)率：從激發(fā)的單重態(tài)向三重態(tài)的系間轉(zhuǎn)換效率高三重態(tài)的壽命長可以增強(qiáng)毒理反應(yīng)的機(jī)會(huì)非多聚體：多聚體會(huì)降低消光系數(shù)；多聚體縮短三重態(tài)的量子產(chǎn)率與壽命；排泄快：降低毒性、減小PDT治療后光毒性常用光敏藥物第一代光敏藥物----血卟啉衍生物第二代光敏藥物----成分更單一、吸收峰向長波長移動(dòng)改良卟啉衍生物：苯并卟啉類衍生物與5-氨基乙酰丙酸綠素降解產(chǎn)生衍生物藻膽蛋白竹紅菌素富勒烯五氮齒酞菁染料血卟啉的來源動(dòng)物（?；蜇i）血中的血紅蛋白（HP）

（降解）

氯化血紅素

（溴化）二溴血卟啉

（水解）血卟啉

（成鹽）

血卟啉鈉鹽（HPD）分子量598.7，分子式C34H38O6N4血卟啉鈉鹽的性質(zhì)血卟啉呈暗紅色，酸堿二性，不溶于水，易溶于酸或堿，也易溶于酸性和堿性有機(jī)溶液。血卟啉鹽溶于水。血卟啉鈉鹽由四個(gè)大吡咯環(huán)連接組成大環(huán)，形成一個(gè)Pπ共軛體系，因此很容易接受光能而發(fā)生電子躍遷，使血卟啉鈉鹽分子由基態(tài)變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài)。當(dāng)電子從高能級(jí)回到低能級(jí)時(shí)，激發(fā)態(tài)分子釋放能量回到基態(tài)，因此產(chǎn)生熒光。血卟啉鈉鹽的激發(fā)與發(fā)射譜激發(fā)光的峰值405nm熒光光譜的峰值630nm690nm血卟啉鈉鹽在腫瘤組織中濃度較高的原因

在惡性腫瘤和正常組織的吸收比大于10;血卟啉鈉鹽在正常組織中的滯留時(shí)間為24~72小時(shí)，但皮膚組織中的血卟啉鈉鹽排泄時(shí)間較長。一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明血卟啉鈉鹽在肝、腎、脾中的濃度比腫瘤中要高;正是利用血卟啉鈉鹽在正常組織和惡性組織中的分布和潴留時(shí)間有明顯差異的特性，利用光動(dòng)力療法對(duì)惡性腫瘤進(jìn)行選擇性治療;血卟啉衍生物的不足混和物組成比例不穩(wěn)定排泄緩慢、皮膚光毒性大，需避光4-6周紅光區(qū)吸收低，影響治療深度苯并卟啉類衍生物（BPD）組分單一與HPD有相似的母核二氫卟酚相似的紅光區(qū)高吸收長波吸收大690nm35000M-1cm-1苯并卟啉衍生物（BPD）單態(tài)氧產(chǎn)額高I與II

期臨床表明在腫瘤聚集更迅速皮膚光毒性更小已被允許用于老年斑治療可能應(yīng)用凈化白血病的骨髓清除血液制品污染的抗病毒試劑5-氨基乙酰丙酸(-ALA)一種自然的卟啉前體,本身并非光敏藥物，外源攝入

一ALA可促進(jìn)某些類型的細(xì)胞組織的內(nèi)源性原卟啉Ⅸ的生物合成以產(chǎn)生血紅蛋白。癌細(xì)胞內(nèi)酶的變化可促成原卟啉IX的內(nèi)源性產(chǎn)生并積累到足以成為光敏劑的水平。5-氨基乙酰丙酸特點(diǎn)4-6小時(shí)迅速達(dá)到治療部位24小時(shí)清除體外對(duì)皮膚無光毒性每隔24小時(shí)可重復(fù)治療在體熒光分析可通過局部或全身性臨床應(yīng)用：光老化治療綠素類與菌綠素綠素類與菌綠素PDT藥物特點(diǎn)其吸收向長波方向移動(dòng)，在750-800nm仍有吸收光敏劑在體內(nèi)的滯留時(shí)間有限未通過FDA批準(zhǔn)腫瘤治療早期小細(xì)胞支氣管肺癌、其它支氣管肺癌、肺部間質(zhì)瘤梗阻性的食道癌早期食道癌皮膚癌乳腺癌腦癌結(jié)腸、直腸癌婦科惡性腫瘤光動(dòng)力治療應(yīng)用其它疾病治療心血管疾病慢性皮膚疾?。ㄅＦぐ_）免疫性疾?。L(fēng)濕）抗菌（傷口感染、口腔潰瘍）血液制品滅菌疫苗

試管內(nèi)血卟啉－激光對(duì)C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞（C6gliomacells）的作用

照射以前照射24小時(shí)以后（632nm，25J/cm2)右圖可以看見PDT殺滅癌細(xì)胞后留下的空洞。腦腫瘤治療PDT治療食管鱗狀癌細(xì)胞PDT以前碘染色后PDT治療以后光動(dòng)力治療機(jī)制細(xì)胞免疫光動(dòng)力活化血管定位線粒體細(xì)胞凋亡定位質(zhì)膜壞死血管損傷血管基層爆露、血小板聚集、血流停、血管關(guān)閉釋放炎癥因子損傷炎癥細(xì)胞免疫抑制PDT作用的部位體外實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞膜是PDT的主要作用部位，細(xì)胞可由于PDT產(chǎn)生膜大泡、膜溶解、酶失活、蛋白變性等。有時(shí)在線粒體、溶酶體和細(xì)胞核膜上出現(xiàn)改變。體內(nèi)應(yīng)用光氧化破壞首先作用部位是毛細(xì)胞血管。PDT對(duì)細(xì)胞靶向性作用

生物膜：如細(xì)胞膜和細(xì)胞器膜上，特別是線粒體、微粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜、溶酶體及核膜；

DNA：可以引起染色體的斷裂、突變和移位、引起DNA與酶和蛋白質(zhì)的交聯(lián)等；蛋白質(zhì)：抗原、抗體、細(xì)胞內(nèi)微量元素等，在血卟啉鈉鹽光敏作用下發(fā)生異常；PDT對(duì)細(xì)胞靶向性作用光敏劑在細(xì)胞部位產(chǎn)生的單重態(tài)氧微秒的壽命僅能在0.02

m產(chǎn)生光損傷定位在線粒體的光敏劑（PHD，ALA產(chǎn)生的原卟啉）導(dǎo)致細(xì)胞凋亡定位于細(xì)胞膜上的光敏劑（酞菁染料）引起細(xì)胞壞死卟吩類衍生物（m-THPC）對(duì)人體結(jié)腸腺癌細(xì)胞的光化學(xué)作用PDT對(duì)血管的破壞血卟啉鈉鹽誘導(dǎo)的PDT能迅速攻擊血管，并使血流停止、出血，直接或間接致使腫瘤細(xì)胞缺氧致死。血管損傷與光敏劑的類型無關(guān)，但與光照時(shí)光敏劑聚集水平直接相關(guān)。血管損傷過程內(nèi)皮細(xì)胞收縮---血管基層爆露---血小板聚集

----血流停止----血管關(guān)閉PDT誘導(dǎo)免疫應(yīng)答免疫應(yīng)答與光敏劑有關(guān)Releaseofinflammatorymediatory（炎癥因子的釋放）Damageofinflammatorycell（炎性細(xì)胞損傷）Immunosuperpression（免疫抑制）光動(dòng)力治療的評(píng)價(jià)優(yōu)點(diǎn)：（1）有選擇性地破壞惡性腫瘤的能力，對(duì)正常組織有損傷很小，保留重要器官的功能；（2）適用范圍廣，對(duì)不同組織的惡性腫瘤都能進(jìn)行治療；（3）對(duì)重要器官無損傷；（4）治療效率高，較小的光輸出功率就具有治療效果；（5）不會(huì)產(chǎn)生抗藥性；（6）既能診斷又能進(jìn)行治療；常規(guī)PDT療法的缺點(diǎn)生物體會(huì)很強(qiáng)的吸收和散射可見光譜內(nèi)的光，在距離表皮幾厘米的深度照射光喪失了相當(dāng)部分能量。因此，很難用常規(guī)的PDT療法來治療大型腫瘤或體腔內(nèi)很深的腫瘤。激光穿透腫瘤周圍的健康組織并且造成傷害。具有光毒性后應(yīng)，皮膚的光敏反應(yīng)大，用藥后要避光一段時(shí)間。2024/1/3043當(dāng)前進(jìn)展及未來方向理想PDT藥物的研發(fā)光源：多光子激發(fā)具有識(shí)別功能的光敏劑特定序列的肽鏈作為側(cè)基引入治療藥物分子糖基的修飾的光敏劑光敏劑與寡核苷酸共價(jià)偶聯(lián)雙光子激發(fā)采用近紅外激光穿透腫瘤，對(duì)深部組織進(jìn)行治療。激發(fā)比例是一個(gè)關(guān)于光子濃度平方的函數(shù)光子激發(fā)要求因?yàn)殡p光子激發(fā)