【高中生物】動物細胞融合技術(shù)與單克隆抗體+課件+高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修3

第2章

細胞工程2第2節(jié)動物細胞工程二

動物細胞融合技術(shù)與單克隆抗體目錄/CONTENTS0102動物細胞融合技術(shù)單克隆抗體及其應(yīng)用一

動物細胞融合技術(shù)1、概念：使兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的技術(shù)。2、原理：細胞膜具有一定的流動性3、誘導(dǎo)方式物理法：電融合法化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活病毒誘導(dǎo)法——動物細胞融合特有與植物原生質(zhì)體融合的方法相同4、結(jié)果：形成具有原來兩個或多個細胞的遺傳信息的雜交細胞

一

動物細胞融合技術(shù)知識延伸動物細胞融合時，一般將多個細胞混合進行處理，因為就目前常用的細胞融合方法來看，不管是用物理、化學(xué)方法，還是用生物方法，其融合率都不可能是100%。若僅有少數(shù)細胞進行融合，則不一定能得到融合細胞，更重要的是，即使兩個細胞已發(fā)生融合，也并不一定是研究者期望得到的細胞類型。動物細胞融合技術(shù)最有價值的應(yīng)用就是制備單克隆抗體。一

動物細胞融合技術(shù)5、過程:動物細胞融合動物細胞培養(yǎng)細胞膜的流動性細胞增殖一

動物細胞融合技術(shù)（1）“滅活病毒”中滅活的具體含義是什么？相關(guān)信息滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒失去感染能力，但是并不破壞病毒的抗原結(jié)構(gòu)。仙臺病毒紫外線滅活喪失感染活性（不感染細胞）保留融合活性（誘導(dǎo)細胞融合）（2）滅活病毒誘導(dǎo)細胞融合的原理是什么？病毒表面的糖蛋白和一些酶與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞互相凝聚，細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合。一

動物細胞融合技術(shù)相關(guān)信息（3）滅活病毒誘導(dǎo)細胞融合過程：

病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞互相凝聚，細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合。一

動物細胞融合技術(shù)6、意義：細胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限，使遠緣雜交成為可能。7、應(yīng)用：至今，種間、屬間、科間，甚至動物和植物之間的細胞融合都已獲得成功。研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段。為制造單克隆抗體開辟了新途徑。正在融合的淋巴細胞與骨髓瘤細胞（1）受精作用：是在同種生物之間進行的，精子與卵細胞的融合不需要任何誘導(dǎo)劑，受精卵內(nèi)具備同種生物的兩個親本的遺傳物質(zhì)（2）動物細胞融合可在不同物種間進行，由于物種間存在生殖隔離，所以自然條件下不能融合成雜交細胞，必須有誘導(dǎo)劑才能融合。形成的雜交細胞具備兩個親本細胞的遺傳物質(zhì)，從而體現(xiàn)兩個親本的遺傳特性注意：一

動物細胞融合技術(shù)動物細胞融合與受精作用的區(qū)別小結(jié)：動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合原理步驟誘導(dǎo)方法結(jié)果意義細胞膜的流動性和植物細胞的全能性細胞膜的流動性酶解法去掉細胞壁后，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，形成雜種體細胞，再經(jīng)過植物組織培養(yǎng)形成雜種植株分散成單個細胞后誘導(dǎo)細胞融合物理方法、化學(xué)方法物理方法、化學(xué)方法、滅活病毒形成雜種植株形成雜種細胞克服遠緣雜交不親和障礙一

動物細胞融合技術(shù)二

單克隆抗體及其應(yīng)用1.定義：機體受抗原刺激后產(chǎn)生的，能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。

抗體抗體體液免疫2.抗體的分布：1）血清（主要）2）組織液及外分泌液（如乳汁中）1）每個B淋巴細胞只分泌一種特異性的抗體2）體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類多達百萬種以上抗原傳統(tǒng)抗血清（所有抗體混合）免疫1

1234二

單克隆抗體及其應(yīng)用1、傳統(tǒng)抗體制備方法及缺陷動物體內(nèi)1抗原注射漿細胞1抗體

1B淋巴細胞增殖分化（不能無限增殖）缺陷：產(chǎn)量低、純度低，特異性差。二

單克隆抗體及其應(yīng)用（1）概念：由單一的B淋巴細胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體稱為單克隆抗體(2)基本原理①每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體，但不能在體外無限增殖②小鼠骨髓瘤細胞能在體外無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體③利用動物細胞融合技術(shù)產(chǎn)生的雜交瘤細胞可以保持親代雙方的特性，既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體(3)來源：單克隆抗體是由B淋巴細胞和骨髓瘤細胞雜交形成的單一雜交瘤細胞增值產(chǎn)生的高度專一的抗體①B淋巴細胞：能產(chǎn)生特異性強的抗體②骨髓瘤細胞：在體外能無限增殖2、單克隆抗體的制備過程二

單克隆抗體及其應(yīng)用注射特定抗原多種已免疫B淋巴細胞小鼠的脾臟中獲取骨髓瘤細胞從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)取骨髓瘤細胞的培養(yǎng)2、單克隆抗體的制備過程二

單克隆抗體及其應(yīng)用融合的細胞BB132B置于選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)

第一次篩選√B瘤2雜交瘤細胞(多種)13瘤瘤瘤2、單克隆抗體的制備過程雜交瘤細胞(多種)克隆化培養(yǎng)第二次篩選抗體檢測(抗原-抗體雜交技術(shù))陽性細胞能分泌所需抗體的雜交瘤細胞二

單克隆抗體及其應(yīng)用2、單克隆抗體的制備過程能分泌所需抗體的雜交瘤細胞體內(nèi)或體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔體外培養(yǎng)單克隆抗體二

單克隆抗體及其應(yīng)用2、單克隆抗體的制備過程二

單克隆抗體及其應(yīng)用篩選原理：①細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。②人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但不能分裂增殖。

③鼠骨髓瘤細胞中只有D途徑，沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。篩選出雜交瘤細胞方法？培養(yǎng)基中加入氨基嘌呤B淋巴細胞及同型融合細胞骨髓瘤細胞及同型融合細胞雜交瘤細胞不能無限增殖，死亡D途徑被阻斷，無法增殖死亡能無限增殖，生長二

單克隆抗體及其應(yīng)用1、診斷試劑——最廣泛應(yīng)用抗人絨毛促性腺激素單克隆抗體在妊娠第8天就可以作出診斷，比原來診斷方法提前了10d左右，準(zhǔn)確率在90﹪以上。診斷優(yōu)點：具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速特點3、單克隆抗體的應(yīng)用二

單克隆抗體及其應(yīng)用乙肝測定試劑艾滋病檢測試劑新冠病毒檢測試劑3、單克隆抗體的應(yīng)用血型檢測試劑二

單克隆抗體及其應(yīng)用3、單克隆抗體的應(yīng)用2021年12月8日晚，由清華大學(xué)張林琦教授團隊及其他公司共同研發(fā)的抗新冠病毒抗體組合藥物——安巴韋單抗注射液及羅米司韋單抗注射液，正式被中國藥監(jiān)局批準(zhǔn)上市，成為我國首個自主研發(fā)的抗新冠病毒抗體藥物。注入體內(nèi)后馬上起效，可以降低80%新冠患者的住院率與死亡率”2、作為藥物治療疾病張林琦教授團隊二

單克隆抗體及其應(yīng)用3、單克隆抗體的應(yīng)用3、運載藥物

ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細胞毒素）三部分組成。閱讀教材50頁思考：ADC的抗體和藥物各具有什么作用？

抗體主要發(fā)揮靶向運輸作用；藥物發(fā)揮治療效應(yīng)，如殺傷靶細胞。二

單克隆抗體及其應(yīng)用3、單克隆抗體的應(yīng)用對點訓(xùn)練√下列有關(guān)動物細胞融合與植物體細胞雜交比較的敘述，錯誤的是（）A.它們的原理都涉及細胞膜的流動性

B.都可以用電融合法或PEG融合法誘導(dǎo)融合C.融合前都需用纖維素酶或果膠酶處理細胞D.前者主要為了獲得細胞產(chǎn)品，后者主要為了獲得雜種植株對點訓(xùn)練科研人員將抗癌藥物連接在單克隆抗體上制成“生物導(dǎo)彈”用于癌癥治療。“生物導(dǎo)彈”由兩部分組成，一是“瞄準(zhǔn)裝置”，二是“殺傷性彈頭”。分析下列有關(guān)描述，其中不正確的是A.“瞄準(zhǔn)裝置”由識別腫瘤的單克隆抗體組成B.“彈頭”由放射性同位素、化學(xué)藥物或毒素等物質(zhì)構(gòu)成C.“彈頭”中的藥物有選擇殺傷腫瘤細胞的功能D.“生物導(dǎo)彈”的制備應(yīng)用了細胞工程√對點訓(xùn)練為降低乳腺癌治療藥物的副作用，科研人員嘗試在單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)上，構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)，過程如圖1所示。請回答下列問題：(1)本實驗中，小鼠注射的特定抗原應(yīng)取自_______________。(2)步驟①常用方法包括_____融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等