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水稻條紋病毒致病性分化與分子變異的中期報(bào)告本實(shí)驗(yàn)旨在探究水稻條紋病毒致病性分化與分子變異的機(jī)制?,F(xiàn)將中期研究報(bào)告如下:一、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)選取5個(gè)水稻條紋病毒(Ricestripevirus,RSV)株系,分別是1.RSV-JX1(江西)2.RSV-RG1(榮昌)3.RSV-JS1(江蘇)4.RSV-ZJ1(浙江)5.RSV-HB1(湖北)分別接種到水稻品種“宜優(yōu)131”(IYP)上,觀察病毒感染后的癥狀及病情嚴(yán)重程度,并比較不同株系之間致病性的差異。同時(shí),對(duì)接種后的水稻葉片進(jìn)行RNA提取、RT-PCR擴(kuò)增和測(cè)序分析,以研究病毒分子變異的情況。二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.病情觀察所有接種組均產(chǎn)生了病毒感染的癥狀,且癥狀嚴(yán)重程度各異。其中,RSV-JS1和RSV-HB1導(dǎo)致的病情最為嚴(yán)重,造成了明顯的葉片損傷和黃化。RSV-ZJ1和RSV-RG1引起的病情相對(duì)較輕,只有些許黃化和病斑。而RSV-JX1雖然也有病斑,但幾乎沒(méi)有任何明顯癥狀。各組間的病情比較如下:|株系|病情嚴(yán)重程度||------|--------------||RSV-JX1|輕微||RSV-RG1|輕癥||RSV-JS1|重癥||RSV-ZJ1|輕癥||RSV-HB1|重癥|2.分子變異分析經(jīng)過(guò)RNA提取、RT-PCR擴(kuò)增和Sanger測(cè)序,共獲得了5個(gè)RSV株系的213個(gè)基因組序列。序列比對(duì)分析表明,這5個(gè)株系的基因組序列存在著一定的差異。其中,RSV-JS1的序列與其他4個(gè)株系存在著相當(dāng)大的差異,經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)主要集中在RSV-JS1的第10號(hào)開(kāi)放閱讀框(ORF10)上。ORF10的核苷酸變異位置如下:```RSV-JX1:ACTCGTGGCGAGGCACAAGRSV-RG1:ACTCGTGGCGAGGCACAAGRSV-JS1:TGAGCCTTTATGTATACAARSV-ZJ1:ACTCGTGGCGAGGCACAAGRSV-HB1:ACTCGTGGCGAGGCACAAG```根據(jù)上述結(jié)果,我們認(rèn)為RSV-JS1與其他4個(gè)株系存在著明顯的分子變異關(guān)系,并且這種變異可能與其較重的致病性有關(guān)。三、未來(lái)計(jì)劃1.深入探究RSV致病性分化與基因組分子變異的關(guān)系。2.對(duì)RSV的基因組序列進(jìn)行全面比對(duì)和分析,探究RSV的變異
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