齊魯教科研協(xié)作體、湖北重高2023年高考全國(guó)統(tǒng)考預(yù)測(cè)密卷生物試卷含解析

2023學(xué)年高考生物模擬試卷

注意事項(xiàng)：

1.答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)碼填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。

2.答題時(shí)請(qǐng)按要求用筆。

3.請(qǐng)按照題號(hào)順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無(wú)效；在草稿紙、試卷上答題無(wú)效。

4.作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。

5.保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。

一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）

1.如圖曲線沒有標(biāo)注橫縱坐標(biāo)具體含義，下列關(guān)于此曲線的描述正確的是（）

A,橫坐標(biāo)表示時(shí)間，縱坐標(biāo)表示洋蔥細(xì)胞在一定濃度蔗糖溶液中的質(zhì)壁分離和復(fù)原過程中失水量

B.橫坐標(biāo)表示溫度，縱坐標(biāo)表示酶促反應(yīng)的速率，曲線可表示酶促反應(yīng)的速率隨著溫度的升高而變化的趨勢(shì)

C.橫坐標(biāo)表示生長(zhǎng)素濃度，縱坐標(biāo)表示生長(zhǎng)素促進(jìn)或者抑制，曲線可表示生長(zhǎng)素的兩重性

D.橫坐標(biāo)表示pH,縱坐標(biāo)表示酶的活性，曲線可表示pH由12逐漸降低到2過程中酶的活性變化的趨勢(shì)

2.貨幣狀掌跖角化病是一種遺傳病，患者腳掌部發(fā)病一般從幼兒學(xué)會(huì)走路時(shí)開始，隨年齡增長(zhǎng)，患處損傷逐步加重;

手掌發(fā)病多見于手工勞動(dòng)者。如圖為某家族中該病的遺傳系譜，有關(guān)敘述正確的是（）

B.貨幣狀掌跖角化病的癥狀表現(xiàn)僅由基因決定的

C.由家系圖判斷此病最可能屬于常染色體顯性遺傳病

D.IV代中患者與正常人婚配生女兒可避免此病的遺傳

3.生物膜上的質(zhì)子泵（H+的載體蛋白）可分為三種：F—型質(zhì)子泵、P—型質(zhì)子泵和V—型質(zhì)子泵，前一種是生成ATP

的質(zhì)子泵，后兩種是消耗ATP的質(zhì)子泵。下列關(guān)于H+跨膜運(yùn)輸?shù)臄⑹?，正確的是（）

A.液泡膜通過V—型質(zhì)子泵吸收H+的方式是協(xié)助擴(kuò)散

B.葉綠體類囊體膜上的質(zhì)子泵是P-型質(zhì)子泵

C.F—型質(zhì)子泵為H+逆濃度梯度運(yùn)輸

D.線粒體內(nèi)膜上的質(zhì)子泵是F—型質(zhì)子泵

4.已知抗維生素D佝僂病為伴X染色體顯性遺傳病，血友病為伴X染色體隱性遺傳病。下列有關(guān)人類遺傳病的說法

正確的是

A.一對(duì)患有抗維生素D佝僂病的夫婦，所生的女兒不一定患病

B.鐮刀形細(xì)胞貧血癥的根本病因是血紅蛋白中一個(gè)氨基酸被替換

C.某家庭中母親患血友病，父親正常，生了一個(gè)凝血正常且性染色體組成為XXY的孩子，則其形成原因最可能是卵

細(xì)胞異常

D.人群中某常染色體顯性遺傳病的發(fā)的發(fā)病率為19%,一對(duì)夫婦中妻子患病，丈夫正常，則所生子女不患該病的概

率是9/19

5.將同一紫色洋蔥鱗片葉外表皮制成兩組相同的臨時(shí)裝片，分別浸潤(rùn)在甲、乙兩種溶液中，測(cè)得液泡直徑的變化情況

如圖所示。下列相關(guān)敘述，正確的是

A.乙種溶液的濃度大于甲種溶液的濃度

B.2-6min乙溶液中細(xì)胞的吸水能力逐漸增大

C.甲溶液中的溶質(zhì)分子在2min后開始進(jìn)入細(xì)胞

D.甲溶液中細(xì)胞體積與液泡體積的變化量相等

6.下列關(guān)于生命活動(dòng)調(diào)節(jié)的敘述錯(cuò)誤的是（）

A.手和腳有時(shí)會(huì)磨出“水泡”，“水泡”中的液體主要是組織液

B.在免疫細(xì)胞中，吞噬細(xì)胞和漿細(xì)胞對(duì)抗原均沒有特異性識(shí)別能力

C.對(duì)植物激素的研究發(fā)現(xiàn)，同一種激素，在不同情況下作用也有差異

D.神經(jīng)遞質(zhì)與突觸后膜上的受體結(jié)合，就會(huì)使突觸后膜的電位發(fā)生逆轉(zhuǎn)

二、綜合題：本大題共4小題

7.（9分）埃博拉出血熱是由埃博拉病毒（EBV）引起的病毒性出血熱。EBV與宿主細(xì)胞結(jié)合后，將核酸-蛋白復(fù)合體

（-RNA）釋放至細(xì)胞質(zhì)，通過以下途徑進(jìn)行增殖。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：

,、儂賴RNA的

②翻譯聚合酶］力生

--------＞蛋白質(zhì)一

----＞結(jié)構(gòu)蛋白J④蛆裝

子代

一網(wǎng)ARNA聚合酶＞xnRNA一EBV

③依鼓RNA的

*-RNA—1

-RNA聚合酶

（1）過程②和③分別叫、o

（2）請(qǐng)利用箭頭和文字寫出埃博拉病毒在宿主巨噬細(xì)胞中遺傳信息的流動(dòng)方向。

RNA蛋白質(zhì)

（3）EBV病毒感染機(jī)體后，引發(fā)的特異性免疫有。現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)了5種埃博拉病毒，從該病毒遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)

特點(diǎn)分析其易發(fā)生變異的原因是o

（4）已研制出針對(duì)埃博拉病毒的DNA疫苗，其流程是將埃博拉病毒基因經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄后整合到質(zhì)粒上，構(gòu)建基因表達(dá)

載體，導(dǎo)入人體皮膚。這種DNA疫苗相對(duì)普通疫苗具有等優(yōu)點(diǎn)；但若注射劑量高，可能會(huì)整合到宿主

基因組內(nèi)而引起安全性問題。

（5）若制備埃博拉病毒的單克隆抗體，必須借助動(dòng)物細(xì)胞工程中的技術(shù)。

8.（10分）類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）是一種自身免疫病，致殘性強(qiáng)。研究表明，該病的病理改變與腫瘤壞死因子-a（TNF-a）

密切相關(guān)，而一種人鼠嵌合的抗TNF-a單克隆抗體能有效治療RA。下圖為該單克隆抗體制備過程示意圖。

原A

0

O

H

相

I?).!細(xì)

=胞

骨

髓

『HAT培養(yǎng)克隆化培養(yǎng)大規(guī)模培養(yǎng)

融劑基中培養(yǎng)

細(xì)抗體篩選

|:*|胞

?

匕

（1）圖中的抗原A是,常用的促融劑是。細(xì)胞融合完成后，融合體系中除含有未融

合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞。體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的

原因是。

（2）HAT培養(yǎng)基的作用是經(jīng)選擇性培養(yǎng)篩選出雜交瘤細(xì)胞，之后還需要進(jìn)行培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩

選，就可獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。最后獲得的雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)生一種單一抗體的原因是

（3）單克隆抗體的特點(diǎn)是。單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和

____________技術(shù)。

（4）單克隆抗體主要的用途有：（至少答兩點(diǎn)）。

9.（10分）轉(zhuǎn)染是指利用一定手段使外源基因進(jìn)入細(xì)胞中并穩(wěn)定表達(dá)的過程。腺病毒載體常用于外源基因的轉(zhuǎn)染，這

在基因治療、疫苗研發(fā)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的可視化監(jiān)控方面有著廣闊的應(yīng)用前景?；卮鹣铝袉栴}。

（1）腺病毒營(yíng)—活，用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上具有—識(shí)別和結(jié)合的部位，是外源基因在受體細(xì)胞中啟動(dòng)表達(dá)的關(guān)

鍵。

（2）構(gòu)建腺病毒載體時(shí)，先用同種限制酶對(duì)腺病毒DNA和外源基因進(jìn)行切割，可獲得相同的一，再用DNA連接

酶恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核昔酸之間的—o

（3）通過腺病毒載體將藍(lán)色熒光基因轉(zhuǎn)染山羊耳緣成纖維細(xì)胞，利用藍(lán)色熒光直觀監(jiān)控細(xì)胞的體外培養(yǎng)過程。首先將

山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或處理得到單個(gè)成纖維細(xì)胞，培養(yǎng)至貼滿瓶壁時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)

象稱為。這時(shí)，重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)使用的合成培養(yǎng)基，通常

需加入—等一些天然成分，以滿足細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的全面需求。

10.（10分）某課題組為得到青蒿素產(chǎn)量高的新品系，讓青蒿素合成過程的某一關(guān)鍵酶基因fps在野生青蒿素中過量表

達(dá)，其過程如圖所示：

提%烈索螞

1晚的3.垂組質(zhì)粒電桿獨(dú)_青蒿

質(zhì)粒.跳.

回答下列問題:

（1）酶1和酶2分別是、。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模

板DNA解鏈為單鏈的條件是加熱至90~95℃,目的是破壞了DNA分子中的鍵。在構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒的過

程中，需將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的中。

（2）檢驗(yàn)?zāi)康幕蚴欠裾系角噍锼鼗蚪M，可以將放射性同位素標(biāo)記的做成分子探針與青蒿素

基因組DNA雜交。理論上，與野生型相比，該探針與轉(zhuǎn)基因青蒿素DNA形成的雜交帶的量（填“較多”

或，，較少，，）。

（3）據(jù)圖分析，農(nóng)桿菌的作用是o判斷該課題組的研究目的是否達(dá)到，必須檢測(cè)轉(zhuǎn)基因青蒿

素植株中的?

11.（15分）礦區(qū)廢棄土地一般水分狀況很差，養(yǎng)分極其貧瘠，自然狀態(tài)下植被無(wú)法恢復(fù)。某城市為治理市區(qū)某廢棄

礦場(chǎng)的生態(tài)環(huán)境，對(duì)其進(jìn)行了生態(tài)恢復(fù)工程。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題：

（1）首先通過機(jī)械方法平整壓實(shí)土地人工制造表土（從外地引入較為肥沃的土壤），再選擇適當(dāng)植物進(jìn)行人工植樹種

草，隨著時(shí)間的推移，植物物種數(shù)目逐漸增加并達(dá)到穩(wěn)定，這屬于群落演替中的演替。

（2）在恢復(fù)初期，土壤條件的改善需要生態(tài)系統(tǒng)中的將植物遺體殘骸中的有機(jī)物分解為無(wú)機(jī)物。同時(shí)人工林

土壤中的_______也可以導(dǎo)致群落中植物物種數(shù)目增加。

(3)隨著植物物種的增加，消費(fèi)者也逐漸在該生態(tài)系統(tǒng)中出現(xiàn)且種類越來(lái)越多，那么生態(tài)系統(tǒng)中消費(fèi)者的作用是

(4)與礦區(qū)進(jìn)行的自然演替相比較，人類的開墾活動(dòng)使得該礦區(qū)群落演替的方向(填“發(fā)生改變”或“未發(fā)生

改變”)。

(5)恢復(fù)后的生態(tài)系統(tǒng)具有調(diào)節(jié)氣候，保持水土的作用。從生物多樣性價(jià)值的角度分析，這種作用所具有的價(jià)值屬于

________價(jià)值。

參考答案

一、選擇題：(共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)

1、B

【解析】

1、影響酶促反應(yīng)速率的因素主要有：溫度、pH、底物濃度和酶濃度。

(1)溫度(pH)能影響酶促反應(yīng)速率，在最適溫度(pH)前，隨著溫度(pH)的升高，酶活性增強(qiáng)，酶促反應(yīng)速率加快；到

達(dá)最適溫度(pH)時(shí)，酶活性最強(qiáng)，酶促反應(yīng)速率最快；超過最適溫度(pH)后，隨著溫度(pH)的升高，酶活性降低，

酶促反應(yīng)速率減慢。另外低溫酶不會(huì)變性失活，但高溫、pH過高或過低都會(huì)使酶變性失活。

(2)底物濃度能影響酶促反應(yīng)速率，在一定范圍內(nèi)，隨著底物濃度的升高，酶促反應(yīng)速率逐漸加快，但由于酶濃度的限

制，酶促反應(yīng)速率達(dá)到最大值后保持相對(duì)穩(wěn)定。

(3)酶濃度能影響酶促反應(yīng)速率，在底物充足時(shí)，隨著酶濃度的升高，酶促反應(yīng)速率逐漸加快。

2、生長(zhǎng)素的兩重性：生長(zhǎng)素既能促進(jìn)生長(zhǎng)也能抑制生長(zhǎng)；既能促進(jìn)發(fā)芽也能抑制發(fā)芽；百既能防止落花落果也能疏花

疏果。

【詳解】

A、若橫坐標(biāo)表示時(shí)間，則洋蔥細(xì)胞在一定濃度蔗糖溶液中不會(huì)表現(xiàn)出質(zhì)壁分離復(fù)原現(xiàn)象，A錯(cuò)誤；

B、橫坐標(biāo)表示溫度，縱坐標(biāo)表示酶促反應(yīng)的速率，曲線可表示酶促反應(yīng)的速率隨著溫度的升高先增加后減少，B正確；

C、橫坐標(biāo)表示生長(zhǎng)素濃度，縱坐標(biāo)只能表示生長(zhǎng)素促進(jìn)的程度先增加后減少，不能表現(xiàn)生長(zhǎng)素的抑制作用，C錯(cuò)誤;

D、橫坐標(biāo)表示pH,縱坐標(biāo)表示酶的活性，pH12時(shí)可能導(dǎo)致酶失活，逐漸降低到2過程中酶的活性將不再變化，D

錯(cuò)誤；

故選B。

【點(diǎn)睛】

結(jié)合酶促反應(yīng)的影響因素、生長(zhǎng)素的兩重性及植物細(xì)胞的失水和吸水的過程分析題圖是解題的關(guān)鍵。

2、C

【解析】

分析系譜圖：根據(jù)口訣“無(wú)中生有為隱性，隱性看女病，女病男正非伴性”和“有中生無(wú)為顯性，顯性看男病，男病女正

非伴性”，無(wú)法準(zhǔn)確判斷該遺傳病的遺傳方式。系譜圖中有女患者，所以該遺傳病不可能是伴Y遺傳；I代男患者的

女兒正常，所以該病也不可能是伴X染色體顯性遺傳病，據(jù)此分析。

【詳解】

A.家系調(diào)查可以確定該遺傳病的遺傳方式和遺傳特點(diǎn)，通過社會(huì)群體調(diào)查可以調(diào)查該遺傳病的發(fā)病率，A錯(cuò)誤；

B.根據(jù)題意，該病多見于手工勞動(dòng)者，因此該病的癥狀表現(xiàn)是基因與環(huán)境因素共同作用的結(jié)果，B錯(cuò)誤；

C.從系譜圖看，該病有世代遺傳的特點(diǎn)，且男女患病率相似，最可能是常染色體顯性遺傳病，C正確；

D.根據(jù)此圖題圖無(wú)法判斷出此病的遺傳方式，所以IV中患者與正常人婚配后代是否患病無(wú)法判斷，D錯(cuò)誤。

3、D

【解析】

根據(jù)題意分析，“一種為生成ATP的F-型質(zhì)子泵，生成ATP的場(chǎng)所為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、類囊體薄膜、線粒體內(nèi)膜和線粒體

基質(zhì)”，“兩種為消耗ATP的P-型質(zhì)子泵和V-型質(zhì)子泵，可見這兩種質(zhì)子泵為H+逆濃度梯度運(yùn)輸”。

【詳解】

A、根據(jù)以上分析可知，V-型質(zhì)子泵為H+逆濃度梯度運(yùn)輸，屬于主動(dòng)運(yùn)輸，A錯(cuò)誤；

B、類囊體薄膜是生成ATP的場(chǎng)所之一，該膜上的質(zhì)子泵為F—型，B錯(cuò)誤；

C、H+逆濃度梯度運(yùn)輸需要消耗ATP,而F—型質(zhì)子泵是一種能生成ATP的質(zhì)子泵，C錯(cuò)誤；

D、線粒體內(nèi)膜是生成ATP的場(chǎng)所之一，該膜上的質(zhì)子泵為F—型，D正確。

故選D。

4、D

【解析】

一對(duì)患有抗維生素D佝僂病的夫婦，該病為伴X染色體顯性遺傳病，由于父親患病，因此所生女兒一定患病，A錯(cuò)誤;

鐮刀型細(xì)胞貧血癥的根本原因是血紅蛋白基因中一個(gè)堿基對(duì)被替換，B錯(cuò)誤；血友病是伴X染色體隱性遺傳病(用H、

h表示)，父親正常，母親患血友病，生了一個(gè)性染色體為XXY的凝血正常的兒子，則這對(duì)夫婦的基因型為XHYxXhXh,

兒子的基因型為XHXhY?根據(jù)兒子的基因型可知，他是由含XHY的精子和含Xh的卵細(xì)胞結(jié)合形成的受精卵發(fā)育而來(lái)

的，即其形成原因可能是精子異常，C錯(cuò)誤；假設(shè)控制該遺傳病的基因?yàn)锳、a,已知該病的發(fā)病率為19%,則正常

(aa)的概率為81%,根據(jù)哈迪-溫伯格定律，a的基因頻率為90%,A的基因頻率為10%,由此人群中AA的基因

型概率為=10%xl0%=l%,Aa的基因型頻率=2xl0%x90%=18%,所以患病妻子的基因型為Aa的概率為18%/

(18%+1%)=18/19,其后代不患該病的概率為18/19x1/2=9/19,D正確。

【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握基因頻率和基因型頻率的關(guān)系，能夠利用基因型頻率計(jì)算基因頻率，進(jìn)而計(jì)算出正常

個(gè)體中雜合子的概率，最后計(jì)算后代不患病的概率。

5、B

【解析】

分析題圖可知，在2分鐘之前，處于甲溶液中的洋蔥表皮細(xì)胞液泡的直徑減小的速度更快，因此甲溶液濃度大，A錯(cuò)

誤；

2-6min乙溶液中細(xì)胞的直徑不斷減小，則其吸水能力逐漸增大，B正確；

甲溶液中2min后細(xì)胞已經(jīng)開始吸收水分了，說明在這之前溶質(zhì)分子已經(jīng)開始進(jìn)入細(xì)胞了，C錯(cuò)誤；

由于細(xì)胞壁的伸縮性很小，所以甲溶液中細(xì)胞體積與液泡體積的變化量是不相等的，D錯(cuò)誤。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握植物細(xì)胞質(zhì)壁分離的原理，根據(jù)單位時(shí)間液泡直徑下降的速率判斷兩種溶液的濃度大小。

6、D

【解析】

興奮性神經(jīng)遞質(zhì)與突觸后膜上的受體結(jié)合，會(huì)導(dǎo)致突觸后膜對(duì)Na+的通透性增大，使鈉離子大量?jī)?nèi)流產(chǎn)生外負(fù)內(nèi)正的

動(dòng)作電位，抑制性神經(jīng)遞質(zhì)與突觸后膜上的受體結(jié)合，會(huì)導(dǎo)致突觸后膜對(duì)陰離子的通透性增大，最終會(huì)導(dǎo)致突觸后神

經(jīng)元膜電位電位差變得更大。

【詳解】

A、手和腳有時(shí)會(huì)磨出“水泡”，其中的液體主要是組織液，A正確；

B、在免疫細(xì)胞中，吞噬細(xì)胞對(duì)抗原沒有特異性識(shí)別能力，漿細(xì)胞也不能識(shí)別抗原，B正確；

C、對(duì)植物激素的研究發(fā)現(xiàn)，同一種激素，在不同情況下作用也有差異，如同一濃度的生長(zhǎng)素對(duì)不同器官表現(xiàn)的生理

效應(yīng)不同，C正確；

D、神經(jīng)遞質(zhì)與突觸后膜上的受體結(jié)合，由于神經(jīng)遞質(zhì)的種類不同，故會(huì)使突觸后膜的電位發(fā)生逆轉(zhuǎn)或電位差更大，D

錯(cuò)誤。

故選D。

二、綜合題：本大題共4小題

7、翻譯RNA復(fù)制張白麗細(xì)胞免疫和體液免疫EBV的遺傳物質(zhì)RNA

是單鏈，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，容易突變DNA分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，便于運(yùn)輸和保存(不會(huì)誘發(fā)針對(duì)載體自身免疫反應(yīng)等)破

壞正常細(xì)胞功能等動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合

【解析】

試題分析：本題以圖文結(jié)合的形式，綜合考查學(xué)生對(duì)中心法則的、特異性免疫及其應(yīng)用、生產(chǎn)單克隆抗體等知識(shí)的理

解和掌握情況。解答此類問題需熟記并理解相關(guān)的基礎(chǔ)知識(shí)、形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，依據(jù)題圖中呈現(xiàn)的信息，

準(zhǔn)確識(shí)別圖中數(shù)字所示生理過程，進(jìn)而進(jìn)行相關(guān)問題的解答。

(1)分析圖示可知，過程②為以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)的翻譯過程；③為以mRNA為模板合成-RNA的RNA復(fù)制

過程。

(2)結(jié)合對(duì)(1)分析可知：埃博拉病毒在宿主巨噬細(xì)胞中遺傳信息的流動(dòng)方向?yàn)樵D硬3蛋白質(zhì)。

(3)EBV病毒為寄生生物，感染機(jī)體后可引發(fā)細(xì)胞免疫和體液免疫。埃博拉病毒(EBV)的遺傳物質(zhì)RNA是單鏈，結(jié)

構(gòu)不穩(wěn)定，容易突變。

(4)與普通疫苗相比，利用基因工程研制的DNA疫苗具有DNA分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、便于運(yùn)輸和保存等優(yōu)點(diǎn)；但若注射劑量

高，可能會(huì)整合到宿主基因組內(nèi)而引起破壞正常細(xì)胞功能等

(5)若制備埃博拉病毒的單克隆抗體，必須借助動(dòng)物細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。

8、腫瘤壞死因子《(或TNF-a)聚乙二醇(PEG)細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%克隆化培

養(yǎng)每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)作為診

斷試劑、用于治療疾病、用于運(yùn)載藥物

【解析】

單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來(lái)制備，雜交瘤

抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融

合為雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體，又能無(wú)限增殖。用具備這種特性的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群，可制

備針對(duì)一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。

題圖分析，單抗制備過程為：將特定的抗原注射小鼠一篩選出產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞一誘導(dǎo)細(xì)胞融合一用HAT培養(yǎng)

基篩選出雜交瘤細(xì)胞一篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞一大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。單克隆抗體典型優(yōu)點(diǎn)

是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。單克隆抗體最廣泛的用途是作為診斷試劑，也

可用于治療疾病、用于運(yùn)載藥物，主要是用于癌癥治療、也有少量是是用于其他治療的。

【詳解】

(1)要制備抗TNF-a單克隆抗體需要給小鼠注射腫瘤壞死因子a(TNF-a),即圖中的抗原A。常用物理或化學(xué)方法促

融，最常用的化學(xué)促融劑是聚乙二醇(PEG),細(xì)胞融合完成后，由于細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%,所以

細(xì)胞融合完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、淋巴細(xì)胞自

身融合細(xì)胞。

(2)HAT培養(yǎng)基的作用是選擇性培養(yǎng)篩選出雜交瘤細(xì)胞，在抗體檢測(cè)之前需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，以增加雜交瘤細(xì)胞

數(shù)量。經(jīng)多次篩選，就可獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)生一種單一抗體的原因是每一個(gè)B淋

巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。

（3）單克隆抗體典型優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，單克隆抗

體技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的應(yīng)用之一。故單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。

（4）單克隆抗體最廣泛的用途是作為診斷試劑，也可用于治療疾病、用于運(yùn)載藥物，主要是用于癌癥治療、也有少量

是是用于其他治療的。

【點(diǎn)睛】

熟知單克隆抗體制備流程中各階段的原理和要點(diǎn)是解答本題的關(guān)鍵！熟知單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)及其應(yīng)用是解答本題的另

一關(guān)鍵！

9、寄生RNA聚合酶黏性末端或平末端磷酸二酯鍵膠原蛋白酶細(xì)胞的接觸抑制傳代血

清、血漿

【解析】

1、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。構(gòu)建

基因表達(dá)載體時(shí)需要用同種限制酶切割目的基因和載體，以產(chǎn)生相同的末端，然后用DNA連接酶連接，恢復(fù)被切開

的核昔酸之間的磷酸二酯鍵，RNA聚合酶能夠與啟動(dòng)子識(shí)別并結(jié)合催化轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行，這是是外源基因在受體細(xì)胞中啟

動(dòng)表達(dá)的關(guān)鍵。

2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）-剪碎一用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理

分散成單個(gè)細(xì)胞一制成細(xì)胞懸液t轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)一貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白的處理分

散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

【詳解】

（1）腺病毒屬于動(dòng)物病毒，其無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，營(yíng)寄生生活，必須寄生于宿主的活細(xì)胞中才能繁殖；用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載

體上應(yīng)具有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位啟動(dòng)子，這樣才能驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄形成mRNA,最終合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)。

（2）構(gòu)建腺病毒載體時(shí)，先用同種限制酶對(duì)腺病毒DNA和外源基因進(jìn)行切割，可以獲得相同的黏性末端或平末端，

再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)脫氧核甘酸之間的磷酸二酯鍵。

（3）對(duì)山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理得到單個(gè)成纖維細(xì)胞，便于細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸；培養(yǎng)至貼滿

瓶壁時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制；這時(shí)重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)進(jìn)行傳代培養(yǎng);

由于人們對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，因此培養(yǎng)時(shí)使用的合成培養(yǎng)基，通常需加入血漿、血清

等一些天然成分，以滿足細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的全面要求。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程和細(xì)胞工程的知識(shí)點(diǎn)，要求學(xué)生掌握基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程以及啟動(dòng)子的作用，把握操作工具限

制酶和DNA連接酶的應(yīng)用及其作用結(jié)果，理解動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程和特點(diǎn)，把握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的原代培養(yǎng)和

傳代培養(yǎng)的概念，識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件，這是解決問題的關(guān)鍵。

10、逆轉(zhuǎn)錄酶限制性核酸內(nèi)切酶氫T-DNAfps基因或fps基因的mRNA（寫出一項(xiàng)即可得分）較

多農(nóng)桿菌可感染植物，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中青蒿素產(chǎn)量

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌

轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法：將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)

胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜

交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分