高考生物二輪復(fù)習(xí) 基因工程和細(xì)胞工程專題卷5試題

基因工程和細(xì)胞工程一、單選題1．建立基因文庫時(shí)，下列最可能作為載體是的（）A.大腸桿菌B.大腸桿菌的質(zhì)粒C.鏈狀DNA分子D.環(huán)狀RNA分子【答案】B【解析】本題考查基因工程中的運(yùn)載體，要求考生識(shí)記基因工程中運(yùn)載體的種類、功能，理解基因文庫的構(gòu)建過程，方可正確答題。基因工程中使用的載體有質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等，其中最常使用的是大腸桿菌的質(zhì)粒，能攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，構(gòu)建基因文庫，所以B正確，ACD錯(cuò)誤?！军c(diǎn)睛】學(xué)生易錯(cuò)易混知識(shí)：1．錯(cuò)誤認(rèn)為基因文庫是直接保存基因。建立基因文庫時(shí)，需將目的基因?qū)胧荏w菌細(xì)胞內(nèi)，然后培養(yǎng)受體菌，即通過保存受體菌種以保存目的基因，而不是直接保存基因。2.對質(zhì)粒是基因工程中常用運(yùn)載體的原因理解不清晰透徹。質(zhì)粒是基因工程中常用的運(yùn)載體，是因?yàn)椋?）質(zhì)粒中含有一個(gè)至多個(gè)限制酶切位點(diǎn)，供目的基因插入其中；2）具有自我復(fù)制能力，導(dǎo)入受體細(xì)胞后，能在受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行自我復(fù)制，或是整合到染色體DNA上，隨染色體DNA同步復(fù)制；3）質(zhì)粒上有特殊的標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和篩選。2．下列有關(guān)基因工程中啟動(dòng)子的說法正確的是A.啟動(dòng)子是一段特殊的RNA片段B.啟動(dòng)子是DNA聚合酶的識(shí)和結(jié)合位點(diǎn)C.啟動(dòng)子可以驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄D.啟動(dòng)子和起始密碼子是同一概念【答案】C【解析】啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄形成信使RNA，起始密碼子存在于mRNA上，是翻譯的起點(diǎn)，故C正確?！军c(diǎn)睛】解答本題要注意以下幾點(diǎn)：1、啟動(dòng)子是啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程的結(jié)構(gòu)，故啟動(dòng)子存在于DNA上。2、啟動(dòng)子與起始密碼子有本質(zhì)的區(qū)別，起始密碼子存在于mRNA上，是翻譯的起點(diǎn)。3．下列關(guān)于cDNA文庫及其建立過程的敘述中，哪一項(xiàng)是不正確的（）A.cDNA文庫包含了某種生物的部分基因B.需從特定組織或細(xì)胞中提取DNA或RNAC.利用mRNA的反轉(zhuǎn)錄合成互補(bǔ)DNA片段D.合成的互補(bǔ)DNA片段需要連接在載體上【答案】B【解析】建立cDNA文庫需從特定組織或細(xì)胞中提取RNA，利用mRNA的反轉(zhuǎn)錄合成互補(bǔ)DNA片段，合成的互補(bǔ)DNA片段需要連接在載體上，導(dǎo)入受體菌群中保存。由于特定組織或細(xì)胞中只有部分基因轉(zhuǎn)錄生成mRNA，所以cDNA文庫只包含了某種生物的部分基因。4．將一個(gè)用32P和35S充分標(biāo)記的人體肝細(xì)胞與沒有標(biāo)記的小鼠肝細(xì)胞(2N=40)融合，所形成的雜種細(xì)胞A．在有絲分裂后期時(shí)，含32P的染色體數(shù)共有46條B．不具有發(fā)育成完整“人一鼠”雜種個(gè)體的潛在能力C．能正常分化發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體D．細(xì)胞膜上含35S的蛋白質(zhì)均勻分布的過程體現(xiàn)了膜的結(jié)構(gòu)特性【答案】D【解析】DNA復(fù)制是半保留復(fù)制，在有絲分裂后期時(shí)，含32P的染色體數(shù)共有92條；雜種細(xì)胞含有人－鼠細(xì)胞的基因，具有發(fā)育成完整“人一鼠”雜種個(gè)體的潛能；由于動(dòng)物細(xì)胞高度分化，該雜種細(xì)胞不一定能正常分化發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體；細(xì)胞膜上含35S的蛋白質(zhì)均勻分布的過程體現(xiàn)了膜的結(jié)構(gòu)特性。5．下圖中的供體DNA中含有無限增殖調(diào)控基因，該基因能激發(fā)動(dòng)物細(xì)胞的分裂，圖示是利用該基因制備新型單克隆抗體的過程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A.經(jīng)酶A處理后Ⅰ與質(zhì)粒具有相同的黏性末端B.Ⅱ是已免疫的B淋巴細(xì)胞C.Ⅲ既能無限增殖又能分泌特異性抗體D.該過程涉及轉(zhuǎn)基因技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)【答案】D【解析】供體DNA與質(zhì)粒用同一種限制酶處理，可使I與質(zhì)粒具有相同的粘性末端，A正確；II受體細(xì)胞，要具有分泌抗體的能力，所以是已免疫的B淋巴細(xì)胞，B正確；經(jīng)檢測和篩選所得到的重組細(xì)胞Ⅲ既有無限增殖的能力又能分泌特異性抗體，C正確；該過程涉及轉(zhuǎn)基因技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，但沒有涉及動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，D錯(cuò)誤?！究键c(diǎn)定位】轉(zhuǎn)基因技術(shù)【名師點(diǎn)睛】本題通過圖示介紹了基因工程技術(shù)制備單克隆抗體的方法，還可以通過細(xì)胞工程實(shí)現(xiàn)：向小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體雜交瘤細(xì)胞，再將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，然后從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取單克隆抗體。6．水稻（基因型為AaBb）的花藥通過無菌操作，接入試管，經(jīng)過如下過程培育試管苗。以下選項(xiàng)中正確的是（）A．a(chǎn)用花藥離體培養(yǎng)法獲得單倍體植株；b通過有絲分裂產(chǎn)生愈傷組織；c培養(yǎng)基中至少應(yīng)有乙烯和脫落酸；d試管苗的生長發(fā)育不需要光照；B．a(chǎn)用花藥離體培養(yǎng)法獲得二倍體植株；b通過減數(shù)分裂產(chǎn)生愈傷組織；c培養(yǎng)基中至少應(yīng)有生長素和細(xì)胞分裂素；d試管苗的生長發(fā)育不需光照C．a(chǎn)用花藥離體培養(yǎng)法獲得單倍體植株；b通過有絲分裂產(chǎn)生愈傷組織；c培養(yǎng)基中至少應(yīng)有生長素和細(xì)胞分裂素；d試管苗的生長發(fā)育需要光照D．a(chǎn)用花藥離體培養(yǎng)法獲得二倍體植株；b通過有絲分裂產(chǎn)生愈傷組織；c培養(yǎng)基中至少應(yīng)有乙烯和脫落酸；d試管苗的生長發(fā)育需要光照【答案】C【解析】試題分析：a用花藥離體培養(yǎng)法獲得單倍體植株，長的弱小，高度不育；b通過有絲分裂和脫分化產(chǎn)生愈傷組織；c培養(yǎng)基中至少應(yīng)有生長素和細(xì)胞分裂素，在再分化過程中，生長素高，促進(jìn)根的分化，細(xì)胞分裂是比例高，促進(jìn)芽的分化d試管苗的生長發(fā)育需要光照，原因是①葉綠素的合成需要光照；②試管苗需要光進(jìn)行光合作用制造有機(jī)物提供營養(yǎng)物質(zhì)。故選C?？键c(diǎn)：本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)圖能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題的能力。7．下列敘述中能說明目的基因完成表達(dá)的是A.重組質(zhì)粒成功地導(dǎo)入受體細(xì)胞中B.能檢檢測到受體細(xì)胞中出現(xiàn)了標(biāo)記基因C.受體細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)目的基因轉(zhuǎn)錄生成的mRNAD.受體細(xì)胞中存在目的基因表達(dá)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)【答案】D【解析】由于基因的選擇性表達(dá)，重組質(zhì)粒成功地導(dǎo)入受體細(xì)胞中，不一定能夠表達(dá)出相關(guān)的蛋白質(zhì)，A錯(cuò)誤；能檢檢測到受體細(xì)胞中出現(xiàn)了標(biāo)記基因，說明目的基因可能已經(jīng)導(dǎo)入受體細(xì)胞，但是不能說明目的基因已經(jīng)表達(dá)，B錯(cuò)誤；基因的表達(dá)的最終產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，而不是mRNA，C錯(cuò)誤；受體細(xì)胞中存在目的基因表達(dá)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，說明該基因已經(jīng)成功表達(dá)了，D正確。8．下列過程中，沒有發(fā)生膜融合的是A.植物體細(xì)胞雜交B.制備單克隆抗體C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)D.漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體【答案】C【解析】略9．下圖是人工種子的模式圖，請據(jù)圖判斷正確的是A．③④⑤分別相當(dāng)于種子的種皮、胚乳和胚B．③是一層半透膜，可通過生物降解分解C．④是愈傷組織D．在⑤中添加固氮細(xì)菌對增加產(chǎn)量沒有作用【答案】B【解析】試題分析：根據(jù)圖示分析可知，③④⑤分別相當(dāng)于種子的種皮、胚和胚乳，A項(xiàng)錯(cuò)誤；③是一層半透膜，可通過生物降解分解，B項(xiàng)正確；④是將來能發(fā)育成完整植株的結(jié)構(gòu)，可以是胚狀體或不定芽或頂芽或腋芽等，C項(xiàng)錯(cuò)誤；在⑤中添加固氮細(xì)菌，有利于增加作物產(chǎn)量，D項(xiàng)錯(cuò)誤?？键c(diǎn)：植物的組織培養(yǎng)10．2001年2月，一只背上長著“人耳”的老鼠在北京展覽館與觀眾見面，這只老鼠其實(shí)是一只切去脾臟的老鼠，它背上的“人耳”是一種高分子化學(xué)材料聚羥基乙酸作為模型支架用生物方法增殖成的，增殖“人耳鼠”的生物工程技術(shù)是()A．細(xì)胞培養(yǎng)B.細(xì)胞融合C.動(dòng)物胚胎移植D.細(xì)胞核移植【答案】A【解析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)使細(xì)胞數(shù)目增多，而形成組織器官11．某科研小組利用番茄細(xì)胞原生質(zhì)體培育遺傳學(xué)改良植株，據(jù)圖判斷，下列說法正確的是A.①過程的目的是去除細(xì)胞膜B.②過程中原生質(zhì)體的變異是不定向的C.③過程原生質(zhì)體的分化程度提髙D.④過程不需要光照處理【答案】B【解析】①過程的目的是去除細(xì)胞壁，A項(xiàng)錯(cuò)誤；②過程中原生質(zhì)體發(fā)生不定向的基因突變，B項(xiàng)正確；③過程為原生質(zhì)體的脫分化，分化程度降低，C項(xiàng)錯(cuò)誤；④過程需要光照處理，以利于葉綠素的形成，D項(xiàng)錯(cuò)誤。【點(diǎn)睛】組織培養(yǎng)過程中光照的處理：（1）脫分化階段：不進(jìn)行光照，以免傷害細(xì)胞；（2）再分化階段：需要光照，以利于葉綠素的形成。12．下列有關(guān)人工種子及其培育過程的敘述不正確的是()A．人工種子一般用離體的植物細(xì)胞通過組織培養(yǎng)技術(shù)獲得B．人工種子克服了有些作物品種繁殖能力差或發(fā)芽率低等問題C．同一批次的人工種子可以保證具有相同的遺傳物質(zhì)D．人工種子的胚狀體是由未分化的、具有分裂能力的細(xì)胞構(gòu)成【答案】D【解析】試題分析：人工種子是用離體的植物細(xì)胞經(jīng)過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的，故A正確；人工種子克服了有些作物繁殖能力差或發(fā)芽率低的問題，故B正確；因?yàn)橹参锝M織培養(yǎng)屬于無性繁殖，同一批次的人工種子可以保證有相同的遺傳物質(zhì)，故C正確；人工種子的胚狀體已經(jīng)發(fā)生了細(xì)胞分化，故D錯(cuò)誤?？键c(diǎn)：本題考查人工種子的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。13．關(guān)于應(yīng)用基因工程治療人類遺傳病的敘述，不正確的是（）A.基因治療是治療遺傳病的最有效手段B.進(jìn)行基因治療時(shí)，基因的受體細(xì)胞是受精卵C.基因治療并不是對患者體內(nèi)細(xì)胞的缺陷基因改造D.基因治療時(shí)可只對患者部分細(xì)胞輸入正常基因【答案】B【解析】基因治療是治療遺傳病的最有效手段，A正確；進(jìn)行基因治療時(shí)，基因的受體細(xì)胞是有基因缺陷的體細(xì)胞而不是受精卵，B錯(cuò)誤；基因治療并不是對患者體內(nèi)細(xì)胞的缺陷基因改造而是對患者部分細(xì)胞輸入正常基因，C、D正確。14．下表是基因工程操作中鑒定含目的基因植株的4種方法。請預(yù)測同一后代種群中，4種方法檢出的含目的基因植株的比例最小的是（）選項(xiàng)方法檢驗(yàn)對象檢測目標(biāo)APCR擴(kuò)增基因組DNA目的基因B分子雜交總mRNA目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物C抗原-抗體雜交總蛋白質(zhì)目的基因編碼的蛋白質(zhì)D噴灑除草劑幼苗抗除草劑幼苗A.AB.BC.CD.D【答案】D【解析】PCR擴(kuò)增技術(shù)可以在體外大量增殖目的基因，A含量最多；導(dǎo)入到受體細(xì)胞中的目的基因不一定完成轉(zhuǎn)錄，則利用分子雜交檢測目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，含量不一定多；導(dǎo)入到受體細(xì)胞中的目的基因不一定完成表達(dá)，則利用分子雜交檢測目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，含量不一定多；將目的基因（抗除草劑基因）導(dǎo)入受體細(xì)胞的概率較小，則噴灑除草劑檢測幼苗，其中抗除草劑幼苗出現(xiàn)的概率較低。故D項(xiàng)檢出的含目的基因植株的比例最小。故選D。15．全能干細(xì)胞能夠讓植物在整個(gè)生命周期中產(chǎn)生新的器官，是植物生長發(fā)育的源泉和信號(hào)調(diào)控中心，但是到目前為止，人們對于干細(xì)胞組織中心建立和維持的機(jī)制仍然知之甚少。中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所的李傳友課題小組發(fā)現(xiàn)了一個(gè)在植物根尖干細(xì)胞維持中起重要作用的基因，這一研究結(jié)果于2010年11月3日作為封面文章發(fā)表于國際著名雜志The

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Cell上。下列說法不正確的是（）A．植物全能干細(xì)胞分化形成不同組織細(xì)胞是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果B．植物全能干細(xì)胞有細(xì)胞周期，全能干細(xì)胞分化形成的導(dǎo)管細(xì)胞沒有細(xì)胞周期C．植物全能干細(xì)胞分化形成根、莖、葉的過程一般是不可逆的D．植物全能干細(xì)胞分化形成根、莖、葉的過程體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性【答案】D【解析】略16．“多利”的產(chǎn)生與下列哪項(xiàng)技術(shù)無關(guān)（）A.人工授精B.胚胎移植C.體外培養(yǎng)D.核移植【答案】A【解析】17．從基因型為Aa的綠色植物某器官中獲取組織，顯微觀察如下圖。下列對該圖所示細(xì)胞的敘述正確的是（）A．若將X細(xì)胞離體培養(yǎng)成完整植株，此過程要涉及胰蛋白酶和膠原蛋白酶B．若將Y細(xì)胞離體培養(yǎng)成幼苗后用秋水仙素處理，目的是使其發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)變異C．X與Y兩個(gè)細(xì)胞進(jìn)行雜交，形成雜種細(xì)胞，發(fā)育成基因型為AAaa的雜種植株是不可育的D．如果X與Y細(xì)胞所含蛋白質(zhì)種類有明顯差異，其根本原因是信使RNA的不同【答案】D【解析】植物細(xì)胞經(jīng)離體培養(yǎng)成完整植株，此過程不需要纖維素酶和果膠酶，進(jìn)行植物細(xì)胞融合時(shí)則需要纖維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞，去除細(xì)胞壁；將幼苗用秋水仙素處理的主要目的是誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍；X與Y兩個(gè)細(xì)胞進(jìn)行雜交，形成雜種細(xì)胞，發(fā)育成基因型為AAaa的雜種植株為四倍體是可育的；如果X與Y細(xì)胞所含蛋白質(zhì)種類有明顯差異，其根本原因是基因的選擇性表達(dá)形成不同的信使RNA，從而指導(dǎo)合成了不同的蛋白質(zhì)?！究键c(diǎn)定位】植物組織培養(yǎng)，植物細(xì)胞雜交18．下列有關(guān)單克隆抗體制備及其應(yīng)用的敘述，不正確的是()A.制備單克隆抗體運(yùn)用的技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)B.需要用選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞C.需要從雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞D.利用生物導(dǎo)彈治療癌癥就是利用了單克隆抗體清除癌細(xì)胞【答案】D【解析】制備單克隆抗體過程是先效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，接著篩選出能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)和體外培養(yǎng)，提取單克隆抗體，則運(yùn)用的技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，A正確；單克隆抗體的制備過程需要兩次篩選，第一次是用選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞，去除未融合的細(xì)胞和自身融合細(xì)胞，B正確；第二次篩選是從雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞，再進(jìn)行體內(nèi)和體外培養(yǎng)，提取單克隆抗體，C正確；利用生物導(dǎo)彈治療癌癥就是利用了單克隆抗體的定位導(dǎo)向作用將藥物帶到癌細(xì)胞所在的位置，D錯(cuò)誤。【考點(diǎn)定位】單克隆抗體的制備過程【名師點(diǎn)睛】單克隆抗體制備的細(xì)胞來源：B淋巴細(xì)胞：能產(chǎn)生特異性抗體，在體外不能無限繁殖；骨髓瘤細(xì)胞：不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無限繁殖．雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。生物導(dǎo)彈：單克隆抗體+放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素（借助單克隆抗體的定位導(dǎo)向作用將藥物定向帶到癌細(xì)胞，在原位殺死癌細(xì)胞．療效高，副作用小，位置準(zhǔn)確）。19．科學(xué)家將β－干擾素基因進(jìn)行定點(diǎn)突變導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá)，使β－干擾素第十七位的半胱氨酸，改變成絲氨酸，結(jié)果大大提高了β－干擾素的抗病毒活性，并且提高了儲(chǔ)存穩(wěn)定性。該生物技術(shù)為（）A.蛋白質(zhì)工程B.基因工程C.基因突變D.細(xì)胞工程【答案】A【解析】據(jù)題意可看出，通過定點(diǎn)突變干擾素基因，從而改造干擾素這種蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，屬于蛋白質(zhì)工程中的小改。【考點(diǎn)定位】蛋白質(zhì)工程20．基因工程切割目的基因的工具是（）A.DNA酶B.限制酶C.DNA連接酶D.DNA聚合酶【答案】B【解析】基因工程切割目的基因的工具是限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）；DNA酶能將DNA水解成基本單位，A不符合題意；DNA連接酶能將DNA片段連接成鏈，C不符合題意；DNA聚合酶能將脫氧核苷酸連接成鏈，D不符合題意。故選B?！究键c(diǎn)】基因工程【點(diǎn)睛】熟悉基因工程所用到的工具，以及相關(guān)酶的作用。二、非選擇題21．（2015秋?朔州校級(jí)期末）自然界中有一種含有葉綠體的原生動(dòng)物﹣﹣眼蟲，這說明植物的細(xì)胞器同樣可以在某些動(dòng)物細(xì)胞中存活．某同學(xué)提出問題：“動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞之間可以實(shí)現(xiàn)雜交嗎？”他嘗試設(shè)計(jì)出下列具體的實(shí)驗(yàn)方案．結(jié)合實(shí)驗(yàn)方案回答：實(shí)驗(yàn)原理：根據(jù)眼蟲的特點(diǎn)，動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞之間在理論上是可以實(shí)現(xiàn)雜交的．實(shí)驗(yàn)步驟如下：（1）①中選的植物材料細(xì)胞中，必須有的細(xì)胞器是．（2）③過程所用的酶是．（3）④過程除了用電激之外，還可以用、等作為誘導(dǎo)因素．（4）在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，要強(qiáng)調(diào)所用的器械的滅菌和無菌操作，原因是各種雜菌可以在培養(yǎng)基上面迅速生長，培養(yǎng)基一旦被污染，迅速生長的各種雜菌不但會(huì)和爭奪營養(yǎng)，而且這些雜菌生長的過程中會(huì)生成大量導(dǎo)致培養(yǎng)物迅速死亡．（5）在⑤⑥過程中，通常要添加血清，原因是．【答案】（1）葉綠體（2）纖維素酶和果膠酶（3）滅活的病毒、聚乙二醇、振動(dòng)、離心（任意兩個(gè)）（4）培養(yǎng)物對培養(yǎng)物有害的物質(zhì)（5）補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的缺乏【解析】試題分析：分析題圖：圖示為動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞的雜交過程，①→②表示脫分化過程；③表示去壁過程；④是誘導(dǎo)細(xì)胞融合的過程；⑤是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程；⑥是融合的胚胎細(xì)胞；⑦→⑧表示胚胎移植過程；⑧→⑨表示妊娠過程．解：（1）根據(jù)題意，眼蟲中含有葉綠體，實(shí)現(xiàn)植物與動(dòng)物細(xì)胞雜交，選擇的植物細(xì)胞要有葉綠體．（2）植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素素和果膠，去除植物細(xì)胞壁用纖維素酶和果膠酶．（3）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合可用滅活的病毒、聚乙二醇、振動(dòng)、離心、電激等方法．（4）培養(yǎng)基一旦被污染，培養(yǎng)基的培養(yǎng)物與雜菌之間是競爭關(guān)系，兩者爭奪營養(yǎng)，并且雜菌生長的過程中會(huì)生成大量對培養(yǎng)物有害的物質(zhì)導(dǎo)致培養(yǎng)物迅速死亡．（5）人們對細(xì)胞所需要的營養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，所以動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要添加血清，補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的缺乏．故答案為：（1）葉綠體（2）纖維素酶和果膠酶（3）滅活的病毒、聚乙二醇、振動(dòng)、離心（任意兩個(gè)）（4）培養(yǎng)物對培養(yǎng)物有害的物質(zhì)（5）補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的缺乏考點(diǎn)：細(xì)胞融合的概念及方法；動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程．22．選考內(nèi)容課本填空（1）葡萄酒制作過程中，在沒有嚴(yán)格滅菌的條件下，通過和的措施，使酵母菌大量繁殖而成為優(yōu)勢菌種。（2）某水樣的大腸桿菌嚴(yán)重超標(biāo)，常采用法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)。如果要對水樣中的大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，常用的培養(yǎng)基應(yīng)選取A．MS固體培養(yǎng)基B．MS液體培養(yǎng)基C．LB固體培養(yǎng)基D．LB液體培養(yǎng)基（3）進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，待生根后，將苗移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或塑料布保持以上的濕度，2~3天后打開玻璃罩逐漸降低濕度進(jìn)行鍛煉，直到將罩全部打開處于自然濕度下為止。（4）“二娃”政策實(shí)施后，大量高齡夫婦選擇“試管嬰兒”技術(shù)孕育二胎：要使精子和卵細(xì)胞在體外成功融合，首先須采集到成熟的卵細(xì)胞，此時(shí)需要用（激素）處理女方，達(dá)到的目的；同時(shí)對于男方提供的精子，須經(jīng)系列處理與培養(yǎng)，以達(dá)到狀態(tài)。受精卵形成后，經(jīng)人工培養(yǎng)至特定階段，借助胚胎移植技術(shù)回輸至女方體內(nèi)，經(jīng)過自然孕育，即得試管嬰兒。（5）對大面積燒傷病人，借助技術(shù)可獲取大量自身健康皮膚用于移植。培養(yǎng)的條件需要、合適的營養(yǎng)、適宜的溫度、通入含有95%空氣和5%CO2混合氣體（維持培養(yǎng)液的pH）。【答案】（1）控制溫度通入氧氣（2）稀釋涂布平板D（3）80%（4）促性腺激素超數(shù)排卵獲能（5）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)無菌、無毒的環(huán)境【解析】（1）葡萄酒制作過程中，在沒有嚴(yán)格滅菌的條件下，通過控制溫度和通入氧氣的措施，使酵母菌大量繁殖而成為優(yōu)勢菌種；（2）對樣品中的菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)常采用稀釋涂布平板法，如果要對水樣中的大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，常用LB液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)；（3）進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)練苗時(shí)，要用玻璃罩或塑料布保持80%以上的濕度，2~3天后打開玻璃罩逐漸降低濕度進(jìn)行鍛煉，直到將罩全部打開處于自然濕度下為止；（4）采集卵母細(xì)胞時(shí)，需要用促性腺激素處理女方，使其超數(shù)排卵，同時(shí)對于男方提供的精子，須經(jīng)獲能處理才能進(jìn)行受精；（5）對于大面積燒傷病人，借助動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可獲取大量自身健康皮膚用于移植，培養(yǎng)的條件需要無菌、無毒的環(huán)境、合適的營養(yǎng)、適宜的溫度、通入含有95%空氣和5%CO2混合氣體（維持培養(yǎng)液的pH）?！究键c(diǎn)定位】發(fā)酵工程、胚胎工程23．[生物一一選修3:現(xiàn)代生物科技專題]某重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室課題研究組欲將一株野生雜草的抗病基因轉(zhuǎn)給一雙子葉農(nóng)作物。該農(nóng)作物含有高莖基因，植株過高容易倒伏，科學(xué)家欲通過基因工程操作抑制高莖基因的表達(dá)。結(jié)合所學(xué)知識(shí)分析下列問題：（1）課題研究組已經(jīng)獲得了抗性基因，欲體外大量擴(kuò)增該目的基因需采用___________技術(shù)，該技術(shù)的基本反應(yīng)過程：目的基因受熱______________后解鏈為單鏈，__________與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在___________DNA聚合酶的作用下進(jìn)行______________。（2）該基因工程操作的核心是____________。本研究中，欲將目的基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，常采用_________法。（3）科學(xué)家將高莖基因的__________基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，該基因產(chǎn)生的mRNA能夠與高莖基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA互補(bǔ)結(jié)合，形成____________，抑制高莖基因的表達(dá)。【答案】PCR變性引物Taq熱穩(wěn)定性延伸基因表達(dá)載體的構(gòu)建農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化反義雙鏈RNA【解析】試題分析：本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的培養(yǎng)過程，考查基因工程和PCR技術(shù)等相關(guān)知識(shí)，要求熟記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握各步驟中應(yīng)注意的細(xì)節(jié)，在此基礎(chǔ)上結(jié)合題意作答。

（1）要在體外大量擴(kuò)增該抗性基因可以采用PCR技術(shù)，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過程中，目的基因受熱變性，形成單鏈并與引物結(jié)合，在Taq熱穩(wěn)定性聚合酶的作用下延伸形成DNA。（2）基因工程操作的四個(gè)基本步驟是：獲取目的基因，基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞和目的基因的檢測與鑒定，其中核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。當(dāng)植物細(xì)胞作受體細(xì)胞時(shí)，一般采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)?。?）科學(xué)家將高莖基因的反義基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，反義基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA能夠與高莖基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA互補(bǔ)結(jié)合，形成雙鏈RNA，導(dǎo)致核糖體無法與高莖基因轉(zhuǎn)錄出的mRN結(jié)合，而翻譯受阻，從而抑制高莖基因的表達(dá)。24．回答下列（一）、（二）小題。（一）回答與果酒、果醋制作有關(guān)的問題。（1）在釀酒過程中，酵母菌只有在無氧條件下才能進(jìn)行___________。發(fā)酵開始時(shí)，發(fā)酵瓶內(nèi)看不到氣泡冒出的原因可能是酵母菌的___________使發(fā)酵瓶內(nèi)出現(xiàn)負(fù)壓。（2）下列各項(xiàng)中，與果酒中的酒精濃度有關(guān)的是___________（多選）。A.發(fā)酵時(shí)間B.發(fā)酵溫度C.培養(yǎng)液中糖的含量D.酵母菌對酒精濃度的耐受程度（3）不同地域所釀制的葡萄酒風(fēng)味會(huì)有一定的差異，出現(xiàn)風(fēng)味差異的原因除了與當(dāng)?shù)叵鄳?yīng)的土壤、氣候等地理環(huán)境因素和葡萄品種有關(guān)外，還可能與不同地域釀酒時(shí)所用的___________等生物因素有關(guān)。（4）在利用果酒制作果醋過程中，如果已獲得醋化醋桿菌菌種，可先在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行_____培養(yǎng)，然后接種到發(fā)酵瓶中。發(fā)酵瓶下口直角玻璃管內(nèi)塞有松緊合適的脫脂棉球，其作用是___________。開始收集果醋前，應(yīng)檢測發(fā)酵瓶流出液的___________。（二）通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)入法培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物的過程如下圖（圖中①?④表示相應(yīng)操作過程）。請回答：（1）如果外源基因的核苷酸序列是未知的，可以建立一個(gè)包括外源基因來源生物中所有基因的_________來獲取外源基因。圖中②過程涉及的工具酶是___________。（2）將外源遺傳物質(zhì)與受體植物細(xì)胞（包括原生質(zhì)體受體）遺傳物質(zhì)重新組合，除了轉(zhuǎn)基因技術(shù)外，還有___________等方法，這些方法解決了傳統(tǒng)育種方法存在的___________的缺陷。植物原生質(zhì)體的獲取可以在較高滲透壓環(huán)境下，用___________酶處理根尖、葉片、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞壁。（3）如果構(gòu)建重組細(xì)胞的目的是為了獲取重要的次生代謝產(chǎn)物（如某些中藥），可以通過大量培養(yǎng)特定______________________來達(dá)成目的。（4）如果農(nóng)桿菌侵染對象為某植物葉片，將被侵染的葉片除菌后進(jìn)行培養(yǎng)，最終得到轉(zhuǎn)基因植物。下列敘述中正確的是__________________。A.愈傷組織在合適條件下經(jīng)脫分化形成再生植株B.再生的芽在細(xì)胞分裂素含量較高的培養(yǎng)基上生根C.葉片在含合適濃度生長素的培養(yǎng)基上經(jīng)再分化形成愈傷組織D.愈傷組織在細(xì)胞分裂素和生長素配比較髙的培養(yǎng)基上形成芽【答案】酒精發(fā)酵需氧呼吸ABCD菌種擴(kuò)大過濾空氣pH基因文庫DNA連接酶細(xì)胞融合或顯微注射遠(yuǎn)緣親本難以雜交（或生殖隔離）纖維素酶和果膠細(xì)胞系D【解析】試題分析：本題考查果酒和果醋的制作、基因工程和植物細(xì)胞工程的基本操作原理的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生對知識(shí)的識(shí)記、理解和運(yùn)用能力。（一）（1）在釀酒過程中，酵母菌只有在無氧條件下才能進(jìn)行酒精發(fā)酵。發(fā)酵開始時(shí)，發(fā)酵瓶內(nèi)看不到氣泡冒出的原因可能是酵母菌的需氧呼吸使發(fā)酵瓶內(nèi)出現(xiàn)負(fù)壓。（2）在酵母菌的厭氧呼吸中，在細(xì)胞中酶的催化下，葡萄糖經(jīng)過一系列化學(xué)反應(yīng)，分解成不徹底的酒精和CO2，并合成少量能量。在該過程中，酒精產(chǎn)量的多少，受到發(fā)酵時(shí)間、發(fā)酵溫度、培養(yǎng)液中糖的含量和酵母菌對酒精濃度的耐受程度的影響。（3）不同地域所釀制的葡萄酒風(fēng)味會(huì)有一定的差異，出現(xiàn)風(fēng)味差異的原因除了與當(dāng)?shù)叵鄳?yīng)的土壤、氣候等地理環(huán)境因素和葡萄品種有關(guān)外，還可能與不同地域釀酒時(shí)所用的菌種等生物因素有關(guān)，因?yàn)椴煌N產(chǎn)生的酶存在差異。（4）液體培養(yǎng)基可用于菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)。發(fā)酵瓶下口直角玻璃管內(nèi)塞有松緊合適的脫脂棉球，其作用是過濾空氣，防止雜菌污染。醋化醋桿菌會(huì)將果酒轉(zhuǎn)化成果醋，導(dǎo)致發(fā)酵液pH值下降，因此開始收集果醋前，應(yīng)檢測發(fā)酵瓶流出液的pH值。（二）（1）如果外源基因的核苷酸序列是未知的，可以建立一個(gè)包括外源基因來源生物中所有基因的基因文庫來獲取外源基因。圖中②過程是構(gòu)建基因表達(dá)載體，涉及到的工具酶是DNA連接酶。（2）將外源遺傳物質(zhì)與受體植物細(xì)胞（包括原生質(zhì)體受體）遺傳物質(zhì)重新組合，除了轉(zhuǎn)基因技術(shù)外，還有細(xì)胞融合或顯微注射。這些方法解決了傳統(tǒng)育種方法存在的遠(yuǎn)緣親本難以雜交（或生殖隔離）的缺陷。植物的細(xì)胞壁主要成分是纖維素和果膠，因此可以在較高滲透壓環(huán)境下，用纖維素酶和果膠酶處理根尖、葉片、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞壁。（3）獲取重要的次生代謝產(chǎn)物（如某些中藥）可通過破碎細(xì)胞來獲得，可以通過大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系來達(dá)成目的。（4）將被農(nóng)桿菌侵染的葉片除菌后進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，可得到轉(zhuǎn)基因植物。該過程需經(jīng)過脫分化生成愈傷組織，然后再分化生成胚狀體或叢芽，進(jìn)而獲得轉(zhuǎn)基因植物。培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和生長素配比較低時(shí)形成根，配比較高時(shí)形成芽，比例適中時(shí)形成愈傷組織。愈傷組織在合適條件下經(jīng)再分化形成再生植株，A項(xiàng)錯(cuò)誤；再生的芽在生長素含量較高的培養(yǎng)基上生根，B項(xiàng)錯(cuò)誤；葉片在含合適濃度生長素的培養(yǎng)基上經(jīng)脫分化形成愈傷組織，C項(xiàng)錯(cuò)誤；愈傷組織在細(xì)胞分裂素和生長素配比較髙的培養(yǎng)基上形成芽，D項(xiàng)正確。【點(diǎn)睛】解答此題的關(guān)鍵是熟練掌握果酒和果醋的制作的基本原理、以及基因工程與細(xì)胞工程的基本操作過程，結(jié)合圖像分析問題，不難得出正確的答案。25．I、下圖表示生物體內(nèi)部分物質(zhì)之間的轉(zhuǎn)化關(guān)系，請據(jù)圖作答。(1)a?d四個(gè)生理過程中，人體不能進(jìn)行的過程除a外，還包括，原因是缺乏。(2)在酵母菌細(xì)胞中，催化過程b的酶存在于細(xì)胞的中。（3）請?zhí)顚憴z測酵母菌呼吸產(chǎn)物時(shí)所用試劑和顏色反應(yīng)比較表：被檢測的物質(zhì)試劑現(xiàn)象（顏色）CO2澄清的石灰水混濁溴麝香草酚藍(lán)水溶液①酒精重鉻酸鉀的濃硫酸溶液②II、如圖所示為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖，回答下列問題:(1)容器A中放置的一般是幼齡動(dòng)物的器官或組織，原因是其細(xì)胞能力強(qiáng)，易于培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)先要剪碎，然后用分散細(xì)胞，制成B瓶中的細(xì)胞懸液。細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入C瓶中進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為。(2)B、C、D瓶中的培養(yǎng)基為保證無菌的環(huán)境，需要添加一定量的。培養(yǎng)過程中需要提供02和C02等氣體環(huán)境，C02的作用主要是?！敬鸢浮縄、(1)b相關(guān)的酶(2)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)(3)由藍(lán)變綠再變黃橙色→灰綠色I(xiàn)I、（1）分裂胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)原代培養(yǎng)（2）抗生素維持培養(yǎng)液的Ph【解析】I、a?d四個(gè)生理過程分別是光合作用，酒精發(fā)酵，乳酸發(fā)酵，有氧呼吸。（1）人體內(nèi)除沒有光合作用外，也沒有酒精發(fā)酵過程（b），原因是缺乏相關(guān)的酶。（2）在酵母菌細(xì)胞中，催化過程b（無氧呼吸）的酶存在于細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中。（3）用溴麝香草酚藍(lán)水溶液檢測CO2的現(xiàn)象是溶液由藍(lán)變綠再變黃；用重鉻酸鉀的濃硫酸溶液檢測酒精的現(xiàn)象是橙色→灰綠色。II、（1）培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般取自動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織的原因是這部分細(xì)胞的分化程度低，增殖能力強(qiáng)，更易于培養(yǎng)。在進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)應(yīng)盡量分散成單個(gè)細(xì)胞，便于與培養(yǎng)液充分接觸進(jìn)行物質(zhì)交換，使其分散需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入C瓶中進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。(2)為保證無菌的環(huán)境，需要添加一定量的抗生素。培養(yǎng)過程中需要提供02和C02等氣體環(huán)境，C02的作用主要是維持培養(yǎng)液的PH?！究键c(diǎn)定位】細(xì)胞呼吸，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，探究酵母菌細(xì)胞呼吸的方式26．某小組欲進(jìn)行胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞）的一系列研究。請回答：(1)ES細(xì)胞能分化出成體動(dòng)物的所有組織和器官，這體現(xiàn)了ES細(xì)胞的______________。為獲得適合人體移植的豬器官，減弱或消除排斥反應(yīng)，可對ES細(xì)胞進(jìn)行____________。(2)—個(gè)ES細(xì)胞變成ES細(xì)胞群的過程中，細(xì)胞__________(填“可能”、“不可能”)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象。下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植的敘述，正確的是___________。A.從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中選擇和純化無法獲得細(xì)胞株B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中添加胰島素的目的是調(diào)節(jié)血糖濃度C.胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，加滋養(yǎng)層是為了抑制胚胎干細(xì)胞分化D.核移植形成的重組細(xì)胞在初次分裂時(shí)核基因不轉(zhuǎn)錄(3)為獲得含兔褐毛基因的轉(zhuǎn)基因小鼠，可將褐毛基因通過__________法導(dǎo)入ES細(xì)胞核中，再將該核移植到去核的卵細(xì)胞中，經(jīng)過_________、胚胎培養(yǎng)、胚胎移植，最終由代孕母鼠產(chǎn)下克隆小鼠。(4)為獲得大量的上述克隆小鼠，可用轉(zhuǎn)基因的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞克隆。因?yàn)楹泻置虻呐咛コ衫w維細(xì)胞可進(jìn)行___________培養(yǎng)，理論上可獲得無限個(gè)轉(zhuǎn)基因小鼠?！敬鸢浮堪l(fā)育全能性基因敲除可能D顯微注射胚激活傳代【解析】【試題分析】本題考查動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程以及胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用的相關(guān)知識(shí)，可參考下面知識(shí)點(diǎn)對本題進(jìn)行分析作答：1、細(xì)胞株和細(xì)胞系：

細(xì)胞株：原代培養(yǎng)細(xì)胞傳至10代左右就不容易傳下去，細(xì)胞生長停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞能存活傳到40～50代，這部分細(xì)胞稱為細(xì)胞株。細(xì)胞系：細(xì)胞株傳到50代左右不能再繼續(xù)傳代，部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)改變，具有癌變細(xì)胞的特點(diǎn)，可以在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去，這部分細(xì)胞稱為細(xì)胞系。

2、胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，體積較小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物任何一種組織細(xì)胞。另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細(xì)胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行某些遺傳改造。（1）ES細(xì)胞具有發(fā)育全能性，能分化出成體動(dòng)物的所有組織和器官；為獲得適合人體移植的豬器官，減弱或消除排斥反應(yīng)，可對ES細(xì)胞進(jìn)行基因敲除，即改變抗原決定簇基因，使其功能喪失。（2）ES細(xì)胞是正常體細(xì)胞，其分裂形成細(xì)胞群的過程中，若不發(fā)生基因突變，則會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，若發(fā)生基因突變，則可能不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象；

從一個(gè)經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系或原代培養(yǎng)物用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，克隆具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的單細(xì)胞獲得的細(xì)胞群，稱細(xì)胞株，A項(xiàng)錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基添加胰島素的目的是促進(jìn)細(xì)胞更好地吸收利用葡萄糖，沒有血糖不是調(diào)節(jié)血糖濃度，B項(xiàng)錯(cuò)誤；胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，加的是飼養(yǎng)層細(xì)胞，C項(xiàng)錯(cuò)誤；核移植形成的重組細(xì)胞分裂的準(zhǔn)備在重組前已完成，在初次分裂時(shí)核基因不轉(zhuǎn)錄，D項(xiàng)正確。（3）培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物時(shí)，導(dǎo)入目的基因最有效的方法是顯微注射法，因此為獲得含兔褐毛基因的轉(zhuǎn)基因小鼠，可將褐毛基因通過顯微注射法導(dǎo)入ES細(xì)胞核中，再將該核移植到去核的卵細(xì)胞中，經(jīng)過胚激活、胚胎培養(yǎng)、胚胎移植，最終由代孕母鼠產(chǎn)下克隆小鼠。（4）為獲得大量的上述克隆小鼠，可用轉(zhuǎn)基因的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞克隆。因?yàn)楹泻置虻呐咛コ衫w維細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，理論上可獲得無限個(gè)轉(zhuǎn)基因小鼠?！军c(diǎn)睛】本題的易錯(cuò)點(diǎn)是（2）小題的C選項(xiàng)中，容易將“飼養(yǎng)層細(xì)胞”和“滋養(yǎng)層細(xì)胞”混淆，所以在平時(shí)學(xué)習(xí)時(shí)一定要注意多比較和歸納。27．普通番茄細(xì)胞中有多聚半乳糖醛酸酶基因（PG基因），可產(chǎn)生多聚半乳糖醛酸酶（PG），該酶能破壞細(xì)胞壁．番茄果實(shí)細(xì)胞中，PG合成顯著增加，使番茄軟化，不耐貯藏．科學(xué)家們利用基因工程技術(shù)在普通番茄中轉(zhuǎn)入PG基因的反義基因抑制PG基因的表達(dá)，培育出了抗軟化、保鮮時(shí)間長的番茄新品種，過程如圖（1）過程①表示轉(zhuǎn)錄過程，發(fā)生在番茄細(xì)胞的______（場所）中，過程②所需要的原料是______。（2）過程③形成重組質(zhì)粒需要的工具酶有______，Ti質(zhì)粒上必須含有______，以便檢測農(nóng)桿菌細(xì)胞中是否導(dǎo)入了含反義基因的重組質(zhì)粒。（3）過程⑥中運(yùn)用的技術(shù)手段是______技術(shù)．其中，愈傷組織要經(jīng)過______過程最終形成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加______。（4）由于導(dǎo)入的目的基因能轉(zhuǎn)錄出反義RNA，且能與含反義基因的重組質(zhì)粒

互補(bǔ)結(jié)合，直接阻礙了PG合成時(shí)的翻譯過程，抑制PG基因的正常表達(dá)．最終使番茄番茄獲得抗軟化的性狀．若____________（性狀），則可確定轉(zhuǎn)基因番茄培育成功。【答案】細(xì)胞核四種核糖核苷酸限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶標(biāo)記基因植物組織培養(yǎng)再分化生長素和細(xì)胞分裂素番茄果實(shí)的保質(zhì)期延長【解析】試題分析：本題考查基因工程、細(xì)胞工程，考查對基因工程的工具、操作程序、植物組織培養(yǎng)流程的理解和識(shí)記。解答此題，可根據(jù)模板、產(chǎn)物判斷轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄過程。（1）過程①表示轉(zhuǎn)錄過程，發(fā)生在番茄細(xì)胞的細(xì)胞核中，過程②為逆轉(zhuǎn)錄過程，所需要的原料是四種脫氧核苷酸。（2）過程③形成重組質(zhì)粒需要限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶，Ti質(zhì)粒上必須含有標(biāo)記基因，以便檢測農(nóng)桿菌細(xì)胞中是否導(dǎo)入了含反義基因的重組質(zhì)粒。（3）過程⑥中運(yùn)用的技術(shù)手段是植物組織培養(yǎng)技術(shù)．其中，愈傷組織要經(jīng)過再分化過程最終形成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加生長素和細(xì)胞分裂素。（4）若番茄果實(shí)的保質(zhì)期延長，則可從個(gè)體水平上確定轉(zhuǎn)基因番茄培育成功?！军c(diǎn)睛】解答第（1）小題時(shí)，根據(jù)PG基因的功能可推斷該基因位于細(xì)胞核中。28．【生物一現(xiàn)代生物科技專題】下圖為轉(zhuǎn)基因克隆奶牛的培育過程，據(jù)圖回答下列問題：(1)②過程常用的方法是________。(2)③過程在體外的________中進(jìn)行，受精后將受精卵轉(zhuǎn)移至________中繼續(xù)培養(yǎng)。(3)在乙圖中對卵母細(xì)胞進(jìn)行顯微操作去核時(shí)，需要用微型吸管一并吸出________。(4)丙圖中將來發(fā)育成胎兒各種組織的是________，發(fā)育成胎膜和胎盤的是_______。(5)圖示轉(zhuǎn)基因奶牛的乳汁中可提取人的生長激素，這些轉(zhuǎn)基因?？煞Q為________。為檢測人生長激素基因是否成功表達(dá)，可采用________技術(shù)，試解釋原因________?！敬鸢浮匡@微注射技術(shù)獲能液或?qū)Ｓ玫氖芫芤喊l(fā)育培養(yǎng)液細(xì)胞核和第一極體內(nèi)細(xì)胞團(tuán)滋養(yǎng)層乳腺生物反應(yīng)器抗原—抗體雜交只有抗原—抗體雜交法才能檢測表達(dá)的最終產(chǎn)物是蛋白質(zhì)【解析】試題分析：據(jù)圖分析，①表示構(gòu)建基因表達(dá)載體，形成重組質(zhì)粒甲；②表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞（牛的受精卵），③表示精子和卵細(xì)胞通過受精作用形成受精卵；④表示將核移植形成的重組細(xì)胞進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)，形成丙囊胚。圖中乙表示為核移植提供細(xì)胞質(zhì)的卵母細(xì)胞。（1）根據(jù)以上分析已知，②表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞（牛的受精卵）的過程，常用的方法是顯微注射法。（2）③過程為體外受精作用，發(fā)生在獲能培養(yǎng)液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐?；受精后將受精卵轉(zhuǎn)移至發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。（3）圖乙表示為核移植提供細(xì)胞質(zhì)的卵母細(xì)胞，對其去核時(shí)，要一并除去第一極體。（4）丙表示囊胚，其中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒各種組織器官，滋養(yǎng)層發(fā)育成胎膜和胎盤。（5）圖示轉(zhuǎn)基因奶牛的乳汁中可提取人的生長激素，這些轉(zhuǎn)基因牛可稱為乳腺生物反應(yīng)器。人生長激素基因控制合成的生長激素的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，而只有抗原—抗體雜交法才能檢測表達(dá)的最終產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，所以可采用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測人的生長激素基因是否成功表達(dá)。【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是分析圖形，確定轉(zhuǎn)基因克隆奶牛的培育過程中各個(gè)過程的名稱，以及甲乙丙代表的細(xì)胞或者結(jié)構(gòu)的名稱。29．回答下列(一)、(二)小題：(一)請回答與“果汁中的果膠和果膠酶”實(shí)驗(yàn)有關(guān)的問題：(1)果膠是細(xì)胞壁的重要組成成分，其化學(xué)本質(zhì)是______(A.蛋白質(zhì)B．脂質(zhì)C．核酸D．多糖)。它在細(xì)胞壁的形成過程中的主要作用是將相鄰的細(xì)胞________在一起。(2)制取果汁時(shí)，先用果膠酶將果膠分解成________和半乳糖醛酸甲酯等物質(zhì)，再用________酶處理，可得到比較澄清的果汁。用適量且濃度適宜的上述兩種酶處理時(shí)，果汁的出汁率、澄清度與酶的________高低成正相關(guān)。(3)由于果膠不溶于乙醇，故可用乙醇對果膠粗提物(經(jīng)酶處理后的混合物)進(jìn)行________處理，從而得到干制品。(二)兔肝細(xì)胞中的基因E編碼代謝甲醛的酶，擬利用基因工程技術(shù)將基因E轉(zhuǎn)入矮牽牛中，以提高矮牽牛對甲醛的代謝能力，請回答：(1)從兔肝細(xì)胞中提取mRNA，在________酶的作用下形成互補(bǔ)DNA，然后以此DNA為模板擴(kuò)增得到基因E。在相關(guān)酶的作用下，將基因E與Ti質(zhì)粒連接在一起，形成________，再導(dǎo)入用氯化鈣處理的________，侵染矮牽牛葉片。將被侵染的葉片除菌后進(jìn)行培養(yǎng)，最終得到轉(zhuǎn)基因矮牽牛。其中培養(yǎng)過程正確的是（____）A．葉片在含適宜濃度生長素的培養(yǎng)基上分化形成愈傷組織B．愈傷組織在含細(xì)胞分裂素和生長素配比較高的培養(yǎng)基上形成芽C．再生的芽在細(xì)胞分裂素含量較高的培養(yǎng)基上生根D．愈傷組織在含適宜濃度植物生長調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上