【薄層色譜】薄層色譜四個(gè)常見問題

第第頁【薄層色譜】薄層色譜四個(gè)常見問題1.簡述薄層色譜法常見問題及相應(yīng)解決方案

所謂薄層色譜法，是指通過利用各成分對同一吸附劑的吸附本領(lǐng)不同，在流動相流過固定相的過程中，連續(xù)發(fā)生吸附、解吸、再吸附、再解吸，實(shí)現(xiàn)各成分相互分別的吸附薄層色譜法分別法。以下依據(jù)網(wǎng)上資料，對薄層色譜的一些問題進(jìn)行簡述：

1.如何選擇薄層色譜的打開劑：薄層色譜在流動相的選擇具有較大的快捷性，而流動相的選擇目的是使絕大部分樣品能達(dá)到較好的分別，與此對應(yīng)的是流動相要有適當(dāng)?shù)膹?qiáng)度和構(gòu)成。流動相強(qiáng)度越大，溶質(zhì)比移值越大，但很可能降低分別本領(lǐng)；另外單一溶劑很難分別較多而雜的混合物，依據(jù)相像相溶原理，要使用多元溶劑體系。一般打開劑體系選擇如下：依據(jù)分別樣品性質(zhì)、薄層色譜板性質(zhì)選擇一個(gè)二元溶劑體系，通過調(diào)整溶劑比例以尋求適合比移值。

2.薄層色譜的通用顯色方法：理想的顯色希望靈敏度高、斑點(diǎn)顏色穩(wěn)定、斑點(diǎn)與背景間的對比度好、斑點(diǎn)的大小及顏色的深度與物質(zhì)的量成正比。在樣品構(gòu)成未知的情況下，通用顯色方法顯得成尤為緊要。一般顯色方法有便利并且不破壞樣品的紫外照射法，還有通用性強(qiáng)的點(diǎn)蒸汽法，還有制造熒光背景，使原來紫外下無熒光物質(zhì)被辨別的熒光試劑法，以及對絕大多數(shù)有機(jī)物有效但卻會存在破壞性的硫酸溶液。

3.怎么提高薄層色譜的點(diǎn)樣效率：由于點(diǎn)樣是造成薄層色譜定量誤差的緊要來源。由于定量毛細(xì)管更適合較小體積的點(diǎn)樣；微量注射器更適合較大體積的點(diǎn)樣。這緊要是由于微量注射器受小氣泡、溶液回爬現(xiàn)象的影響較大。為避開不同定量毛細(xì)管間的點(diǎn)樣誤差，一般建議一塊薄層板上用同定量毛細(xì)管。但應(yīng)注意更換樣品時(shí)，應(yīng)將毛細(xì)管用超聲波或不同極性溶劑清洗干凈。

由于資料有限，因而上述對薄層色譜使用過程中的一些問題概述并不全面，歡迎補(bǔ)充。2.薄層色譜法在中藥復(fù)方制劑中的應(yīng)用

薄層色譜法在中藥復(fù)方制劑中的應(yīng)用

薄層色譜法又簡寫為TLC，常用于中藥成方制劑中有效成分的定性辨別。由于該方法辨別專屬性強(qiáng)，使用設(shè)備簡單，易于操作，故應(yīng)用廣泛，在目前的藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)定性辨別中（如中國藥典和國家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)），已大大地超過了顯微辨別、理化辨別和光譜辨別。

下面對薄層色譜法在中藥復(fù)方制劑中的應(yīng)用做一些分析：

一、醫(yī)院制劑由于其自身的特別性，如只能在本院銷售，生產(chǎn)和檢驗(yàn)設(shè)備簡陋，生產(chǎn)量小，劑型和品種相對較多，生產(chǎn)中常以水煎煮為主。故在選擇處方中的薄層定性藥材時(shí)，應(yīng)以選擇水溶性成分為先。如芍藥苷、梔子苷、黃芪甲苷、龍膽苦苷、人參皂苷等苷類或綠原酸、阿魏酸等易溶于水的有機(jī)酸類成分。

二、認(rèn)真分析處方。選擇方中薄層定性的藥材，應(yīng)先選取以粉碎入藥的藥材。由于這部分藥材中的有效成分一般沒被破壞，特別是一些含有揮發(fā)性成分的藥材，如薄荷、香附、荊芥等，在薄層層析中以藥材作為對比品，很簡單辨別出來。

三、對處方中含有多糖類或淀粉質(zhì)較多的藥材，如麥冬、北沙參、黨參等，可實(shí)行先酸解后用有機(jī)溶劑提取的方法。經(jīng)這樣處理后，薄層層析斑點(diǎn)一般都比較清楚，藥檢所復(fù)核時(shí)往往簡單通過。

四、在使用打開劑時(shí)，在同等條件下，應(yīng)選擇無毒或毒性較小的有機(jī)溶劑。如選用環(huán)己烷而不選用正己烷，選用甲苯而不選用苯。以削減有機(jī)溶劑毒性對人體的侵害。

五、對樣品的取樣量不宜太大。假如取樣量太大，點(diǎn)樣時(shí)往往因樣品的濃度太高而造成點(diǎn)樣困難，打開時(shí)斑點(diǎn)又不易分別而使薄層圖譜不清楚。

六、對中藥復(fù)方制劑的液體劑型，提取分別方法應(yīng)溶劑法，用適合的有機(jī)溶劑提取。如是提取水溶性成分，應(yīng)考慮對樣品進(jìn)行脫脂處理。對酒劑、酊劑或搽劑中含有的樣品，應(yīng)先在水浴上蒸去后再作下一步的處理。如液體劑型不宜用有機(jī)溶劑提取，也可接受先將藥液置水浴上蒸干（或加入適量硅藻土分散），再用有機(jī)溶劑提取的方法。

七、對中藥復(fù)方制劑的固體劑型，提取分別方法可選用超聲提取法、回流提取法或溶劑提取法（應(yīng)先將樣品加定量水溶解）等。超聲提取方法簡單，所需時(shí)間短，目前使用較多，應(yīng)，但在使用過程中應(yīng)注意一個(gè)問題，如提取時(shí)使用的有機(jī)溶劑是，超聲處理時(shí)間應(yīng)掌控在10～20min以內(nèi)，超聲時(shí)容器不能密閉太緊，以免瓶塞沖出或全部揮發(fā)，特別是在氣溫較高的夏天，尤其要注意。

八、對中藥復(fù)方制劑的外用劑型，如軟膏劑、黑膏藥、貼膏一類，在樣品處理時(shí)，應(yīng)首先考慮去掉賦形劑后再對樣品進(jìn)行處理。如用凡士林制成的軟膏，可用有機(jī)溶劑除去凡士林。

九、樣品經(jīng)薄層打開后，察看層析情況，筆者認(rèn)為應(yīng)多選擇在日光下察看為主。起因于大多數(shù)醫(yī)院制劑室未建立暗室，在紫外光燈下拍照有困難。

十、對樣品中某些成分的提取分別，可先實(shí)行相像佛的方法，然后再選用不同的定容溶液和打開劑，即可達(dá)到目的。相像時(shí)提取某些皂苷類、苷類、有機(jī)酸類等。

十一、在中藥復(fù)方制劑中，往往藥味較多，化學(xué)成分較為多而雜，給單一成分的分別造成確定困難。為了達(dá)到分別的目的，在實(shí)在操作中，可以考慮使用高速離心，柱層析、氧化鎂凈化、水或氨試液洗滌等多種操作方法。但在使用這些方法時(shí)，必需注意不能把應(yīng)提取的有效成分棄掉了。

十二、