DB2312T 088-2023 禽用油乳劑滅活疫苗細(xì)菌內(nèi)毒素含量檢驗技術(shù)操作規(guī)程

ICS11.220CCSB41

DB2312黑 龍 江 省 綏 化 市 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB2312/T088—2023禽用油乳劑滅活疫苗細(xì)菌內(nèi)毒素含量檢驗技術(shù)操作規(guī)程2023-11-30發(fā)布 2024-01-01實施綏化市市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB2312/T088—2023DB2312/T088—2023II前 言本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由綏化市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局歸口。本文件起草單位：黑龍江省百洲生物工程有限公司、明水縣農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊。本文件主要起草人：張越、張洪楠、李山峰、汪洋、王海楠、王東升。DB2312/T088—2023DB2312/T088—2023PAGEPAGE1禽用油乳劑滅活疫苗細(xì)菌內(nèi)毒素含量檢驗技術(shù)操作規(guī)程范圍本文件規(guī)定了禽用油乳劑滅活疫苗細(xì)菌內(nèi)毒素含量檢驗方法，本法為凝膠法是利用鱟試劑檢測或量化由革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素的方法。本文件適用于獸用生物制品生產(chǎn)企業(yè)以及經(jīng)營企業(yè)對禽用油乳劑滅活疫苗細(xì)菌內(nèi)毒素含量范圍的檢測。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適《中華人民共和國獸藥典》（2020版）一部附錄“細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法”。術(shù)語和定義《中華人民共和國獸藥典》（2020版）一部附錄“細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法”界定的術(shù)語和定義適用于本文件。主要技術(shù)內(nèi)容被檢疫苗處理1-2024h～48h，待其完全凍結(jié)后，將其取出置24h～48h3～43500r/min15min供試品溶液稀釋用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水（0.015EU/ml）10倍、1005001000鱟試劑靈敏度復(fù)核實驗當(dāng)使用新批號的鱟試劑或?qū)嶒灄l件發(fā)生了任何可改變實驗結(jié)果的改變時，應(yīng)根據(jù)《中華人民共和國獸藥典》現(xiàn)行版一部附錄“細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法”進(jìn)行靈敏度復(fù)核實驗，確定鱟試劑的靈敏度與標(biāo)示值相符。供試品干擾試驗供試品初次進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素實驗之前，需根據(jù)《中華人民共和國獸藥典》現(xiàn)行版一部附錄“細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法”先進(jìn)行干擾試驗，以檢測供試品對內(nèi)毒素檢測試驗是否有干擾或抑制作用，供試品如對實驗有干擾，可通過對供試品進(jìn)行更大倍數(shù)的稀釋或通過其他適宜的方法(如過濾、中和、透析或加熱處理等)排除干擾。檢測步驟實驗前準(zhǔn)備主要儀器超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱、干燥箱、旋渦混合儀、離心機(jī)、移液槍、無熱源槍頭（或去熱源的刻度吸管外徑1×75m25℃干烤1。試劑鱟試劑（0.1ml/支、細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品（10EU/支、細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水（內(nèi)毒素小于0.015EU/ML。操作步驟按照《中華人民共和國獸藥典》現(xiàn)行版一部附錄“細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法”進(jìn)行檢驗,制備供試品溶0.1ml/支的鱟試20.1ml20.1mlλ的內(nèi)毒素供試液溶液（分別用相對應(yīng)的待測稀釋倍數(shù)下的供試品溶液稀20.ml濃度為20.ml內(nèi)毒素37℃±160min±2min180°。若管內(nèi)形成凝膠并且凝膠不變形、不從管壁脫落者為陽性；未形成凝膠或形成的凝膠不堅實、變形并從管壁脫落者為陰性。記錄結(jié)果。結(jié)果判定若陰性對照管均為陰性，陽性對照管均為陽性，供試品陽性對照管均為陽性，判定試驗有效。若供試品管均為陰性，判定供試品內(nèi)毒素含量小于測定值。若供試品管均為陽性，則判定供試品內(nèi)毒素4檢驗記錄填寫檢驗記錄，并建立檢驗檔案，內(nèi)容包