紫花地丁水浸出物抗乙型肝炎病毒的實驗研究的任務書

紫花地丁水浸出物抗乙型肝炎病毒的實驗研究的任務書一、研究背景與意義乙型肝炎病毒（HBV）是一種致病性病毒，全球范圍內約有2億人攜帶該病毒。HBV感染可引發(fā)急性或慢性乙型肝炎，甚至導致肝硬化和肝癌。目前，雖然有乙肝疫苗可以預防感染，但治療乙型肝炎仍然是一項難題，目前臨床上使用的治療方法效果不盡如人意，且存在一定副作用。因此，尋找一種安全有效的治療方法，具有重要的臨床意義。紫花地丁水浸出物（PE）是傳統(tǒng)中藥，被廣泛運用于臨床上，具有清熱解毒、利尿退黃、消腫止痛等功效。在過去的一些研究中，證明PE具有抗氧化、抗炎、抗病毒等作用。因此，本研究將探討PE對HBV的抗病毒活性，并為開發(fā)具有抗HBV活性的中藥提供科學依據(jù)。二、研究內容/目標本研究的主要內容是探討PE對HBV的抗病毒活性。具體研究內容如下：1.確定PE的濃度-反應時間殺毒曲線；2.探究PE對HBVRNA復制的影響；3.探究PE對HBV核心蛋白（HBcAg）合成的影響；4.探究PE對HBV表面抗原（HBsAg）的影響；5.探究PE對HBV包膜蛋白（HBVS）合成的影響。三、研究方法1.實驗物質：PE、HBV；2.滅毒處理：HBV用過氧化氫（H2O2）滅毒；3.病毒感染：用HBV滅毒液感染培養(yǎng)的肝細胞；4.細胞毒性實驗：MTT方法；5.濃度-反應時間殺毒曲線實驗；6.qRT-PCR實驗：沖式PCR（ABIPrism7300）；7.免疫印跡實驗：Westernblot；8.統(tǒng)計分析：SPSS21.0。四、預期結果通過本研究，預計可以獲得以下結果：1.獲得PE的濃度-反應時間殺毒曲線；2.證明PE能夠顯著抑制HBVRNA復制；3.發(fā)現(xiàn)PE能夠抑制HBcAg合成，降低HBVDNA含量；4.發(fā)現(xiàn)PE能夠抑制HBsAg表達，顯示PE對HBV外殼蛋白的影響；5.發(fā)現(xiàn)PE能夠抑制HBVS合成，標志性地證實了PE具有對HBV包膜蛋白的影響。五、實驗安全與倫理本研究實驗將在符合生物安全法規(guī)定的條件下進行，病毒感染前將進行滅菌處理以及符合實驗安全標準的防護措施。六、參考文獻1.ZhangY,etal.ProtectiveeffectofpolyphenolsextractofPolygonumcapitatumagainstoxidativedamageinliverofmiceinducedbydiquat[J].InternationalJournalofClinicalandExperimentalMedicine,2016,9(1):1849-1858.2.HsuTH,etal.SweetpotatoleafextractinhibitshepatitisBvirusreplicationinhumanHepG2cells[J].JournalofMedicinalFood,2013,6(4):364-369.3.ZhengYF,etal.Antiviralactivityofpolygonumcapitatumonhepatitis