流式細胞儀在不孕診斷中運用學(xué)習(xí)

精子DNA碎片率檢測方法介紹（SDFA）及流式細胞儀在不孕診斷中運用ICSI(intracytoplasmicsperminjection)

卵母細胞單精子顯微注射技術(shù)2.IUI(intrauterineinsemination)3.IVF4.ART主要內(nèi)容1.SDFA（精子DNA碎片率檢測）進一步的精液檢查2.免疫性不孕/流產(chǎn)病因?qū)W診斷自然殺傷細胞的檢測3.自然殺傷細胞檢測相關(guān)試劑

SDFA檢測方法背景-自從生殖領(lǐng)域不孕診療的不斷發(fā)展，精液檢查一直是我們所關(guān)注的，但其評價的標準的確定，還尚未達成一致

-許多檢測聲稱是更優(yōu)越的，并能給臨床醫(yī)生提供更多信息-我們?nèi)匀恍枰薪y(tǒng)一的評價標準精子DNA碎片檢測:1980開始當初聲稱能預(yù)測IUI,IVF,及ICSI的成功率之后，碎片率的檢測一直未標準化新的數(shù)據(jù)證明：碎片率的檢測能提供IUI還是IVF/ICSI助孕方式選擇的參考意見

不孕患者初診篩查流程ART初診患者IUI患者不孕患者精液常規(guī)分析已做碎片分析未做碎片分析80-90%第一次IUI敗70-80%總是失敗無精子碎片率檢查進行精子碎片分析IUI失敗后放棄ART更高的IUI成功率大部分人在失敗后不會嘗試ART更多嬰兒出生IUI失敗的病人將行IVF/ICSI首次ART患者什么是SDFA？SDFA通過評估精子的健康狀況，幫助不孕患者選擇更適合的助孕方式SDFA能評估精子的DNA損傷程度，而此異常有可能引起IUI助孕的失敗DNA碎片指數(shù)---DFI精子經(jīng)酸處理及染色后1.DNA完整的細胞染色--綠色2.DNA受損的細胞染色--紅色DNA碎片指數(shù)---DFI基于熒光強度的差異可用流式細胞儀分析檢測DNA碎片指數(shù)---DFI計算受損DNA細胞所占的比值即患者精液標本的DNA碎片率指數(shù)---DFISDFA檢測文獻支持-1大樣本多中心臨床研究結(jié)果證實SDFA檢測結(jié)果DFI指數(shù)：1.能指導(dǎo)輔助生殖助孕方式選擇2.能預(yù)測輔助生殖助孕的成功率SDFA檢測文獻支持-2已發(fā)表的文獻中SDFA檢測結(jié)果---DFI指數(shù)在不同人群中的異常發(fā)生率自然殺傷細胞（NK）的檢測1.自然殺傷細胞是淋巴細胞的一種其細胞表面表達CD56+等2.在不孕或反復(fù)自然流產(chǎn)患者，其外周血或子宮內(nèi)膜上NK細胞活性增加3.使用抗體熒光染色技術(shù)，通過流式細胞儀可檢測NK細胞NK細胞檢測相關(guān)抗體編號品名克隆亞型規(guī)格349041MouseIgG1-FITCX40MouseIgG1,k100ug349043MouseIgG1-PEX40MouseIgG1,k100ug347202MouseIgG1-PerCP-Cy5.5X40MouseIgG1,k50ug340442MouseIgG1-APCiiii100ug349044MouseIgG-PerCPiiii100ug347747CD56-PEMY31MouseIgG1,k100tests347617CD16-PEB73.1MouseIgG1,k100tests349201/340542CD3-FITCSK7MouseIgG1,k50/250tests347463CD45-FITC2D1MouseIgG1,k100tests347493/347497/333945CD14-FITC/CD14-PE/CD14-APC-Cy7MOP9MouseIgG1,k100tests340436CD14-AP