鋅指蛋白ZBTB45基因敲除小鼠模型的建立及其表型分析的開題報(bào)告

鋅指蛋白ZBTB45基因敲除小鼠模型的建立及其表型分析的開題報(bào)告論文題目：鋅指蛋白ZBTB45基因敲除小鼠模型的建立及其表型分析一、研究背景和意義鋅指蛋白家族成員是一類廣泛存在于細(xì)胞中的重要轉(zhuǎn)錄因子，其作用于基因的調(diào)控和表達(dá)。在這個(gè)家族中，ZBTB45作為一種C2H2型鋅指蛋白，參與了多個(gè)生物學(xué)過程，例如細(xì)胞增殖、分化、凋亡和腫瘤形成等。研究表明，ZBTB45在腫瘤生長(zhǎng)中扮演了非常重要的角色，抑制細(xì)胞的增殖和促進(jìn)凋亡，因此，對(duì)其研究有利于深入了解腫瘤的發(fā)生機(jī)理，并且可以為腫瘤治療提供一定的理論基礎(chǔ)。因此，本研究擬建立ZBTB45基因敲除小鼠模型，以深入了解其在腫瘤中的作用機(jī)理，并進(jìn)一步分析其體內(nèi)表型變化，探尋其受體細(xì)胞分化、基因調(diào)控等方面的生物學(xué)意義。二、研究目的1、建立ZBTB45基因敲除小鼠模型；2、對(duì)敲除小鼠進(jìn)行生物學(xué)鑒定，分析其表型變化；3、深入研究ZBTB45基因敲除對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育和腫瘤生長(zhǎng)等的影響機(jī)制。三、研究方法1、基因敲除小鼠模型建立。采用CRISPR/Cas9技術(shù)生成ZBTB45敲除小鼠，并使用PCR、Westernblot、代表性克隆等方法鑒定小鼠模型；2、生物學(xué)鑒定和表型分析。對(duì)ZBTB45敲除小鼠及其野生型小鼠進(jìn)行生長(zhǎng)發(fā)育體重、組織學(xué)結(jié)構(gòu)、生殖功能等方面的比較；3、基因表達(dá)分析。使用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)，對(duì)野生型小鼠和ZBTB45基因敲除小鼠模型的基因表達(dá)進(jìn)行比較，尋找差異基因和通路，并進(jìn)一步分析其生物學(xué)意義。四、研究預(yù)期成果1、成功建立ZBTB45基因敲除小鼠模型；2、對(duì)敲除小鼠進(jìn)行生物學(xué)鑒定，發(fā)現(xiàn)其體重、組織結(jié)構(gòu)、生殖功能等表型變化；3、探究ZBTB45在發(fā)育成熟和腫瘤生長(zhǎng)中的作用機(jī)理；4、通過基因表達(dá)分析，尋找ZBTB45相關(guān)的基因和通路，并進(jìn)一步了解其在細(xì)胞分化、基因調(diào)控等方面的生物學(xué)意義。五、研究難點(diǎn)1、CRISPR/Cas9技術(shù)的選擇和應(yīng)用；2、基因敲除小鼠模型的驗(yàn)證和鑒定；3、組織和細(xì)胞水平的生物學(xué)數(shù)據(jù)收集與分析。六、研究進(jìn)度安排1月-3月：文獻(xiàn)調(diào)研和實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備；4月-6月：ZBTB45基因敲除小鼠模型建立和鑒定；7月-9月：小鼠表型分析和生物學(xué)鑒定；10月-12月：基因表達(dá)分析和結(jié)果分析、撰寫論文。七、參考文獻(xiàn)1.ChenXJ,etal.ZBTB45repressestranscriptionofgenesassociatedwithcellularstressresponseandcellsurvival.FEBSJ.2019;286(23):4685-4702.2.LiC,etal.ZincfingerproteinZBTB45isanessentialtranscriptionalregulatorspecificallyrequiredforthelate-stagematurationofBcells.MolCellBiol.2019;39(19):e00086-19.3.LiS,etal.GenerationofknockoutmiceusingCRISPR/Cas9-mediatedgenetargeting.BiolProcedOnline.2016;18:17.4.YangH,etal.Transcriptomeanalysisidentifiesnovelgenesignaturesfamoufostatin-inducedcellcy