版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
SDS原理及結(jié)果分析技巧SDS是一種常用的蛋白質(zhì)電泳方法,通過凝膠電泳將復(fù)雜的混合物分離成單個(gè)蛋白帶。本文將介紹SDS的原理及結(jié)果分析的技巧。SDS原理說明SDS使用聚丙烯酰胺凝膠和SDS來分離蛋白質(zhì),根據(jù)蛋白質(zhì)的分子量來定位蛋白帶。SDS作為帶負(fù)電荷的表面活性劑,使蛋白質(zhì)獲得幾乎相同的電荷密度,從而只受到電場(chǎng)力的影響。凝膠濃度的選擇決定了分離效果和分辨率。實(shí)驗(yàn)器材及試劑準(zhǔn)備凝膠電泳槽選擇適當(dāng)尺寸的凝膠電泳槽,保證完整性和冷卻性能。凝膠板使用聚丙烯酰胺凝膠板,根據(jù)需要選擇不同濃度的凝膠。電泳緩沖液配置適當(dāng)濃度的Tris緩沖液和適當(dāng)?shù)碾x子濃度,pH值約為8.3。樣品處理試劑包括蛋白樣品,樣品緩沖液,還原劑和離子變性劑(如SDS)等。凝膠制備步驟1凝膠配制按照實(shí)驗(yàn)要求,將聚丙烯酰胺凝膠配制好。2注入電泳緩沖液在電泳槽中注入適量的電泳緩沖液,確保完全覆蓋凝膠。3凝膠加載將樣品和分子量標(biāo)記物加載到凝膠的孔中。4電泳設(shè)置合適的電流和電壓進(jìn)行電泳,直至樣品達(dá)到合適位置。樣品處理及電泳條件設(shè)置還原與變性將蛋白樣品加熱還原,并與離子變性劑(如SDS)混合。樣品加載將處理好的樣品加載到凝膠孔中,記得加入分子量標(biāo)記物。電泳條件根據(jù)蛋白質(zhì)的大小和分離效果,設(shè)置適當(dāng)?shù)碾娏骱碗妷?。凝膠顯影步驟1固定和染色使用甲醛固定凝膠,并選擇合適的染色方法(如Coomassie藍(lán)染色或銀染色)。2去染劑處理將凝膠在去染劑中處理,去除多余的染料。3成像和分析使用分子成像系統(tǒng)對(duì)凝膠進(jìn)行成像,然后使用圖像分析軟件進(jìn)行蛋白質(zhì)帶的定位和分析。電泳數(shù)據(jù)的分析與解讀通過分析蛋白帶的大小、強(qiáng)度和位置,可以了解樣品中蛋白質(zhì)的組成和表達(dá)水平。使用分子量標(biāo)記物作為參考,確定蛋白質(zhì)的分子量。還可以比較不同樣品之間的差異,尋找感興趣的蛋白質(zhì)。結(jié)果展示與討論蛋白質(zhì)分離結(jié)果展示電泳結(jié)果的照片,注明每個(gè)蛋白帶的分子量。蛋白質(zhì)強(qiáng)度分析圖使用圖表或直方圖展示蛋白帶的
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 2024年擺攤冰粉轉(zhuǎn)讓合同范本
- 合作宅基地出售協(xié)議書范文范本
- 買賣房屋協(xié)議書范文模板正規(guī)版
- 離婚協(xié)議書范文電子模板不用撫養(yǎng)費(fèi)
- 慢阻肺患者的護(hù)理流程
- 物流行業(yè)缺陷產(chǎn)品召回管理規(guī)范
- 《三角形的三邊關(guān)系》教學(xué)
- 小學(xué)語文教師培訓(xùn)的生活化教學(xué)方案
- 高考備考策略工作總結(jié)
- 車間職工安全培訓(xùn)試題及答案(易錯(cuò)題)
- 2023屆吉林省吉林大學(xué)附屬中學(xué)化學(xué)高一第一學(xué)期期中復(fù)習(xí)檢測(cè)試題含解析
- 古詩(shī)文賞析社團(tuán)詩(shī)詞大會(huì)課件
- 胸外科診療指南和操作規(guī)范
- 玻璃幕墻工程施工質(zhì)量控制方法與措施
- 銷售逼單成交話術(shù)及技巧
- 《影響人類文明的里程碑》課件
- 風(fēng)電場(chǎng)地質(zhì)勘察設(shè)計(jì)方案
- 橫河UT35A-32A-操作手冊(cè)
- 計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)(第三版)課件(完整版)
- 《紅樓夢(mèng)》指導(dǎo)第二課 命名
- 關(guān)于建立企業(yè)干部職工末等調(diào)整和不勝任退出機(jī)制的實(shí)施方案
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論