新高考生物二輪復(fù)習(xí)核心考點(diǎn)梳理與分層練習(xí)專(zhuān)題33 微生物的培養(yǎng)與利用（含解析）

本卷由系統(tǒng)自動(dòng)生成，請(qǐng)仔細(xì)校對(duì)后使用，答案僅供參考。PAGE專(zhuān)題33微生物的培養(yǎng)與利用考點(diǎn)一、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)【要點(diǎn)速記】1．培養(yǎng)基（1）概念：人們按照微生物對(duì)_________的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。（2）種類(lèi)：液體培養(yǎng)基和______________培養(yǎng)基，二者的區(qū)別為是否添加_____________。（3）營(yíng)養(yǎng)成分。①主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：_____________、_____________、水和無(wú)機(jī)鹽。②其他條件：pH、_______________物質(zhì)和氧氣。2．無(wú)菌技術(shù)（1）目的：獲得_______________________________。（2）關(guān)鍵：防止___________________________的入侵。（3）常用方法：_______________和_______________。（4）無(wú)菌技術(shù)的主要方法及適用對(duì)象：3．制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基：（1）計(jì)算：依據(jù)配方比例，計(jì)算配制100mL的培養(yǎng)基時(shí)，各種成分的用量。（2）稱(chēng)量：準(zhǔn)確地稱(chēng)取各種成分。（5）倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至___________℃左右時(shí)，在_____________倒平板。4．純化大腸桿菌（1）菌落：由____________繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的_____________群體。（2）兩種常用接種方法的比較：常用方法平板劃線(xiàn)法稀釋涂布平板法純化原理通過(guò)接種環(huán)在________________的表面_______________操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面將菌液進(jìn)行一系列的____________，然后將不同稀釋度的菌液分別______________到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。稀釋度足夠高時(shí)，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞主要步驟_______________操作系列稀釋操作和涂布平板操作接種工具接種環(huán)_______________平板示意圖相同點(diǎn)都能獲得單細(xì)胞菌落不同點(diǎn)平板劃線(xiàn)法不能對(duì)微生物計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法能對(duì)微生物計(jì)數(shù)5．菌種的保藏方法主要方法臨時(shí)保藏法甘油管藏法保藏對(duì)象頻繁使用的菌種____________的菌種方法步驟先接種到試管的_________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，然后放入_____________的冰箱中轉(zhuǎn)入滅菌后的_____中，混勻后放在_________冷凍箱中保存【重難點(diǎn)突破】1．培養(yǎng)基的配制原則“三要”（1）目的要明確：配制時(shí)應(yīng)根據(jù)微生物的種類(lèi)、培養(yǎng)目的等確定配制的培養(yǎng)基種類(lèi)。（2）營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)：注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。（3）pH要適宜：一般的細(xì)菌適合于中性環(huán)境生長(zhǎng)，放線(xiàn)菌適合于偏堿性環(huán)境，而酵母菌和霉菌適合于微酸性環(huán)境，配制培養(yǎng)基時(shí)需要根據(jù)微生物的類(lèi)群調(diào)節(jié)pH。2．消毒和滅菌的比較項(xiàng)目條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學(xué)藥劑消毒法用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源紫外線(xiàn)消毒接種室、接種箱、超凈工作臺(tái)等滅菌強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌法接種工具等干熱滅菌法玻璃器皿、金屬用具等高壓蒸汽滅菌法培養(yǎng)基、容器等3．平板劃線(xiàn)操作中灼燒接種環(huán)的目的灼燒時(shí)間灼燒目的第一次劃線(xiàn)前殺死接種環(huán)上原有的微生物，防止外來(lái)雜菌污染培養(yǎng)基第二次及以后每次劃線(xiàn)前殺死上次劃線(xiàn)后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線(xiàn)的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端最后一次劃線(xiàn)后殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者考點(diǎn)二、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)【要點(diǎn)速記】1．篩選菌株（1）尋找目的菌株的方法：根據(jù)它對(duì)____________的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。（2）實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選。①方法：____________有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。②實(shí)例：篩選尿素分解菌時(shí)使用以________為唯一氮源的________培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。（3）選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，允許____________的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)____________其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。2．統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目比較項(xiàng)目間接計(jì)數(shù)法（稀釋涂布平板法）直接計(jì)數(shù)法（顯微鏡直接計(jì)數(shù)法）原理樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的___________活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌利用特定_______________________或_____________，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量公式每克樣品中的菌株數(shù)=_____________C：某稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)；V：涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL）；M：稀釋倍數(shù)每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)：每小格平均細(xì)菌數(shù)×400×10000×稀釋倍數(shù)缺點(diǎn)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是____________不能區(qū)分細(xì)胞死活誤差比實(shí)際值偏____________比實(shí)際值偏____________細(xì)菌的數(shù)目還可以通過(guò)_______來(lái)測(cè)定3．設(shè)置對(duì)照和重復(fù)比較項(xiàng)目對(duì)照重復(fù)目的排除___________對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響排除_________對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響方法空白對(duì)照：確定培養(yǎng)基制作是否合格；條件對(duì)照：用________培養(yǎng)基與選擇培養(yǎng)基對(duì)照，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基具有選擇作用同一稀釋度涂布至少_________個(gè)平板4．土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)5．分解尿素的細(xì)菌的鑒別（1）方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入___________指示劑培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌。（2）原理：（3）實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)論：①培養(yǎng)基變紅：該種細(xì)菌_______________分解尿素。②培養(yǎng)基不變紅：該種細(xì)菌___________分解尿素。6．微生物的觀察：一般來(lái)說(shuō)，在一定的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的____________，包括________的________、大小、____________和______________等方面?！局仉y點(diǎn)突破】1．選擇培養(yǎng)基的制作方法2．兩種純化細(xì)菌方法的辨析比較項(xiàng)目平板劃線(xiàn)法稀釋涂布平板法關(guān)鍵操作接種環(huán)在固體平板培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線(xiàn)①一系列的梯度稀釋②涂布平板法操作注意事項(xiàng)每次劃線(xiàn)前后均需灼燒接種環(huán)稀釋度要足夠高，為確保實(shí)驗(yàn)成功可以增加稀釋度的范圍菌體獲取在具有顯著菌落特征的區(qū)域的菌落中挑取菌體從適宜稀釋度的平板上的菌落中挑取菌體優(yōu)點(diǎn)可以根據(jù)菌落的特點(diǎn)獲得某種微生物的單細(xì)胞菌落既可以獲得單細(xì)胞菌落，又能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)缺點(diǎn)不能對(duì)微生物計(jì)數(shù)操作復(fù)雜，需要涂布多個(gè)平板考點(diǎn)三、分解纖維素的微生物的分離【要點(diǎn)速記】1．纖維素酶2．纖維素分解菌的篩選3．實(shí)驗(yàn)流程【重難點(diǎn)突破】1．選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的比較種類(lèi)選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基制備方法培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì)培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品原理依據(jù)某些微生物對(duì)某些物質(zhì)或環(huán)境條件的嗜好、抗性而設(shè)計(jì)依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中的特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)用途從眾多微生物中“分離”所需的微生物，淘汰不需要的微生物“鑒別”不同種類(lèi)的微生物（注：未淘汰其他微生物）舉例加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌2．分離纖維素分解菌所用的兩種培養(yǎng)基比較分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)中先用選擇培養(yǎng)基，再用鑒別培養(yǎng)基。（1）選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長(zhǎng)，而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長(zhǎng)。（2）鑒別培養(yǎng)基含瓊脂，為固體培養(yǎng)基，細(xì)菌可在培養(yǎng)基上形成肉眼可見(jiàn)的菌落。（3）剛果紅染色法應(yīng)用于鑒別培養(yǎng)基。要點(diǎn)速記答案考點(diǎn)一、1．（1）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（2）固體凝固劑（3）碳源氮源特殊營(yíng)養(yǎng)2．（1）純凈的培養(yǎng)物（2）外來(lái)雜菌（3）滅菌消毒（4）a－Ⅲ－⑤、a－Ⅴ－④、a－Ⅵ－③b－Ⅰ－⑥、b－Ⅱ－①、b－Ⅳ－②3．（3）稱(chēng)量紙蛋白胨瓊脂（4）pH高壓蒸汽121℃（5）50酒精燈火焰附近4．（1）一個(gè)細(xì)菌子細(xì)胞（2）瓊脂固體培養(yǎng)基連續(xù)劃線(xiàn)梯度稀釋涂布平板劃線(xiàn)涂布器5．長(zhǎng)期保藏固體斜面4℃甘油－20℃考點(diǎn)二、1．（1）生存環(huán)境（2）人為提供尿素選擇（3）特定種類(lèi)抑制或阻止2．一個(gè)細(xì)菌計(jì)數(shù)板血細(xì)胞計(jì)數(shù)板（C÷V）×M一個(gè)菌落小大濾膜法3．非測(cè)試因素偶然因素完全34．脲酶尿素直接計(jì)數(shù)法稀釋涂布平板法系列稀釋計(jì)數(shù)5．（1）酚紅（2）2NH3紅色（3）能不能6．菌落特征菌落形狀隆起程度顏色考點(diǎn)三、1．C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶纖維二糖葡萄糖2．紅色復(fù)合物透明圈剛果紅透明圈纖維素3．纖維素選擇培養(yǎng)基鑒別纖維素分解菌專(zhuān)題33微生物的培養(yǎng)與利用（基礎(chǔ)）一、單選題1．培養(yǎng)下列微生物，培養(yǎng)基中不用添加碳源的是（）A．藍(lán)藻 B．酵母菌 C．醋酸菌 D．毛霉【答案】A【解析】藍(lán)藻是原核生物，含藻藍(lán)素、葉綠素，能利用二氧化碳無(wú)機(jī)碳源進(jìn)行光合作用合成有機(jī)物，是自養(yǎng)型生物，故不需要添加碳源，A正確；酵母菌是異養(yǎng)型生物，培養(yǎng)基中需要添加有機(jī)碳源，B錯(cuò)誤；醋酸菌是異養(yǎng)型生物，培養(yǎng)基中需要添加有機(jī)碳源，C錯(cuò)誤；毛霉是異養(yǎng)型生物，培養(yǎng)基中需要添加有機(jī)碳源，D錯(cuò)誤。2．細(xì)菌喜葷、霉菌喜素的意思是在配制培養(yǎng)基時(shí)（）A．要調(diào)整培養(yǎng)基的pH B．要考慮不同微生物的代謝特性C．要調(diào)整培養(yǎng)基的滲透壓 D．要考慮不同微生物的結(jié)構(gòu)特性【答案】B【解析】培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無(wú)氧的條件。3．某學(xué)生在實(shí)踐酒釀酵母菌的培養(yǎng)探索時(shí)，對(duì)部分培養(yǎng)基成分進(jìn)行了改良，如表。其中主要提供氮源的培養(yǎng)基成分是（）培養(yǎng)基成分用量（g）黃豆粉10葡萄糖5瓊脂15A．瓊脂 B．黃豆粉 C．葡萄糖 D．黃豆粉和葡萄糖【答案】B【解析】瓊脂是凝固劑，不能提供氮源，A錯(cuò)誤；黃豆粉富含蛋白質(zhì)，能夠提供氮源，B正確；葡萄糖只含C、H、O三種元素，不能提供氮源，C錯(cuò)誤；黃豆粉能夠提供氮源，但葡萄糖不能提供氮源，D錯(cuò)誤。4．在分離和純化土壤中自生固氮菌的實(shí)驗(yàn)中，不合理的操作是（）A．取土表3-5cm以下土層的土壤B．用無(wú)菌水稀釋土壤樣品C．使用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D．用接種環(huán)進(jìn)行劃線(xiàn)接種【答案】C【解析】土表3-5cm以上的土壤比較干燥，自生固氮菌的數(shù)量較少，因此取土表3-5cm以下土層的土壤，A正確；用無(wú)菌水稀釋土壤樣品，否則可能造成土壤被雜菌污染，B正確；自生固氮菌可以在缺乏氮源的培養(yǎng)基中生存，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基含有氮源，用其分離出的微生物既有自生固氮菌也有其他的雜菌，無(wú)法純化自生固氮菌，C錯(cuò)誤；接種自生固氮菌時(shí)可用接種環(huán)進(jìn)行劃線(xiàn)接種，也可用涂布器用稀釋涂布平板法接種，D正確。5．關(guān)于微生物的營(yíng)養(yǎng)，說(shuō)法正確的是（）A．同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源B．凡是碳源都能提供能量C．除水以外的無(wú)機(jī)物僅提供無(wú)機(jī)鹽D．無(wú)機(jī)氮源也可能提供能量【答案】D【解析】對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源，如牛肉膏，A錯(cuò)誤；CO2和N2是無(wú)機(jī)物，也是某些微生物的碳源和氮源，B錯(cuò)誤；有機(jī)碳源能提供能量，無(wú)機(jī)碳源不能提供能量，C錯(cuò)誤；自然界中一些微生物如硝化細(xì)菌，可以以無(wú)機(jī)氮源合成細(xì)胞物質(zhì)，同時(shí)通過(guò)氧化外界無(wú)機(jī)物獲得生長(zhǎng)所需能量，叫做化能合成作用，D正確。6．滅菌的標(biāo)準(zhǔn)是（）A．殺死所有的細(xì)菌B．殺死所有的微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子C．殺死所有的病原微生物D．使病原菌不生長(zhǎng)【答案】B【解析】菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子），B正確。7．如圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌的部分操作步驟，下列說(shuō)法正確的是（）A．步驟①中待培養(yǎng)基冷卻后才能蓋上培養(yǎng)皿蓋B．步驟④中接種環(huán)共需5次灼燒處理C．將接種后的圖④平板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)無(wú)需倒置D．①②③步驟操作時(shí)都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行【答案】D【解析】步驟①將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中應(yīng)立即該上培養(yǎng)皿蓋，A項(xiàng)錯(cuò)誤；每次劃線(xiàn)前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理，因此步驟④中接種環(huán)共需6次灼燒處理，B項(xiàng)錯(cuò)誤；劃線(xiàn)接種結(jié)束后，將平板倒置后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，防止冷凝水污染培養(yǎng)基，C項(xiàng)錯(cuò)誤；培養(yǎng)與純化大腸桿菌的過(guò)程中需要在酒精燈的火焰旁進(jìn)行，故①②③步驟操作時(shí)都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，D項(xiàng)正確。8．做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列敘述正確的是（）A．高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零后，開(kāi)啟鍋蓋B．倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C．為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D．用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上【答案】D【解析】高壓滅菌加熱結(jié)束，等待壓力表指針回到零后，才能開(kāi)啟鍋蓋，不能打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零，A錯(cuò)誤；倒平板過(guò)程中不能打開(kāi)培養(yǎng)皿的皿蓋，B錯(cuò)誤；接種環(huán)火焰上灼燒后，待冷卻后才可以快速挑取菌落，C錯(cuò)誤；用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上，D正確。9．通過(guò)選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無(wú)法生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線(xiàn)菌；在培養(yǎng)基中加入10％酚可以抑制細(xì)菌和霉菌。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分別分離出（）A．大腸桿菌 B．霉菌 C．放線(xiàn)菌 D．固氮細(xì)菌【答案】A【解析】大腸桿菌需要氮源，青霉素能抑制大腸桿菌生長(zhǎng)，酚也能抑制大腸桿菌的生長(zhǎng)，A符合題意；霉菌是真菌，在培養(yǎng)基中加入青霉素后，青霉素可以抑制細(xì)菌和放線(xiàn)菌，但是不抑制真菌，所以加入青霉素的培養(yǎng)基可以選擇出霉菌，B不符合題意；培養(yǎng)基中加入10%酚可以抑制細(xì)菌和霉菌，所以可以篩選放線(xiàn)菌，C不符合題意；固氮細(xì)菌的氮源是氮?dú)?，在培養(yǎng)基中不需要氮源，所以缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無(wú)法生長(zhǎng)，但是固氮細(xì)菌可以生長(zhǎng)，D不符合題意。10．微生物接種最常用的方法是平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法。下列關(guān)于這兩種接種方法的敘述中，不正確的是（）A．都只能用于固體培養(yǎng)基接種 B．都能用于微生物的計(jì)數(shù)C．接種培養(yǎng)后均可獲得單菌落 D．接種工具使用后需要滅菌【答案】B【解析】將微生物接種到固體培養(yǎng)基中的方法通常為平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法，A正確；稀釋涂布平板法接種可以形成單菌落，所以常用來(lái)進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)，平板劃線(xiàn)法常用來(lái)篩選分離微生物，B錯(cuò)誤；兩種接種方法在培養(yǎng)基中均可形成單個(gè)菌落，C正確；為防止污染，接種工具使用后需要滅菌，D正確。11．甲、乙、丙是三種微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用來(lái)培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長(zhǎng)繁殖；甲能在I中正常生長(zhǎng)繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長(zhǎng)繁殖，甲、丙都不能。下列說(shuō)法正確的是（）粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g（NH4）2SO40.4gH2O100mlMgSO49.25gCaCl20.5gI+++++++Ⅱ+++++++Ⅲ++++++++A．甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物B．甲、乙都是自養(yǎng)微生物，丙是異養(yǎng)微生物C．甲是異養(yǎng)微生物，乙是固氮微生物，丙是自養(yǎng)微生物D．甲是固氮微生物，乙是自養(yǎng)微生物，丙是異養(yǎng)微生物【答案】D【解析】根據(jù)以上分析已知，乙屬于自養(yǎng)微生物，A錯(cuò)誤；甲能夠在Ⅰ中正常生長(zhǎng)繁殖，但是不能在Ⅱ培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖，說(shuō)明其為異養(yǎng)微生物，B錯(cuò)誤；根據(jù)以上分析已知，丙屬于異養(yǎng)微生物，C錯(cuò)誤；根據(jù)以上分析已知，甲是固氮微生物，乙是自養(yǎng)微生物，丙是異養(yǎng)微生物，D正確。12．細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中分別采用高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒幾種不同處理，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌（）A．接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B．高壓鍋、手、接種環(huán)C．培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D．接種環(huán)、手、高壓鍋【答案】C【解析】接種環(huán)應(yīng)該進(jìn)行灼燒滅菌，手應(yīng)該用酒精消毒，培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A錯(cuò)誤；高壓鍋是滅菌工具，手應(yīng)該用酒精消毒，接種環(huán)應(yīng)該進(jìn)行灼燒滅菌，B錯(cuò)誤；培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，手應(yīng)該用酒精消毒，接種環(huán)應(yīng)該進(jìn)行灼燒滅菌，C正確；接種環(huán)應(yīng)該進(jìn)行灼燒滅菌，手應(yīng)該用酒精消毒，高壓鍋是滅菌工具，D錯(cuò)誤。13．下列有關(guān)用平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法純化培養(yǎng)大腸桿菌的敘述，正確的是（）①都需要用固體培養(yǎng)基②都需要使用接種針進(jìn)行接種③都需要在火焰旁進(jìn)行接種④都可以用菌落數(shù)來(lái)計(jì)數(shù)活菌A．①② B．①③ C．②④ D．③④【答案】B【解析】平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落，所以都需要用固體培養(yǎng)基，①正確；稀釋涂布平板法不需要使用接種針進(jìn)行接種，②錯(cuò)誤；為防止雜菌污染，操作時(shí)都需要在火焰旁進(jìn)行接種，③正確；平板劃線(xiàn)法不能用于計(jì)數(shù)活菌，只能用于分離菌種；稀釋涂布平板法可以用來(lái)計(jì)數(shù)活菌，④錯(cuò)誤。14．某研究小組從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是（）A．培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌B．轉(zhuǎn)換劃線(xiàn)角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線(xiàn)C．接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D．培養(yǎng)過(guò)程中每隔一周觀察一次【答案】B【解析】可以直接在錐形瓶滅菌，然后再分裝到滅菌過(guò)的培養(yǎng)皿中，如果分裝到培養(yǎng)皿中再滅菌，不便移動(dòng)操作；A錯(cuò)誤；接種環(huán)暴露在空氣中一段時(shí)間后就需再進(jìn)行灼勺滅菌；B正確；微生物培養(yǎng)一般不需要光照條件；C錯(cuò)誤；根據(jù)不同的微生物，間隔觀察時(shí)間不同，如也可能每天定時(shí)觀察。D錯(cuò)誤。15．下圖是劃線(xiàn)分離法接種微生物的示意圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．該接種過(guò)程一般需灼燒接種環(huán)5次B．劃線(xiàn)結(jié)束可看到劃線(xiàn)末端出現(xiàn)不連續(xù)單菌落C．若培養(yǎng)的是尿素分解菌，可加入酚紅指示劑D．該接種方法不能準(zhǔn)確計(jì)數(shù)培養(yǎng)液中微生物數(shù)量【答案】B【解析】為了防止雜菌污染，每一次的劃線(xiàn)之前和劃線(xiàn)操作結(jié)束后都需要將接種環(huán)灼燒滅菌，圖示中共有4個(gè)劃線(xiàn)區(qū)域，因此該接種過(guò)程一般需灼燒接種環(huán)5次，A正確；劃線(xiàn)結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置放在一定溫度的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時(shí)間后，可看到劃線(xiàn)末端出現(xiàn)不連續(xù)單菌落，B錯(cuò)誤；若培養(yǎng)的是尿素分解菌，因該菌合成的脲酶可將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的pH升高，酚紅指示劑將變紅，所以可加入酚紅指示劑來(lái)予以鑒定，C正確；該接種方法（劃線(xiàn)分離法）不易分離出單個(gè)菌落，不能準(zhǔn)確計(jì)數(shù)培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，D正確。16．關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述中錯(cuò)誤的是（）A．操作順序?yàn)橛?jì)算、稱(chēng)量、溶化、倒平板、滅菌B．將稱(chēng)好的牛肉膏連同稱(chēng)量紙一同放入燒杯C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板D．待平板冷卻凝固約5~10min后將平板倒過(guò)來(lái)放置【答案】A【解析】制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌、倒平板，A錯(cuò)誤；將稱(chēng)好的牛肉膏連同稱(chēng)量紙一同放入燒杯，加入少量的水，加熱，B正確；待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板，C正確；待平板冷卻凝固約5?l0min后將平板倒過(guò)來(lái)放置，以防止水蒸氣凝集滴入培養(yǎng)基，D正確。17．圖是微生物平板劃線(xiàn)示意圖。劃線(xiàn)的順序?yàn)?、2、3、4、5。下列操作方法正確的是（）A．操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B．劃線(xiàn)操作必須在火焰上進(jìn)行C．最可能得到所需菌落的區(qū)域是1D．在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線(xiàn)前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌【答案】D【解析】操作前要將接種環(huán)放在火焰外焰中灼燒滅菌，A錯(cuò)誤；劃線(xiàn)操作必須在火焰附近進(jìn)行，B錯(cuò)誤；區(qū)域5是劃線(xiàn)末端菌液最少處，最有可能得到所需的單菌落，C錯(cuò)誤；在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線(xiàn)前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌，D正確。18．平板冷凝后，要將平板倒置，其原因是（）A．接種時(shí)再拿起來(lái)方便 B．在皿底上標(biāo)記日期等方便C．正著放置容易破碎 D．防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染【答案】D【解析】微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的關(guān)鍵在于防止雜菌污染，平板冷凝后，要將平板倒置，其原因是防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染，故選D。19．下列有關(guān)分解纖維素的微生物的分離的敘述，說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．纖維素酶中的C1酶和CX酶可以將纖維素分解為纖維二糖B．分離纖維素分解菌時(shí)，可在倒平板時(shí)加入剛果紅染色，然后接種分解菌C．纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵法和固體發(fā)酵法D．要增加纖維素分解菌的濃度，應(yīng)使用固體培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)【答案】D【解析】纖維素酶中的C1酶和CX酶可以將纖維素分解為纖維二糖，A正確；分離纖維素分解菌時(shí)，可在倒平板時(shí)加入剛果紅染色，然后接種分解菌，B正確；纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵法和固體發(fā)酵法，C正確；要增加纖維素分解菌的濃度，應(yīng)使用以纖維素為唯一碳源的液體培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。20．某生物興趣小組欲配制培養(yǎng)基從土壤中選擇尿素分解菌。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．配制以尿素為唯一氮源的液體培養(yǎng)基可用于選擇和觀察尿素分解菌B．為獲取102的稀釋液可將90mL無(wú)菌水加入10g土壤樣品中C．實(shí)驗(yàn)中若需要統(tǒng)計(jì)尿素分解菌的菌落數(shù)目，接種時(shí)只能用平板劃線(xiàn)法D．實(shí)驗(yàn)中設(shè)置對(duì)照，同時(shí)培養(yǎng)一個(gè)空白培養(yǎng)基可檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否徹底【答案】D【解析】選擇和觀察尿素分解菌時(shí)需要配制以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；10g土壤樣品加入90mL無(wú)菌水中，振蕩搖勻后可獲得10倍的稀釋液，B錯(cuò)誤；實(shí)驗(yàn)中若需要統(tǒng)計(jì)尿素分解菌的菌落數(shù)目，接種時(shí)只能用稀釋涂布平板法，C錯(cuò)誤；實(shí)驗(yàn)中設(shè)置對(duì)照，同時(shí)培養(yǎng)一個(gè)空白培養(yǎng)基，可通過(guò)空白培養(yǎng)基上是否有菌落來(lái)判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底，D正確。21．某同學(xué)依據(jù)下圖操作步驟，從土壤中分離以尿素為氮源的微生物。其中尿素固體培養(yǎng)基和尿素液體培養(yǎng)基均以尿素為唯一氮源。下列敘述正確的是（）A．尿素固體培養(yǎng)基比尿素液體培養(yǎng)基多了瓊脂B．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基的滅菌方式是過(guò)濾滅菌C．利用液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)需要振蕩以提高營(yíng)養(yǎng)成分的利用率D．兩種步驟獲得的菌落比值相等（甲1/甲2＝乙1/乙2）【答案】C【解析】尿素固體培養(yǎng)基比尿素液體培養(yǎng)基多了瓊脂和酚紅指示劑，A錯(cuò)誤；以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基的滅菌方式是高壓蒸汽滅菌，其中的尿素用過(guò)濾滅菌，B錯(cuò)誤；利用液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)的過(guò)程中，通過(guò)振蕩可以提高營(yíng)養(yǎng)成分的利用率，C正確；兩種步驟獲得的菌落比值關(guān)系為（甲1/甲2＞乙1/乙2），因?yàn)楹笳呓?jīng)過(guò)了對(duì)尿素分解菌的選擇培養(yǎng)，所以尿素分解菌的比例變多，D錯(cuò)誤。22．下列檢測(cè)某熟制食品中大腸桿菌是否超標(biāo)的實(shí)驗(yàn)操作，不合理的是（）A．待檢測(cè)食品需要經(jīng)過(guò)滅菌操作后取樣檢測(cè)B．應(yīng)設(shè)置未接種的培養(yǎng)基，作為實(shí)驗(yàn)的對(duì)照C．用稀釋涂布平板法接種計(jì)數(shù)大腸桿菌的活菌數(shù)D．接種后將培養(yǎng)皿倒置并在適宜溫度下培養(yǎng)【答案】A【解析】待檢測(cè)食品滅菌后會(huì)將大腸桿菌殺死，則不能檢測(cè)大腸桿菌是否超標(biāo)，A錯(cuò)誤；應(yīng)設(shè)置未接種的培養(yǎng)基，作為實(shí)驗(yàn)的對(duì)照，B正確；用稀釋涂布平板法接種計(jì)數(shù)大腸桿菌的活菌數(shù)，C正確；接種后應(yīng)該將培養(yǎng)皿倒置，并在適宜溫度下培養(yǎng)，D正確。二、綜合題23．回答下列有關(guān)微生物培養(yǎng)和利用的有關(guān)問(wèn)題：（1）按照培養(yǎng)基的成分來(lái)分，培養(yǎng)基按其所含成分，可分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基三類(lèi)。①在釀制葡萄酒時(shí)，葡萄汁就相當(dāng)于是酵母菌發(fā)酵的天然培養(yǎng)基。在_____________的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無(wú)法適應(yīng)而受到抑制。②雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同但一般都含碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水。培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源和氮源的成分是_______________（“蛋白胨”“葡萄糖”“NaNO3”）。（2）按照培養(yǎng)基用途來(lái)分，培養(yǎng)基按其特殊用途可分為富集培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。在微生物學(xué)中，將允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱(chēng)作________________。在選擇培養(yǎng)基中添加一些特殊的物質(zhì)，則可配制成鑒別培養(yǎng)基。如在尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_______________，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑變紅，則可初步鑒定為該種細(xì)菌能夠分解尿素；在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入______________，當(dāng)纖維素被分解后，其與纖維素形成的紅色復(fù)合物就無(wú)法形成。

（3）微生物培養(yǎng)中，稀釋涂布平板法常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。值得注意的是，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)開(kāi)_____________________________________。【答案】（1）缺氧、呈酸性蛋白胨（2）選擇培養(yǎng)基酚紅指示劑剛果紅（3）當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落【解析】（1）①在釀制葡萄酒時(shí)，葡萄汁就相當(dāng)于是酵母菌發(fā)酵的天然培養(yǎng)基，酵母菌為兼性厭氧型微生物，在氧氣充足條件下，能進(jìn)行有氧呼吸并大量繁殖，在無(wú)氧條件下能進(jìn)行酒精發(fā)酵，在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無(wú)法適應(yīng)而受到抑制。②雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水。培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源和氮源的成分是蛋白胨。（2）在微生物學(xué)中，將允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱(chēng)作選擇培養(yǎng)基。在選擇培養(yǎng)基中添加一些特殊的物質(zhì)，則可配制成鑒別培養(yǎng)基。如在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑變紅，則可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素，產(chǎn)生NH3；在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入剛果紅，由于剛果紅能和纖維素結(jié)合形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解，剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。（3）微生物培養(yǎng)中，稀釋涂布平板法常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。然而當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。24．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，但是并不能直接被農(nóng)作物吸收。土壤中含大量微生物，其中就有尿素分解菌。某興趣小組欲從土壤中分離該類(lèi)細(xì)菌，并進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)研究，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)：請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題：（1）稱(chēng)取土壤、梯度稀釋、接種微生物需要在火焰旁進(jìn)行，其目的是_____________。（2）該興趣小組設(shè)計(jì)了A、B兩種培養(yǎng)基（成分見(jiàn)下表）：葡萄糖無(wú)機(jī)鹽尿素瓊脂酚紅溶液水培養(yǎng)基A＋＋＋＋＋＋培養(yǎng)基B＋＋＋－＋＋注：＋表示有，－表示無(wú)據(jù)表分析，兩種培養(yǎng)基的碳源是________________；培養(yǎng)基B可用于增菌培養(yǎng)，不能用于分離純化，原因是________________________。接種的微生物中是否含有尿素分解菌，可通過(guò)觀察_______________進(jìn)行初步鑒定。（3）加入培養(yǎng)基的無(wú)機(jī)鹽含有KH2PO4及Na2HPO4，其作用是________________。配置好的培養(yǎng)基滅菌方法是_______________________。（4）若用平板劃線(xiàn)法接種微生物，在培養(yǎng)基上共畫(huà)了4個(gè)區(qū)域，則至少需要__________次灼燒接種環(huán)。【答案】（1）防止空氣中的雜菌污染（2）葡萄糖分離微生物需要用固體培養(yǎng)基或者液體培養(yǎng)基不能用于分離純化培養(yǎng)基是否變紅（培養(yǎng)基顏色）（3）為細(xì)菌生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，調(diào)節(jié)pH值高壓蒸汽滅菌法（4）5次【解析】（1）微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無(wú)菌操作，稱(chēng)取土壤、梯度稀釋、接種微生物需要在火焰旁進(jìn)行，其目的是防止雜菌污染。（2）由表可知，兩種培養(yǎng)基的碳源是葡萄糖；培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B的區(qū)別是有無(wú)瓊脂，即培養(yǎng)基A為固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基B為液體培養(yǎng)基，分離微生物需要用固體培養(yǎng)基，故培養(yǎng)基B可用于增菌培養(yǎng)，不能用于分離純化。由鑒定分解尿素細(xì)菌的原理可知，接種的微生物中是否含有尿素分解菌，可通過(guò)觀察培養(yǎng)基是否變紅進(jìn)行初步鑒定。（3）加入培養(yǎng)基的無(wú)機(jī)鹽含有KH2PO4及Na2HPO4，其作用是為細(xì)菌生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，調(diào)節(jié)pH值。培養(yǎng)基滅菌通常采用高壓蒸汽滅菌法。（4）采用平板劃線(xiàn)法純化微生物時(shí)，每次劃線(xiàn)之前都要灼燒接種環(huán)，劃線(xiàn)結(jié)束后還需灼燒接種環(huán)，若劃線(xiàn)時(shí)在培養(yǎng)基上共畫(huà)了4個(gè)區(qū)域，則需要5次灼燒接種環(huán)。25．牛奶消毒不過(guò)關(guān)容易攜帶細(xì)菌。根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB19645—2010）規(guī)定，每毫升合格的牛奶細(xì)菌總數(shù)不能超過(guò)50000個(gè)。某興趣小組利用恒溫水浴鍋對(duì)新鮮牛奶進(jìn)行消毒然后檢測(cè)消毒的效果，如下圖所示。（1）圖中步驟①對(duì)牛奶的消毒的方法是_____________，一般采用__________對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，蛋白胨的作用有________________________________（寫(xiě)兩點(diǎn)）。（2）步驟②將牛奶進(jìn)行梯度稀釋的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在培養(yǎng)基表面形成___________。步驟③的接種方法是_______________，這種方法可以用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，其原理是___________________________________________________________。（3）興趣小組通過(guò)步驟①～③接種了3個(gè)平板和1個(gè)未接種的平板放入恒溫培養(yǎng)箱，在適宜的溫度條件下培養(yǎng)48h，然后統(tǒng)計(jì)出4個(gè)平板上的菌落數(shù)分別是57、53、55和9。根據(jù)這樣的實(shí)驗(yàn)結(jié)果________（填“能”或“不能”）判斷該興趣小組消毒后的牛奶細(xì)菌超標(biāo)，原因是_________________________________。（4）如果要檢測(cè)牛奶中是否含有大腸桿菌，需要在培養(yǎng)基中加入____________（填物質(zhì)），觀察是否出現(xiàn)黑色（或藍(lán)黑色）的菌落?！敬鸢浮浚?）巴氏消毒高壓蒸汽滅菌提供碳源、氮源等（2）單個(gè)菌落稀釋涂布平板法當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌（3）不能因?yàn)槲唇臃N的培養(yǎng)基上有菌落出現(xiàn)，說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌不徹底，則其它培養(yǎng)基上的菌落數(shù)不能表示牛奶中細(xì)菌數(shù)量（4）伊紅美藍(lán)【解析】（1）圖中步驟①對(duì)牛奶的消毒方法是巴氏消毒，既可以殺滅牛奶中的微生物，又可以使牛奶中的營(yíng)養(yǎng)成分不會(huì)被破壞。對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌常用高壓蒸汽滅菌法，蛋白胨含多種有機(jī)物，能為微生物提供碳源、氮源、維生素等。（2）步驟②將牛奶進(jìn)行梯度稀釋的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。步驟③的接種方法是稀釋涂布平板法，這種方法可以用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，其原理是樣品稀釋度足夠高時(shí)，稀釋液中的一個(gè)活菌可在平板上長(zhǎng)出一個(gè)單菌落，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。（3）由于未接種的平板上也有菌落，說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌不合格，則其它培養(yǎng)基上的菌落數(shù)不能表示牛奶中細(xì)菌數(shù)量，故不能由上述平板上菌落數(shù)計(jì)算消毒后的牛奶細(xì)菌是否超標(biāo)。（4）伊紅美藍(lán)可使大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，所以要檢測(cè)牛奶中是否含有大腸桿菌，需要在培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)，觀察是否出現(xiàn)黑色（或藍(lán)黑色）的菌落。專(zhuān)題33微生物的培養(yǎng)與利用（提高）一、單選題1．為了篩選出能產(chǎn)生脲酶的微生物，應(yīng)當(dāng)從下列哪一種環(huán)境中選擇（）A．施用尿素較多的農(nóng)田 B．施用氨肥較多的農(nóng)田C．施用磷肥較多的農(nóng)田 D．落葉較多的地方【答案】A【解析】脲酶可以將尿素分解為二氧化碳和氨氣，其底物為尿素，因此篩選能產(chǎn)生脲酶的微生物，應(yīng)當(dāng)從尿素較多的農(nóng)田中獲得，BCD錯(cuò)誤，A正確。2．下列關(guān)于無(wú)菌操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．煮沸消毒可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢B．加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌C．利用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖脫毒苗時(shí)，需要對(duì)植物的外植體進(jìn)行消毒D．接種時(shí)灼燒接種環(huán)要冷卻后再對(duì)菌種劃線(xiàn)【答案】B【解析】100℃煮沸5~6min可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢，A正確；指示劑和染料可能混有微生物，故加入培養(yǎng)基前需滅菌，B錯(cuò)誤；利用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖脫毒苗時(shí)，為防止細(xì)菌污染，應(yīng)對(duì)外植體進(jìn)行消毒，C正確；接種時(shí)灼燒接種環(huán)要冷卻后再對(duì)菌種劃線(xiàn)，以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種，D正確。3．下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A．培養(yǎng)過(guò)微生物的培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后仍可用于培養(yǎng)微生物B．涂布接種時(shí)，要待涂布器上酒精燃盡后冷卻再使用C．對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行編號(hào)或?qū)N進(jìn)行標(biāo)注時(shí)，應(yīng)使用記號(hào)筆在皿蓋標(biāo)記便于觀察D．長(zhǎng)期保存菌種時(shí)，可以采用甘油管藏的方法，放在4℃冰箱中保存【答案】B【解析】培養(yǎng)過(guò)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)該經(jīng)滅菌后扔掉，A錯(cuò)誤；涂布接種時(shí)，應(yīng)該將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8-10s，B正確；對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行標(biāo)記時(shí)，應(yīng)該在皿底進(jìn)行標(biāo)記，C錯(cuò)誤；長(zhǎng)期保存菌種時(shí)，可以采用甘油管藏法，放入-20度的冷凍箱中保存，D錯(cuò)誤。4．實(shí)驗(yàn)測(cè)定鏈霉素對(duì)3種細(xì)菌的抗生素效應(yīng)，用3種細(xì)菌在事先準(zhǔn)備好的瓊脂塊平板上畫(huà)3條等長(zhǎng)的平行線(xiàn)（3條線(xiàn)均與下圖中的鏈霉素帶接觸），將平板置于37℃條件下恒溫培養(yǎng)3天，結(jié)果如圖所示。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析以下敘述，不正確的是（???）?A．鏈霉素能阻止結(jié)核菌的生長(zhǎng)B．鏈霉素對(duì)結(jié)核菌比對(duì)霍亂菌更有效C．鏈霉素對(duì)結(jié)核菌比對(duì)傷寒菌更有效D．鏈霉素可以用于治療傷寒病人【答案】D【解析】抗生素是真菌（另外還有放線(xiàn)菌）產(chǎn)生的可殺死某些致病菌的物質(zhì)，可以用來(lái)治療相應(yīng)的疾病。如圖所示，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，鏈霉菌產(chǎn)生的鏈霉素是一種抗生素類(lèi)物質(zhì)，它可以抑制某些細(xì)菌的繁殖。分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出：鏈霉素對(duì)結(jié)核桿菌的抑制作用最強(qiáng)，對(duì)霍亂菌的抑制作用較弱，對(duì)傷寒菌幾乎無(wú)抑制作用，ABC正確，D錯(cuò)誤。5．不同的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)型微生物的描述中，不正確的是（）A．氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮元素 B．碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C．無(wú)機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) D．水是該微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之一【答案】B【解析】氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素，A正確；該碳源是二氧化碳，屬于無(wú)機(jī)物，不能作為微生物的能源物質(zhì)，B錯(cuò)誤；無(wú)機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，C正確；水是該微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之一，D正確。6．在做分離“分解尿素的細(xì)菌”實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從對(duì)應(yīng)10-6培養(yǎng)基中篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。下列有關(guān)敘述不正確的是（）A．A同學(xué)出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是土樣不同B．可以將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)作為空白對(duì)照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染C．讓其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如果結(jié)果與A同學(xué)一樣，則可證明A同學(xué)無(wú)誤D．B選項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)思路遵循了實(shí)驗(yàn)的對(duì)照原則，而C選項(xiàng)的沒(méi)有【答案】D【解析】A同學(xué)出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是土樣不同，也可能是操作中污染造成的，A正確；A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能是培養(yǎng)基污染造成的，可以將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)作為空白對(duì)照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染，B正確；如果是A同學(xué)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中污染造成的，讓其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如果結(jié)果與A同學(xué)一樣，則可證明A同學(xué)無(wú)誤，C正確；B、C選項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)思路都遵循了實(shí)驗(yàn)的對(duì)照原則，D錯(cuò)誤。7．為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線(xiàn)接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是（）A．倒平板后需間歇晃動(dòng)，以保證表面平整B．圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C．該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的D．菌落周?chē)睦w維素被降解后，可被剛果紅染成紅色【答案】B【解析】倒平板后無(wú)需晃動(dòng)，A錯(cuò)誤；Ⅰ區(qū)、Ⅱ區(qū)沒(méi)有出現(xiàn)單菌落，說(shuō)明細(xì)菌數(shù)量太多，故應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落，B正確；出現(xiàn)單菌落即達(dá)到了菌種純化的目的，C錯(cuò)誤；剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)，D錯(cuò)誤。8．產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，①為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．使用平板劃線(xiàn)法可以在⑥上獲得單個(gè)菌落B．如果要測(cè)定②中的活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法C．圖中②培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源D．微生物培養(yǎng)前，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行消毒處理【答案】D【解析】平板劃線(xiàn)法可分離微生物，可獲得單個(gè)菌落，A正確；利用稀釋涂布平板法可對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，B正確；圖中②培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源，以擴(kuò)大降解苯酚的微生物的濃度，C正確；微生物培養(yǎng)前，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行滅菌處理，D錯(cuò)誤。9．下列有關(guān)微生物分離、純化及計(jì)數(shù)的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A．平板劃線(xiàn)法通過(guò)連續(xù)劃線(xiàn)將聚集的菌種分散并計(jì)數(shù)B．用富含尿素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)尿素分解菌C．稀釋涂布平板法通過(guò)系列梯度稀釋可將微生物分散D．用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)微生物時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往偏大【答案】A【解析】平板劃線(xiàn)法通過(guò)連續(xù)劃線(xiàn)將聚集的菌種分散，但無(wú)法計(jì)數(shù)，A錯(cuò)誤；用富含尿素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)尿素分解菌，B正確；稀釋涂布平板法通過(guò)系列梯度稀釋可將微生物分散，C正確；用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)微生物時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往偏大，因?yàn)橛行┧谰脖挥?jì)入其中，D正確。10．茶葉中含多種物質(zhì)，其中茶多酚具有殺菌消炎作用。為研究茶多酚的抑菌效果，研究人員進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。下表所示為在不同pH、茶多酚濃度為40g/L時(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。菌種抑菌圈直徑（mm）pH=4pH=5pH=6pH=7pH=8pH=9pH=10沙門(mén)氏菌14．013．713．814．315．514．612．5蠟狀芽孢桿菌16．015．514．715．717．415．613．5大腸桿菌11．812．912．713．815．014．412．8結(jié)合表中數(shù)據(jù)分析，可得到的結(jié)論是（）A．不同pH條件下，茶多酚對(duì)同一種細(xì)菌的抑制效果不同B．相同pH條件下，茶多酚對(duì)三種細(xì)菌的抑制效果相同C．茶多酚對(duì)三種細(xì)菌的抑制效果均最強(qiáng)時(shí)的最適pH是7D．濃度為40g/L的茶多酚是抑制三種菌繁殖的最適濃度【答案】A【解析】不同pH條件下，茶多酚對(duì)同一種細(xì)菌的抑制效果不同，A正確；任選一個(gè)pH值對(duì)比即可發(fā)現(xiàn)茶多酚對(duì)不同細(xì)菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑是不同的，所以相同pH條件下，茶多酚對(duì)三種細(xì)菌的抑制效果不同，B錯(cuò)誤；找出每一行細(xì)菌抑菌圈最大值對(duì)應(yīng)的pH值，可知茶多酚對(duì)三種細(xì)菌的抑制效果均最強(qiáng)時(shí)的最適pH是8，C錯(cuò)誤；本題中未比較其他濃度的茶多酚抑菌效果，因此不能判斷40g/L是否為抑制三種菌繁殖的最適濃度，D錯(cuò)誤。11．下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和分離的說(shuō)法中，正確的是（）A．先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，立即出現(xiàn)有透明圈的菌落B．篩選纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)流程中不可省略選擇培養(yǎng)這一步C．菌落的大小、顏色、有無(wú)莢膜、隆起程度等特征都可作為菌種肉眼鑒定的依據(jù)D．在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可初步鑒定尿素分解菌【答案】D【解析】先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，此種方法需用氯化鈉洗去浮色，再觀察出現(xiàn)有透明圈的菌落，A錯(cuò)誤；選擇培養(yǎng)可省略，但培養(yǎng)分離的纖維素分解菌少，B錯(cuò)誤；菌落的大小、顏色、隆起程度等特征都可作為菌種鑒定的依據(jù)，但是有無(wú)莢膜通過(guò)肉眼無(wú)法觀察，C錯(cuò)誤；在只含有尿素作為氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可初步鑒定尿素分解菌，D正確。12．秸稈還田可增加土壤肥力，緩解環(huán)境污染。為分離分解纖維素的微生物菌種，實(shí)現(xiàn)廢物的資源化利用，研究人員設(shè)計(jì)了“土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌株”的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)在高壓蒸汽滅菌之后調(diào)節(jié)pHB．選擇培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)使用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基C．進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，應(yīng)在酒精燈火焰旁完成各種操作D．挑選菌株后，應(yīng)將使用過(guò)的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌后再丟棄【答案】A【解析】配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)在高壓蒸汽滅菌之前調(diào)節(jié)pH，避免滅菌之后調(diào)pH造成雜菌污染，A錯(cuò)誤；選擇培養(yǎng)時(shí)，為分離分解纖維素的微生物菌種，應(yīng)使用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基，B正確；進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，為了無(wú)菌操作，應(yīng)在酒精燈火焰旁完成各種操作，C正確；挑選菌株后，為了防止造成污染，應(yīng)將使用過(guò)的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌后再丟棄，D正確。13．尿素分解菌可將土壤中的尿素分解成CO2和NH3供植物利用。下列關(guān)于土壤中尿素分解菌的分離和計(jì)數(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．尿素分解菌能分解尿素是因?yàn)槟芎铣呻迕窧．培養(yǎng)尿素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基的pH要調(diào)至中性或微堿性C．用稀釋涂布平板法接種后，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)單個(gè)的尿素分解菌D．若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目多【答案】D【解析】尿素分解菌可以合成脲酶，將尿素分解成CO2和NH3，A正確；培養(yǎng)尿素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基的pH要調(diào)至中性或微堿性，B正確；用稀釋涂布平板法接種后，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)單個(gè)的尿素分解菌，C正確；由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌可能形成一個(gè)菌落，所以用稀釋涂布平板法接種，統(tǒng)計(jì)的數(shù)目比實(shí)際的數(shù)目少，D錯(cuò)誤。14．黑茶是利用微生物的酶促進(jìn)茶多酚氧化的發(fā)酵茶。研究人員對(duì)黑茶中的微生物進(jìn)行了分離和鑒定，過(guò)程如圖所示。下列相關(guān)敘述不正確的是（）A．向樣品中加入無(wú)菌水制成樣品懸液B．可根據(jù)菌落特征對(duì)菌種進(jìn)行初步鑒定C．涂布平板上長(zhǎng)出的菌落可通過(guò)劃線(xiàn)法進(jìn)一步純化D．斜面培養(yǎng)基含大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，常溫下可長(zhǎng)期保存【答案】D【解析】制備樣品懸液時(shí)應(yīng)向黑茶樣品中加入無(wú)菌水，A正確；可以根據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)菌種進(jìn)行初步的鑒定或分類(lèi)，B正確；涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，可通過(guò)平板劃線(xiàn)法進(jìn)一步純化，C正確；斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物，可在低溫下長(zhǎng)期保存菌株，D錯(cuò)誤。15．下列有關(guān)土壤中微生物的分離與計(jì)數(shù)的說(shuō)法中，錯(cuò)誤的是（）A．因?yàn)橥寥乐懈黝?lèi)微生物的數(shù)量不同，所以，為獲得不同類(lèi)型的微生物要按不同的稀釋倍數(shù)進(jìn)行分離B．測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍不同C．如果得到了3個(gè)或3個(gè)以上菌落數(shù)目在30~300的平板，則說(shuō)明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)D．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯小于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細(xì)菌菌落【答案】D【解析】土壤是微生物的天然培養(yǎng)基，土壤中各類(lèi)微生物的數(shù)量不同，獲得不同類(lèi)型的微生物要按不同的稀釋倍數(shù)進(jìn)行分離，A正確；土壤中細(xì)菌總量高于定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，所以選用的稀釋范圍不同，B正確；稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，得到了3個(gè)或3個(gè)以上菌落數(shù)目在30～300的平板，則說(shuō)明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)，C正確；選擇培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯小于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)目，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細(xì)菌菌落，D錯(cuò)誤。二、綜合題16．研究人員欲從土壤中分離出高效分解尿素的尿素小球菌，進(jìn)行了一系列操作。回答下列相關(guān)問(wèn)題：（1）為了獲得尿素小球菌，可在含尿素較多的土壤中取樣，并應(yīng)選用以__________為唯一氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)。除氮源外，培養(yǎng)液還應(yīng)含有__________等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。（2）培養(yǎng)基中的瓊脂屬于多糖類(lèi)物質(zhì)，但是它并不能為尿素小球菌提供碳源，原因是____________________________________________________________________________。（3）對(duì)采集的土壤樣品一般先用____________進(jìn)行稀釋?zhuān)龠M(jìn)行平板培養(yǎng)，從中選出菌落數(shù)在____________間的平板計(jì)數(shù)。該方法計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏小，原因是__________________。（4）對(duì)分離得到的尿素小球菌作進(jìn)一步鑒定時(shí)，可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑變紅的原因是______________________，再結(jié)合菌落的特征等進(jìn)行確定。（5）將獲得的3種待選微生物甲、乙、丙分別接種在相同的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充裕、條件適宜，觀測(cè)從實(shí)驗(yàn)開(kāi)始到微生物停止生長(zhǎng)所用的時(shí)間，甲、乙、丙分別為23h、17h、29h，則應(yīng)選擇微生物__________作為菌種進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)?！敬鸢浮浚?）尿素碳源、水、無(wú)機(jī)鹽（2）尿素小球菌細(xì)胞中缺乏分解瓊脂的酶（3）無(wú)菌水30~300當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌落連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是單個(gè)菌落數(shù)（4）尿素小球菌合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)乙【解析】（1）為了獲得尿素小球菌，可在含尿素較多的土壤中取樣，并應(yīng)選用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)。培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)組成一般都含有氮源、碳源、水和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。（2）由于尿素小球菌細(xì)胞中缺乏分解瓊脂的酶，所以培養(yǎng)基中的瓊脂雖屬于多糖類(lèi)物質(zhì)，但是它并不能為尿素小球菌提供碳源。（3）對(duì)采集的土壤樣品一般先用無(wú)菌水進(jìn)行稀釋?zhuān)龠M(jìn)行平板培養(yǎng)，從中選出菌落數(shù)在30~300間的平板計(jì)數(shù)。該方法計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏小，原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌落連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是單個(gè)菌落數(shù)。（4）對(duì)分離得到的尿素小球菌作進(jìn)一步鑒定時(shí)，可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，由于尿素小球菌合成的脲酶能將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，進(jìn)而使酚紅指示劑變紅。（5）由題意可知，微生物乙在選擇培養(yǎng)基中從實(shí)驗(yàn)開(kāi)始到停止生長(zhǎng)所用的時(shí)間較微生物甲、丙短，說(shuō)明微生物乙分解尿素的能力比甲、丙更強(qiáng)，所以應(yīng)選擇微生物乙作為菌種進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)。17．某種物質(zhì)S（一種含有C、H、N的有機(jī)物）難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無(wú)機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無(wú)機(jī)鹽、水、S和Y?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）實(shí)驗(yàn)時(shí)，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用_________________的方法進(jìn)行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是_________________。甲、乙培養(yǎng)基均屬于________________培養(yǎng)基。（2）實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過(guò)200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋__________倍。（3）在步驟⑤的篩選過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過(guò)某一濃度時(shí)，某菌株對(duì)S的降解量反而下降，其原因可能是__________________________________________（答出1點(diǎn)即可）。（4）若要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)，請(qǐng)寫(xiě)出主要實(shí)驗(yàn)步驟________________。（5）上述實(shí)驗(yàn)中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供4類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，即____________________。【答案】（1）高壓蒸汽滅菌瓊脂選擇（2）104（3）S的濃度超過(guò)某一值時(shí)會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)（4）取淤泥加入無(wú)菌水，涂布（或稀釋涂布）到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)（5）水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽【解析】（1）常用高壓蒸汽滅菌法處理盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶，乙為固體培養(yǎng)基，故需要加入Y瓊脂；甲和乙培養(yǎng)基可以用于篩選能降解S的菌株，故均屬于選擇培養(yǎng)基。（2）若要在每個(gè)平板上涂布100μL稀釋液后的菌液，且每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過(guò)200個(gè)，則搖瓶M中的菌液稀釋的倍數(shù)至少為2×107÷1000×100÷200=1×104倍。（3）當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過(guò)某一濃度后，可能會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)，從而造成其對(duì)S的降解量下降。（4）要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)，可以取淤泥加無(wú)菌水制成菌懸液，稀釋涂布到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)。（5）甲和乙培養(yǎng)基均含有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源。18．研究發(fā)現(xiàn)一些嗜冷細(xì)菌產(chǎn)生的蛋白酶可使乳蛋白分解，導(dǎo)致牛奶變質(zhì)。為了篩選檢測(cè)變質(zhì)牛奶中的嗜冷細(xì)菌，某研學(xué)小組做了如圖所示實(shí)驗(yàn)。（注：培養(yǎng)皿旁的數(shù)字代表菌落數(shù)目），請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）牛奶飲用前要經(jīng)過(guò)巴氏消毒，以殺死有害微生物，與煮沸消毒相比，巴氏消毒的牛奶在常溫（約28℃）下保存時(shí)間較短，原因是_________，導(dǎo)致牛奶中營(yíng)養(yǎng)成分被分解而變質(zhì)。（2）若要篩選嗜冷細(xì)菌，應(yīng)將牛奶樣品稀釋液接種在以_________為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上，并且在______的環(huán)境條件下培養(yǎng)，以利于嗜冷細(xì)菌生長(zhǎng)，抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。（3）據(jù)圖分析，研學(xué)小組采用的是________________法分離和計(jì)數(shù)嗜冷細(xì)菌。（4）用上述方法統(tǒng)計(jì)樣本中菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對(duì)照組？_________（填“需要”或“不需要”），其原因是_____________________________________________。（5）按照菌落計(jì)數(shù)的要求，據(jù)圖可得出1ml牛奶樣品中嗜冷細(xì)菌的活菌數(shù)為_(kāi)_________個(gè)，與用血球計(jì)數(shù)板相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)目較_______________?！敬鸢浮浚?）（巴氏消毒的）牛奶中沒(méi)有被殺死的微生物（或細(xì)菌）在適宜溫度（或常溫）下大量繁殖（2）乳蛋白低溫（或較低溫度）（3）稀釋涂布平板（4）需要需要證明（或判斷）培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格）（5）3.9×105少【解析】（1）由于巴氏消毒的溫度為75~80℃之間，有些微生物在此溫度下沒(méi)有被殺死，故在適宜溫度（或常溫）下，（巴氏消毒的）牛奶中沒(méi)有被殺死的微生物（或細(xì)菌）會(huì)大量繁殖，導(dǎo)致牛奶中營(yíng)養(yǎng)成分被分解而變質(zhì)。所以巴氏消毒的牛奶在常溫（約28℃）下保存時(shí)間較短。（2）由于嗜冷細(xì)菌產(chǎn)生的蛋白酶可使乳蛋白分解，故要篩選嗜冷細(xì)菌，應(yīng)將牛奶樣品稀釋液接種在以乳蛋白為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上，并且在低溫的環(huán)境條件下培養(yǎng)，以利于嗜冷細(xì)菌生長(zhǎng)，抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。（3）根據(jù)圖示中將牛奶樣品稀釋后涂在培養(yǎng)基上進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，可知研學(xué)小組采用的是稀釋涂布平板法分離和計(jì)數(shù)嗜冷細(xì)菌。（4）由于不知道制備的培養(yǎng)基是否被污染，故需要設(shè)置不接種微生物的培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照，以證明（或判斷）培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格）。（5）菌體計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選擇菌落數(shù)在30~300之間的稀釋倍數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，由圖中菌落數(shù)量可知，應(yīng)選擇稀釋103的進(jìn)行計(jì)數(shù)，故1ml牛奶樣品中嗜冷細(xì)菌的活菌數(shù)為（36+39+42）÷3÷0.1×103=3.9×105個(gè)。該種方法計(jì)數(shù)時(shí)，計(jì)數(shù)的是活菌的數(shù)量，且當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌體連在一起生長(zhǎng)時(shí)，平板上觀察的只是一個(gè)菌落，故與用血球計(jì)數(shù)板相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)目較小。19．多環(huán)芳烴菲在染料、殺蟲(chóng)劑等生產(chǎn)過(guò)程中被廣泛使用，是土壤、河水中常見(jiàn)的污染物之一。下圖表示科研人員從被石油污染的土壤中分離獲得能降解多環(huán)芳烴菲的菌株Q的主要步驟。請(qǐng)回答：（1）步驟①→③的培養(yǎng)過(guò)程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率；另一方面能__________________________________。（2）步驟④用平板劃線(xiàn)法純化菌株Q過(guò)程中，在做第二次以及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)，原因是_________________________________________，同時(shí)需要相同條件下培養(yǎng)不接種的培養(yǎng)基平板做對(duì)照，采用固體平板培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)要倒置培養(yǎng)，其目的是______________________________。（3）接種環(huán)通過(guò)灼燒滅菌，完成步驟④中劃線(xiàn)操作，共需灼燒接種環(huán)________次。（4）為了獲得分解多環(huán)芳烴菲能力更強(qiáng)的菌株，研究人員又對(duì)菌種Q進(jìn)行了誘變處理，得到突變株K。為了進(jìn)一步鑒定菌株K并比較兩種菌株降解多環(huán)芳烴菲的能力，設(shè)計(jì)了下列實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)補(bǔ)全實(shí)驗(yàn)步驟：①取9只錐形瓶均分成三組，編號(hào)A、B、C②向A、B、C三組錐形瓶中加入_______________________________________的培養(yǎng)液。③向A、B、C三組培養(yǎng)液中分別加入___________________________________________。④28℃恒溫培養(yǎng)3天后，測(cè)定_________________________________________________?！敬鸢浮浚?）增加培養(yǎng)液中的溶氧量（或增加培養(yǎng)液中的含氧量）（2）線(xiàn)條末端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)條起始處要少（或能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落）防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基（或避免培養(yǎng)基中水分的過(guò)快揮發(fā)）（3）6（4）等量的以多環(huán)芳烴菲為唯一碳源等量的無(wú)菌水、菌株Q菌液和突變株K菌液錐形瓶中多環(huán)芳烴菲的降解率【解析】（1）步驟①→③的培養(yǎng)過(guò)程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，目的有兩個(gè)，一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率；另一方面能增加培養(yǎng)液中的溶氧量。（2）步驟④用平板劃線(xiàn)法純化菌株Q過(guò)程中，由于線(xiàn)條末端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)條起始處要少，所以在做第二次以及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)．采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)要倒置培養(yǎng)的目的是防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基。（3）接種環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過(guò)灼燒來(lái)滅菌，所以完成步驟④中5次劃線(xiàn)操作前都要灼燒滅菌，接種結(jié)束后還需灼燒滅菌1次，防止造成污染，由此可見(jiàn)，完成步驟④共需灼燒接種環(huán)6次。（4）本實(shí)驗(yàn)的目的是比較兩種菌株降解多環(huán)芳烴菲的能力。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需要遵循對(duì)照原則，對(duì)照組需加入等量無(wú)菌水；還需遵循單一變量原則，單一變量是菌種類(lèi)比不同，即菌株Q菌液和突變株K菌液，所以實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下：①取9只錐形瓶均分成三組，編號(hào)A、B、C。②向9支錐形瓶中分別加入等量以多環(huán)芳烴菲為唯一碳源的培養(yǎng)液。③向A、B、C三組培養(yǎng)液中分別加入等量的無(wú)菌水、菌株Q菌液和突變株K菌液。④28℃恒溫培養(yǎng)3天后，測(cè)定錐形瓶中多環(huán)芳烴菲的降解率。專(zhuān)題33微生物的培養(yǎng)與利用（挑戰(zhàn)）一、單選題1．下列有關(guān)微生物的培養(yǎng)和分離的敘述，正確的是（）A．灼燒接種環(huán)后，為避免其他雜菌的干擾，應(yīng)立即伸入菌液取菌種B．若要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染，可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下進(jìn)行培養(yǎng)C．在第一次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)和每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)的目的相同D．若對(duì)大腸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的數(shù)目會(huì)比實(shí)際值略大【答案】B【解析】接種環(huán)必須冷卻后，才可以伸入菌液中蘸取一環(huán)液，否則會(huì)燒傷或燒死微生物，A錯(cuò)誤；可以將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對(duì)照，以判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底，若空白培養(yǎng)基上有菌種出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基被污染，B正確；在第一次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)和每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)的目的不相同，第一次灼燒接種環(huán)的目的是避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基，而每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)的目的殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，C錯(cuò)誤；由于在稀釋涂布平板法中，可能會(huì)發(fā)生多個(gè)微生物形成一個(gè)菌落的情況，因此涂布平板法統(tǒng)計(jì)的大腸桿菌數(shù)目會(huì)比實(shí)際值偏小，D錯(cuò)誤。2．原油（黑褐色黏稠的油狀液體）泄漏造成的污染很難清除，我們可以從受原油污染的土壤或海水中篩選出能高效降解原油的菌株。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．配制選擇培養(yǎng)基時(shí)需提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件，同時(shí)抑制其他微生物生長(zhǎng)B．在供氧充足的條件下培養(yǎng)、分離目的菌株可避免無(wú)氧呼吸產(chǎn)物造成的二次污染C．接種前對(duì)菌種進(jìn)行稀釋的目的是使粘在一起的菌體分散開(kāi)，便于菌株的分離D．若三個(gè)平板上菌落數(shù)分別為276、159、32，則平均菌落數(shù)約為156【答案】D【解析】對(duì)微生物的篩選，應(yīng)人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件如營(yíng)養(yǎng)、溫度、PH值等，同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)，A正確；微生物在厭氧條件下不能將有機(jī)物徹底氧化分解，產(chǎn)生的不徹底氧化產(chǎn)物會(huì)導(dǎo)致土壤受到二次污染，B正確；稀釋的目的是使粘在一起的菌體分散開(kāi)，將菌體分散成單個(gè)細(xì)胞，便于后面在平板上獲得單個(gè)菌落，C正確；由于三個(gè)數(shù)值差別太大，可信度差，D錯(cuò)誤。3．圓褐固氮菌具有較強(qiáng)的固氮能力（將大氣中的N2固定成NH3），并且能夠分泌植物生長(zhǎng)素，促進(jìn)植株生長(zhǎng)和果實(shí)發(fā)育。某研究小組從土壤中分離固氮菌并進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后制成菌肥施入土壤中以增加土壤肥力，提高農(nóng)作物的產(chǎn)量。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（）A．圓褐固氮菌固定的氮能直接被植物吸收利用B．可用酚紅對(duì)選擇培養(yǎng)的圓褐固氮菌進(jìn)行鑒定C．篩選圓褐固氮菌的培養(yǎng)基中要加入有機(jī)氮源D．可通過(guò)平板劃線(xiàn)法對(duì)所培養(yǎng)的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)【答案】B【解析】生物固氮生成的NH3經(jīng)過(guò)土壤中硝化細(xì)菌的作用，最終轉(zhuǎn)化成硝酸鹽，硝酸鹽可以被植物吸收利用，A錯(cuò)誤；酚紅指示劑在pH升高后將變紅，而圓褐固氮菌固氮產(chǎn)生的氨使得pH升高，因此可用酚紅對(duì)選擇培養(yǎng)的圓褐固氮菌進(jìn)行鑒定，B正確；圓褐固氮菌具有固氮能力，因此篩選圓褐固氮菌的培養(yǎng)基中不要加入有機(jī)氮源，C錯(cuò)誤；平板劃線(xiàn)法只能用于菌種的分離，不能用于菌種的計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。4．將從種植煙草的土壤里分離得到的尼古?。–10H14N2）降解菌株SC接種到尼古丁培養(yǎng)基中，30℃搖床培養(yǎng)并定時(shí)取樣，測(cè)定并計(jì)算發(fā)酵液中的尼古丁濃度和菌體濃度，得到的結(jié)果如圖所示。下列分析不正確的是（）A．分離SC時(shí)可用稀釋涂布平板法或劃線(xiàn)法B．培養(yǎng)36h時(shí)SC的數(shù)量為該種群的環(huán)境容納量C．影響SC種群密度變化的主要因素是O2濃度和pHD．發(fā)酵液中的尼古丁為SC提供碳源和氮源【答案】C【解析】平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法均可分離和提純細(xì)菌，A項(xiàng)正確；培養(yǎng)36h時(shí)，SC的數(shù)量達(dá)到最大值，為該種群的環(huán)境容納量，B項(xiàng)正確；根據(jù)題意可知，尼古丁是SC的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，為SC提供碳源和氮源，再結(jié)合曲線(xiàn)圖可推知，影響SC種群密度變化的主要因素是培養(yǎng)基中尼古丁的含量，C項(xiàng)錯(cuò)誤，D項(xiàng)正確。5．生物燃料是指以纖維素材料為原料生產(chǎn)的燃料乙醇和生物柴油，篩選出能高效分解纖維素的纖維素分解菌是制造生物燃料的重要前提。下列說(shuō)法正確的是（）A．能夠分解纖維素的酶是一種復(fù)合酶，其中葡萄糖苷酶能把纖維素分解為纖維二糖B．在篩選纖維素分解菌的過(guò)程中，剛果紅染色法能通過(guò)顏色反應(yīng)直接篩選微生物C．倒平板時(shí)加入剛果紅染色，優(yōu)點(diǎn)是顯示的顏色反應(yīng)基本上就是纖維素分解菌的作用D．用平板劃線(xiàn)法對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)選菌落數(shù)在30-300之間的平板計(jì)數(shù)【答案】B【解析】由分析可知，纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少含有三種組分，即C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶，其中C1酶、Cx酶能把纖維素分解為纖維二糖，A錯(cuò)誤；在篩選纖維素分解菌的過(guò)程中，發(fā)明了剛果紅染色法，剛果紅染色法能通過(guò)顏色反應(yīng)直接篩選微生物，B正確；由分析可知，倒平板時(shí)加入剛果紅染色是第二種方法，其優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，不存在菌落混雜問(wèn)題，而顯示的顏色反應(yīng)基本上就是纖維素分解菌的作用是方法一的典型優(yōu)點(diǎn)，C錯(cuò)誤；用稀釋涂布平板法對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)選菌落數(shù)在30-300之間的平板計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。6．某同學(xué)檢測(cè)泡菜濾液中的亞硝酸鹽含量，并分離純化其中的乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．泡菜濾液顯色的深淺與其中亞硝酸鹽的含量呈正相關(guān)B．培養(yǎng)適宜時(shí)間后，應(yīng)挑選出具有透明圈的菌落C．若要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，應(yīng)該在滅菌之前進(jìn)行D．挑選出來(lái)的菌落可直接進(jìn)行涂布分離【答案】D【解析】在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料．將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測(cè)對(duì)比，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量，所以泡菜濾液顯色的深淺與其中亞硝酸鹽的含量呈正相關(guān)，A正確；由于乳酸菌產(chǎn)生的乳酸將培養(yǎng)基的碳酸鈣分解，所以會(huì)出現(xiàn)透明圈，因此培養(yǎng)適宜時(shí)間后，應(yīng)挑選出具有透明圈的菌落，B正確；培養(yǎng)基的配制時(shí)需要先調(diào)節(jié)pH，在進(jìn)行滅菌，避免雜菌的污染，C正確；挑選出來(lái)的菌落要先進(jìn)行稀釋在進(jìn)行涂布，D錯(cuò)誤。7．勤洗手是預(yù)防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠狀病毒（2019-nCOV）期間推出一款新型免洗洗手凝膠。為衡量該凝膠的清洗效果，研究人員檢測(cè)了凝膠洗手前后，手部細(xì)菌的含量。凝膠洗手前的檢測(cè)流程見(jiàn)下圖。下列敘述正確的是（）A．統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌的數(shù)量，選擇的接種方法是平板劃線(xiàn)法B．除圖中操作外，還需要設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)C．培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落只可能來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌D．初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類(lèi)型，需要用顯微鏡觀察菌體的形狀【答案】B【解析】平板劃線(xiàn)無(wú)法得知稀釋倍數(shù)，不能用于活菌計(jì)數(shù)，故統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌的數(shù)量，選擇的接種方法是稀釋涂布平板法，A錯(cuò)誤；除圖中操作外，還需要設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，驗(yàn)證培養(yǎng)基是否被雜菌污染，B正確；由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上顯示的只是一個(gè)菌落，故培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落可能來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)、甚至幾個(gè)活菌，C錯(cuò)誤；由于菌落肉眼可見(jiàn)，故初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類(lèi)型，可用肉眼觀察菌體的形態(tài)特征，D錯(cuò)誤。8．將同一土壤樣本經(jīng)滅菌和未滅菌處理后．分別放在兩個(gè)培養(yǎng)皿中，在土壤表面分別放3張廢紙（主要成分是纖維素）。然后將兩個(gè)培養(yǎng)皿放在有較高濕度的培養(yǎng)室中，4~6周后觀察兩個(gè)培養(yǎng)皿的變化情況（如下圖）。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．土壤微生物能夠?qū)U紙中的有機(jī)物分解成無(wú)機(jī)物B．將培養(yǎng)皿和土壤滅菌的方法可以是高壓蒸汽滅菌C．若土壤濕度不夠，可加入些清水以控制無(wú)關(guān)變量D．若某酵母菌不能利用廢紙，可能是由于缺乏相應(yīng)分解酶系【答案】C【解析】廢紙的主要成分是纖維素，土壤中分解纖維素的微生物可以利用廢紙中的纖維素獲取物質(zhì)和能量，A正確；培養(yǎng)皿和土壤既可以采用干熱滅菌，又可以采用高壓蒸汽滅菌，B正確；若土壤濕度不夠，可加入些無(wú)菌水，以控制濕度對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，C錯(cuò)誤；某酵母菌不能利用廢紙，可能的原因是缺乏相應(yīng)分解酶系（即缺乏纖維素酶和半纖維素酶），D正確。9．下列對(duì)四種微生物相關(guān)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．CO2和NH3分別是硝化細(xì)菌的碳源和氮源，該生物所需的能源來(lái)自NH3的氧化B．CO2和硝酸鹽分別是褐藻的碳源和氮源，該生物所需的能源來(lái)自太陽(yáng)能C．糖類(lèi)和N2是乳酸菌的碳源和氮源，該生物所需的能源來(lái)自乳酸的氧化分解D．葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，但CO2一定不是酵母菌的碳源【答案】C【解析】硝化細(xì)菌是化能自養(yǎng)需氧型微生物，CO2和NH3分別是硝化細(xì)菌的碳源和氮源，該生物所需的能源來(lái)自NH3的氧化，A項(xiàng)正確；褐藻能進(jìn)行光合作用，CO2和硝酸鹽分別是褐藻的碳源和氮源，該生物所需的能源來(lái)自太陽(yáng)能，B項(xiàng)正確；乳酸菌是異養(yǎng)厭氧型微生物，乳酸菌不能固氮，因此N2不是其氮源，乳酸是乳酸菌的代謝產(chǎn)物，乳酸菌的碳源為葡萄糖,氮源為無(wú)機(jī)鹽，該生物所需的能源來(lái)自糖類(lèi)的氧化分解，C項(xiàng)錯(cuò)誤；酵母菌是異養(yǎng)生物，葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，酵母菌不能直接利用CO2，D項(xiàng)正確。10．篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細(xì)菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會(huì)出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈（如圖），實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表。菌種菌落直徑：C（mm）透明圈直徑：H（mm）H/C細(xì)菌Ⅰ5.111.22.2細(xì)菌Ⅱ8.113.01.6有關(guān)本實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B．篩選分解淀粉的細(xì)菌時(shí)，菌液應(yīng)稀釋后涂布C．以上兩種細(xì)菌均不能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外D．H/C值反映了兩種細(xì)菌分解淀粉能力的差異【答案】C【解析】培養(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子等成分，A正確；篩選淀粉分解菌時(shí)，需要對(duì)菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)賹⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，B正確；由題意可知，以上兩種菌均會(huì)產(chǎn)生透明圈，說(shuō)明兩種菌均可以產(chǎn)生淀粉酶并分泌到細(xì)胞外分解淀粉，C錯(cuò)誤；淀粉分解菌的H/C越大，說(shuō)明其產(chǎn)生的淀粉酶分解的淀粉相對(duì)越多，可說(shuō)明該淀粉分解菌分解淀粉的能力越強(qiáng)，D正確。11．生長(zhǎng)圖形法是一種測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需求的簡(jiǎn)便方法。為探究某嗜熱菌所需生長(zhǎng)因子的種類(lèi)，研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長(zhǎng)因子但含有其他必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長(zhǎng)因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無(wú)污染B．制備平板時(shí)，培養(yǎng)基需先滅菌再倒平板C．生長(zhǎng)圖形法還可用于某些菌種的篩選D．圖示結(jié)果表明該菌需要生長(zhǎng)因子乙或丙【答案】D【解析】平板上不含任何生長(zhǎng)因子，若倒成平板后直接培養(yǎng)，出現(xiàn)菌落說(shuō)明已被雜菌感染，因?yàn)樵撌葻峋荒茉谌狈ιL(zhǎng)因子的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，A正確；制備平板時(shí)，先滅菌再倒平板，故倒成平