新高考生物二輪復習核心考點梳理與分層練習專題33 微生物的培養(yǎng)與利用（含解析）

本卷由系統(tǒng)自動生成，請仔細校對后使用，答案僅供參考。PAGE專題33微生物的培養(yǎng)與利用考點一、微生物的實驗室培養(yǎng)【要點速記】1．培養(yǎng)基（1）概念：人們按照微生物對_________的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質。（2）種類：液體培養(yǎng)基和______________培養(yǎng)基，二者的區(qū)別為是否添加_____________。（3）營養(yǎng)成分。①主要營養(yǎng)物質：_____________、_____________、水和無機鹽。②其他條件：pH、_______________物質和氧氣。2．無菌技術（1）目的：獲得_______________________________。（2）關鍵：防止___________________________的入侵。（3）常用方法：_______________和_______________。（4）無菌技術的主要方法及適用對象：3．制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基：（1）計算：依據(jù)配方比例，計算配制100mL的培養(yǎng)基時，各種成分的用量。（2）稱量：準確地稱取各種成分。（5）倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至___________℃左右時，在_____________倒平板。4．純化大腸桿菌（1）菌落：由____________繁殖而來的肉眼可見的_____________群體。（2）兩種常用接種方法的比較：常用方法平板劃線法稀釋涂布平板法純化原理通過接種環(huán)在________________的表面_______________操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面將菌液進行一系列的____________，然后將不同稀釋度的菌液分別______________到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。稀釋度足夠高時，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞主要步驟_______________操作系列稀釋操作和涂布平板操作接種工具接種環(huán)_______________平板示意圖相同點都能獲得單細胞菌落不同點平板劃線法不能對微生物計數(shù)，而稀釋涂布平板法能對微生物計數(shù)5．菌種的保藏方法主要方法臨時保藏法甘油管藏法保藏對象頻繁使用的菌種____________的菌種方法步驟先接種到試管的_________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，然后放入_____________的冰箱中轉入滅菌后的_____中，混勻后放在_________冷凍箱中保存【重難點突破】1．培養(yǎng)基的配制原則“三要”（1）目的要明確：配制時應根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等確定配制的培養(yǎng)基種類。（2）營養(yǎng)要協(xié)調：注意各種營養(yǎng)物質的濃度和比例。（3）pH要適宜：一般的細菌適合于中性環(huán)境生長，放線菌適合于偏堿性環(huán)境，而酵母菌和霉菌適合于微酸性環(huán)境，配制培養(yǎng)基時需要根據(jù)微生物的類群調節(jié)pH。2．消毒和滅菌的比較項目條件結果常用方法應用范圍消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內部的部分微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學藥劑消毒法用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源紫外線消毒接種室、接種箱、超凈工作臺等滅菌強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌法接種工具等干熱滅菌法玻璃器皿、金屬用具等高壓蒸汽滅菌法培養(yǎng)基、容器等3．平板劃線操作中灼燒接種環(huán)的目的灼燒時間灼燒目的第一次劃線前殺死接種環(huán)上原有的微生物，防止外來雜菌污染培養(yǎng)基第二次及以后每次劃線前殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端最后一次劃線后殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者考點二、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)【要點速記】1．篩選菌株（1）尋找目的菌株的方法：根據(jù)它對____________的要求，到相應的環(huán)境中去尋找。（2）實驗室中微生物的篩選。①方法：____________有利于目的菌株生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物生長。②實例：篩選尿素分解菌時使用以________為唯一氮源的________培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。（3）選擇培養(yǎng)基：在微生物學中，允許____________的微生物生長，同時____________其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。2．統(tǒng)計菌落數(shù)目比較項目間接計數(shù)法（稀釋涂布平板法）直接計數(shù)法（顯微鏡直接計數(shù)法）原理樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的___________活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌利用特定_______________________或_____________，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量公式每克樣品中的菌株數(shù)=_____________C：某稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)；V：涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL）；M：稀釋倍數(shù)每毫升原液所含細菌數(shù)：每小格平均細菌數(shù)×400×10000×稀釋倍數(shù)缺點當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是____________不能區(qū)分細胞死活誤差比實際值偏____________比實際值偏____________細菌的數(shù)目還可以通過_______來測定3．設置對照和重復比較項目對照重復目的排除___________對實驗結果的影響排除_________對實驗結果的影響方法空白對照：確定培養(yǎng)基制作是否合格；條件對照：用________培養(yǎng)基與選擇培養(yǎng)基對照，說明選擇培養(yǎng)基具有選擇作用同一稀釋度涂布至少_________個平板4．土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)5．分解尿素的細菌的鑒別（1）方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入___________指示劑培養(yǎng)分解尿素的細菌。（2）原理：（3）實驗現(xiàn)象及結論：①培養(yǎng)基變紅：該種細菌_______________分解尿素。②培養(yǎng)基不變紅：該種細菌___________分解尿素。6．微生物的觀察：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的____________，包括________的________、大小、____________和______________等方面?！局仉y點突破】1．選擇培養(yǎng)基的制作方法2．兩種純化細菌方法的辨析比較項目平板劃線法稀釋涂布平板法關鍵操作接種環(huán)在固體平板培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線①一系列的梯度稀釋②涂布平板法操作注意事項每次劃線前后均需灼燒接種環(huán)稀釋度要足夠高，為確保實驗成功可以增加稀釋度的范圍菌體獲取在具有顯著菌落特征的區(qū)域的菌落中挑取菌體從適宜稀釋度的平板上的菌落中挑取菌體優(yōu)點可以根據(jù)菌落的特點獲得某種微生物的單細胞菌落既可以獲得單細胞菌落，又能對微生物進行計數(shù)缺點不能對微生物計數(shù)操作復雜，需要涂布多個平板考點三、分解纖維素的微生物的分離【要點速記】1．纖維素酶2．纖維素分解菌的篩選3．實驗流程【重難點突破】1．選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的比較種類選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基制備方法培養(yǎng)基中加入某些化學物質培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品原理依據(jù)某些微生物對某些物質或環(huán)境條件的嗜好、抗性而設計依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中的特定試劑或化學藥品反應，產(chǎn)生明顯的特征變化而設計用途從眾多微生物中“分離”所需的微生物，淘汰不需要的微生物“鑒別”不同種類的微生物（注：未淘汰其他微生物）舉例加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌伊紅美藍培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌2．分離纖維素分解菌所用的兩種培養(yǎng)基比較分離纖維素分解菌的實驗中先用選擇培養(yǎng)基，再用鑒別培養(yǎng)基。（1）選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長，而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長。（2）鑒別培養(yǎng)基含瓊脂，為固體培養(yǎng)基，細菌可在培養(yǎng)基上形成肉眼可見的菌落。（3）剛果紅染色法應用于鑒別培養(yǎng)基。要點速記答案考點一、1．（1）營養(yǎng)物質（2）固體凝固劑（3）碳源氮源特殊營養(yǎng)2．（1）純凈的培養(yǎng)物（2）外來雜菌（3）滅菌消毒（4）a－Ⅲ－⑤、a－Ⅴ－④、a－Ⅵ－③b－Ⅰ－⑥、b－Ⅱ－①、b－Ⅳ－②3．（3）稱量紙蛋白胨瓊脂（4）pH高壓蒸汽121℃（5）50酒精燈火焰附近4．（1）一個細菌子細胞（2）瓊脂固體培養(yǎng)基連續(xù)劃線梯度稀釋涂布平板劃線涂布器5．長期保藏固體斜面4℃甘油－20℃考點二、1．（1）生存環(huán)境（2）人為提供尿素選擇（3）特定種類抑制或阻止2．一個細菌計數(shù)板血細胞計數(shù)板（C÷V）×M一個菌落小大濾膜法3．非測試因素偶然因素完全34．脲酶尿素直接計數(shù)法稀釋涂布平板法系列稀釋計數(shù)5．（1）酚紅（2）2NH3紅色（3）能不能6．菌落特征菌落形狀隆起程度顏色考點三、1．C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶纖維二糖葡萄糖2．紅色復合物透明圈剛果紅透明圈纖維素3．纖維素選擇培養(yǎng)基鑒別纖維素分解菌專題33微生物的培養(yǎng)與利用（基礎）一、單選題1．培養(yǎng)下列微生物，培養(yǎng)基中不用添加碳源的是（）A．藍藻 B．酵母菌 C．醋酸菌 D．毛霉【答案】A【解析】藍藻是原核生物，含藻藍素、葉綠素，能利用二氧化碳無機碳源進行光合作用合成有機物，是自養(yǎng)型生物，故不需要添加碳源，A正確；酵母菌是異養(yǎng)型生物，培養(yǎng)基中需要添加有機碳源，B錯誤；醋酸菌是異養(yǎng)型生物，培養(yǎng)基中需要添加有機碳源，C錯誤；毛霉是異養(yǎng)型生物，培養(yǎng)基中需要添加有機碳源，D錯誤。2．細菌喜葷、霉菌喜素的意思是在配制培養(yǎng)基時（）A．要調整培養(yǎng)基的pH B．要考慮不同微生物的代謝特性C．要調整培養(yǎng)基的滲透壓 D．要考慮不同微生物的結構特性【答案】B【解析】培養(yǎng)基的營養(yǎng)構成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調至酸性，培養(yǎng)細菌時需將pH調至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。3．某學生在實踐酒釀酵母菌的培養(yǎng)探索時，對部分培養(yǎng)基成分進行了改良，如表。其中主要提供氮源的培養(yǎng)基成分是（）培養(yǎng)基成分用量（g）黃豆粉10葡萄糖5瓊脂15A．瓊脂 B．黃豆粉 C．葡萄糖 D．黃豆粉和葡萄糖【答案】B【解析】瓊脂是凝固劑，不能提供氮源，A錯誤；黃豆粉富含蛋白質，能夠提供氮源，B正確；葡萄糖只含C、H、O三種元素，不能提供氮源，C錯誤；黃豆粉能夠提供氮源，但葡萄糖不能提供氮源，D錯誤。4．在分離和純化土壤中自生固氮菌的實驗中，不合理的操作是（）A．取土表3-5cm以下土層的土壤B．用無菌水稀釋土壤樣品C．使用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D．用接種環(huán)進行劃線接種【答案】C【解析】土表3-5cm以上的土壤比較干燥，自生固氮菌的數(shù)量較少，因此取土表3-5cm以下土層的土壤，A正確；用無菌水稀釋土壤樣品，否則可能造成土壤被雜菌污染，B正確；自生固氮菌可以在缺乏氮源的培養(yǎng)基中生存，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基含有氮源，用其分離出的微生物既有自生固氮菌也有其他的雜菌，無法純化自生固氮菌，C錯誤；接種自生固氮菌時可用接種環(huán)進行劃線接種，也可用涂布器用稀釋涂布平板法接種，D正確。5．關于微生物的營養(yǎng)，說法正確的是（）A．同一種物質不可能既作碳源又作氮源B．凡是碳源都能提供能量C．除水以外的無機物僅提供無機鹽D．無機氮源也可能提供能量【答案】D【解析】對異養(yǎng)微生物來說，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源，如牛肉膏，A錯誤；CO2和N2是無機物，也是某些微生物的碳源和氮源，B錯誤；有機碳源能提供能量，無機碳源不能提供能量，C錯誤；自然界中一些微生物如硝化細菌，可以以無機氮源合成細胞物質，同時通過氧化外界無機物獲得生長所需能量，叫做化能合成作用，D正確。6．滅菌的標準是（）A．殺死所有的細菌B．殺死所有的微生物的細胞、芽孢和孢子C．殺死所有的病原微生物D．使病原菌不生長【答案】B【解析】菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所用的微生物（包括芽孢和孢子），B正確。7．如圖為實驗室培養(yǎng)和純化大腸桿菌的部分操作步驟，下列說法正確的是（）A．步驟①中待培養(yǎng)基冷卻后才能蓋上培養(yǎng)皿蓋B．步驟④中接種環(huán)共需5次灼燒處理C．將接種后的圖④平板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時無需倒置D．①②③步驟操作時都需要在酒精燈火焰旁進行【答案】D【解析】步驟①將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中應立即該上培養(yǎng)皿蓋，A項錯誤；每次劃線前后都要對接種環(huán)進行灼燒處理，因此步驟④中接種環(huán)共需6次灼燒處理，B項錯誤；劃線接種結束后，將平板倒置后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，防止冷凝水污染培養(yǎng)基，C項錯誤；培養(yǎng)與純化大腸桿菌的過程中需要在酒精燈的火焰旁進行，故①②③步驟操作時都需要在酒精燈火焰旁進行，D項正確。8．做“微生物的分離與培養(yǎng)”實驗時，下列敘述正確的是（）A．高壓滅菌加熱結束時，打開放氣閥使壓力表指針回到零后，開啟鍋蓋B．倒平板時，應將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C．為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應趁熱快速挑取菌落D．用記號筆標記培養(yǎng)皿中菌落時，應標記在皿底上【答案】D【解析】高壓滅菌加熱結束，等待壓力表指針回到零后，才能開啟鍋蓋，不能打開放氣閥使壓力表指針回到零，A錯誤；倒平板過程中不能打開培養(yǎng)皿的皿蓋，B錯誤；接種環(huán)火焰上灼燒后，待冷卻后才可以快速挑取菌落，C錯誤；用記號筆標記培養(yǎng)皿中菌落時，應標記在皿底上，D正確。9．通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入10％酚可以抑制細菌和霉菌。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分別分離出（）A．大腸桿菌 B．霉菌 C．放線菌 D．固氮細菌【答案】A【解析】大腸桿菌需要氮源，青霉素能抑制大腸桿菌生長，酚也能抑制大腸桿菌的生長，A符合題意；霉菌是真菌，在培養(yǎng)基中加入青霉素后，青霉素可以抑制細菌和放線菌，但是不抑制真菌，所以加入青霉素的培養(yǎng)基可以選擇出霉菌，B不符合題意；培養(yǎng)基中加入10%酚可以抑制細菌和霉菌，所以可以篩選放線菌，C不符合題意；固氮細菌的氮源是氮氣，在培養(yǎng)基中不需要氮源，所以缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長，但是固氮細菌可以生長，D不符合題意。10．微生物接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。下列關于這兩種接種方法的敘述中，不正確的是（）A．都只能用于固體培養(yǎng)基接種 B．都能用于微生物的計數(shù)C．接種培養(yǎng)后均可獲得單菌落 D．接種工具使用后需要滅菌【答案】B【解析】將微生物接種到固體培養(yǎng)基中的方法通常為平板劃線法和稀釋涂布平板法，A正確；稀釋涂布平板法接種可以形成單菌落，所以常用來進行微生物的計數(shù)，平板劃線法常用來篩選分離微生物，B錯誤；兩種接種方法在培養(yǎng)基中均可形成單個菌落，C正確；為防止污染，接種工具使用后需要滅菌，D正確。11．甲、乙、丙是三種微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長繁殖；甲能在I中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是（）粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g（NH4）2SO40.4gH2O100mlMgSO49.25gCaCl20.5gI+++++++Ⅱ+++++++Ⅲ++++++++A．甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物B．甲、乙都是自養(yǎng)微生物，丙是異養(yǎng)微生物C．甲是異養(yǎng)微生物，乙是固氮微生物，丙是自養(yǎng)微生物D．甲是固氮微生物，乙是自養(yǎng)微生物，丙是異養(yǎng)微生物【答案】D【解析】根據(jù)以上分析已知，乙屬于自養(yǎng)微生物，A錯誤；甲能夠在Ⅰ中正常生長繁殖，但是不能在Ⅱ培養(yǎng)基中生長繁殖，說明其為異養(yǎng)微生物，B錯誤；根據(jù)以上分析已知，丙屬于異養(yǎng)微生物，C錯誤；根據(jù)以上分析已知，甲是固氮微生物，乙是自養(yǎng)微生物，丙是異養(yǎng)微生物，D正確。12．細菌培養(yǎng)過程中分別采用高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒幾種不同處理，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌（）A．接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B．高壓鍋、手、接種環(huán)C．培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D．接種環(huán)、手、高壓鍋【答案】C【解析】接種環(huán)應該進行灼燒滅菌，手應該用酒精消毒，培養(yǎng)基應該進行高壓蒸汽滅菌，A錯誤；高壓鍋是滅菌工具，手應該用酒精消毒，接種環(huán)應該進行灼燒滅菌，B錯誤；培養(yǎng)基應該進行高壓蒸汽滅菌，手應該用酒精消毒，接種環(huán)應該進行灼燒滅菌，C正確；接種環(huán)應該進行灼燒滅菌，手應該用酒精消毒，高壓鍋是滅菌工具，D錯誤。13．下列有關用平板劃線法和稀釋涂布平板法純化培養(yǎng)大腸桿菌的敘述，正確的是（）①都需要用固體培養(yǎng)基②都需要使用接種針進行接種③都需要在火焰旁進行接種④都可以用菌落數(shù)來計數(shù)活菌A．①② B．①③ C．②④ D．③④【答案】B【解析】平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落，所以都需要用固體培養(yǎng)基，①正確；稀釋涂布平板法不需要使用接種針進行接種，②錯誤；為防止雜菌污染，操作時都需要在火焰旁進行接種，③正確；平板劃線法不能用于計數(shù)活菌，只能用于分離菌種；稀釋涂布平板法可以用來計數(shù)活菌，④錯誤。14．某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是（）A．培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌B．轉換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進行劃線C．接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D．培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次【答案】B【解析】可以直接在錐形瓶滅菌，然后再分裝到滅菌過的培養(yǎng)皿中，如果分裝到培養(yǎng)皿中再滅菌，不便移動操作；A錯誤；接種環(huán)暴露在空氣中一段時間后就需再進行灼勺滅菌；B正確；微生物培養(yǎng)一般不需要光照條件；C錯誤；根據(jù)不同的微生物，間隔觀察時間不同，如也可能每天定時觀察。D錯誤。15．下圖是劃線分離法接種微生物的示意圖，下列敘述錯誤的是（）A．該接種過程一般需灼燒接種環(huán)5次B．劃線結束可看到劃線末端出現(xiàn)不連續(xù)單菌落C．若培養(yǎng)的是尿素分解菌，可加入酚紅指示劑D．該接種方法不能準確計數(shù)培養(yǎng)液中微生物數(shù)量【答案】B【解析】為了防止雜菌污染，每一次的劃線之前和劃線操作結束后都需要將接種環(huán)灼燒滅菌，圖示中共有4個劃線區(qū)域，因此該接種過程一般需灼燒接種環(huán)5次，A正確；劃線結束后，將培養(yǎng)皿倒置放在一定溫度的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時間后，可看到劃線末端出現(xiàn)不連續(xù)單菌落，B錯誤；若培養(yǎng)的是尿素分解菌，因該菌合成的脲酶可將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的pH升高，酚紅指示劑將變紅，所以可加入酚紅指示劑來予以鑒定，C正確；該接種方法（劃線分離法）不易分離出單個菌落，不能準確計數(shù)培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，D正確。16．關于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述中錯誤的是（）A．操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時進行倒平板D．待平板冷卻凝固約5~10min后將平板倒過來放置【答案】A【解析】制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，A錯誤；將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯，加入少量的水，加熱，B正確；待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板，C正確；待平板冷卻凝固約5?l0min后將平板倒過來放置，以防止水蒸氣凝集滴入培養(yǎng)基，D正確。17．圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序為1、2、3、4、5。下列操作方法正確的是（）A．操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B．劃線操作必須在火焰上進行C．最可能得到所需菌落的區(qū)域是1D．在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌【答案】D【解析】操作前要將接種環(huán)放在火焰外焰中灼燒滅菌，A錯誤；劃線操作必須在火焰附近進行，B錯誤；區(qū)域5是劃線末端菌液最少處，最有可能得到所需的單菌落，C錯誤；在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌，D正確。18．平板冷凝后，要將平板倒置，其原因是（）A．接種時再拿起來方便 B．在皿底上標記日期等方便C．正著放置容易破碎 D．防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染【答案】D【解析】微生物實驗室培養(yǎng)的關鍵在于防止雜菌污染，平板冷凝后，要將平板倒置，其原因是防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染，故選D。19．下列有關分解纖維素的微生物的分離的敘述，說法錯誤的是（）A．纖維素酶中的C1酶和CX酶可以將纖維素分解為纖維二糖B．分離纖維素分解菌時，可在倒平板時加入剛果紅染色，然后接種分解菌C．纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵法和固體發(fā)酵法D．要增加纖維素分解菌的濃度，應使用固體培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)【答案】D【解析】纖維素酶中的C1酶和CX酶可以將纖維素分解為纖維二糖，A正確；分離纖維素分解菌時，可在倒平板時加入剛果紅染色，然后接種分解菌，B正確；纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵法和固體發(fā)酵法，C正確；要增加纖維素分解菌的濃度，應使用以纖維素為唯一碳源的液體培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)，D錯誤。20．某生物興趣小組欲配制培養(yǎng)基從土壤中選擇尿素分解菌。下列相關敘述正確的是（）A．配制以尿素為唯一氮源的液體培養(yǎng)基可用于選擇和觀察尿素分解菌B．為獲取102的稀釋液可將90mL無菌水加入10g土壤樣品中C．實驗中若需要統(tǒng)計尿素分解菌的菌落數(shù)目，接種時只能用平板劃線法D．實驗中設置對照，同時培養(yǎng)一個空白培養(yǎng)基可檢驗培養(yǎng)基滅菌是否徹底【答案】D【解析】選擇和觀察尿素分解菌時需要配制以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基，A錯誤；10g土壤樣品加入90mL無菌水中，振蕩搖勻后可獲得10倍的稀釋液，B錯誤；實驗中若需要統(tǒng)計尿素分解菌的菌落數(shù)目，接種時只能用稀釋涂布平板法，C錯誤；實驗中設置對照，同時培養(yǎng)一個空白培養(yǎng)基，可通過空白培養(yǎng)基上是否有菌落來判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底，D正確。21．某同學依據(jù)下圖操作步驟，從土壤中分離以尿素為氮源的微生物。其中尿素固體培養(yǎng)基和尿素液體培養(yǎng)基均以尿素為唯一氮源。下列敘述正確的是（）A．尿素固體培養(yǎng)基比尿素液體培養(yǎng)基多了瓊脂B．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基的滅菌方式是過濾滅菌C．利用液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)需要振蕩以提高營養(yǎng)成分的利用率D．兩種步驟獲得的菌落比值相等（甲1/甲2＝乙1/乙2）【答案】C【解析】尿素固體培養(yǎng)基比尿素液體培養(yǎng)基多了瓊脂和酚紅指示劑，A錯誤；以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基的滅菌方式是高壓蒸汽滅菌，其中的尿素用過濾滅菌，B錯誤；利用液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)的過程中，通過振蕩可以提高營養(yǎng)成分的利用率，C正確；兩種步驟獲得的菌落比值關系為（甲1/甲2＞乙1/乙2），因為后者經(jīng)過了對尿素分解菌的選擇培養(yǎng)，所以尿素分解菌的比例變多，D錯誤。22．下列檢測某熟制食品中大腸桿菌是否超標的實驗操作，不合理的是（）A．待檢測食品需要經(jīng)過滅菌操作后取樣檢測B．應設置未接種的培養(yǎng)基，作為實驗的對照C．用稀釋涂布平板法接種計數(shù)大腸桿菌的活菌數(shù)D．接種后將培養(yǎng)皿倒置并在適宜溫度下培養(yǎng)【答案】A【解析】待檢測食品滅菌后會將大腸桿菌殺死，則不能檢測大腸桿菌是否超標，A錯誤；應設置未接種的培養(yǎng)基，作為實驗的對照，B正確；用稀釋涂布平板法接種計數(shù)大腸桿菌的活菌數(shù)，C正確；接種后應該將培養(yǎng)皿倒置，并在適宜溫度下培養(yǎng)，D正確。二、綜合題23．回答下列有關微生物培養(yǎng)和利用的有關問題：（1）按照培養(yǎng)基的成分來分，培養(yǎng)基按其所含成分，可分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基三類。①在釀制葡萄酒時，葡萄汁就相當于是酵母菌發(fā)酵的天然培養(yǎng)基。在_____________的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應而受到抑制。②雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同但一般都含碳源、氮源、無機鹽和水。培養(yǎng)基中能同時提供碳源和氮源的成分是_______________（“蛋白胨”“葡萄糖”“NaNO3”）。（2）按照培養(yǎng)基用途來分，培養(yǎng)基按其特殊用途可分為富集培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱作________________。在選擇培養(yǎng)基中添加一些特殊的物質，則可配制成鑒別培養(yǎng)基。如在尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_______________，培養(yǎng)某種細菌后，如果pH升高，指示劑變紅，則可初步鑒定為該種細菌能夠分解尿素；在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入______________，當纖維素被分解后，其與纖維素形成的紅色復合物就無法形成。

（3）微生物培養(yǎng)中，稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目。值得注意的是，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，這是因為______________________________________?！敬鸢浮浚?）缺氧、呈酸性蛋白胨（2）選擇培養(yǎng)基酚紅指示劑剛果紅（3）當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落【解析】（1）①在釀制葡萄酒時，葡萄汁就相當于是酵母菌發(fā)酵的天然培養(yǎng)基，酵母菌為兼性厭氧型微生物，在氧氣充足條件下，能進行有氧呼吸并大量繁殖，在無氧條件下能進行酒精發(fā)酵，在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應而受到抑制。②雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含碳源、氮源、無機鹽和水。培養(yǎng)基中能同時提供碳源和氮源的成分是蛋白胨。（2）在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。在選擇培養(yǎng)基中添加一些特殊的物質，則可配制成鑒別培養(yǎng)基。如在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細菌后，如果pH升高，指示劑變紅，則可初步鑒定該種細菌能夠分解尿素，產(chǎn)生NH3；在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入剛果紅，由于剛果紅能和纖維素結合形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解，剛果紅—纖維素的復合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。（3）微生物培養(yǎng)中，稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目。然而當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。24．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，但是并不能直接被農(nóng)作物吸收。土壤中含大量微生物，其中就有尿素分解菌。某興趣小組欲從土壤中分離該類細菌，并進行后續(xù)培養(yǎng)研究，設計了如下實驗：請回答有關問題：（1）稱取土壤、梯度稀釋、接種微生物需要在火焰旁進行，其目的是_____________。（2）該興趣小組設計了A、B兩種培養(yǎng)基（成分見下表）：葡萄糖無機鹽尿素瓊脂酚紅溶液水培養(yǎng)基A＋＋＋＋＋＋培養(yǎng)基B＋＋＋－＋＋注：＋表示有，－表示無據(jù)表分析，兩種培養(yǎng)基的碳源是________________；培養(yǎng)基B可用于增菌培養(yǎng)，不能用于分離純化，原因是________________________。接種的微生物中是否含有尿素分解菌，可通過觀察_______________進行初步鑒定。（3）加入培養(yǎng)基的無機鹽含有KH2PO4及Na2HPO4，其作用是________________。配置好的培養(yǎng)基滅菌方法是_______________________。（4）若用平板劃線法接種微生物，在培養(yǎng)基上共畫了4個區(qū)域，則至少需要__________次灼燒接種環(huán)。【答案】（1）防止空氣中的雜菌污染（2）葡萄糖分離微生物需要用固體培養(yǎng)基或者液體培養(yǎng)基不能用于分離純化培養(yǎng)基是否變紅（培養(yǎng)基顏色）（3）為細菌生長提供營養(yǎng)物質，調節(jié)pH值高壓蒸汽滅菌法（4）5次【解析】（1）微生物培養(yǎng)的關鍵是無菌操作，稱取土壤、梯度稀釋、接種微生物需要在火焰旁進行，其目的是防止雜菌污染。（2）由表可知，兩種培養(yǎng)基的碳源是葡萄糖；培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B的區(qū)別是有無瓊脂，即培養(yǎng)基A為固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基B為液體培養(yǎng)基，分離微生物需要用固體培養(yǎng)基，故培養(yǎng)基B可用于增菌培養(yǎng)，不能用于分離純化。由鑒定分解尿素細菌的原理可知，接種的微生物中是否含有尿素分解菌，可通過觀察培養(yǎng)基是否變紅進行初步鑒定。（3）加入培養(yǎng)基的無機鹽含有KH2PO4及Na2HPO4，其作用是為細菌生長提供營養(yǎng)物質，調節(jié)pH值。培養(yǎng)基滅菌通常采用高壓蒸汽滅菌法。（4）采用平板劃線法純化微生物時，每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，劃線結束后還需灼燒接種環(huán)，若劃線時在培養(yǎng)基上共畫了4個區(qū)域，則需要5次灼燒接種環(huán)。25．牛奶消毒不過關容易攜帶細菌。根據(jù)國家標準（GB19645—2010）規(guī)定，每毫升合格的牛奶細菌總數(shù)不能超過50000個。某興趣小組利用恒溫水浴鍋對新鮮牛奶進行消毒然后檢測消毒的效果，如下圖所示。（1）圖中步驟①對牛奶的消毒的方法是_____________，一般采用__________對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌，蛋白胨的作用有________________________________（寫兩點）。（2）步驟②將牛奶進行梯度稀釋的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在培養(yǎng)基表面形成___________。步驟③的接種方法是_______________，這種方法可以用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，其原理是___________________________________________________________。（3）興趣小組通過步驟①～③接種了3個平板和1個未接種的平板放入恒溫培養(yǎng)箱，在適宜的溫度條件下培養(yǎng)48h，然后統(tǒng)計出4個平板上的菌落數(shù)分別是57、53、55和9。根據(jù)這樣的實驗結果________（填“能”或“不能”）判斷該興趣小組消毒后的牛奶細菌超標，原因是_________________________________。（4）如果要檢測牛奶中是否含有大腸桿菌，需要在培養(yǎng)基中加入____________（填物質），觀察是否出現(xiàn)黑色（或藍黑色）的菌落。【答案】（1）巴氏消毒高壓蒸汽滅菌提供碳源、氮源等（2）單個菌落稀釋涂布平板法當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中大約含有多少活菌（3）不能因為未接種的培養(yǎng)基上有菌落出現(xiàn)，說明培養(yǎng)基滅菌不徹底，則其它培養(yǎng)基上的菌落數(shù)不能表示牛奶中細菌數(shù)量（4）伊紅美藍【解析】（1）圖中步驟①對牛奶的消毒方法是巴氏消毒，既可以殺滅牛奶中的微生物，又可以使牛奶中的營養(yǎng)成分不會被破壞。對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌常用高壓蒸汽滅菌法，蛋白胨含多種有機物，能為微生物提供碳源、氮源、維生素等。（2）步驟②將牛奶進行梯度稀釋的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。步驟③的接種方法是稀釋涂布平板法，這種方法可以用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，其原理是樣品稀釋度足夠高時，稀釋液中的一個活菌可在平板上長出一個單菌落，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中大約含有多少活菌。（3）由于未接種的平板上也有菌落，說明培養(yǎng)基滅菌不合格，則其它培養(yǎng)基上的菌落數(shù)不能表示牛奶中細菌數(shù)量，故不能由上述平板上菌落數(shù)計算消毒后的牛奶細菌是否超標。（4）伊紅美藍可使大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，所以要檢測牛奶中是否含有大腸桿菌，需要在培養(yǎng)基中加入伊紅美藍，觀察是否出現(xiàn)黑色（或藍黑色）的菌落。專題33微生物的培養(yǎng)與利用（提高）一、單選題1．為了篩選出能產(chǎn)生脲酶的微生物，應當從下列哪一種環(huán)境中選擇（）A．施用尿素較多的農(nóng)田 B．施用氨肥較多的農(nóng)田C．施用磷肥較多的農(nóng)田 D．落葉較多的地方【答案】A【解析】脲酶可以將尿素分解為二氧化碳和氨氣，其底物為尿素，因此篩選能產(chǎn)生脲酶的微生物，應當從尿素較多的農(nóng)田中獲得，BCD錯誤，A正確。2．下列關于無菌操作的敘述，錯誤的是（）A．煮沸消毒可以殺死微生物的營養(yǎng)細胞和部分芽孢B．加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌C．利用組織培養(yǎng)技術繁殖脫毒苗時，需要對植物的外植體進行消毒D．接種時灼燒接種環(huán)要冷卻后再對菌種劃線【答案】B【解析】100℃煮沸5~6min可以殺死微生物的營養(yǎng)細胞和一部分芽孢，A正確；指示劑和染料可能混有微生物，故加入培養(yǎng)基前需滅菌，B錯誤；利用組織培養(yǎng)技術繁殖脫毒苗時，為防止細菌污染，應對外植體進行消毒，C正確；接種時灼燒接種環(huán)要冷卻后再對菌種劃線，以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種，D正確。3．下列有關微生物培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A．培養(yǎng)過微生物的培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后仍可用于培養(yǎng)微生物B．涂布接種時，要待涂布器上酒精燃盡后冷卻再使用C．對培養(yǎng)皿進行編號或對菌種進行標注時，應使用記號筆在皿蓋標記便于觀察D．長期保存菌種時，可以采用甘油管藏的方法，放在4℃冰箱中保存【答案】B【解析】培養(yǎng)過微生物的培養(yǎng)基應該經(jīng)滅菌后扔掉，A錯誤；涂布接種時，應該將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8-10s，B正確；對培養(yǎng)皿進行標記時，應該在皿底進行標記，C錯誤；長期保存菌種時，可以采用甘油管藏法，放入-20度的冷凍箱中保存，D錯誤。4．實驗測定鏈霉素對3種細菌的抗生素效應，用3種細菌在事先準備好的瓊脂塊平板上畫3條等長的平行線（3條線均與下圖中的鏈霉素帶接觸），將平板置于37℃條件下恒溫培養(yǎng)3天，結果如圖所示。從實驗結果分析以下敘述，不正確的是（???）?A．鏈霉素能阻止結核菌的生長B．鏈霉素對結核菌比對霍亂菌更有效C．鏈霉素對結核菌比對傷寒菌更有效D．鏈霉素可以用于治療傷寒病人【答案】D【解析】抗生素是真菌（另外還有放線菌）產(chǎn)生的可殺死某些致病菌的物質，可以用來治療相應的疾病。如圖所示，實驗結果表明，鏈霉菌產(chǎn)生的鏈霉素是一種抗生素類物質，它可以抑制某些細菌的繁殖。分析實驗結果可以看出：鏈霉素對結核桿菌的抑制作用最強，對霍亂菌的抑制作用較弱，對傷寒菌幾乎無抑制作用，ABC正確，D錯誤。5．不同的微生物對營養(yǎng)物質的需要各不相同。下列有關一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)型微生物的描述中，不正確的是（）A．氮源物質為該微生物提供必要的氮元素 B．碳源物質也是該微生物的能源物質C．無機鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質 D．水是該微生物的營養(yǎng)物質之一【答案】B【解析】氮源物質為該微生物提供必要的氮素，A正確；該碳源是二氧化碳，屬于無機物，不能作為微生物的能源物質，B錯誤；無機鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質，C正確；水是該微生物的營養(yǎng)物質之一，D正確。6．在做分離“分解尿素的細菌”實驗時，A同學從對應10-6培養(yǎng)基中篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落。下列有關敘述不正確的是（）A．A同學出現(xiàn)這種結果的原因可能是土樣不同B．可以將A同學配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進行培養(yǎng)作為空白對照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染C．讓其他同學用與A同學一樣的土壤進行實驗，如果結果與A同學一樣，則可證明A同學無誤D．B選項的實驗思路遵循了實驗的對照原則，而C選項的沒有【答案】D【解析】A同學出現(xiàn)這種結果的原因可能是土樣不同，也可能是操作中污染造成的，A正確；A同學的實驗結果可能是培養(yǎng)基污染造成的，可以將A同學配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進行培養(yǎng)作為空白對照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染，B正確；如果是A同學實驗操作過程中污染造成的，讓其他同學用與A同學一樣的土壤進行實驗，如果結果與A同學一樣，則可證明A同學無誤，C正確；B、C選項的實驗思路都遵循了實驗的對照原則，D錯誤。7．為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細菌，培養(yǎng)結果如圖所示。下列敘述正確的是（）A．倒平板后需間歇晃動，以保證表面平整B．圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細菌數(shù)量均太多，應從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C．該實驗結果因單菌落太多，不能達到菌種純化的目的D．菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色【答案】B【解析】倒平板后無需晃動，A錯誤；Ⅰ區(qū)、Ⅱ區(qū)沒有出現(xiàn)單菌落，說明細菌數(shù)量太多，故應從Ⅲ區(qū)挑取單菌落，B正確；出現(xiàn)單菌落即達到了菌種純化的目的，C錯誤；剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應，D錯誤。8．產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，①為土壤樣品。下列相關敘述錯誤的是（）A．使用平板劃線法可以在⑥上獲得單個菌落B．如果要測定②中的活細菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法C．圖中②培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應加入苯酚作為碳源D．微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行消毒處理【答案】D【解析】平板劃線法可分離微生物，可獲得單個菌落，A正確；利用稀釋涂布平板法可對微生物進行計數(shù)，B正確；圖中②培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應加入苯酚作為碳源，以擴大降解苯酚的微生物的濃度，C正確；微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進行滅菌處理，D錯誤。9．下列有關微生物分離、純化及計數(shù)的敘述中，錯誤的是（）A．平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分散并計數(shù)B．用富含尿素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)尿素分解菌C．稀釋涂布平板法通過系列梯度稀釋可將微生物分散D．用血細胞計數(shù)板計數(shù)微生物時，實驗結果往往偏大【答案】A【解析】平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分散，但無法計數(shù)，A錯誤；用富含尿素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)尿素分解菌，B正確；稀釋涂布平板法通過系列梯度稀釋可將微生物分散，C正確；用血細胞計數(shù)板計數(shù)微生物時，實驗結果往往偏大，因為有些死菌也被計入其中，D正確。10．茶葉中含多種物質，其中茶多酚具有殺菌消炎作用。為研究茶多酚的抑菌效果，研究人員進行了相關實驗。下表所示為在不同pH、茶多酚濃度為40g/L時的實驗結果。菌種抑菌圈直徑（mm）pH=4pH=5pH=6pH=7pH=8pH=9pH=10沙門氏菌14．013．713．814．315．514．612．5蠟狀芽孢桿菌16．015．514．715．717．415．613．5大腸桿菌11．812．912．713．815．014．412．8結合表中數(shù)據(jù)分析，可得到的結論是（）A．不同pH條件下，茶多酚對同一種細菌的抑制效果不同B．相同pH條件下，茶多酚對三種細菌的抑制效果相同C．茶多酚對三種細菌的抑制效果均最強時的最適pH是7D．濃度為40g/L的茶多酚是抑制三種菌繁殖的最適濃度【答案】A【解析】不同pH條件下，茶多酚對同一種細菌的抑制效果不同，A正確；任選一個pH值對比即可發(fā)現(xiàn)茶多酚對不同細菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑是不同的，所以相同pH條件下，茶多酚對三種細菌的抑制效果不同，B錯誤；找出每一行細菌抑菌圈最大值對應的pH值，可知茶多酚對三種細菌的抑制效果均最強時的最適pH是8，C錯誤；本題中未比較其他濃度的茶多酚抑菌效果，因此不能判斷40g/L是否為抑制三種菌繁殖的最適濃度，D錯誤。11．下列關于微生物培養(yǎng)和分離的說法中，正確的是（）A．先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應，立即出現(xiàn)有透明圈的菌落B．篩選纖維素分解菌的實驗流程中不可省略選擇培養(yǎng)這一步C．菌落的大小、顏色、有無莢膜、隆起程度等特征都可作為菌種肉眼鑒定的依據(jù)D．在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可初步鑒定尿素分解菌【答案】D【解析】先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應，此種方法需用氯化鈉洗去浮色，再觀察出現(xiàn)有透明圈的菌落，A錯誤；選擇培養(yǎng)可省略，但培養(yǎng)分離的纖維素分解菌少，B錯誤；菌落的大小、顏色、隆起程度等特征都可作為菌種鑒定的依據(jù)，但是有無莢膜通過肉眼無法觀察，C錯誤；在只含有尿素作為氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可初步鑒定尿素分解菌，D正確。12．秸稈還田可增加土壤肥力，緩解環(huán)境污染。為分離分解纖維素的微生物菌種，實現(xiàn)廢物的資源化利用，研究人員設計了“土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌株”的實驗流程。下列敘述錯誤的是（）A．配制培養(yǎng)基時，應在高壓蒸汽滅菌之后調節(jié)pHB．選擇培養(yǎng)時，應使用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基C．進行梯度稀釋時，應在酒精燈火焰旁完成各種操作D．挑選菌株后，應將使用過的培養(yǎng)基進行滅菌后再丟棄【答案】A【解析】配制培養(yǎng)基時，應在高壓蒸汽滅菌之前調節(jié)pH，避免滅菌之后調pH造成雜菌污染，A錯誤；選擇培養(yǎng)時，為分離分解纖維素的微生物菌種，應使用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基，B正確；進行梯度稀釋時，為了無菌操作，應在酒精燈火焰旁完成各種操作，C正確；挑選菌株后，為了防止造成污染，應將使用過的培養(yǎng)基進行滅菌后再丟棄，D正確。13．尿素分解菌可將土壤中的尿素分解成CO2和NH3供植物利用。下列關于土壤中尿素分解菌的分離和計數(shù)的敘述，錯誤的是（）A．尿素分解菌能分解尿素是因為能合成脲酶B．培養(yǎng)尿素分解菌時，培養(yǎng)基的pH要調至中性或微堿性C．用稀釋涂布平板法接種后，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)單個的尿素分解菌D．若用稀釋涂布平板法計數(shù)，統(tǒng)計的細菌數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目多【答案】D【解析】尿素分解菌可以合成脲酶，將尿素分解成CO2和NH3，A正確；培養(yǎng)尿素分解菌時，培養(yǎng)基的pH要調至中性或微堿性，B正確；用稀釋涂布平板法接種后，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)單個的尿素分解菌，C正確；由于兩個或多個細菌可能形成一個菌落，所以用稀釋涂布平板法接種，統(tǒng)計的數(shù)目比實際的數(shù)目少，D錯誤。14．黑茶是利用微生物的酶促進茶多酚氧化的發(fā)酵茶。研究人員對黑茶中的微生物進行了分離和鑒定，過程如圖所示。下列相關敘述不正確的是（）A．向樣品中加入無菌水制成樣品懸液B．可根據(jù)菌落特征對菌種進行初步鑒定C．涂布平板上長出的菌落可通過劃線法進一步純化D．斜面培養(yǎng)基含大量營養(yǎng)物質，常溫下可長期保存【答案】D【解析】制備樣品懸液時應向黑茶樣品中加入無菌水，A正確；可以根據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對菌種進行初步的鑒定或分類，B正確；涂布平板上長出的菌落，可通過平板劃線法進一步純化，C正確；斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物，可在低溫下長期保存菌株，D錯誤。15．下列有關土壤中微生物的分離與計數(shù)的說法中，錯誤的是（）A．因為土壤中各類微生物的數(shù)量不同，所以，為獲得不同類型的微生物要按不同的稀釋倍數(shù)進行分離B．測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍不同C．如果得到了3個或3個以上菌落數(shù)目在30~300的平板，則說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數(shù)D．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯小于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細菌菌落【答案】D【解析】土壤是微生物的天然培養(yǎng)基，土壤中各類微生物的數(shù)量不同，獲得不同類型的微生物要按不同的稀釋倍數(shù)進行分離，A正確；土壤中細菌總量高于定土壤中能分解尿素的細菌的數(shù)量，所以選用的稀釋范圍不同，B正確；稀釋涂布平板法進行計數(shù)時，得到了3個或3個以上菌落數(shù)目在30～300的平板，則說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數(shù)，C正確；選擇培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯小于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細菌菌落，D錯誤。二、綜合題16．研究人員欲從土壤中分離出高效分解尿素的尿素小球菌，進行了一系列操作?；卮鹣铝邢嚓P問題：（1）為了獲得尿素小球菌，可在含尿素較多的土壤中取樣，并應選用以__________為唯一氮源的培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)。除氮源外，培養(yǎng)液還應含有__________等營養(yǎng)物質。（2）培養(yǎng)基中的瓊脂屬于多糖類物質，但是它并不能為尿素小球菌提供碳源，原因是____________________________________________________________________________。（3）對采集的土壤樣品一般先用____________進行稀釋，再進行平板培養(yǎng)，從中選出菌落數(shù)在____________間的平板計數(shù)。該方法計數(shù)的結果往往偏小，原因是__________________。（4）對分離得到的尿素小球菌作進一步鑒定時，可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑變紅的原因是______________________，再結合菌落的特征等進行確定。（5）將獲得的3種待選微生物甲、乙、丙分別接種在相同的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，其他營養(yǎng)物質充裕、條件適宜，觀測從實驗開始到微生物停止生長所用的時間，甲、乙、丙分別為23h、17h、29h，則應選擇微生物__________作為菌種進行后續(xù)培養(yǎng)?！敬鸢浮浚?）尿素碳源、水、無機鹽（2）尿素小球菌細胞中缺乏分解瓊脂的酶（3）無菌水30~300當兩個或多個菌落連在一起時，平板上觀察到的只是單個菌落數(shù)（4）尿素小球菌合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強乙【解析】（1）為了獲得尿素小球菌，可在含尿素較多的土壤中取樣，并應選用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)。培養(yǎng)基營養(yǎng)組成一般都含有氮源、碳源、水和無機鹽等營養(yǎng)物質。（2）由于尿素小球菌細胞中缺乏分解瓊脂的酶，所以培養(yǎng)基中的瓊脂雖屬于多糖類物質，但是它并不能為尿素小球菌提供碳源。（3）對采集的土壤樣品一般先用無菌水進行稀釋，再進行平板培養(yǎng)，從中選出菌落數(shù)在30~300間的平板計數(shù)。該方法計數(shù)的結果往往偏小，原因是當兩個或多個菌落連在一起時，平板上觀察到的只是單個菌落數(shù)。（4）對分離得到的尿素小球菌作進一步鑒定時，可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，由于尿素小球菌合成的脲酶能將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強，進而使酚紅指示劑變紅。（5）由題意可知，微生物乙在選擇培養(yǎng)基中從實驗開始到停止生長所用的時間較微生物甲、丙短，說明微生物乙分解尿素的能力比甲、丙更強，所以應選擇微生物乙作為菌種進行后續(xù)培養(yǎng)。17．某種物質S（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機鹽、水和S，乙的組分為無機鹽、水、S和Y?；卮鹣铝袉栴}：（1）實驗時，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用_________________的方法進行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質是_________________。甲、乙培養(yǎng)基均屬于________________培養(yǎng)基。（2）實驗中初步估測搖瓶M中細菌細胞數(shù)為2×107個/mL，若要在每個平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則至少應將搖瓶M中的菌液稀釋__________倍。（3）在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時，某菌株對S的降解量反而下降，其原因可能是__________________________________________（答出1點即可）。（4）若要測定淤泥中能降解S的細菌細胞數(shù)，請寫出主要實驗步驟________________。（5）上述實驗中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細菌的生長提供4類營養(yǎng)物質，即____________________?！敬鸢浮浚?）高壓蒸汽滅菌瓊脂選擇（2）104（3）S的濃度超過某一值時會抑制菌株的生長（4）取淤泥加入無菌水，涂布（或稀釋涂布）到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計數(shù)（5）水、碳源、氮源和無機鹽【解析】（1）常用高壓蒸汽滅菌法處理盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶，乙為固體培養(yǎng)基，故需要加入Y瓊脂；甲和乙培養(yǎng)基可以用于篩選能降解S的菌株，故均屬于選擇培養(yǎng)基。（2）若要在每個平板上涂布100μL稀釋液后的菌液，且每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則搖瓶M中的菌液稀釋的倍數(shù)至少為2×107÷1000×100÷200=1×104倍。（3）當培養(yǎng)基中的S超過某一濃度后，可能會抑制菌株的生長，從而造成其對S的降解量下降。（4）要測定淤泥中能降解S的細菌的細胞數(shù)，可以取淤泥加無菌水制成菌懸液，稀釋涂布到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后進行計數(shù)。（5）甲和乙培養(yǎng)基均含有水、無機鹽、碳源、氮源。18．研究發(fā)現(xiàn)一些嗜冷細菌產(chǎn)生的蛋白酶可使乳蛋白分解，導致牛奶變質。為了篩選檢測變質牛奶中的嗜冷細菌，某研學小組做了如圖所示實驗。（注：培養(yǎng)皿旁的數(shù)字代表菌落數(shù)目），請回答下列問題：（1）牛奶飲用前要經(jīng)過巴氏消毒，以殺死有害微生物，與煮沸消毒相比，巴氏消毒的牛奶在常溫（約28℃）下保存時間較短，原因是_________，導致牛奶中營養(yǎng)成分被分解而變質。（2）若要篩選嗜冷細菌，應將牛奶樣品稀釋液接種在以_________為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上，并且在______的環(huán)境條件下培養(yǎng)，以利于嗜冷細菌生長，抑制或阻止其他微生物的生長。（3）據(jù)圖分析，研學小組采用的是________________法分離和計數(shù)嗜冷細菌。（4）用上述方法統(tǒng)計樣本中菌落數(shù)時是否需要設置對照組？_________（填“需要”或“不需要”），其原因是_____________________________________________。（5）按照菌落計數(shù)的要求，據(jù)圖可得出1ml牛奶樣品中嗜冷細菌的活菌數(shù)為__________個，與用血球計數(shù)板相比，此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)目較_______________?！敬鸢浮浚?）（巴氏消毒的）牛奶中沒有被殺死的微生物（或細菌）在適宜溫度（或常溫）下大量繁殖（2）乳蛋白低溫（或較低溫度）（3）稀釋涂布平板（4）需要需要證明（或判斷）培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格）（5）3.9×105少【解析】（1）由于巴氏消毒的溫度為75~80℃之間，有些微生物在此溫度下沒有被殺死，故在適宜溫度（或常溫）下，（巴氏消毒的）牛奶中沒有被殺死的微生物（或細菌）會大量繁殖，導致牛奶中營養(yǎng)成分被分解而變質。所以巴氏消毒的牛奶在常溫（約28℃）下保存時間較短。（2）由于嗜冷細菌產(chǎn)生的蛋白酶可使乳蛋白分解，故要篩選嗜冷細菌，應將牛奶樣品稀釋液接種在以乳蛋白為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上，并且在低溫的環(huán)境條件下培養(yǎng)，以利于嗜冷細菌生長，抑制或阻止其他微生物的生長。（3）根據(jù)圖示中將牛奶樣品稀釋后涂在培養(yǎng)基上進行菌落計數(shù)，可知研學小組采用的是稀釋涂布平板法分離和計數(shù)嗜冷細菌。（4）由于不知道制備的培養(yǎng)基是否被污染，故需要設置不接種微生物的培養(yǎng)基進行對照，以證明（或判斷）培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格）。（5）菌體計數(shù)時應選擇菌落數(shù)在30~300之間的稀釋倍數(shù)進行計數(shù)，由圖中菌落數(shù)量可知，應選擇稀釋103的進行計數(shù)，故1ml牛奶樣品中嗜冷細菌的活菌數(shù)為（36+39+42）÷3÷0.1×103=3.9×105個。該種方法計數(shù)時，計數(shù)的是活菌的數(shù)量，且當兩個或多個菌體連在一起生長時，平板上觀察的只是一個菌落，故與用血球計數(shù)板相比，此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)目較小。19．多環(huán)芳烴菲在染料、殺蟲劑等生產(chǎn)過程中被廣泛使用，是土壤、河水中常見的污染物之一。下圖表示科研人員從被石油污染的土壤中分離獲得能降解多環(huán)芳烴菲的菌株Q的主要步驟。請回答：（1）步驟①→③的培養(yǎng)過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質的利用率；另一方面能__________________________________。（2）步驟④用平板劃線法純化菌株Q過程中，在做第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，原因是_________________________________________，同時需要相同條件下培養(yǎng)不接種的培養(yǎng)基平板做對照，采用固體平板培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌時要倒置培養(yǎng)，其目的是______________________________。（3）接種環(huán)通過灼燒滅菌，完成步驟④中劃線操作，共需灼燒接種環(huán)________次。（4）為了獲得分解多環(huán)芳烴菲能力更強的菌株，研究人員又對菌種Q進行了誘變處理，得到突變株K。為了進一步鑒定菌株K并比較兩種菌株降解多環(huán)芳烴菲的能力，設計了下列實驗，請補全實驗步驟：①取9只錐形瓶均分成三組，編號A、B、C②向A、B、C三組錐形瓶中加入_______________________________________的培養(yǎng)液。③向A、B、C三組培養(yǎng)液中分別加入___________________________________________。④28℃恒溫培養(yǎng)3天后，測定_________________________________________________?！敬鸢浮浚?）增加培養(yǎng)液中的溶氧量（或增加培養(yǎng)液中的含氧量）（2）線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少（或能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落）防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基（或避免培養(yǎng)基中水分的過快揮發(fā)）（3）6（4）等量的以多環(huán)芳烴菲為唯一碳源等量的無菌水、菌株Q菌液和突變株K菌液錐形瓶中多環(huán)芳烴菲的降解率【解析】（1）步驟①→③的培養(yǎng)過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，目的有兩個，一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質的利用率；另一方面能增加培養(yǎng)液中的溶氧量。（2）步驟④用平板劃線法純化菌株Q過程中，由于線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，所以在做第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線．采用固體平板培養(yǎng)細菌時要倒置培養(yǎng)的目的是防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基。（3）接種環(huán)在每次接種前和接種結束后都要通過灼燒來滅菌，所以完成步驟④中5次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結束后還需灼燒滅菌1次，防止造成污染，由此可見，完成步驟④共需灼燒接種環(huán)6次。（4）本實驗的目的是比較兩種菌株降解多環(huán)芳烴菲的能力。實驗設計需要遵循對照原則，對照組需加入等量無菌水；還需遵循單一變量原則，單一變量是菌種類比不同，即菌株Q菌液和突變株K菌液，所以實驗設計如下：①取9只錐形瓶均分成三組，編號A、B、C。②向9支錐形瓶中分別加入等量以多環(huán)芳烴菲為唯一碳源的培養(yǎng)液。③向A、B、C三組培養(yǎng)液中分別加入等量的無菌水、菌株Q菌液和突變株K菌液。④28℃恒溫培養(yǎng)3天后，測定錐形瓶中多環(huán)芳烴菲的降解率。專題33微生物的培養(yǎng)與利用（挑戰(zhàn)）一、單選題1．下列有關微生物的培養(yǎng)和分離的敘述，正確的是（）A．灼燒接種環(huán)后，為避免其他雜菌的干擾，應立即伸入菌液取菌種B．若要檢測培養(yǎng)基是否被污染，可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下進行培養(yǎng)C．在第一次劃線前灼燒接種環(huán)和每次劃線前灼燒接種環(huán)的目的相同D．若對大腸桿菌進行計數(shù)，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的數(shù)目會比實際值略大【答案】B【解析】接種環(huán)必須冷卻后，才可以伸入菌液中蘸取一環(huán)液，否則會燒傷或燒死微生物，A錯誤；可以將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對照，以判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底，若空白培養(yǎng)基上有菌種出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基被污染，B正確；在第一次劃線前灼燒接種環(huán)和每次劃線前灼燒接種環(huán)的目的不相同，第一次灼燒接種環(huán)的目的是避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基，而每次劃線前灼燒接種環(huán)的目的殺死上次劃線結束后接種環(huán)上殘留的菌種，C錯誤；由于在稀釋涂布平板法中，可能會發(fā)生多個微生物形成一個菌落的情況，因此涂布平板法統(tǒng)計的大腸桿菌數(shù)目會比實際值偏小，D錯誤。2．原油（黑褐色黏稠的油狀液體）泄漏造成的污染很難清除，我們可以從受原油污染的土壤或海水中篩選出能高效降解原油的菌株。下列有關敘述錯誤的是（）A．配制選擇培養(yǎng)基時需提供有利于目的菌株生長的條件，同時抑制其他微生物生長B．在供氧充足的條件下培養(yǎng)、分離目的菌株可避免無氧呼吸產(chǎn)物造成的二次污染C．接種前對菌種進行稀釋的目的是使粘在一起的菌體分散開，便于菌株的分離D．若三個平板上菌落數(shù)分別為276、159、32，則平均菌落數(shù)約為156【答案】D【解析】對微生物的篩選，應人為提供有利于目的菌株生長的條件如營養(yǎng)、溫度、PH值等，同時抑制或阻止其他微生物的生長，A正確；微生物在厭氧條件下不能將有機物徹底氧化分解，產(chǎn)生的不徹底氧化產(chǎn)物會導致土壤受到二次污染，B正確；稀釋的目的是使粘在一起的菌體分散開，將菌體分散成單個細胞，便于后面在平板上獲得單個菌落，C正確；由于三個數(shù)值差別太大，可信度差，D錯誤。3．圓褐固氮菌具有較強的固氮能力（將大氣中的N2固定成NH3），并且能夠分泌植物生長素，促進植株生長和果實發(fā)育。某研究小組從土壤中分離固氮菌并進行計數(shù)，然后制成菌肥施入土壤中以增加土壤肥力，提高農(nóng)作物的產(chǎn)量。下列有關說法正確的是（）A．圓褐固氮菌固定的氮能直接被植物吸收利用B．可用酚紅對選擇培養(yǎng)的圓褐固氮菌進行鑒定C．篩選圓褐固氮菌的培養(yǎng)基中要加入有機氮源D．可通過平板劃線法對所培養(yǎng)的菌落進行計數(shù)【答案】B【解析】生物固氮生成的NH3經(jīng)過土壤中硝化細菌的作用，最終轉化成硝酸鹽，硝酸鹽可以被植物吸收利用，A錯誤；酚紅指示劑在pH升高后將變紅，而圓褐固氮菌固氮產(chǎn)生的氨使得pH升高，因此可用酚紅對選擇培養(yǎng)的圓褐固氮菌進行鑒定，B正確；圓褐固氮菌具有固氮能力，因此篩選圓褐固氮菌的培養(yǎng)基中不要加入有機氮源，C錯誤；平板劃線法只能用于菌種的分離，不能用于菌種的計數(shù)，D錯誤。4．將從種植煙草的土壤里分離得到的尼古?。–10H14N2）降解菌株SC接種到尼古丁培養(yǎng)基中，30℃搖床培養(yǎng)并定時取樣，測定并計算發(fā)酵液中的尼古丁濃度和菌體濃度，得到的結果如圖所示。下列分析不正確的是（）A．分離SC時可用稀釋涂布平板法或劃線法B．培養(yǎng)36h時SC的數(shù)量為該種群的環(huán)境容納量C．影響SC種群密度變化的主要因素是O2濃度和pHD．發(fā)酵液中的尼古丁為SC提供碳源和氮源【答案】C【解析】平板劃線法和稀釋涂布平板法均可分離和提純細菌，A項正確；培養(yǎng)36h時，SC的數(shù)量達到最大值，為該種群的環(huán)境容納量，B項正確；根據(jù)題意可知，尼古丁是SC的主要營養(yǎng)物質，為SC提供碳源和氮源，再結合曲線圖可推知，影響SC種群密度變化的主要因素是培養(yǎng)基中尼古丁的含量，C項錯誤，D項正確。5．生物燃料是指以纖維素材料為原料生產(chǎn)的燃料乙醇和生物柴油，篩選出能高效分解纖維素的纖維素分解菌是制造生物燃料的重要前提。下列說法正確的是（）A．能夠分解纖維素的酶是一種復合酶，其中葡萄糖苷酶能把纖維素分解為纖維二糖B．在篩選纖維素分解菌的過程中，剛果紅染色法能通過顏色反應直接篩選微生物C．倒平板時加入剛果紅染色，優(yōu)點是顯示的顏色反應基本上就是纖維素分解菌的作用D．用平板劃線法對纖維素分解菌進行計數(shù)時，應選菌落數(shù)在30-300之間的平板計數(shù)【答案】B【解析】由分析可知，纖維素酶是一種復合酶，至少含有三種組分，即C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶，其中C1酶、Cx酶能把纖維素分解為纖維二糖，A錯誤；在篩選纖維素分解菌的過程中，發(fā)明了剛果紅染色法，剛果紅染色法能通過顏色反應直接篩選微生物，B正確；由分析可知，倒平板時加入剛果紅染色是第二種方法，其優(yōu)點是操作簡便，不存在菌落混雜問題，而顯示的顏色反應基本上就是纖維素分解菌的作用是方法一的典型優(yōu)點，C錯誤；用稀釋涂布平板法對纖維素分解菌進行計數(shù)時，應選菌落數(shù)在30-300之間的平板計數(shù)，D錯誤。6．某同學檢測泡菜濾液中的亞硝酸鹽含量，并分離純化其中的乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。下列敘述錯誤的是（）A．泡菜濾液顯色的深淺與其中亞硝酸鹽的含量呈正相關B．培養(yǎng)適宜時間后，應挑選出具有透明圈的菌落C．若要調節(jié)培養(yǎng)基的pH，應該在滅菌之前進行D．挑選出來的菌落可直接進行涂布分離【答案】D【解析】在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料．將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測對比，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量，所以泡菜濾液顯色的深淺與其中亞硝酸鹽的含量呈正相關，A正確；由于乳酸菌產(chǎn)生的乳酸將培養(yǎng)基的碳酸鈣分解，所以會出現(xiàn)透明圈，因此培養(yǎng)適宜時間后，應挑選出具有透明圈的菌落，B正確；培養(yǎng)基的配制時需要先調節(jié)pH，在進行滅菌，避免雜菌的污染，C正確；挑選出來的菌落要先進行稀釋在進行涂布，D錯誤。7．勤洗手是預防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠狀病毒（2019-nCOV）期間推出一款新型免洗洗手凝膠。為衡量該凝膠的清洗效果，研究人員檢測了凝膠洗手前后，手部細菌的含量。凝膠洗手前的檢測流程見下圖。下列敘述正確的是（）A．統(tǒng)計洗手前手部細菌的數(shù)量，選擇的接種方法是平板劃線法B．除圖中操作外，還需要設置一組未接種的空白培養(yǎng)基進行培養(yǎng)C．培養(yǎng)基上的一個菌落只可能來源于樣品稀釋液中的一個活菌D．初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，需要用顯微鏡觀察菌體的形狀【答案】B【解析】平板劃線無法得知稀釋倍數(shù)，不能用于活菌計數(shù)，故統(tǒng)計洗手前手部細菌的數(shù)量，選擇的接種方法是稀釋涂布平板法，A錯誤；除圖中操作外，還需要設置一組未接種的空白培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，驗證培養(yǎng)基是否被雜菌污染，B正確；由于當兩個或多個細胞連在一起時，平板上顯示的只是一個菌落，故培養(yǎng)基上的一個菌落可能來源于樣品稀釋液中的一個、甚至幾個活菌，C錯誤；由于菌落肉眼可見，故初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，可用肉眼觀察菌體的形態(tài)特征，D錯誤。8．將同一土壤樣本經(jīng)滅菌和未滅菌處理后．分別放在兩個培養(yǎng)皿中，在土壤表面分別放3張廢紙（主要成分是纖維素）。然后將兩個培養(yǎng)皿放在有較高濕度的培養(yǎng)室中，4~6周后觀察兩個培養(yǎng)皿的變化情況（如下圖）。下列相關敘述錯誤的是（）A．土壤微生物能夠將廢紙中的有機物分解成無機物B．將培養(yǎng)皿和土壤滅菌的方法可以是高壓蒸汽滅菌C．若土壤濕度不夠，可加入些清水以控制無關變量D．若某酵母菌不能利用廢紙，可能是由于缺乏相應分解酶系【答案】C【解析】廢紙的主要成分是纖維素，土壤中分解纖維素的微生物可以利用廢紙中的纖維素獲取物質和能量，A正確；培養(yǎng)皿和土壤既可以采用干熱滅菌，又可以采用高壓蒸汽滅菌，B正確；若土壤濕度不夠，可加入些無菌水，以控制濕度對實驗結果的影響，C錯誤；某酵母菌不能利用廢紙，可能的原因是缺乏相應分解酶系（即缺乏纖維素酶和半纖維素酶），D正確。9．下列對四種微生物相關的敘述，錯誤的是（）A．CO2和NH3分別是硝化細菌的碳源和氮源，該生物所需的能源來自NH3的氧化B．CO2和硝酸鹽分別是褐藻的碳源和氮源，該生物所需的能源來自太陽能C．糖類和N2是乳酸菌的碳源和氮源，該生物所需的能源來自乳酸的氧化分解D．葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，但CO2一定不是酵母菌的碳源【答案】C【解析】硝化細菌是化能自養(yǎng)需氧型微生物，CO2和NH3分別是硝化細菌的碳源和氮源，該生物所需的能源來自NH3的氧化，A項正確；褐藻能進行光合作用，CO2和硝酸鹽分別是褐藻的碳源和氮源，該生物所需的能源來自太陽能，B項正確；乳酸菌是異養(yǎng)厭氧型微生物，乳酸菌不能固氮，因此N2不是其氮源，乳酸是乳酸菌的代謝產(chǎn)物，乳酸菌的碳源為葡萄糖,氮源為無機鹽，該生物所需的能源來自糖類的氧化分解，C項錯誤；酵母菌是異養(yǎng)生物，葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，酵母菌不能直接利用CO2，D項正確。10．篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈（如圖），實驗結果見下表。菌種菌落直徑：C（mm）透明圈直徑：H（mm）H/C細菌Ⅰ5.111.22.2細菌Ⅱ8.113.01.6有關本實驗的敘述，錯誤的是（）A．培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質B．篩選分解淀粉的細菌時，菌液應稀釋后涂布C．以上兩種細菌均不能將淀粉酶分泌至細胞外D．H/C值反映了兩種細菌分解淀粉能力的差異【答案】C【解析】培養(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子等成分，A正確；篩選淀粉分解菌時，需要對菌液進行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，B正確；由題意可知，以上兩種菌均會產(chǎn)生透明圈，說明兩種菌均可以產(chǎn)生淀粉酶并分泌到細胞外分解淀粉，C錯誤；淀粉分解菌的H/C越大，說明其產(chǎn)生的淀粉酶分解的淀粉相對越多，可說明該淀粉分解菌分解淀粉的能力越強，D正確。11．生長圖形法是一種測定微生物營養(yǎng)需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類，研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需營養(yǎng)物質的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分數(shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結果如圖所示，下列說法錯誤的是（）A．倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無污染B．制備平板時，培養(yǎng)基需先滅菌再倒平板C．生長圖形法還可用于某些菌種的篩選D．圖示結果表明該菌需要生長因子乙或丙【答案】D【解析】平板上不含任何生長因子，若倒成平板后直接培養(yǎng)，出現(xiàn)菌落說明已被雜菌感染，因為該嗜熱菌不能在缺乏生長因子的培養(yǎng)基中生長，A正確；制備平板時，先滅菌再倒平板，故倒成平