《氨基酸、氨基酸鹽及其類似物 第11部分：L-茶氨酸》

1QB/T5633.11—202X氨基酸、氨基酸鹽及其類似物第11部分：L-茶氨酸本文件規(guī)定了L-茶氨酸的感官要求、理化指標(biāo)、安全指標(biāo)，描述了相應(yīng)的試驗(yàn)方法，規(guī)定了檢驗(yàn)規(guī)則和標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝、運(yùn)輸、貯存，給出了化學(xué)名稱、分子式、結(jié)構(gòu)簡式和相對分子質(zhì)量的信息。本文件適用于以淀粉質(zhì)或糖類為原料，經(jīng)發(fā)酵法生產(chǎn)的，用于食品加工用的L-茶氨酸的生產(chǎn)、檢驗(yàn)和銷售。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T191包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T601化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備GB/T602化學(xué)試劑雜質(zhì)測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備GB/T603化學(xué)試劑試驗(yàn)方法中所用制劑及制品的制備GB/T613化學(xué)試劑比旋光本領(lǐng)（比旋光度）測定通用方法GB4789.2食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測定GB4789.3食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)GB4789.4食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)GB4789.10食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)GB4789.15食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)霉菌和酵母計(jì)數(shù)GB5009.4食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中灰分的測定GB5009.11食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無機(jī)砷的測定GB5009.12食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉛的測定GB5009.74食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑中重金屬限量試驗(yàn)GB5009.75食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑中鉛的測定GB5009.76食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑中砷的測定GB/T6040紅外光譜分析方法通則GB/T6284化工產(chǎn)品中水分測定的通用方法干燥減量法GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB7718食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)預(yù)包裝食品標(biāo)簽通則GB/T9724化學(xué)試劑pH值測定通則GB/T9729化學(xué)試劑氯化物測定通用方法GB29924食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑標(biāo)識通則3術(shù)語和定義2QB/T5633.11—202X本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4化學(xué)名稱、分子式、結(jié)構(gòu)簡式和相對分子質(zhì)量4.1化學(xué)名稱L-N-乙基-γ-谷氨酰胺、N-(γ-谷氨?；┮野?.2分子式C7H14N2O34.3結(jié)構(gòu)簡式4.4相對分子質(zhì)量174.205技術(shù)要求5.1感官要求應(yīng)符合表1要求。表1感官要求5.2理化指標(biāo)應(yīng)符合表2要求。表2理化指標(biāo)3QB/T5633.11—202X表2理化指標(biāo)（續(xù)）5.3安全指標(biāo)應(yīng)符合表3要求。表3安全指標(biāo)5006試驗(yàn)方法6.1一般規(guī)定本文件所用試劑在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑。試驗(yàn)中所用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、雜質(zhì)測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液及其他試劑，應(yīng)按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規(guī)定制備。除非另有規(guī)定，試驗(yàn)用水均為GB/T6682規(guī)定的三級水。6.2感官取試樣適量，置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光線下，目測其色澤與狀態(tài)，聞其氣味，嘗其滋味，觀察有無外來雜質(zhì)。6.3鑒別按照附錄A中A.1進(jìn)行測定。6.4含量按照附錄A中A.2進(jìn)行測定。6.5比旋光度4QB/T5633.11—202X按照GB/T613，稱取105℃干燥3h試樣2.5g（精確至0.0001g），加水溶解并定容至50mL，搖勻后進(jìn)行測定。6.6pH按照GB/T9724，稱取試樣0.50g，加水溶解并定容至50mL，搖勻后進(jìn)行測定。6.7透光率按照附錄A中A.3進(jìn)行測定。6.8干燥減量按照GB/T6284，稱取試樣1.0g（精確至0.0001g），干燥時間為3h。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不應(yīng)大于算術(shù)平均值的10%。6.9灼燒殘?jiān)凑誈B5009.4食品中總灰分測定法中其他食品的方法，稱取試樣1.0g（精確至0.0001g）進(jìn)行測定。6.10氯化物按照GB/T9729，稱取試樣1.0g（精確至0.01g），氯化物標(biāo)準(zhǔn)溶液2.0mL進(jìn)行測定，試樣溶液的濁度不應(yīng)大于對照溶液的濁度。6.11硫酸鹽按照附錄A中A.4進(jìn)行測定。6.12其他氨基酸按照附錄A中A.5進(jìn)行測定。6.13重金屬按照GB5009.74（仲裁法，干法消解處理試樣）或按照附錄A中A.6進(jìn)行測定。6.14鉛按照GB5009.12或GB5009.75進(jìn)行測定。6.15總砷按照GB5009.11或GB5009.76進(jìn)行測定。6.16菌落總數(shù)按照GB4789.2進(jìn)行測定。6.17霉菌和酵母按照GB4789.15平板計(jì)數(shù)進(jìn)行測定。6.18大腸菌群5QB/T5633.11—202X按照GB4789.3平板計(jì)數(shù)法進(jìn)行測定。6.19金黃色葡萄球菌按照GB4789.10定性檢驗(yàn)法進(jìn)行測定。6.20沙門氏菌按照GB4789.4進(jìn)行測定。7檢驗(yàn)規(guī)則7.1組批同原料、同配方、同工藝生產(chǎn)的，符合質(zhì)量要求的，同一品種的質(zhì)量均一的產(chǎn)品為一批。7.2抽樣均勻試樣的抽取應(yīng)使用清潔、干燥的取樣工具，等量取樣。一般取樣量為全檢量的3倍，不應(yīng)少于500g，如有特殊需求，根據(jù)實(shí)際情況加大取樣量。將抽取的樣品混勻，通過四分法分樣。7.3檢驗(yàn)分類檢驗(yàn)分出廠檢驗(yàn)和型式檢驗(yàn)。7.4出廠檢驗(yàn)7.4.1每批產(chǎn)品應(yīng)經(jīng)企業(yè)質(zhì)檢部門按本文件檢驗(yàn)合格并附合格證后方可出廠。7.4.2出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目為：感官、含量、比旋光度、pH、透光率、干燥減量、灼燒殘?jiān)?、氯化物、其他氨基酸、菌落總?shù)、霉菌和酵母。7.5型式檢驗(yàn)7.5.1檢驗(yàn)項(xiàng)目為本文件要求中規(guī)定的全部項(xiàng)目。一般情況下，型式檢驗(yàn)半年進(jìn)行一次。7.5.2有下列情況之一時，亦應(yīng)進(jìn)行型式檢驗(yàn)：——原輔材料有較大變化時；——更改關(guān)鍵工藝或設(shè)備時；——新試制的產(chǎn)品或正常生產(chǎn)的產(chǎn)品停產(chǎn)3個月后，重新恢復(fù)生產(chǎn)時；——出廠檢驗(yàn)與上次型式檢驗(yàn)結(jié)果有較大差異時；——國家市場監(jiān)督機(jī)構(gòu)按有關(guān)規(guī)定需要抽檢時。7.6判定規(guī)則7.6.1樣品經(jīng)檢驗(yàn)，所有項(xiàng)目全部合格，則判定該批產(chǎn)品為合格品。7.6.2感官要求和理化指標(biāo)有2項(xiàng)或2項(xiàng)以下不合格，則應(yīng)重新自該批產(chǎn)品中加倍取樣復(fù)驗(yàn)，以復(fù)驗(yàn)結(jié)果為準(zhǔn)。7.6.3微生物指標(biāo)有1項(xiàng)不合格，則判定該批產(chǎn)品為不合格，不應(yīng)復(fù)驗(yàn)。7.6.4技術(shù)要求中有2項(xiàng)以上不合格，則判定該批產(chǎn)品為不合格，不應(yīng)復(fù)驗(yàn)。8標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝、運(yùn)輸、貯存6QB/T5633.11—202X8.1標(biāo)志、標(biāo)簽8.1.1銷售包裝標(biāo)簽應(yīng)符合GB7718或GB29924的規(guī)定。8.1.2包裝儲運(yùn)圖示應(yīng)符合GB/T191的規(guī)定。8.2包裝8.2.1包裝材料應(yīng)符合相應(yīng)的國家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。8.2.2包裝物和容器應(yīng)整潔、衛(wèi)生、無破損。8.3運(yùn)輸運(yùn)輸工具應(yīng)清潔衛(wèi)生，不應(yīng)與有毒、有害、有腐蝕性、有異味的物品混裝、混運(yùn)，運(yùn)輸過程中應(yīng)有遮蓋物，避免受潮、暴曬。8.4貯存產(chǎn)品應(yīng)在清潔、陰涼、干燥、通風(fēng)的倉庫內(nèi)貯存，遠(yuǎn)離有毒有害、有腐蝕性物品，不應(yīng)與有異味物品混貯。7QB/T5633.11—202X（規(guī)范性）檢測方法警示：使用本文件的人員應(yīng)有正規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。本文件并未指出所有可能的安全問題。使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關(guān)法規(guī)規(guī)定的條件。A.1鑒別A.1.1紅外光吸收法按照GB/T6040壓片法，稱取試樣1mg～2mg，加干燥的溴化鉀約200mg，充分研磨混勻，壓片，掃描并記錄紅外光吸收譜圖，紅外光吸收譜圖應(yīng)與附錄B一致。A.1.2高效液相色譜法按照A.2.2進(jìn)行測定，試樣溶液色譜圖中主峰（溶劑峰除外）的保留時間與標(biāo)準(zhǔn)溶液中主峰的保留時間一致。A.2含量A.2.1電位滴定法A.2.1.1試劑和材料A.2.1.1.1無水乙酸。A.2.1.1.2無水甲酸。A.2.1.1.3高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：c（HClO4）=0.1mol/L。A.2.1.2儀器和設(shè)備A.2.1.2.1電位滴定儀：配非水相電極。A.2.1.2.2分析天平：感量為0.0001g。A.2.1.3分析步驟稱取105℃干燥3h的試樣約0.15g（精確至0.0001g），置于干燥的燒杯或錐形瓶中，加入無水甲酸3mL完全溶解后，加入無水乙酸50mL，采用電位滴定儀用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至終點(diǎn)。按與試樣相同的測定步驟進(jìn)行空白試驗(yàn)。A.2.1.4結(jié)果計(jì)算L-茶氨酸的含量（以干基計(jì)）以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω1計(jì)，用百分?jǐn)?shù)（%）表示，按式（A.1）計(jì)算：式中： ×M×cm×1000×100%·········································（A.1）v——試樣溶液消耗高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積，單位為毫升（mL）；v0——空白溶液消耗高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積，單位為毫升（mL）；M——L-茶氨酸的摩爾質(zhì)量，單位為克每摩爾（g/molM=174.2c——高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度，單位為摩爾每升（mol/L）；8QB/T5633.11—202Xm——試樣的質(zhì)量，單位為克（g）；1000——換算系數(shù)。A.2.1.5精密度試驗(yàn)結(jié)果以平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不應(yīng)大于算術(shù)平均值的0.3%。A.2.2高效液相色譜法（仲裁法）A.2.2.1試劑和材料A.2.2.1.1水：一級水。A.2.2.1.2乙腈：色譜純。A.2.2.1.3L-茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)品（C7H14N2O3，CASNo.：3081-61-6）：純度≥99.0%。A.2.2.1.4濾膜：水相，0.22μm。A.2.2.2儀器和設(shè)備A.2.2.2.1高效液相色譜儀：配有紫外檢測器。A.2.2.2.2分析天平：感量為0.00001g。A.2.2.3分析步驟A.2.2.3.1試樣溶液的制備稱取105℃干燥3h的試樣0.03g（精確至0.00001g加水溶解并定容至100mL，搖勻，經(jīng)濾膜過濾后備用。A.2.2.3.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備稱取105℃干燥3h的L-茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)品0.03g（精確至0.00001g加水溶解并定容至100mL，搖勻，經(jīng)濾膜過濾。A.2.2.3.3儀器參考條件A.2.2.3.3.1色譜柱：SB-C18，5μm，250mm×4.6mm或性能相當(dāng)者。A.2.2.3.3.2流動相：A相，一級水；B相，乙腈。A.2.2.3.3.3柱溫：35℃。A.2.2.3.3.4流速：1.0mL/min。A.2.2.3.3.5進(jìn)樣量：20μL。A.2.2.3.3.6檢測波長：210nm。A.2.2.3.4液相色譜梯度洗脫條件液相色譜梯度洗脫條件見表A.1。9QB/T5633.11—202X表A.1梯度洗脫條件10020345060A.2.2.3.5試樣溶液的測定將試樣溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液分別注入液相色譜儀中進(jìn)行測定，記錄試樣溶液中待測物質(zhì)的峰面積A1和標(biāo)準(zhǔn)溶液中L-茶氨酸的峰面積A2。色譜圖見附錄C。A.2.2.4結(jié)果計(jì)算L-茶氨酸的含量（以干基計(jì)）以質(zhì)量分?jǐn)?shù)2計(jì)，用百分?jǐn)?shù)（%）表示，按（A.2）計(jì)算：ω2=A0×100%··········································（A.2）式中：A1——試樣中L-茶氨酸的峰面積；c1——L-茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度，單位毫克每毫升（mg/mL）；V1——試樣溶液體積，單位為毫升（mL）；A2——L-茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積；m——試樣的質(zhì)量，單位為克（g）；1000——換算系數(shù)。A.2.2.5精密度試驗(yàn)結(jié)果以平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留至小數(shù)點(diǎn)后兩位。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不應(yīng)大于算術(shù)平均值的10%。A.3透光率A.3.1儀器和設(shè)備A.3.1.1分光光度計(jì)。A.3.1.2分析天平：感量為0.01g。A.3.2分析步驟稱取試樣0.50g（精確至0.01g），加水溶解并定容至25mL，搖勻。用1cm比色皿，以水為空白對照，于430nm波長下測定試樣溶液的透光率。試驗(yàn)結(jié)果以兩次平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示。A.3.3精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不應(yīng)大于算術(shù)平均值的0.5%。A.4硫酸鹽QB/T5633.11—202XA.4.1試劑和材料A.4.1.1鹽酸。A.4.1.2無水氯化鋇。A.4.1.3鹽酸溶液：量取鹽酸234mL，加水稀釋并定容至1000mL。A.4.1.4氯化鋇溶液（25%）：稱取無水氯化鋇25g，加水溶解并定容至100mL。A.4.1.5硫酸鹽（SO4）標(biāo)準(zhǔn)溶液：0.1mg/mL。A.4.2儀器和設(shè)備A.4.2.1納氏比色管。A.4.2.2分析天平：感量為0.01g、0.0001g。A.4.3分析步驟A.4.3.1試樣溶液的制備稱取試樣1.0g（精確至0.01g），置于50mL納氏比色管中，加水約40mL和鹽酸溶液2mL，搖勻。A.4.3.2對照溶液的制備準(zhǔn)確移取硫酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液2.0mL，按試樣溶液的制備方法制備。A.4.3.3測定在試樣溶液管與對照溶液管中分別加入氯化鋇溶液5mL，并加水至50mL，搖勻，放置10min。將試樣溶液管與對照溶液管置于同一黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較所產(chǎn)生的濁度。A.4.4結(jié)果判定試樣溶液的濁度不應(yīng)大于對照溶液的濁度。A.5其他氨基酸A.5.1薄層色譜法A.5.1.1試劑和材料A.5.1.1.1乙醇。A.5.1.1.2無水乙酸。A.5.1.1.3正丁醇。A.5.1.1.4茚三酮。A.5.1.1.5茚三酮的乙醇溶液（0.2%）：稱取茚三酮0.2g，加乙醇溶解并定容至100mL。A.5.1.1.6茶氨酸對照品：純度≥99.0%。A.5.1.1.7谷氨酰胺對照品：純度≥99.0%。A.5.1.1.8硅膠G薄層板。A.5.1.1.9展開劑：正丁醇:無水乙酸:水=4:1:1。A.5.1.2儀器和設(shè)備QB/T5633.11—202X分析天平：感量為0.01g、0.0001g。A.5.1.3分析步驟A.5.1.3.1試樣溶液的制備稱取試樣適量，加無水乙酸溶解并制成每1mL中約含試樣10mg的溶液。A.5.1.3.2對照溶液的制備準(zhǔn)確移取試樣溶液1.0mL，加無水乙酸稀釋并定容至200mL。A.5.1.3.3系統(tǒng)適用性溶液的制備稱取茶氨酸對照品和谷氨酰胺對照品各適量，置于同一量瓶中，加適量無水乙酸溶解，制成每1mL中約含茶氨酸10mg和谷氨酰胺0.1mg的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。A.5.1.3.4測定吸取試樣溶液、對照溶液和系統(tǒng)適用性溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，用展開劑展開，取出晾干，噴以茚三酮的乙醇溶液，90℃加熱至斑點(diǎn)出現(xiàn)，立即檢驗(yàn)。A.5.1.3.5結(jié)果判定系統(tǒng)適用性溶液應(yīng)顯兩個完全分離的斑點(diǎn)，對照溶液應(yīng)顯一個清晰的斑點(diǎn)。試樣溶液中如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對照溶液的主斑點(diǎn)比較，不應(yīng)深于對照溶液中主斑點(diǎn)顏色，且不應(yīng)超過1個。A.6重金屬A.6.1試劑和材料A.6.1.1鹽酸。A.6.1.2濃氨水。A.6.1.3氫氧化鈉。A.6.1.4A.6.1.5甘油。A.6.1.6乙酸銨。A.6.1.7酚酞。A.6.1.8乙醇。A.6.1.9硝酸。A.6.1.10硝酸鉛。A.6.1.11鹽酸溶液I：量取鹽酸63mL，加水稀釋至100mL。A.6.1.12鹽酸溶液II：量取鹽酸18mL，加水稀釋至100mL。A.6.1.13氨水溶液：10%。A.6.1.14氫氧化鈉溶液：c（NaOH）=1mol/L。A.6.1.15硫代乙酰胺溶液：稱取硫代乙酰胺4g，加水溶解并稀釋至100mL，置冰箱中冷藏保存。臨用前量取1.0mL及混合液（由氫氧化鈉溶液15mL、水5.0mL和甘油20mL組成）5.0mL，置水浴上加熱20s，混勻后冷卻，立即使用。QB/T5633.11—202XA.6.1.16乙酸鹽緩沖液（pH3.5）：稱取乙酸銨25g，加水25mL溶解，加鹽酸溶液I38mL，用鹽酸溶液II或氨水溶液準(zhǔn)確調(diào)節(jié)pH至3.5（電位法指示），加水稀釋至100