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文檔簡(jiǎn)介
QB/T5133—****家用和類(lèi)似用途洗碗機(jī)的抗菌、除菌功能技術(shù)要求及試驗(yàn)方法本文件規(guī)定了家用和類(lèi)似用途電動(dòng)洗碗機(jī)的除菌、除病毒、抗菌、防霉、抗病毒等性能的要求,描述了相應(yīng)的試驗(yàn)方法,規(guī)定了標(biāo)志和說(shuō)明的內(nèi)容。本文件適用于在器具上或其使用說(shuō)明中明示具有上述一種或多種功能的,在家庭和類(lèi)似場(chǎng)合使用的電動(dòng)洗碗機(jī)的設(shè)計(jì)、制造和檢驗(yàn)等。在器具上或使用說(shuō)明中明示具有上述一種或多種功能的其他類(lèi)似器具以及組合功能器具中的洗碗機(jī)的相關(guān)功能的設(shè)計(jì)、制造和檢驗(yàn)等參照使用。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T1355小麥粉GB4789.2食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定GB/T5296.2消費(fèi)品使用說(shuō)明第2部分:家用和類(lèi)似用途電器GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB/T20290—2016家用電動(dòng)洗碗機(jī)性能測(cè)試方法GB21551.1—2008家用和類(lèi)似用途電器的抗菌、除菌、凈化功能通則GB21551.2家用和類(lèi)似用途電器的抗菌、除菌、凈化功能抗菌材料的特殊要求GB38383—2019洗碗機(jī)能效水效限定值及等級(jí)QB/T1520—XXXX家用和類(lèi)似用途電動(dòng)洗碗機(jī)《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)3術(shù)語(yǔ)和定義GB21551.1—2008界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1電動(dòng)洗碗機(jī)electricaldishwasher使用電能驅(qū)動(dòng),依靠化學(xué)、物理等方法對(duì)餐具進(jìn)行洗滌、漂洗、干燥等處理的器具,以下簡(jiǎn)稱(chēng)“洗碗機(jī)”。[來(lái)源:QB/T1520—XXXX,3.1]3.2除菌microbialreduction采用化學(xué)、物理等方法去除或減少作用對(duì)象上細(xì)菌、真菌等微生物的過(guò)程。[來(lái)源:GB21551.1—2008,3.7,有修改]3.3除菌率microbialreductionrate除菌性能試驗(yàn)后,相比對(duì)照組,試驗(yàn)組細(xì)菌或真菌數(shù)量減少的百分比。QB/T5133—****3.4除病毒virusreduction采用化學(xué)、物理等方法去除或減少作用對(duì)象上病毒的過(guò)程。3.5除病毒率virusreductionrate除病毒性能試驗(yàn)后,相比對(duì)照組,試驗(yàn)組病毒滴度減少的百分比。3.6抗菌anti-microbial材料成分采用化學(xué)、物理等方法作用于材料本體,殺滅或妨礙細(xì)菌、真菌等微生物生長(zhǎng)繁殖及其活性的過(guò)程。[來(lái)源:GB21551.1—2008,3.2,有修改]3.7防霉等級(jí)anti-mildewlevel在防霉菌性能試驗(yàn)中用霉菌生長(zhǎng)面積表示防霉效果的級(jí)別。[來(lái)源:GB21551.1—2008,3.5,有修改]3.8抗病毒antiviral材料成分采用化學(xué)、物理等方法作用于材料本體,殺滅或使病毒失去感染活性的過(guò)程。3.9抗病毒率anti-viralrate抗病毒性能試驗(yàn)后,相比對(duì)照組,試驗(yàn)組病毒滴度減少的百分比。3.10中式標(biāo)準(zhǔn)餐具Chinesestandardtableware符合GB38383—2019中附錄B規(guī)格要求的餐具,簡(jiǎn)稱(chēng)“中式餐具”。3.11西式標(biāo)準(zhǔn)餐具westernstandardtableware符合GB/T20290—2016中附錄A規(guī)格要求的餐具,簡(jiǎn)稱(chēng)“西式餐具”。4技術(shù)要求4.1除菌性能明示具有除菌功能的洗碗機(jī),中式餐具的除菌率應(yīng)不小于99.99%,可用對(duì)數(shù)值表示??裳b載西式餐具的洗碗機(jī),其西式餐具的除菌試驗(yàn)可參考本條要求。4.2除病毒性能明示具有除病毒功能的洗碗機(jī),其除病毒率應(yīng)不小于99.99%,可用對(duì)數(shù)值表示。4.3材料抗菌性能明示使用抗菌材料的洗碗機(jī),其抗菌材料的抗菌率應(yīng)不小于99.0%。4.4材料防霉性能明示使用防霉材料的洗碗機(jī),其防霉材料的防霉等級(jí)應(yīng)不大于1級(jí)。3QB/T5133—****4.5材料抗病毒性能明示使用抗病毒材料的洗碗機(jī),其抗病毒材料的抗病毒率應(yīng)不小于99.0%。5試驗(yàn)方法5.1試驗(yàn)環(huán)境實(shí)驗(yàn)室環(huán)境應(yīng)符合GB19489和GB/T20290—2016的相關(guān)要求。5.2除菌試驗(yàn)方法明示裝載中式餐具的洗碗機(jī),按照附錄A進(jìn)行試驗(yàn);明示裝載西式餐具的洗碗機(jī),參考附錄B進(jìn)行試驗(yàn)。5.3除病毒試驗(yàn)方法按照附錄C進(jìn)行試驗(yàn)。5.4材料抗菌試驗(yàn)方法5.4.1形狀規(guī)則、可制成特定面積的吸水性或非吸水性抗菌材料,按照GB21551.2進(jìn)行試驗(yàn)。5.4.2形狀不規(guī)則的抗菌材料,按照附錄D進(jìn)行試驗(yàn)。5.5材料防霉試驗(yàn)方法具有防霉功能的材料,按照GB21551.2進(jìn)行試驗(yàn)。5.6抗病毒試驗(yàn)方法具有抗病毒功能的材料,按照附錄E進(jìn)行試驗(yàn)。6標(biāo)志和說(shuō)明6.1一般要求明示具有除菌、除病毒、材料抗菌、材料防霉、材料抗病毒功能的洗碗機(jī)產(chǎn)品,其使用說(shuō)明應(yīng)符合GB/T5296.2和GB21551.1。6.2標(biāo)志和說(shuō)明的要求和內(nèi)容明示具有除菌、除病毒、材料抗菌、材料防霉、材料抗病毒功能的洗碗機(jī)產(chǎn)品,符合4.1、4.2、4.3、4.4、4.5的要求并對(duì)功能進(jìn)行標(biāo)識(shí)時(shí),至少在本體、包裝箱、使用說(shuō)明三者之一中,應(yīng)包括以下內(nèi)容:——明示功能的種類(lèi);——應(yīng)標(biāo)注細(xì)菌、真菌、病毒、霉菌的種類(lèi),試驗(yàn)負(fù)載容量,試驗(yàn)程序;——使用壽命內(nèi)需要更換、清洗的零部件,應(yīng)予以說(shuō)明零部件名稱(chēng)、更換、清洗的頻次。6.3標(biāo)志和說(shuō)明的使用符合4.1要求的洗碗機(jī),可在其本體、包裝箱或使用說(shuō)明上標(biāo)注“除菌”或類(lèi)似字樣。符合4.2要求的洗碗機(jī),可在其本體、包裝箱或使用說(shuō)明標(biāo)注“除病毒”或類(lèi)似字樣。符合4.3要求的洗碗機(jī),可在其本體、包裝箱或使用說(shuō)明上標(biāo)注“抗菌”或類(lèi)似字樣。符合4.4要求的洗碗機(jī),可在其本體、包裝箱或使用說(shuō)明上標(biāo)注“防霉”或類(lèi)似字樣。符合4.5要求的洗碗機(jī),可在其本體、包裝箱或使用說(shuō)明上標(biāo)注“抗病毒”或類(lèi)似字樣。4QB/T5133—****附錄A(規(guī)范性)中式餐具除菌性能試驗(yàn)方法A.1試驗(yàn)菌種和儀器A.1.1試驗(yàn)菌種A.1.1.1菌種的選擇試驗(yàn)用菌種首選:——大腸埃希氏菌EscherichiacoliCGMCC1.90——金黃色葡萄球菌StaphylococcusaureusCGMCC1.89如有需要,也可選用其他菌種或菌株作為試驗(yàn)用菌。所有菌種或菌株應(yīng)由國(guó)家相應(yīng)菌種保藏管理中心提供,并在報(bào)告中明示試驗(yàn)用菌種名稱(chēng)及菌株編號(hào)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)依據(jù)國(guó)家相關(guān)安全規(guī)定使用試驗(yàn)微生物,并盡量選擇非致病或低致病微生物。培養(yǎng)菌種使用的各種培養(yǎng)基組份,應(yīng)符合菌種保藏管理中心的要求。所有涉及微生物操作的器皿和材料應(yīng)在試驗(yàn)前進(jìn)行滅菌處理。A.1.1.2培養(yǎng)條件除菌種提供機(jī)構(gòu)有特殊要求外,試驗(yàn)菌種的一般性培養(yǎng)條件應(yīng)符合GB21551.2的相關(guān)要本文件的試驗(yàn)條件均以大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌為例,如果使用其他試驗(yàn)菌種,應(yīng)符合對(duì)應(yīng)的試驗(yàn)條件。A.1.1.3試驗(yàn)菌種的活化和菌液的制備10℃下保藏(不得超過(guò)1個(gè)月作為斜面保藏菌。將斜面保藏菌轉(zhuǎn)接到平板固體培養(yǎng)基上,在(37±1)℃條件下培養(yǎng)(24±1)h,試驗(yàn)時(shí)應(yīng)采用3代~5代、24h內(nèi)轉(zhuǎn)接的新鮮細(xì)菌培養(yǎng)物。用接種環(huán)從新鮮培養(yǎng)物上刮適量新鮮細(xì)菌,加入到質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.85%的無(wú)菌生理鹽水中,將菌液濃度稀釋至1.0×109CFU/mL~9.0×109CFU/mL作為試驗(yàn)用菌液,按照GB4789.2方法進(jìn)行菌落總數(shù)測(cè)定。A.1.1.4試驗(yàn)污染物的制備無(wú)菌污染物:10g小麥粉(符合GB/T1355中對(duì)標(biāo)準(zhǔn)粉的要求100mL蒸餾水,25mL南瓜汁(不加水用慢磨機(jī)榨取混合后煮沸攪勻,再放入高壓蒸汽滅菌器內(nèi),121℃,滅菌20min。無(wú)菌污染物冷卻至室溫后,與試驗(yàn)用菌液1:1混合均勻,作為試驗(yàn)污染物。A.1.2儀器試驗(yàn)用儀器及相關(guān)參數(shù)應(yīng)符合以下要求:——生化培養(yǎng)箱37±1)℃;——冷藏箱:5℃~10℃;——干燥箱:0℃~300℃;——二級(jí)生物安全柜;——高壓蒸汽滅菌器;——平皿、移液槍、渦旋混勻器、接種環(huán)、酒精燈等實(shí)驗(yàn)室常用器具。A.2試驗(yàn)要求及預(yù)處理A.2.1試驗(yàn)條件5QB/T5133—****試驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T20290—2016中5.6的要求,菌落總數(shù)應(yīng)<100CFU/mL。A.2.2環(huán)境要求為避免環(huán)境污染,洗碗機(jī)餐具的污染、裝載、回收的過(guò)程應(yīng)在二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室(BSL-2)中進(jìn)行。試驗(yàn)前后都要徹底進(jìn)行空間消毒。洗碗機(jī)排水應(yīng)進(jìn)行收集消毒,防止試驗(yàn)微生物污染環(huán)境。A.2.3試驗(yàn)預(yù)處理洗碗機(jī)應(yīng)按照制造商的要求進(jìn)行安裝及試運(yùn)行。試驗(yàn)用餐具的規(guī)格及裝載方法應(yīng)符合GB38383—2019中附錄B的要求。待測(cè)洗碗機(jī):試驗(yàn)前應(yīng)在空載狀態(tài)下連續(xù)運(yùn)行2個(gè)周期制造商明示的除菌程序,應(yīng)在運(yùn)行結(jié)束后的4h內(nèi)進(jìn)行除菌試驗(yàn),器具中應(yīng)視檢無(wú)污漬、水痕等殘留。餐具預(yù)處理:試驗(yàn)前采用干燥箱(160℃,2h)對(duì)餐具進(jìn)行干熱滅菌,待餐具溫度降至低于37℃方可使用,餐具中應(yīng)視檢無(wú)污漬、水痕等殘留。試驗(yàn)時(shí),洗碗機(jī)不添加任何洗滌劑或漂洗劑等化學(xué)物質(zhì),建議使用全新樣機(jī)。如使用試驗(yàn)過(guò)的樣機(jī),則清空鹽倉(cāng)、分配器,同時(shí)也要視檢器具中無(wú)污漬、水痕等殘留。A.3試驗(yàn)步驟A.3.1餐具的涂覆制備對(duì)表A.1中要求的餐具種類(lèi)和污染量進(jìn)行涂覆,涂覆餐具套數(shù)應(yīng)為額定容量的50%。如果洗碗機(jī)的規(guī)格套數(shù)是奇數(shù),涂覆試驗(yàn)污染物的餐具套數(shù)是:(總套數(shù)+1)/2。其中:a)米飯碗、筷子、小湯勺的涂覆數(shù)量與涂覆套數(shù)一致;b)馬克杯和玻璃杯的涂覆數(shù)量之和與涂覆套數(shù)相同,且二者數(shù)量相同,如不能均等,則另外涂覆1個(gè)玻璃杯;c)深盤(pán)和淺盤(pán)的涂覆數(shù)量之和與涂覆套數(shù)相同,且二者數(shù)量相同,如不能均等時(shí),則另外涂覆1個(gè)淺盤(pán);d)面碗和佐料碟均整體涂覆,涂覆數(shù)量為涂覆套數(shù)的50%;如涂覆套數(shù)為奇數(shù),面碗和佐料碟的涂覆數(shù)量分別為(涂覆套數(shù)+1)/2。表A.1中式餐具污染物涂覆量123456789盤(pán)、杯、碗類(lèi)等只使用一面的餐具,涂覆試驗(yàn)污染物時(shí),邊緣保留2cm的空白??曜?、勺類(lèi)兩面使用的餐具,涂覆試驗(yàn)污染物時(shí),只涂覆使用位置,手柄處不涂覆,筷子從使用端開(kāi)始涂覆,涂覆長(zhǎng)度為筷子長(zhǎng)度的1/4長(zhǎng)度。需污染的餐具全部完成涂覆后,在室溫下干燥約1h,待表面無(wú)明顯水漬,與未涂覆菌液的餐具交叉排列裝載入洗碗機(jī)中,試驗(yàn)時(shí)洗碗機(jī)按照滿(mǎn)載運(yùn)行。A.3.2菌液回收、培養(yǎng)除菌程序運(yùn)行結(jié)束后,對(duì)餐具表面殘留細(xì)菌進(jìn)行回收。回收套數(shù)等于涂覆套數(shù)。6QB/T5133—****每套回收餐具包含1個(gè)米飯碗,1個(gè)面碗的1/2內(nèi)表面,1個(gè)馬克杯或玻璃杯,1雙筷子,1個(gè)小湯勺,1個(gè)佐料碟的1/2內(nèi)表面,1個(gè)深盤(pán)或淺盤(pán)。每套餐具使用30mL0.85%的無(wú)菌生理鹽水進(jìn)行回收,按照GB4789.2方法對(duì)回收液進(jìn)行菌落總數(shù)測(cè)定。對(duì)于需要進(jìn)行回收1/2個(gè)表面的面碗和佐料碟,其具體回收步驟如下:a)每2套餐具作為一組,記為A套和B套;b)A套、B套共用1個(gè)面碗和佐料碟,在60mL(2套用量)洗脫液中,用5mL洗脫1個(gè)面碗,將洗脫液分成2份,每份2.5mL,另取5mL洗脫佐料碟,分成2份,每個(gè)2.5mL;c)將b)其中1份2.5mL面碗洗脫液和一份2.5mL的佐料碟洗脫液混合后,補(bǔ)充25mL洗脫液至30mL,將A套的其他餐具進(jìn)行洗脫;d)將b)另外1份2.5mL面碗洗脫液和一份2.5mL的佐料碟洗脫液混合后,補(bǔ)充25mL洗脫液至30mL,將B套的其他餐具進(jìn)行洗脫;e)若涂覆套數(shù)為奇數(shù)套,則缺少一套B套餐具,多余的一份d)不再進(jìn)行洗脫。常見(jiàn)餐具涂覆及回收見(jiàn)表A.2。表A.2常見(jiàn)套數(shù)涂覆及回收舉例537533773264322744211633665337721163342274432740——1——011111A.3.3陽(yáng)性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照組采用與A.3.1中相同配比的餐具2套。餐具按照表A.1的要求均勻涂覆污染物,與試驗(yàn)組餐具同時(shí)干燥,干燥后按A.3.2的方法進(jìn)行洗脫、菌落培養(yǎng),陽(yáng)性對(duì)照組初始含菌量不得小于106CFU/套。A.3.4陰性對(duì)照陰性對(duì)照采用2個(gè)佐料碟,不涂覆菌液直接干燥后,按A.3.2的方法進(jìn)行洗脫、菌落培養(yǎng),回收液含菌量應(yīng)小于1CFU/mL,否則試驗(yàn)無(wú)效。A.4計(jì)算除菌率和除菌對(duì)數(shù)值分別按照公式(A.1)、(A.2)計(jì)算:P=根100%………………(A.1)QB/T5133—****=lgT0i-lgTi………………(A.2)式中:i—單次試驗(yàn)編號(hào);P—第i次試驗(yàn)的除菌率,以百分?jǐn)?shù)表示;Qi—第i次試驗(yàn)的除菌對(duì)數(shù)值;Ti—第i次試驗(yàn),試驗(yàn)組平均每套餐具殘留的活菌數(shù),單位為CFU/套;T—第i次試驗(yàn),陽(yáng)性對(duì)照組平均每套餐具殘留的活菌數(shù),單位為CFU/套。相同規(guī)格的洗碗機(jī),應(yīng)在相同條件下至少試驗(yàn)1臺(tái),每臺(tái)進(jìn)行3次試驗(yàn),每次試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)高于限值要求,每次試驗(yàn)后計(jì)算除菌率和除菌對(duì)數(shù)值,取全部試驗(yàn)除菌率和除菌對(duì)數(shù)值的算術(shù)平均值作為試驗(yàn)結(jié)果。試驗(yàn)結(jié)果按照GB/T8170的要求進(jìn)行修約并保留兩位小數(shù)。QB/T5133—****(資料性)西式餐具除菌性能試驗(yàn)方法B.1試驗(yàn)菌種和儀器B.2試驗(yàn)要求及預(yù)處理B.2.1試驗(yàn)條件同A.2.1。B.2.2環(huán)境要求同A.2.2。B.2.3試驗(yàn)預(yù)處理洗碗機(jī)應(yīng)該按照制造商的要求進(jìn)行安裝試運(yùn)行。試驗(yàn)用餐具的規(guī)格及裝載方法符合GB/T20290—2016中附錄A(西式餐具)的要求。待測(cè)洗碗機(jī):試驗(yàn)前應(yīng)在空載狀態(tài)下連續(xù)運(yùn)行2個(gè)制造商聲明的除菌程序,應(yīng)在運(yùn)行結(jié)束后的4h內(nèi)進(jìn)行除菌試驗(yàn)。器具中應(yīng)視檢無(wú)污漬、水痕等殘留。餐具預(yù)處理:試驗(yàn)前采用干燥箱(160℃、2h)對(duì)餐具進(jìn)行干熱滅菌。待餐具溫度降至低于37℃方可使用。試驗(yàn)時(shí),洗碗機(jī)不添加任何洗滌劑或漂洗劑等化學(xué)物質(zhì),建議使用全新樣機(jī)。如使用試驗(yàn)過(guò)的樣機(jī),則清空鹽倉(cāng)、分配器,同時(shí)也要視檢器具中無(wú)污漬、水痕等殘留。B.3試驗(yàn)步驟B.3.1餐具的涂覆制備對(duì)50%的個(gè)人餐具均勻涂覆試驗(yàn)污染物,每個(gè)餐具涂覆污染物的量見(jiàn)表B.1;如果洗碗機(jī)的規(guī)格套數(shù)是奇數(shù),涂覆試驗(yàn)污染物的餐具套數(shù)是:(總套數(shù)+1)/2。盤(pán)、杯類(lèi)等只使用一面的餐具,涂覆試驗(yàn)污染物時(shí),邊緣保留2cm的空白。刀、叉類(lèi)兩面使用的餐具,涂覆試驗(yàn)污染物時(shí),只涂覆使用位置,手柄處不涂覆。涂覆污染物后,在室溫下干燥約1h,待表面無(wú)明顯水漬,然后與未涂覆菌液的餐具交叉排列放置于洗碗機(jī)中,試驗(yàn)時(shí)洗碗機(jī)按照滿(mǎn)載容量運(yùn)行。表B.1西式餐具污染物涂覆量122232415161789B.3.2菌液回收、培養(yǎng)除菌程序運(yùn)行結(jié)束后,對(duì)餐具表面殘留細(xì)菌進(jìn)行回收。選取每1套個(gè)人餐具,使用30mL0.85%的無(wú)菌生理鹽水進(jìn)行回收,按照GB4789.2方法對(duì)回收液進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。QB/T5133—****B.3.3陽(yáng)性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照采用與B.3.2中相同配比的餐具2套。餐具按照表B.1的要求均勻涂覆污染物,與試驗(yàn)組餐具同時(shí)干燥,干燥后按B.3.2的方法進(jìn)行洗脫、菌落培養(yǎng),含菌量不應(yīng)小于106CFU/套。B.3.4陰性對(duì)照陰性對(duì)照采用2個(gè)茶托,不涂覆菌液直接干燥后,按B.3.2的方法進(jìn)行洗脫、菌落培養(yǎng),回收液含菌量應(yīng)小于1CFU/mL,否則試驗(yàn)無(wú)效。B.4計(jì)算QB/T5133—****(規(guī)范性)除病毒性能試驗(yàn)方法C.1試驗(yàn)病毒和儀器C.1.1一般要求實(shí)驗(yàn)室環(huán)境應(yīng)符合GB19489的相關(guān)要求。病毒試驗(yàn)應(yīng)符合世界衛(wèi)生組織(WHO)及我國(guó)衛(wèi)生健康委員會(huì)對(duì)于病原體等管理及使用相關(guān)的最新要求。C.1.2試驗(yàn)病毒試驗(yàn)用病毒株首選:——噬菌體:Phi-X174(ATCC13706-B1,NBRC103405)——宿主菌:大腸埃希氏菌(EscherichiacoliATCC13706,NBRC13898)本文件的試驗(yàn)條件均以噬菌體病毒為例,如果使用其他試驗(yàn)病毒,應(yīng)符合對(duì)應(yīng)的試驗(yàn)條件。所有的病毒應(yīng)有相應(yīng)的保藏機(jī)構(gòu)提供,并在報(bào)告中標(biāo)明名稱(chēng)及宿主菌和病毒株編號(hào)。如選用其他病毒株,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備與其危害性相適應(yīng)的生物安全防護(hù)等級(jí)。C.1.3儀器——離心機(jī):轉(zhuǎn)速為500r/min~10000r/min,準(zhǔn)確度1%;——振蕩培養(yǎng)箱:100r/min37±1)℃;——二級(jí)生物安全柜;——冷藏箱:5℃~10℃;——高壓蒸汽滅菌器;——生化培養(yǎng)箱37±1)℃;——干燥箱:0℃~300℃。C.2試驗(yàn)要求及預(yù)處理C.2.1試驗(yàn)條件試驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T20290—2016中5.6的要求,菌落總數(shù)應(yīng)<100CFU/mL。C.2.2環(huán)境要求為避免環(huán)境污染,洗碗機(jī)餐具的污染、裝載、回收的過(guò)程應(yīng)在二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室(BSL-2)中進(jìn)行。試驗(yàn)前后都要徹底進(jìn)行空間消毒。洗碗機(jī)排水應(yīng)進(jìn)行收集消毒,防止試驗(yàn)微生物污染環(huán)境。C.2.3樣機(jī)預(yù)處理樣機(jī)試驗(yàn)前應(yīng)在空載狀態(tài)下連續(xù)運(yùn)行2個(gè)周期制造商明示的除病毒程序,應(yīng)在運(yùn)行結(jié)束后的4h內(nèi)進(jìn)行除病毒試驗(yàn),器具中應(yīng)沒(méi)有殘留上一次使用時(shí)的殘留。保證樣機(jī)可觸及位置沒(méi)有微生物,可采用臭氧法或紫外線照射。C.2.4餐具預(yù)處理按照產(chǎn)品使用說(shuō)明上的要求,滿(mǎn)載容量裝載洗碗機(jī)。使用符合GB38383—2019中附錄B要求的中式標(biāo)準(zhǔn)餐具,或符合GB/T20290—2016中附錄A要求的西式標(biāo)準(zhǔn)餐具。所有試驗(yàn)負(fù)載要在試驗(yàn)前進(jìn)行滅菌,建議使用高溫烘干方法,采用烘箱(160℃、2h)對(duì)餐具進(jìn)行干熱滅菌,待餐具溫度降至37℃以下方可使用。對(duì)于不能高溫處理的塑料餐具,可用75%的酒精擦拭3遍,無(wú)菌水沖洗后晾干。QB/T5133—****C.2.5病毒載體需要用玻璃片(尺寸10mm×10mm,厚度0.5mm~1.0mm)作為病毒載體進(jìn)行試驗(yàn)。使用前應(yīng)按原中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)的要求進(jìn)行脫脂處理。C.3試驗(yàn)步驟C.3.1噬菌體懸液制備噬菌體懸液的制備按照如下步驟進(jìn)行:a)將宿主菌大腸埃希氏菌接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)平板上,于(37±1)℃培養(yǎng)(24±1)h,取單菌落接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯(NB)中,在(37±1)℃,100r/min條件下振蕩(5±1)h;b)將15mL~20mL營(yíng)養(yǎng)瓊脂傾注于培養(yǎng)皿中,凝固后,制備成營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)平板;c)將5mL濃度為1.0×108CFU/mL~1.0×109CFU/mL的大腸埃希氏菌菌懸液與5mL濃度為1.0×105PFU/mL~1.0×106PFU/mL的噬菌體懸液混合(濃度按照大腸埃希氏菌:噬菌體=1000:1的比例在(37±1)℃條件下靜置10min~20min;d)在步驟c)的混合液中加入10mL營(yíng)養(yǎng)半固體瓊脂(NSA混勻后傾注于步驟b)中制備的營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)平板上,在(37±1)℃條件下,正置培養(yǎng)(24±1)h;e)將步驟d)的上層液體移至50mL離心管內(nèi),10000r/min離心10min,將上清液轉(zhuǎn)移到另一50mL離心管內(nèi),再以相同的條件離心處理,反復(fù)離心2次;f)利用孔徑0.22μm的濾膜對(duì)上清液進(jìn)行過(guò)濾,獲得試驗(yàn)用噬菌體原液。原液濃度應(yīng)為9PFU/mL~1.0×1010PFU/mL;試驗(yàn)用噬菌體懸液應(yīng)在當(dāng)日使用。C.3.2試驗(yàn)操作除病毒性能試驗(yàn)步驟如下:a)將經(jīng)滅菌的載體片平鋪于無(wú)菌平皿內(nèi),逐片滴加病毒懸液,每片滴加量為10μL。置室溫下自然陰干后再使用。b)洗碗機(jī)滿(mǎn)載的情況下,將滴染病毒的載體放置于透水的網(wǎng)狀容器,固定于洗碗機(jī)內(nèi)。在洗碗機(jī)每層的內(nèi)、外兩部位各放一個(gè)含有病毒載體的容器。c)關(guān)閉洗碗機(jī)門(mén)/蓋,按照制造商明示具有除病毒功能的程序進(jìn)行除病毒試驗(yàn)。d)程序結(jié)束后,打開(kāi)洗碗機(jī)門(mén)/蓋,取出載體容器,將載體移入含有5mLPBS的試管中,振蕩洗滌后,按照C.3.3進(jìn)行病毒滴度測(cè)定。e)陽(yáng)性對(duì)照組,將染有病毒的載體3片,放置于洗碗機(jī)外室溫下,待試驗(yàn)組運(yùn)行完畢后,立即將載體移入含有5mLPBS的試管中,振蕩洗滌后,進(jìn)行病毒滴度測(cè)定。C.3.3噬菌體滴度測(cè)定除病毒性能試驗(yàn)按照如下操作進(jìn)行:a)將回收的噬菌體懸液作為原液,使用PBS進(jìn)行10倍稀釋。取1.0mL稀釋后的噬菌體懸液與100μL的1.0×108~9.0×108CFU/mL的大腸埃希氏菌菌液混合,在(37±1)℃條件下靜置10min~20min。b)將靜置后的菌懸液與營(yíng)養(yǎng)半固體瓊脂(NSA)混合,傾注于營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)平板表面,在(37±1)℃條件下,正置培養(yǎng)(24±1)h。c)培養(yǎng)完成后,計(jì)算試驗(yàn)組和對(duì)照組的噬菌體數(shù)量,對(duì)照組回收滴度應(yīng)>1.0×105PFU/mL,否則試驗(yàn)無(wú)效。C.4計(jì)算除病毒率和病毒去除對(duì)數(shù)值按公式(C.1)和(C.2)計(jì)算:P=100%............................................................(C.1)QB/T5133—****=lg(Voi)-lg(Vi)..........................................................式中:Pvi——第i次試驗(yàn)的除病毒率;i——單次試驗(yàn)編號(hào);Uvi——第i次試驗(yàn)的除病毒對(duì)數(shù)值;oi——第i次試驗(yàn)中對(duì)照組回收的病毒滴度,單位為PFU/mL;i——第i次試驗(yàn)中試驗(yàn)組回收的病毒滴度,單位為PFU/mL。相同規(guī)格的洗碗機(jī)應(yīng)在相同條件下至少試驗(yàn)1臺(tái),每臺(tái)進(jìn)行3次試驗(yàn),每次試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)高于限值要求,每次試驗(yàn)后計(jì)算出除病毒率和除病毒對(duì)數(shù)值,取全部試驗(yàn)除病毒率和除病毒對(duì)數(shù)值的算術(shù)平均值作為試驗(yàn)結(jié)果。試驗(yàn)結(jié)果按照GB/T8170要求進(jìn)行修約并保留兩位小數(shù)。QB/T5133—****(規(guī)范性)不規(guī)則形狀抗菌材料的抗菌試驗(yàn)方法D.1試驗(yàn)菌種和儀器D.1.1試驗(yàn)菌種D.1.1.1菌種的選擇同A.1.1.1。D.1.1.2培養(yǎng)條件D.1.1.2.1菌種培養(yǎng)條件同A.1.1.2。D.1.1.2.2磷酸鹽緩沖液(PBS)磷酸鹽緩沖液(PBS)的成分應(yīng)符合表D.1的要求。表D.1磷酸鹽緩沖液(PBS)的成分將上述成分混合后加入到1000mL蒸餾水中,充分?jǐn)嚢枞芙夂?,調(diào)節(jié)溶液pH在7.2~7.4,以121℃條件下,在高壓蒸汽滅菌器內(nèi)20min后備用。D.1.1.3試驗(yàn)菌種的活化和菌液的制備10℃條件下保藏(不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月作為斜面保藏菌。將斜面保藏菌轉(zhuǎn)接到平板固體培養(yǎng)基上,在(37±1)℃條件下培養(yǎng)(24±1)h。試驗(yàn)時(shí)應(yīng)采用3代~5代、24h內(nèi)轉(zhuǎn)接的新鮮細(xì)菌培養(yǎng)物。用接種環(huán)從新鮮培養(yǎng)物上刮適量新鮮細(xì)菌,加入適量磷酸鹽緩沖液中,將菌液濃度稀釋至5.0×105~1.0×106CFU/mL作為試驗(yàn)用菌液,按照GB4789.2方法進(jìn)行菌落總數(shù)測(cè)定。D.1.2儀器試驗(yàn)用儀器及相關(guān)參數(shù)應(yīng)符合以下要求:——生化培養(yǎng)箱37±1)℃;——振蕩培養(yǎng)箱:150r/min37±1)℃;——冷藏箱:5℃~10℃;——干燥箱:0℃~300℃;——二級(jí)生物安全柜;——高壓蒸汽滅菌器;——平皿、移液槍、渦旋混勻器、接種環(huán)、酒精燈等實(shí)驗(yàn)室常用器具。D.2樣品要求及預(yù)處理D.2.1試驗(yàn)組樣品試驗(yàn)組樣品從經(jīng)抗菌處理的待檢樣品上直接剪取。將試驗(yàn)組樣品剪成(10±1)mm×(10±1)mm大小的樣塊,若樣品原本的面積不足以剪成該尺寸,則按照樣品原狀進(jìn)行試驗(yàn)。樣品用量為(1.0±0.05)g,若原狀態(tài)樣品不足或超過(guò)1.0g且不方便剪裁或重新制備,可直接使用原樣品,并按照相應(yīng)的質(zhì)量等比例調(diào)整PBS和菌懸液(VPBS:V菌懸液=19:1)的用量。QB/T5133—****式中:V0——正常條件下使用的菌懸液與PBS溶液總體積,常數(shù),取100mL;V1——實(shí)際使用的菌懸液與PBS溶液的總體積,單位為毫升(mLm0——正常條件下使用的樣品質(zhì)量,常數(shù),取1.0g;m1——實(shí)際使用的樣品質(zhì)量,單位為克(g)。D.2.2對(duì)照組樣品高密度聚乙烯(HDPE)注射成型,制成(10±1)mm×(10±1)mm大小的樣塊。質(zhì)量為(1.0±0.05)g,若試驗(yàn)樣品不足或超過(guò)1.0g且不方便剪裁或重新制備時(shí),對(duì)照組樣品的質(zhì)量應(yīng)與試驗(yàn)組樣品相同。D.2.3樣品預(yù)處理試驗(yàn)前,試驗(yàn)組樣品在121℃條件下,在高壓滅菌器內(nèi)20min,于干燥箱中干燥備用。對(duì)照樣品用75%乙醇溶液浸泡10min,然后用無(wú)菌水沖洗3次,自然晾干備用。若試驗(yàn)樣品不能耐受高溫高壓,應(yīng)選用紫外線、臭氧、75%乙醇、無(wú)菌水沖洗等方式進(jìn)行無(wú)菌預(yù)處理,選用的無(wú)菌預(yù)處理方式不應(yīng)影響試驗(yàn)結(jié)果,處理后放置于試驗(yàn)條件下自然干燥。D.3試驗(yàn)步驟D.3.1試驗(yàn)樣液的制備將對(duì)照組樣品和試驗(yàn)組樣品放入三角燒瓶中,當(dāng)樣品質(zhì)量為1.0g時(shí),加入95mL含0.1%(體積分?jǐn)?shù))的PBS,混勻后,再加入5.0mL菌懸液。當(dāng)樣品質(zhì)量不足或超過(guò)1.0g時(shí),按照D.2.1的要求進(jìn)行調(diào)整。每次對(duì)照組樣品和試驗(yàn)組樣品均設(shè)置3片,且每對(duì)試驗(yàn)組樣品和對(duì)照組樣品的質(zhì)量應(yīng)相等。D.3.2對(duì)照組初始菌液濃度的確定振蕩前,取1mL對(duì)照組樣液,經(jīng)過(guò)適當(dāng)稀釋?zhuān)x取合適的稀釋度,傾注平板37±1)℃條件下培養(yǎng)(24±1)h后計(jì)數(shù)。D.3.3振蕩培養(yǎng)將對(duì)照組和試驗(yàn)組的三角瓶置于振蕩培養(yǎng)箱中,在(37±1)℃、150r/min條件下震蕩培養(yǎng)(24±1)h。D.3.4回收對(duì)照組和試驗(yàn)組振蕩培養(yǎng)結(jié)束后,分別進(jìn)行10倍梯度稀釋?zhuān)x取合適的稀釋度,傾注平板37±1)℃條件下培養(yǎng)(24±1)h后計(jì)數(shù)。對(duì)照組樣品經(jīng)振蕩回收后的菌落數(shù)應(yīng)不低于2.5×103CFU/mL。D.4計(jì)算抗菌率按照公式(D.1)計(jì)算:R=根100%……(D.式中:R——抗菌率,以百分?jǐn)?shù)表示;A——試驗(yàn)樣品平均回收菌數(shù),單位為CFU/mL;B——對(duì)照樣品平均回收菌數(shù),單位為CFU/mL。試驗(yàn)結(jié)果按照GB/T8170要求進(jìn)行修約并保留兩位小數(shù)。QB/T5133—****(規(guī)范性)抗病毒性能試驗(yàn)方法E.1試驗(yàn)病毒和儀器E.1.1一般要求實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、試驗(yàn)操作及其他涉及生物安全的部分應(yīng)符合GB19489的要求。試驗(yàn)用病毒株應(yīng)符合世界衛(wèi)生組織(WHO)及我國(guó)衛(wèi)生健康委員會(huì)對(duì)于病原體等管理及使用相關(guān)的最新要求
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