內(nèi)蒙古烏蘭察布市集寧區(qū)第一中學(xué)2023年高二生物第一學(xué)期期末質(zhì)量檢測模擬試題含解析

內(nèi)蒙古烏蘭察布市集寧區(qū)第一中學(xué)2023年高二生物第一學(xué)期期末質(zhì)量檢測模擬試題注意事項1．考生要認(rèn)真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．關(guān)于高等動物激素的敘述，正確的是（）①由無導(dǎo)管的腺體分泌②只運輸給相應(yīng)的靶器官、靶細(xì)胞③化學(xué)成分都是蛋白質(zhì)④血液里含量極少，但對動物的生命活動起重要的調(diào)節(jié)作用A.①③ B.②③ C.③④ D.①④2．下圖表示某海域大黃魚種群的增長速率與種群數(shù)量的關(guān)系。有關(guān)分析錯誤的是（）A.要獲得最大持續(xù)捕撈量，捕撈后大黃魚種群數(shù)量應(yīng)處于b點B.用標(biāo)志重捕法調(diào)查種群密度時，若標(biāo)記個體更易被捕食，則調(diào)查值偏高C.a點時種群的年齡組成是增長型，c點時年齡結(jié)構(gòu)為衰退型D.c點時種群數(shù)量未達(dá)到K值，其增長速率與a點相同3．如圖所示為種群在理想環(huán)境中呈“J”型增長，在有環(huán)境阻力條件下，呈“S”型增長，下列關(guān)于種群在某環(huán)境中數(shù)量增長曲線的敘述，正確的是

(

)A.當(dāng)種群數(shù)量達(dá)到e點后，種群數(shù)量增長速率為0B.種群增長過程中出現(xiàn)環(huán)境阻力是在d點之后C.圖中陰影部分表示克服環(huán)境阻力生存下來的個體數(shù)量D.若該種群在c點時數(shù)量為100，則該種群的K值為4004．下列關(guān)于細(xì)胞中線粒體和葉綠體的敘述，正確的是（）A.都含有色素 B.存在于所有植物細(xì)胞中C.都與細(xì)胞的能量代謝有關(guān) D.能合成自身所需的所有蛋白質(zhì)5．如圖表示胰島B細(xì)胞在較高的血糖濃度下分泌胰島素的部分調(diào)節(jié)機制，下列有關(guān)說法錯誤的是（）A.圖中葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞的方式與K＋通過離子通道出細(xì)胞的方式相同，且都不消耗能量B.圖中ATP既可提供能量，也可作為信號分子使K＋通道關(guān)閉C.圖中K＋通道關(guān)閉，可激活Ca2＋通道打開，促進(jìn)Ca2＋進(jìn)入細(xì)胞，從而抑制胰島素的分泌D.據(jù)圖可研究出“某藥物”來抑制K＋通道活性，使胰島素分泌不足的病人的血糖濃度降低6．下列關(guān)于人體內(nèi)環(huán)境的敘述，不正確的是（）A.內(nèi)環(huán)境是細(xì)胞直接生活的液體環(huán)境B.淋巴細(xì)胞生活的液體環(huán)境是淋巴液、血漿等C.H2CO3、NaHCO3等參與維持血漿pH相對穩(wěn)定D.血漿的主要成分包括水、葡萄糖、血紅蛋白和激素等7．在淺海中，牡蠣與魚類、微生物等所有生物生活在一起。這些生物構(gòu)成了A.群落 B.種群 C.生態(tài)系統(tǒng) D.生物圈8．（10分）唾液是由唾液腺分泌的無色無味近于中性（pH6．6-7．1）液體。下列說法正確的是（）A.唾液屬于體液中的細(xì)胞外液，其pH與血漿有一定差別B.在正常情況下，唾液不會傳播艾滋病毒但可能傳播新冠病毒C.唾液中的唾液淀粉酶可以把淀粉水解成葡萄糖，因此饅頭咀嚼后會產(chǎn)生甜味D.唾液中含有溶菌酶，可以分解細(xì)菌細(xì)胞壁中的纖維素，屬于人體的非特異性免疫二、非選擇題9．（10分）達(dá)爾文在南美洲加拉帕戈斯群島的不同島嶼上發(fā)現(xiàn)分別生活著15種陸龜類，它們的形態(tài)各異，食性和棲息場所也各不相同。但是，經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)它們都保留著南美洲西海岸大陸龜類的痕跡，是由大陸龜進(jìn)化而來的。請用現(xiàn)代生物進(jìn)化理論分析說明大陸龜?shù)倪M(jìn)化過程及原因：(1)生物進(jìn)化的基本單位是______________________，在大陸龜?shù)暮蟠芯哂卸喾N可遺傳的變異，為大陸龜進(jìn)化提供了________________________。(2)剛開始進(jìn)化時不同島嶼之間的龜類因為有________________________________隔離而不能進(jìn)行基因交流。(3)不同島嶼上的地理環(huán)境條件不同，使得不同島嶼上的龜?shù)男螒B(tài)結(jié)構(gòu)向不同方向發(fā)生改變，當(dāng)這種改變達(dá)到一定程度就會產(chǎn)生____________________________，導(dǎo)致眾多新物種的形成。(4)若某龜種群中基因型AA、Aa、aa的個體分別占30%、60%、10%。若該種群中aa個體不適應(yīng)新環(huán)境遭到淘汰，其他基因型個體連續(xù)隨機交配一代，沒有自然選擇，則該種群性狀分離比是________________________，其后代中雜合子占的比例為________________________，該種群是否進(jìn)化？______________________。10．（14分）2020年兩位女科學(xué)家埃瑪紐埃爾·卡彭蒂娜和詹妮弗·杜德娜因發(fā)現(xiàn)“CRISPR/Cas9基因剪刀”而獲得2020年諾貝爾化學(xué)獎。CRISPR/Cas9系統(tǒng)可對基因組進(jìn)行定點編輯，其工作原理如圖1所示。該系統(tǒng)主要包含單鏈向?qū)NA和Cas9蛋白兩個部分，能特異性識別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9蛋白到相應(yīng)位置并剪切DNA，最終實現(xiàn)對靶基因序列的編輯。請回答下列問題：（1）圖1為CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖，該系統(tǒng)能精準(zhǔn)識別相關(guān)基因的原理是sgRNA與目標(biāo)DNA發(fā)生______，Cas9蛋白可催化_____(化學(xué)鍵名稱)水解，剪切特定DNA片段。（2）LMNA基因編碼的核纖層蛋白與維持細(xì)胞核正常形態(tài)有關(guān)。科研人員利用CRISPR/Cas9技術(shù)對體外培養(yǎng)的HepG2(人源肺癌細(xì)胞)細(xì)胞株進(jìn)行基因編輯，獲得了LMNA基因敲除的穩(wěn)定細(xì)胞系。①HepG2細(xì)胞中沒有編碼Cas9的基因，需將Cas9基因及sgRNA基因拼接形成拼接基因并與質(zhì)粒結(jié)合導(dǎo)入HepG2細(xì)胞，sgRNA的合成需要______催化。②用下圖2中的質(zhì)粒以及含Cas9-sgRNA拼接基因的DNA片段構(gòu)建表達(dá)載體時，應(yīng)選用_______進(jìn)行酶切。將構(gòu)建好的表達(dá)載體與用______處理的細(xì)菌置于適宜反應(yīng)體系中培養(yǎng)。然后將培養(yǎng)的細(xì)菌涂布于含______的平板培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)，24h后挑取菌落，提取質(zhì)粒作為模板，選擇圖3中引物組合________和______，通過PCR和電泳技術(shù)鑒定是否重組成功。③用鑒定成功的工程菌對HepG2細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，培養(yǎng)三天后收集HepG2細(xì)胞，提取基因組，對其______序列進(jìn)行檢測，判斷Cas9-sgRNA拼接基因是否導(dǎo)入成功。若從細(xì)胞水平進(jìn)行檢測，可以檢測HepG2細(xì)胞數(shù)目增長量或______。（3）華人科學(xué)家張鋒是首個將CRISPR基因編輯技術(shù)應(yīng)用于哺乳動物和人類細(xì)胞的科學(xué)家，為此項技術(shù)廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域做出了不可磨滅的貢獻(xiàn)。但是更多的學(xué)者提出了CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時存在編輯對象出錯而造成“脫靶”，實驗發(fā)現(xiàn)sgRNA的序列長短影響成功率，越短脫靶率越______，脫靶最可能的原因是______。11．（14分）下圖為真核生物DNA的結(jié)構(gòu)（圖甲），請據(jù)圖回答下列問題：（1）圖甲為DNA的結(jié)構(gòu)示意圖，其基本骨架由__________和__________（填序號）交替排列構(gòu)成，④為________________________。（2）若用1個32P標(biāo)記的噬菌體侵染未標(biāo)記的大腸桿菌，釋放出300個子代噬菌體，其中含有32P的噬菌體所占的比例是___________。（3）若圖甲中親代DNA分子在復(fù)制時，一條鏈上的G變成了A，則該DNA分子經(jīng)過n次復(fù)制后，發(fā)生差錯的DNA分子占DNA分子總數(shù)的___________。12．圖1表示人體內(nèi)某些淋巴細(xì)胞的分化過程，X表示抗原，數(shù)字表示免疫過程，m、n代表相關(guān)免疫器官，其余字母表示細(xì)胞或物質(zhì)。圖2表示將抗原注射到兔體內(nèi)后抗體產(chǎn)生量的變化。請分析回答下列問題。（1）在圖1中，n表示的場所是________，屬于免疫活性物質(zhì)的有_________。（填字母）（2）在圖1中，②和③表示受抗原刺激a、c細(xì)胞后進(jìn)行的一系列的增殖分化過程，形成e、d、k細(xì)胞功能不同的根本原因是_____________。（3）在圖2中，當(dāng)注入抗原X，抗體產(chǎn)生量的變化是曲線A。若在第8天同時注射抗原Y和X，其中表示抗原X刺激機體產(chǎn)生的抗體數(shù)量的曲線是________。判定的依據(jù)是在第8天注射抗原X時刺激了圖1中_______（填字母）迅速增殖分化，快速產(chǎn)生大量________（填字母）。（4）為驗證T細(xì)胞是細(xì)胞免疫過程中的細(xì)胞，通過是否切除圖1中__________（填字母）器官來控制自變量，通過器官移植觀察有無___________來斷定細(xì)胞免疫是否發(fā)生作用。如果實驗分為對照組和實驗組，理論上器官移植在__________組動物體內(nèi)能完好保存，當(dāng)我們再次輸入__________后結(jié)果就與對照組一樣了。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】內(nèi)分泌腺是沒有分泌管的腺體．它們所分泌的物質(zhì)（稱為激素）直接進(jìn)入周圍的血管和淋巴管中，由血液和淋巴液將激素輸送到全身。人體的內(nèi)分泌腺有垂體、甲狀腺、胰島、腎上腺、甲狀旁腺、胸腺和性腺等。激素作用特點：微量高效、通過體液運輸、作用于靶器官、靶細(xì)胞?！驹斀狻竣俑叩葎游锛に赜蔁o導(dǎo)管的腺體分泌，①正確；②高等動物激素經(jīng)分泌后直接彌散進(jìn)入體液，不能定向運輸至靶細(xì)胞或靶器官，②錯誤；③高等動物的有些激素的化學(xué)本質(zhì)是脂質(zhì)或氨基酸衍生物，如性激素和甲狀腺激素，③錯誤；④激素含量很少，但對動物生命活動起重要的調(diào)節(jié)作用，④正確；綜上所述，①④正確。故選D。2、C【解析】據(jù)圖分析：a-b段種群增長速率增加，b-c種群增長速率減少，可知大黃魚種群以S型曲線增長，且b點對應(yīng)于種群的K/2?！驹斀狻緼、要獲得最大持續(xù)捕撈量，應(yīng)使種群的增長速率維持在最大，故捕撈后大黃魚種群數(shù)量應(yīng)處于b點，A正確；B、標(biāo)志重捕法的計算公式：種群中個體數(shù)÷第一次捕獲數(shù)=第二次重捕總數(shù)÷第二次重捕中被標(biāo)志的個體數(shù)，可得種群數(shù)量=第一次捕獲的個數(shù)×第二次捕獲的個體數(shù)÷第二次捕獲中被標(biāo)記的個體數(shù)，若標(biāo)記個體更易于被捕食，則第二次捕獲中被標(biāo)志的個體數(shù)減小，故種群密度的估計值會偏高，B正確；C、只要是種群增長速率大于0，種群數(shù)量就在增加，故a點、c點時，種群數(shù)量都是增長的，年齡組成均為增長型，C錯誤；D、K值時，出生率和死亡率相等，種群增長速率為0，c點時種群數(shù)量未達(dá)到K值，看圖可知，c點增長速率與a點相同，D正確。故選C。3、A【解析】試題分析：當(dāng)種群數(shù)量達(dá)到e點后，即達(dá)到K值，這時出生率=死亡率，種群數(shù)量增長速率為0，故A正確。種群一開始增長就有環(huán)境阻力，故B錯。圖中陰影部分表示被環(huán)境淘汰的個體數(shù)量，故C錯。若該種群在c點時數(shù)量為100，因為c點時種群數(shù)量為K/2，則該種群的K值為200，故D錯?？键c：本題考查種群數(shù)量增長曲線相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系能力。4、C【解析】線粒體和葉綠體是細(xì)胞中的能量轉(zhuǎn)換器，線粒體是廣泛存在于動物細(xì)胞和植物細(xì)胞中的細(xì)胞器，是細(xì)胞呼吸產(chǎn)生能量的主要場所，為細(xì)胞的生命活動提供能量，具有“動力工廠”之稱；葉綠體是綠色植物細(xì)胞中廣泛存在的一種含有葉綠素等色素的質(zhì)體，是植物細(xì)胞進(jìn)行光合作用的場所，并不是所有植物細(xì)胞中都有葉綠體，只有綠色部分，例如葉和幼莖中等含有葉綠體。【詳解】A、葉綠體是植物的光合作用的場所，含有葉綠素等色素的質(zhì)體，線粒體不含色素，A錯誤；B、線粒體是廣泛存在于動物細(xì)胞和植物細(xì)胞中的細(xì)胞器，并不是所有植物細(xì)胞中都有葉綠體，只有綠色部分，例如葉和幼莖中等含有葉綠體，B錯誤；C、線粒體是呼吸作用的主要場所，分解有機物，釋放能量；葉綠體是植物的光合作用的場所，合成有機物，儲存能量，二者都為細(xì)胞的生命活動提供能量，都與細(xì)胞的能量代謝有關(guān)，C正確；D、線粒體和葉綠體都含有少量的DNA，是半自主性細(xì)胞器，能合成自身所需的少量蛋白質(zhì)，大部分蛋白質(zhì)的合成受細(xì)胞核中基因的控制，D錯誤。故選C。5、C【解析】1、與血糖調(diào)節(jié)相關(guān)的激素主要是胰島素和胰高血糖素，其中胰島素的作用是機體內(nèi)唯一降低血糖的激素，胰島素能促進(jìn)全身組織細(xì)胞加速攝取、利用和儲存葡萄糖，從而降低血糖濃度；胰高血糖素能促進(jìn)糖原分解，并促進(jìn)一些非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖，從而使血糖水平升高。2、分析題圖：葡萄糖通過載體蛋白進(jìn)入胰島B細(xì)胞，并代謝產(chǎn)生ATP，當(dāng)ATP升高時，ATP敏感的K+通道關(guān)閉，引起去極化，導(dǎo)致鈣離子通道打開，鈣離子內(nèi)流，促進(jìn)胰島素的分泌。【詳解】A、圖中葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞的方式與K＋通過離子通道出細(xì)胞的方式都是順濃度梯度運輸?shù)?，屬于被動運輸，都不消耗能量，A正確；B、如圖所示，胰島B細(xì)胞內(nèi)ATP升高時，ATP敏感的K+通道關(guān)閉，所以ATP既可提供能量，也可作為信號分子使K＋通道關(guān)閉，B正確；C、圖中K＋通道關(guān)閉，可激活Ca2＋通道打開，促進(jìn)Ca2＋進(jìn)入細(xì)胞，從而促進(jìn)胰島素分泌，C錯誤；D、據(jù)圖分析，若某藥物可以可以關(guān)閉K+通道，則會導(dǎo)致鈣離子通道打開，鈣離子內(nèi)流，促進(jìn)胰島素的分泌，使胰島素分泌不足的病人的血糖濃度降低，D正確。故選C。6、D【解析】內(nèi)環(huán)境的成分包括小分子的營養(yǎng)物質(zhì)、代謝廢物和調(diào)節(jié)類物質(zhì)等，細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)不屬于內(nèi)環(huán)境的成分，如血紅蛋白、呼吸酶等。穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)機制是靠神經(jīng)-體液-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，pH的調(diào)節(jié)是靠緩沖物質(zhì)?！驹斀狻緼、內(nèi)環(huán)境是細(xì)胞直接生活的液體環(huán)境，A正確；B、淋巴細(xì)胞生活在淋巴管或血漿中，故其生活的液體環(huán)境是淋巴、血漿等，B正確；C、血漿的pH在7.35～7.45之間波動，血漿pH之所以能維持相對穩(wěn)定，是由于血漿中存在成對的緩沖物質(zhì)，如H2CO3/HCO3一、H2PO4-/HPO42-等，C正確；D、血漿的主要成分包括水、葡萄糖、血漿蛋白、激素等，血紅蛋白屬于胞內(nèi)物質(zhì)，不是內(nèi)環(huán)境成分，D錯誤。故選D。7、A【解析】生命系統(tǒng)結(jié)構(gòu)層次：細(xì)胞→組織→器官→系統(tǒng)→個體→種群→群落→生態(tài)系統(tǒng)→生物圈．其中細(xì)胞是最基本的生命系統(tǒng)結(jié)構(gòu)層次，生物圈是最大的結(jié)構(gòu)層次。①細(xì)胞：細(xì)胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。②組織：由形態(tài)相似、結(jié)構(gòu)和功能相同的一群細(xì)胞和細(xì)胞間質(zhì)聯(lián)合在一起構(gòu)成。③器官：不同的組織按照一定的次序結(jié)合在一起④系統(tǒng)：能夠共同完成一種或幾種生理功能的多個器官按照一定的次序組合在一起。⑤個體：由不同的器官或系統(tǒng)協(xié)調(diào)配合共同完成復(fù)雜的生命活動的生物。⑥種群：在一定的自然區(qū)域內(nèi)，同種生物的所有個體是一個種群。⑦群落：在一定的自然區(qū)域內(nèi)，所有的種群組成一個群落。⑧生態(tài)系統(tǒng)：生物群落與他的無機環(huán)境相互形成的統(tǒng)一整體。⑨生物圈：由地球上所有的生物和這些生物生活的無機環(huán)境共同組成。【詳解】在淺海中，牡蠣與魚類、微生物等所有生物生活在一起。這些生物構(gòu)成了構(gòu)成了群落，符合群落的定義，一定的區(qū)域全部生物。故選A。【點睛】本題知識點簡單，考查生命系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)層次，只有考生識記相關(guān)知識點即可正確答題，屬于考綱識記層次的考查．此類試題，需要考生掌握牢固的基礎(chǔ)知識。8、B【解析】內(nèi)環(huán)境又叫細(xì)胞外液，由血漿、組織液和淋巴組成．內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)是指正常機體通過調(diào)節(jié)作用，使各個器官，系統(tǒng)協(xié)調(diào)活動，共同維持內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定狀態(tài)．內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)是機體進(jìn)行生命活動的必要條件?！驹斀狻緼、細(xì)胞外液又叫內(nèi)環(huán)境，唾液不屬于細(xì)胞外液，A錯誤；B、艾滋病的傳播途徑主要是母嬰、性接觸和血液傳播，一般不會通過唾液傳播，但新冠病毒可能通過飛沫（唾液）等傳播，B正確；C、在口腔中，唾液中含有淀粉酶，可以將淀粉分解成麥芽糖，因此饅頭咀嚼后會產(chǎn)生甜味，C錯誤；D、肽聚糖是細(xì)菌細(xì)胞壁的重要成分，唾液中含有溶菌酶，能特異性分解肽聚糖，因此唾液能通過溶菌酶的殺菌作用抑制細(xì)菌的生長。這種溶菌酶的存在，體現(xiàn)了人體的非特異性免疫，D錯誤。故選B。二、非選擇題9、①.種群②.原始材料③.地理④.生殖隔離⑤.8：1⑥.4/9⑦.發(fā)生進(jìn)化【解析】（1）現(xiàn)代生物進(jìn)化理論是以種群為基本單位的，可遺傳的變異為進(jìn)化提供原材料。（2）不同島嶼之間的龜類因為有河流的阻礙，屬于地理隔離而不能進(jìn)行基因交流。（3）產(chǎn)生新物種的標(biāo)志是生殖隔離的產(chǎn)生，長期的地理隔離會形成生殖隔離，導(dǎo)致新物種的形成。（4）aa個體被淘汰掉，AA占3/9，Aa占6/9，隨機交配時產(chǎn)生的配子A占2/3，a占1/3，后代中隱性個體占1/3×1/3=1/9，其余為顯性個體，故性狀分離比是顯性：隱性=8:1。雜合子Aa占2/3×1/2×2=4/9。因為生物進(jìn)化的實質(zhì)是種群的基因頻率是否發(fā)生改變。該種群之前A的基因頻率是30%+60%/2=60%,a為40%，在隨機交配一代后A占2/3即66.7%，種群的基因頻率發(fā)生了改變，該種群發(fā)生了進(jìn)化。10、①.堿基互補配對②.磷酸二酯鍵③.RNA聚合酶④.EcoRI⑤.Ca2+（CaCl2）⑥.嘌呤霉素⑦.Ⅱ⑧.Ⅲ（兩空位置可調(diào)換）⑨.堿基(或核苷酸)⑩.細(xì)胞核形態(tài)?.高?.sgRNA（向?qū)NA）越短越容易與DNA其他部位錯誤結(jié)合而脫靶【解析】1.基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)耸荏w細(xì)胞，④目的基因的檢測與鑒定。

基因工程的三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體。

標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來?！驹斀狻浚?）圖1為CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖，該系統(tǒng)能精準(zhǔn)識別相關(guān)基因的原理根據(jù)堿基互補配對原則實現(xiàn)的，即為sgRNA與目標(biāo)DNA發(fā)生堿基互補配對，同時Cas9蛋白可催化磷酸二酯鍵的水解，從而在特定的部位剪切特定DNA片段。（2）科研人員利用CRISPR/Cas9技術(shù)對體外培養(yǎng)的HepG2(人源肺癌細(xì)胞)細(xì)胞株進(jìn)行基因編輯，獲得了LMNA基因敲除的穩(wěn)定細(xì)胞系。①HepG2細(xì)胞中沒有編碼Cas9的基因，需將Cas9基因及sgRNA基因拼接形成拼接基因并與質(zhì)粒結(jié)合導(dǎo)入HepG2細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞中的RNA均來自轉(zhuǎn)錄過程推測sgRNA的合成需要RNA聚合酶的催化。②用下圖2中的質(zhì)粒以及含Cas9-sgRNA拼接基因的DNA片段構(gòu)建表達(dá)載體時，應(yīng)選用EcoRI進(jìn)行酶切，因為在質(zhì)粒和目的基因的兩端均含有該酶的切割位點，而BamHⅠ的酶切位點正好在標(biāo)記基因內(nèi)，因此該酶不能選擇。將構(gòu)建好的表達(dá)載體與用Ca2+（CaCl2）處理的細(xì)菌（增加細(xì)菌的通透性）置于適宜反應(yīng)體系中培養(yǎng)。然后將培養(yǎng)的細(xì)菌涂布于含嘌呤霉素的平板培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，凡是能正常生長的菌落即為帶有目的基因的細(xì)菌，37℃培養(yǎng)，24h后挑取菌落，提取質(zhì)粒作為模板，根據(jù)圖中目的基因兩側(cè)的堿基序列以及引物的堿基順序，結(jié)合堿基互補配對原則可選擇圖3中引物組合Ⅱ和Ⅲ進(jìn)行體外DNA復(fù)制，通過PCR和電泳技術(shù)鑒定是否重組成功。③用鑒定成功的工程菌對HepG2細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，培養(yǎng)三天后收集HepG2細(xì)胞，提取基因組，對其堿基(或核苷酸)序列進(jìn)行檢測，判斷Cas9-sgRNA拼接基因是否導(dǎo)入成功。若從細(xì)胞水平進(jìn)行檢測，可以檢測HepG2細(xì)胞數(shù)目增長量或細(xì)胞核形態(tài)是否變化來檢測。（3）但是更多的學(xué)者提出了CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時存在編輯對象出錯而造成“脫靶”由于其他DNA序列也含有與向?qū)NA互補配對的序列，造成向?qū)NA錯誤結(jié)合而脫靶，故RNA的序列越短脫靶率越高【點睛】熟知基因工程的原理及其應(yīng)用是解答本題的關(guān)鍵，能根據(jù)題目中的關(guān)鍵信息進(jìn)行合理的分析并能正確作答是解答本題的另一關(guān)鍵，基因表達(dá)載體的構(gòu)建是解答本題的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。11、(1).①(2).②(3).胞嘧啶脫氧核苷酸(4).(