新藥肝毒性和致癌性動物試驗中常檢測的酶指標-酶反應速度的影響因素

競爭性抑制是什么某些抑制劑的化學結構與底物相似，能與底物競爭性與酶活性中心結合。當抑制劑與活性中心結合后，底物就不能與活性中心結合，其結果是酶促反應被抑制了。為什么？

+IEIESP+EE+S特點：競爭性抑制劑的結構與底物結構十分相似，二者競爭酶的結合部位。Vmax不變，Km增大可以通過增大底物濃度，即提高底物的競爭能力來消除。抑制程度取決于I和S的濃度以及與酶結合的親和力大小知識點三:影響酶促反應速率的因素應用:

實例：磺胺藥物的藥理H2N--SO2NH2對氨基苯磺酰胺H2N--COOH對氨基苯甲酸對氨基苯甲酸谷氨酸蝶呤葉酸知識點三：酶促反應速度的影響因素酶促反應速度受到各種外界因素的影響。知識點三：影響酶促反應速率的因素一、底物濃度對酶促反應速度的影響是正比關系嗎？知識點三：影響酶促反應速率的因素1、V-S曲線：在酶濃度一定的前提下底物濃度時,反應速度與底物濃度成正比，為一級反應。底物濃度增大與速度的增加不成正比,為混合級反應.當底物濃度達到一定值，幾乎所有的酶都與底物結合后，反應速度達到最大值（Vmax），此時再增加底物濃度，反應速度不再增加，表現為零級反應。知識點三：影響酶促反應速率的因素2、米氏方程Km—

米氏常數Vmax—

最大反應速度知識點三影響酶促反應速率的因素3、米氏常數是反應速度達到最大反應速度一半時的底物濃度。米氏常數的單位為mol/L。Km值是在固定的底物，一定的溫度和pH條件下，一定的緩沖體系中測定的，不同條件下具有不同的Km值。Km值表示酶與底物之間的親和程度：Km值大表示親和程度小，酶的催化活性低;Km值小表示親和程度大,酶的催化活性高。知識點三:影響酶促反應速率的因素二、酶濃度對酶促反應速度的影響在其他條件固定不變，當底物濃度遠遠超過酶濃度即底物濃度飽和時，反應速度與酶濃度成正比。知識點三:影響酶促反應速率的因素三、溫度的影響1、高溫不同影響：開始溫度升高，反應速度加快；但溫度太高，酶蛋白變性,反應速度減慢甚至停止。2、低溫影響：溫度降低，酶活性降低；溫度過低,酶無活性但不變性。3、大多數酶都有一個最適溫度。在最適溫度下,反應速度最大。如很多來自動物體的酶最適溫度是體溫即37攝氏度左右。知識點三:影響酶促反應速率的因素故符合鐘型曲線。知識點三:影響酶促反應速率的因素四、pH的影響由于環(huán)境過酸、過堿使酶變性失活、影響酶活性基團的解離、影響底物的解離。只有在一定的pH下,酶具有最大的催化活性,通常稱該pH為最適pH。故pH對反應速度的影響符合鐘型曲線。知識點三:影響酶促反應速率的因素動物體內的酶最適溫度在35到40攝氏度之間，植物體內的酶最適溫度在40-50攝氏度之間；細菌和真菌體內的酶最適溫度差別較大，有得酶最適溫度可高達70攝氏度。動物體內的酶最適PH大多在6.5-8.0之間，但也有例外，如胃蛋白酶的最適PH為1.5，植物體內的酶最適PH大多在4.5-6.5之間。知識點三:影響酶促反應速率的因素五、激活劑對酶作用的影響：凡能使酶原轉變成酶或能提高酶活性的物質都是酶的激活劑。如維生素C、EDTA等。金屬離子：K+、Na+、Mg2+、Cu2+、Mn2+、Zn2+、Se3+Co2+、Fe2+陰離子：

Cl-、Br有機分子還原劑：抗壞血酸、半胱氨酸、谷胱甘肽金屬螯合劑：EDTA-

知識點三:影響酶促反應速率的因素這些離子可與酶分子上的氨基酸側鏈基團結合，可能是酶活性部位的組成成分，也可作為輔酶或輔基的一個組成部分起作用。應用：如為什么。說好廚一把鹽鎂離子（Mg2+）能激活磷酸酯酶，氯離子（Cl-）能激活α-淀粉酶等。鎂離子、氯離子即為磷酸酯酶的激活劑。知識點三影響酶促反應速率的因素六、抑制劑對酶活性的影響1、基本概念酶的抑制作用：使酶的活性降低或喪失的現象。抑制劑：能夠引起酶的抑制作用但不引起酶變性的物質。

2、酶的抑制劑通常具備兩個特點：能與酶以非共價或共價的方式形成比較穩(wěn)定結合物。在化學結構上與被抑制的底物分子或底物過渡態(tài)相似。知識點三:影響酶促反應速率的因素3、分類：可逆抑制和不可逆抑制可逆抑制抑制劑與酶蛋白以非共價鍵結合，引起酶活性暫時性喪失，可以通過物理透析、超濾等方法除去抑制劑而部分或全部恢復酶的活性。根椐抑制劑與酶結合的情況，又可分為三類：1）竟爭性抑制：知識點三:影響酶促反應速率的因素是什么：某些抑制劑的化學結構與底物相似，能與底物竟爭性與酶活性中心結合。當抑制劑與活性中心結合后，底物就不能與活性中心結合，其結果是酶促反應被抑制了。知識點三:影響酶促反應速率的因素為什么？

+IEIESP+EE+S知識點三:影響酶促反應速率的因素特點：競爭性抑制劑的結構與底物結構十分相似，二者競爭酶的結合部位。Vmax不變，Km增大可以通過增大底物濃度，即提高底物的競爭能力來消除。抑制程度取決于I和S的濃度以及與酶結合的親和力大小知識點三:影響酶促反應速率的因素應用:

實例：磺胺藥物的藥理H2N--SO2NH2對氨基苯磺酰胺H2N--COOH對氨基苯甲酸對氨基苯甲酸谷氨酸蝶呤葉酸知識點三:影響酶促反應速率的因素2）非競爭性抑制是什么：抑制劑與底物結構相似，酶可同時與底物及抑制劑結合，引起酶分子構象變化，并導至酶活性下降。抑制劑與活性中心以外的基團結合，不與底物競爭酶的活性中心，所以稱為非競爭性抑制劑。。非非知識點三:影響酶促反應速率的因素實例：某些金屬離子（Cu2+、Ag+、Hg2+）以及EDTA等，能與酶分子的調控部位中的-SH基團作用，改變酶的空間構象，引起非競爭性抑制.重金屬中毒知識點三:影響酶促反應速率的因素特點：抑制劑與底物結構不相似，抑制劑與酶活性中心外的基團結合。Vm下降，Km不變非竟爭性抑制不能通過增大底物濃度的方法來消除。知識點三:影響酶促反應速率的因素3）反競爭性抑制作用酶只有在與底物結合后，才能與抑制劑結合，引起酶活性下降。知識點三:影響酶促反應速率的因素不可逆抑制抑制劑與酶的必需基團以共價鍵結合，引起酶活力喪失，不能用透析、超濾等物理方法除去抑制劑而使酶復活。按抑制劑對酶必需基團選擇程度不同，又分非專一性和專一性抑制兩類。

不可逆抑制

1)非專一性不可逆性抑制作用抑制劑與酶的一類或幾類基團結合．抑制劑并不區(qū)分其結合的基團屬必需基團或非必需基團。如重金屬離子Pb2+、Cu2+、等與酶分子必需基團巰基結合是造成酶活性抑制的主要原因。有機汞、砷化合物（路易斯毒氣）與巰基結合。對氯汞苯甲酸與酶分子的巰基進行不可逆結合，化學毒劑“路易士氣”則是一種含砷的化合物，它能抑制含巰基酶的活性.不可逆抑制用于某些重金屬（如鉍；銻；鎘等）的中毒。2，3-二巰基丙醇與路易斯氣反應，生成穩(wěn)定；不溶而無毒的砷化合物。因此被稱為英國抗路易斯氣劑。與二巰基丙醇解毒作用相似的品種是二巰基丁二酸鈉（C4H4Na2O4S2）。這是我國創(chuàng)制的新解毒藥，解毒效力比二巰基丙醇強，且毒性較小。二巰基丙醇對鼠皮下注射LD50為86.7毫克/公斤知識點三:影響酶促反應速率的因素2)專一性不可逆性抑制作用抑制劑專一性作用于酶活性中心的必需基團并導致酶活性的抑制。如二異丙基氟磷酸（diisopropylphosphofluoride,DIFP）專一性地共價結合于膽堿酯酶活性中心的絲氨酸殘基的羥基，造成酶活性的抑制