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任務(wù)4.2等電點(diǎn)沉淀法分離RNA學(xué)習(xí)目標(biāo)了解兩性離子與等電點(diǎn)的相關(guān)知識(shí);能夠進(jìn)行等電點(diǎn)沉淀法操作。重難點(diǎn)重點(diǎn):了解等電點(diǎn)沉淀法的原理;難點(diǎn):了解鹽析沉淀的原理,掌握鹽析常用中性鹽的選擇。兩性離子與等電點(diǎn)1等電點(diǎn)沉淀法的原理2目錄等電點(diǎn)沉淀法操作3一.兩性離子與等電點(diǎn)1.兩性離子一.兩性離子與等電點(diǎn)2.等電點(diǎn)一.兩性離子與等電點(diǎn)2.等電點(diǎn)二.等電點(diǎn)沉淀法的原理等電點(diǎn)沉淀法是利用蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)溶解度最低而各種蛋白質(zhì)又具有不同等電點(diǎn)的特點(diǎn)進(jìn)行分離的方法。二.等電點(diǎn)沉淀法的原理在等電點(diǎn)時(shí),蛋白質(zhì)分子以兩性離子形式存在,其分子凈電荷為零(即正負(fù)電荷相等),此時(shí)蛋白質(zhì)分子顆粒在溶液中因沒(méi)有相同電荷的相互排斥,分子相互之間的作用力減弱,其顆粒極易碰撞、凝聚而產(chǎn)生沉淀,所以蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí),其溶解度最小,最易形成沉淀物。等電點(diǎn)時(shí)的許多物理性質(zhì)如黏度、膨脹性、滲透壓等都變小,從而有利于懸浮液的過(guò)濾。二.等電點(diǎn)沉淀法的原理不同的蛋白質(zhì),具有不同的等電點(diǎn)同一種蛋白質(zhì)在不同條件下,等電點(diǎn)不同目的藥物成分對(duì)pH值的要求采用幾種方法結(jié)合來(lái)實(shí)現(xiàn)沉淀分離三.等電點(diǎn)沉淀法操作1.等電點(diǎn)沉淀
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