馬鈴薯脫毒苗大規(guī)模生產(chǎn)繼代擴(kuò)繁的ms培養(yǎng)基改良試驗(yàn)

馬鈴薯脫毒苗大規(guī)模生產(chǎn)繼代擴(kuò)繁的ms培養(yǎng)基改良試驗(yàn)

甘薯健康生產(chǎn)體系的中心或主要基本環(huán)節(jié)是甘薯原種的生產(chǎn)。試管苗的后代是決定該環(huán)境變化的重要因素。MS培養(yǎng)基因成分含量較高,適宜很多品種,因此是國內(nèi)大多數(shù)研究和生產(chǎn)單位的常用培養(yǎng)基。近年來很多研究單位都在為降低馬鈴薯脫毒苗培養(yǎng)成本,以自來水代替無離子水,用白糖代替試劑純的蔗糖,試管苗生長無顯著影響;基本培養(yǎng)基減去部分大量元素,減去或部分減去微量元素及有機(jī)成分培養(yǎng)試管苗;用液體培養(yǎng)替代固體等培養(yǎng)支持物的改進(jìn);此外一些學(xué)者還對培養(yǎng)基添加外源激素進(jìn)行了研究。為保證貴州省薯類脫毒種苗快繁中心短期獲得大量健壯的試管苗,并兼顧降低培養(yǎng)成本,本試驗(yàn)通過適當(dāng)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分、添加適量生長調(diào)節(jié)劑等試驗(yàn),以期篩選出適宜不同馬鈴薯脫毒試管苗規(guī)?；a(chǎn)要求的快繁培養(yǎng)基。1材料和方法1.1材料表面由貴州省薯類脫毒種苗快繁中心提供早熟品種費(fèi)烏瑞它和中薯3號的脫毒試管苗。1.2苗床建立及調(diào)查各培養(yǎng)基均以3%白糖和自來水為基礎(chǔ),以MS+7g/L瓊脂固體培養(yǎng)基為對照,設(shè)置了8處理。分別選擇費(fèi)烏瑞它和中薯3號較為一致的脫毒試管苗同天進(jìn)行轉(zhuǎn)接,在本中心組培室進(jìn)行培養(yǎng)(光照強(qiáng)度2000lx以上,16h/d,溫度20～25℃),15天后從每個處理中隨機(jī)抽取10瓶進(jìn)行調(diào)查,采用DPS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,并對各處理繼續(xù)擴(kuò)繁和栽插進(jìn)行跟蹤。2結(jié)果與分析2.1卡拉膠或膠凝膠對試苗各生物性狀的影響由表1可以看出,培養(yǎng)基中加入卡拉膠或瓊脂作固體基質(zhì),對2品種試管苗無顯著差異。對于品種費(fèi)烏瑞它,在加NPK含量使用卡拉膠或瓊脂,試管苗的各生物性狀均無顯著差異,且用卡拉膠的試管苗根數(shù)和株高平均略高于瓊脂;對于品種中薯3號,在加NPK含量使用卡拉膠或瓊脂,試管苗的各生物性狀也無顯著差異,且用卡拉膠的試管苗株高略高于瓊脂。此外,在大量試管苗大規(guī)模繼代擴(kuò)繁生產(chǎn)中,使用卡拉膠或瓊脂試管當(dāng)代苗情、繼代繁殖以及在大棚栽插繁殖原原種中也無顯著差異。2.2培養(yǎng)植物生物性狀的指標(biāo)添加1.25倍NPK的MS固體培養(yǎng)基,2品種試管苗均較對照有一定差異。對于品種費(fèi)烏瑞它,增加NPK含量固體培養(yǎng)基(加卡拉膠或瓊脂),其試管苗各生物性狀較對照均有顯著差異;株高較對照平均低0.08～0.17cm,而較對照平均莖粗約增加0.02cm,根長增加0.1cm以上,最大葉長增加0.1cm,最大葉寬增加0.05～0.06cm,其中A、B處理較對照最大葉長、根長、莖粗差異達(dá)顯著水平,B處理較對照葉片數(shù)也存在顯著差異;從苗長勢看,增大NPK元素的苗長勢旺盛,繼代繁殖以及在大棚栽插繁殖原原種表現(xiàn)也較好。因此,費(fèi)烏瑞它品種較適應(yīng)較高NPK濃度的培養(yǎng)基。對于中薯3號,增添NPK的卡拉膠或瓊脂固體培養(yǎng)基的試管苗較對照略差。較對照各生物性狀平均值均略差,其中莖粗、葉片數(shù)差異達(dá)顯著水平。可見中薯3號較適應(yīng)MS培養(yǎng)基的NPK濃度。2.3添加naa、ca從表1看,添加0.5mg/LNAA的培養(yǎng)基對2品種試管苗均有一定的影響。對于費(fèi)烏瑞它,添加0.5mg/LNAA的試管苗各指標(biāo)除莖粗外均高于對照,其中株高、根數(shù)、根長均較對照有顯著差異;從苗長勢看,添加NAA的試管苗前期出根早,根系發(fā)育快,苗高,但苗稍纖細(xì),繼代繁殖以及在大棚栽插繁殖原原種表現(xiàn)一般。對于中薯3號,添加0.5mg/LNAA的試管苗情況類似費(fèi)烏瑞它。其莖粗、葉片數(shù)、根長、最大葉長、最大葉寬均小于對照,其中莖粗、葉片數(shù)的差異達(dá)顯著水平。從苗長勢看,添加NAA的試管苗性狀較對照差。3液體培養(yǎng)試驗(yàn)本試驗(yàn)針對大規(guī)模的生產(chǎn)實(shí)踐情況設(shè)定的,通過本試驗(yàn)和規(guī)模生產(chǎn)發(fā)現(xiàn):3.1MS培養(yǎng)基對很多品種較適應(yīng),如本試驗(yàn)中MS培養(yǎng)基對中薯3號較好,但高濃度NPK的改良MS培養(yǎng)基對費(fèi)烏瑞它更適應(yīng)。因此,針對于不同品種可能還需進(jìn)行營養(yǎng)元素更深入的調(diào)配。3.2液體培養(yǎng)具有試管苗切段生根快、莖葉較粗壯等優(yōu)點(diǎn),但在貴州省薯類脫毒種苗快繁中心大規(guī)模的生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn),液體淺層靜止培養(yǎng)苗頂部容易焦化,不是所有的葉腋都能抽出枝條,擴(kuò)繁倍數(shù)沒有固體培養(yǎng)高等問題。因此,本試驗(yàn)沒有設(shè)置液體培養(yǎng)試驗(yàn)。目前純卡拉膠粉售價僅60元/kg,遠(yuǎn)低于瓊脂粉138元/kg,因此選擇了卡拉膠作為研究對象。選擇更低廉實(shí)用的固體培養(yǎng)基也是以后研究的方向。3.3外源激素在莖尖誘導(dǎo)、試管苗的復(fù)壯等方面應(yīng)用較廣、效果較好,但在大規(guī)模的試管苗繼代擴(kuò)繁中,添加外源激素,當(dāng)代苗中可能表現(xiàn)好,但在繼代繁殖以及在大棚栽插繁殖原原種中表現(xiàn)不好,因此本試