芳酸類非甾體抗炎藥物分析

芳酸類非甾體抗炎藥物分析基本要求一、掌握苯甲酸類、水楊酸類藥物的結(jié)構(gòu)特點，主要理化性質(zhì)，鑒別試驗和含量測定的基本原理與方法。二、熟悉其他芳酸類藥物鑒別和含量測定的基本原理與方法。

芳酸類非甾體抗炎藥物分析分類與典型藥物理化特征鑒別試驗雜質(zhì)檢查含量測定練習(xí)與思考芳酸類非甾體抗炎藥物分析炎癥：機(jī)體對感染的一種防御機(jī)制。

表現(xiàn)：紅腫，疼痛等?？寡姿幍姆诸悾?/p>

具甾體結(jié)構(gòu)的糖皮質(zhì)激素類(代表藥：可的松)NSAIDs

芳酸類非甾體抗炎藥物分析什么是芳酸？苯環(huán)羧基其他取代基分類：水楊酸類（鄰羥基苯甲酸）鄰氨基苯甲酸鄰氨基苯乙酸芳基丙酸吲哚乙酸

苯并噻嗪甲酸非甾體抗炎藥：是一類不含有甾體骨架的抗炎藥，多數(shù)具有芳酸基本結(jié)構(gòu)。芳基取代羧酸結(jié)構(gòu)芳酸類非甾體抗炎藥物分析第一節(jié)典型藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、典型藥物與結(jié)構(gòu)特點芳酸類非甾體抗炎藥物分析酸性酸性光譜特性芳酸類非甾體抗炎藥物分析酸性酸性光譜特性基團(tuán)特性芳酸類非甾體抗炎藥物分析酸性芳酸類非甾體抗炎藥物分析酸性光譜特性芳酸類非甾體抗炎藥物分析水解光譜特性芳酸類非甾體抗炎藥物分析其它非甾體類抗炎藥水解光譜特性芳酸類非甾體抗炎藥物分析結(jié)構(gòu)特點

可呈游離狀態(tài)水楊酸、阿司匹林具有羧基可呈鹽或呈酯雙氯芬酸鈉可呈酰胺結(jié)構(gòu)吡羅昔康具有苯環(huán)有不同的結(jié)構(gòu)特征有硫、氯、氟等元素，也可作為鑒別的依據(jù)

芳酸類非甾體抗炎藥物分析（一）酸性具游離羧基顯酸性，酸性受苯環(huán)、羧基和取代基的相互影響◆—CH3、—NH2等斥電子取代基存在使酸性減弱

◆—X、—NO2、—OH等吸電子取代基存在使酸性增強(qiáng)◆鄰位取代酸性>間位、對位取代酸性。例：水楊酸鄰位游離羥基與羧基形成分子內(nèi)氫健，酸性大為增強(qiáng)二、主要理化性質(zhì)水楊酸阿司匹林苯甲酸>>芳酸類非甾體抗炎藥物分析（二）水解性具有酯鍵：阿司匹林、雙水楊酯具有酰胺鍵:對乙酰氨基酚◆利用其水解得到酸和醇的性質(zhì)可進(jìn)行鑒別◆利用酯水解定量消耗氫氧化鈉的性質(zhì)，可用水解后剩余滴定法測定含量◆芳酸類藥物還應(yīng)檢查因水解而引入的特殊雜質(zhì)芳酸類非甾體抗炎藥物分析（三）具有紫外和紅外吸收（四）基團(tuán)或元素特性

芳酸類非甾體抗炎藥物分析第二節(jié)鑒別試驗一、與三氯化鐵反應(yīng)具酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基的藥物特點：（1）反應(yīng)適宜的pH值為4~6，在強(qiáng)酸性溶液中配位化合物可分解。（2）反應(yīng)極為靈敏，宜在稀溶液中進(jìn)行。芳酸類非甾體抗炎藥物分析1、水楊酸反應(yīng)

藥物試驗方法結(jié)果水楊酸水溶液紫堇色阿司匹林加熱水解后反應(yīng)紫堇色雙水楊酯氫氧化鈉試液中煮沸紫色二氟尼柳溶于乙醇深紫色芳酸類非甾體抗炎藥物分析2、酚羥基反應(yīng)

對乙酰氨基酚水溶液藍(lán)紫色

吡羅昔康三氯甲烷溶液玫瑰紅色美洛昔康三氯甲烷溶液淡紫紅色芳酸類非甾體抗炎藥物分析芳酸類非甾體抗炎藥物分析二、縮合反應(yīng)酮洛芬

具有二苯甲酮結(jié)構(gòu)，酸性條件下與二硝基苯肼縮合生成橙色偶氮化合物芳酸類非甾體抗炎藥物分析芳酸類非甾體抗炎藥物分析三、重氮化—偶合反應(yīng)臨用新配

分子結(jié)構(gòu)中具芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物

注意：在鑒別時，首先要使溶液成酸性，然后才能滴加亞硝酸鈉試液及堿性β一萘酚試劑。如：對乙酰氨基酚芳酸類非甾體抗炎藥物分析對乙酰氨基酚具有伯氨基，在酸性條件下反應(yīng)可生成對氨基酚，再與亞硝酸鈉進(jìn)行重氮化反應(yīng)，之后再與堿性β-萘酚偶合生成紅色偶氮化合物。水解反應(yīng)產(chǎn)生芳伯胺芳伯胺重氮化偶合反應(yīng)紅色偶氮化合物芳酸類非甾體抗炎藥物分析芳酸類非甾體抗炎藥物分析四、氧化反應(yīng)

硫酸溶液重鉻酸鉀吲哚美辛硫酸共存，與重鉻酸鉀共熱，顯紫色鹽酸溶液中，與亞硝酸鈉溶液反應(yīng)顯綠色，漸變黃色甲芬那酸顯深藍(lán)色，隨即變?yōu)樽鼐G色芳酸類非甾體抗炎藥物分析五、水解反應(yīng)

阿司匹林芳酸類非甾體抗炎藥物分析六、特征元素的反應(yīng)

1、氯元素的鑒別含氯藥物經(jīng)過前處理，顯氯化物的鑒別反應(yīng)2、硫元素的鑒別

美洛昔康中含有二價硫，分解產(chǎn)生硫化氫，遇醋酸鉛生成硫化氫黑色沉淀如丙磺舒高溫加熱分解，生成SO2氣體，有臭味芳酸類非甾體抗炎藥物分析七.紫外吸收和紅外吸收光譜法

利用藥物所具有的紫外和紅外吸收特征，來進(jìn)行鑒別。紫外：1、最大吸收波長法：如雙氯芬酸鈉的水溶液在276nm有最大吸收2、最大與最小吸收波長法：布洛芬3、吸光度法：甲芬那酸4、吸收度比值法：二氟尼柳紅外：P205芳酸類非甾體抗炎藥物分析水楊酸的紅外吸收圖譜3700~2900cm-1

N-H、

O-H1660cm-1

C=O1610,15701480,1440

C=C775cm-1

Ar-H芳酸類非甾體抗炎藥物分析3700~2900cm-1

N-H、

O-H1640cm-1

N-H1580cm-11500cm-1

C=C1300cm-1

C-N1188cm-1

C-O對氨基水楊酸鈉的紅外吸收圖譜芳酸類非甾體抗炎藥物分析八、色譜法

薄層色譜法高效液相法TLC:比移值HPLC：供試品保留時間，對照品保留時間芳酸類非甾體抗炎藥物分析第三節(jié)特殊雜質(zhì)及其檢查法一、阿司匹林及雙水楊酯中游離水楊酸與有關(guān)物質(zhì)的檢查（一）阿司匹林及雙水楊酯的合成水楊酸雙水楊酯乙酰水楊酸副產(chǎn)物生產(chǎn)工藝芳酸類非甾體抗炎藥物分析（二）阿司匹林中水楊酸及有關(guān)物質(zhì)的檢查HPLC法淡黃、紅棕、深棕色芳酸類非甾體抗炎藥物分析其它有關(guān)物質(zhì)醋酸苯酯水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯HPLC法芳酸類非甾體抗炎藥物分析芳酸類非甾體抗炎藥物分析二、甲芬那酸中2，3-二甲基苯胺的檢查生產(chǎn)工藝鄰氯苯甲酸2,3-二甲基苯胺縮合甲芬那酸HPLC/GC法芳酸類非甾體抗炎藥物分析芳酸類非甾體抗炎藥物分析三、二氟尼柳中有關(guān)物質(zhì)的檢查TLCHPLC2,4-二氟苯胺2，4-二氟聯(lián)苯4-（2’，4’-二氟苯基）苯乙酮4-（2’，4’-二氟苯基）苯酚乙酯4-（2’，4’-二氟苯基）苯酚二氟尼柳芳酸類非甾體抗炎藥物分析有關(guān)物質(zhì)A和B的檢查—自身對照法相同藥物，不同濃度，相互比較，主點限量芳酸類非甾體抗炎藥物分析四、萘普生的有關(guān)物質(zhì)的檢查色譜條件雜質(zhì)限量芳酸類非甾體抗炎藥物分析芳酸類非甾體抗炎藥物分析五、對乙酰氨基酚中氨基酚和對氯苯乙酰胺的檢查HPLC對硝基氯苯對硝基酚對氨基酚對氯苯乙酰胺芳酸類非甾體抗炎藥物分析第四節(jié)含量測定芳酸類非甾體抗炎藥物分析芳酸類非甾體抗炎藥物分析原理：藥物具-COOH；可用堿直接滴定Aspirin,丙磺舒（,BP,JP等），苯甲酸（等）均采用本法。芳酸類非甾體抗炎藥物分析（一）直接滴定法1：1乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶液中滴定過程水解；中性乙醇：對指示劑（酚酞？）而言為中性，可消除滴定誤差；pKa3~6的藥物溶于中性醇，可直接用NaOH滴定；pKa6~9的藥物要用非水溶液滴定法；應(yīng)用：多國藥典用于阿司匹林、雙水楊酯、苯甲酸、丙磺舒、布洛芬測定；USP和BP還用于甲芬那酸的測定。芳酸類非甾體抗炎藥物分析（二）剩余量滴定法本品在甲醇、乙醇及水中極微溶或者幾乎不溶，在丙酮中微溶。所以CHP使用定量過量的氫氧化鈉滴定液溶解后，再用鹽酸滴定液回滴剩余的氫氧化鈉。為什么氫氧化鈉能溶解之？芳酸類非甾體抗炎藥物分析（1）原理：（2）方法：供試品煮沸10’放冷酚酞2SO4(V)空白·····························································(V0)定、過量剩余（三）水解后剩余量滴定法1.水解后剩余量滴定法芳酸類非甾體抗炎藥物分析（3）討論：空白試驗的目的（4）計算：T的計算含量％的計算堿液在受熱時易吸收二氧化碳，生成碳酸鹽，當(dāng)用酸回滴定時，酸滴定液的消耗體積會減小，使測定結(jié)果偏高。芳酸類非甾體抗炎藥物分析滴定度滴定度濃度待測物反應(yīng)系數(shù)滴定液物反應(yīng)系數(shù)滴定液物摩而質(zhì)量空白反應(yīng)體積樣品測定消耗體積樣品稱重量芳酸類非甾體抗炎藥物分析I份NaOH供試品I份NaOH

空白VVOVo-V相當(dāng)于Asipirin消耗NaOH的ml數(shù)剩余芳酸類非甾體抗炎藥物分析2、兩步滴定法-改進(jìn)方法用于：阿司匹林片/腸溶片的含量測定（1）原理：片劑中加穩(wěn)定劑：酒石酸/枸櫞酸抑制水解酸性有干擾，所以采用兩步滴定法第一步中和Aspirin+NaOH鈉鹽+H2O水解產(chǎn)物+NaOHSA-Na+H2O酸性穩(wěn)定劑+NaOH中性鹽第二步水解與測定，即水解后剩余量滴定法芳酸類非甾體抗炎藥物分析（2）方法第一步：中和供試品片粉適量中性乙醇20ml酚酞NaOH（0.1mol/L)滴定至粉紅色第二步：水解與測定中和后的供試液水浴15’2SO4（V）空白（V0）芳酸類非甾體抗炎藥物分析（3）討論適用于阿司匹林片、腸溶片（4）計算芳酸類非甾體抗炎藥物分析空白消耗樣測消耗校正因數(shù)滴定度片劑規(guī)格芳酸類非甾體抗炎藥物分析芳酸類非甾體抗炎藥物分析（四）非水溶液滴定法芳酸類非甾體抗炎藥物分析（一）直接紫外分光光度法貝諾酯的測定：二、紫外分光光度法原料藥：對照品比較法片劑：吸收系數(shù)法芳酸類非甾體抗炎藥物分析（二）離子交換-UV法氯貝丁酯在226nm的波長處有最大吸收，但對氯酚等有關(guān)物質(zhì)亦有吸收，干擾UV法的測定。根據(jù)氯貝丁酯為酯結(jié)構(gòu)，不能發(fā)生電離，而有關(guān)物質(zhì)可發(fā)生酸性解離的性質(zhì)差異，采用陰離子交換色譜分離后，采用UV法測定。芳酸類非甾體抗炎藥物分析利用固定相酸堿性的不同進(jìn)行分離利用藥物和固定相起化學(xué)反應(yīng)而進(jìn)行分離利用生成離子對進(jìn)行層析分離單純靠選擇流動相進(jìn)行分離（三）柱分配色譜-紫外分光光度法USP(32)采用此法同時測定Aspirin膠囊中Aspirin和水楊酸芳酸類非甾體抗炎藥物分析玻璃棉供試品液：CHCl3-HCl洗脫液1：CHCl3

①中/堿性雜質(zhì)先洗脫硅藻土-NaHCO3洗脫液2：冰HAc-CHCl310ml洗脫液3：冰HAc-CHCl385ml②Aspirin后洗脫芳酸類非甾體抗炎藥物分析①NaHCO3使ASA和SA成鹽保留于柱上②用CHCl3洗脫的目的：去除中性或堿性雜質(zhì)③冰HAc酸化的目的：使ASA游離，易被CHCl3洗脫芳酸類非甾體抗炎藥物分析供試品吸光度對照品吸光度對照品濃度例子芳酸類非甾體抗炎藥物分析

ChP(2010)：阿司匹林腸溶膠囊、泡騰片、栓劑等含量測定采用此法。三、高效液相色譜法HPLC芳酸類非甾體抗炎藥物分析對照品濃度供試品濃度對照品濃度芳酸類非甾體抗炎藥物分析阿司匹林栓劑的含量測定色譜條件：色譜柱C18；流動相為乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水(20:5:5:70);檢測波長276nm系統(tǒng)適用性試驗：n＞3000;Aspirin與水楊酸鈉的計算：芳酸類非甾體抗炎藥物分析

練習(xí)與思考1．阿司匹林中檢查的特殊雜質(zhì)是A.水楊醛B.砷鹽C.水楊酸D.苯甲酸E.苯酚2．對氨基水楊酸鈉中