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項(xiàng)目四魚類病害防治技術(shù)任務(wù)十八鯉春病毒血癥的防治2016年4月中旬鏡鯉開始發(fā)病,開始每天死亡1~2尾,到4月底每天死亡幾百斤,整個(gè)池塘總共死魚2000多斤。·發(fā)病期間用過調(diào)水藥和殺菌藥,均無明顯效果?!みM(jìn)入5月份后,水溫上升,死亡量開始下降。
從病魚的肝臟和腎臟中接種,腦心浸液培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌分離、培養(yǎng)。并取病魚的鰓、肝、脾、腎分別用95%酒精和波恩氏固定液固定后做病毒檢測(cè)和組織病理切片觀察。·病毒檢測(cè)顯示病魚錦鯉皰疹病毒(KHV)呈陰性,·鯉春病毒血癥病毒(SVCV)呈陽性。其序列與GenBank中鯉春病毒血癥病毒基因序列同源性高達(dá)99.6%。鯉春病毒血癥是由鯉春病毒血癥病毒引起鯉科魚類的一種急性、出血性傳染病?!ひ匀沓鲅?、腹水、發(fā)病急和死亡率高為特征。項(xiàng)目四魚類病害防治技術(shù)任務(wù)十八鯉春病毒血癥的防治鯉春病毒血癥病毒(鯉彈狀病毒),病毒粒子為典型的彈狀結(jié)構(gòu),大小為(90~180)×(60~90)nm;鯉春病毒血癥病毒(鯉彈狀病毒),病毒粒子為典型的彈狀結(jié)構(gòu),大小為(90~180)×(60~90)nm;病毒基因區(qū)共包含5個(gè)開放閱讀框,編碼5種結(jié)構(gòu)蛋白,核蛋白在病毒粒子中含量最多,與RNA緊密結(jié)合形成螺旋對(duì)稱的核衣殼。
磷蛋白是核衣殼的組成部分,基質(zhì)蛋白由223個(gè)氨基酸組成,糖蛋白通過基質(zhì)蛋白與螺旋狀核衣殼相連,糖蛋白含有與免疫相關(guān)的抗原決定簇,是分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)該病毒的目的基因?!げ《驹谒wpH值為7~10時(shí)穩(wěn)定,侵染率100%;·pH值11時(shí)侵染率50%~70%。45℃1%
60℃0保存在含2%血清培養(yǎng)液中的病毒,在4次冷凍和解凍過程中侵染率在90%左右,缺乏血清時(shí)僅5%左右;冷凍干燥法項(xiàng)目四魚類病害防治技術(shù)任務(wù)十八鯉春病毒血癥的防治病理癥狀感染SVCV的魚類,常聚集在池塘的進(jìn)水口附近,呼吸緩慢,行動(dòng)遲緩,食欲降低,腹水肝、脾、腎腫大腸道發(fā)炎鰾有出血斑點(diǎn)細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)空泡,細(xì)胞核溶解,細(xì)胞變性、壞死;脾臟細(xì)胞變性壞死。細(xì)胞核淡染,部分細(xì)胞核溶解;腎小管堵塞,出現(xiàn)空泡和透明化。項(xiàng)目四魚類病害防治技術(shù)任務(wù)十八鯉春病毒血癥的防治流行情況死亡率可高達(dá)90%,主要危害一齡以上的鯉科魚類,魚苗、夏花很少感染,春季(水溫在13~20℃)時(shí)適宜流行,病魚、死魚及帶病毒魚是傳染源,以水平傳播為主。直接接觸感染通過水、生物媒介等傳播項(xiàng)目四魚類病害防治技術(shù)任務(wù)十八鯉春病毒血癥的防治診斷病魚癥狀病理變化發(fā)病季節(jié)水溫春季水溫低于20℃時(shí),養(yǎng)殖鯉科魚類易出現(xiàn)典型的SVC癥狀。挑選10條有代表性的臨床癥狀的病魚或者瀕死魚,有臨床癥狀的魚,體長(zhǎng)≤4cm的魚苗取整條魚。體長(zhǎng)4~6cm的魚苗取內(nèi)臟(包括腎);體長(zhǎng)大于6cm的魚則取腦、肝、腎和脾。無癥狀的魚,要取腎、脾、鰓和腦組織,成熟雌魚還需取卵巢液。用草魚卵巢細(xì)胞系(CO)鯉上皮瘤細(xì)胞系(EPC)樣品接種細(xì)胞和盲傳后無細(xì)胞病變(CPE)判為陰性;有CPE出現(xiàn)時(shí),以SVC病毒糖蛋白基因作模板,用RT-PCR檢測(cè)SVC病毒。陽性無帶或帶的大小不是714bp或606bp的均判為陰性?!び信R床癥狀細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)CPE、PCR試驗(yàn)為陽性者,判為患鯉春病毒血癥;·無臨床癥狀出現(xiàn)CPE、PCR試驗(yàn)陽性者,判為SVCV攜帶者。項(xiàng)目四魚類病害防治技術(shù)任務(wù)十八鯉春病毒血癥的防治預(yù)防措施對(duì)苗種場(chǎng)、良種場(chǎng)實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。加強(qiáng)疫病監(jiān)測(cè)與檢疫掌握流行病學(xué)情況培育或引進(jìn)抗病品種切斷傳染源加強(qiáng)飼養(yǎng)管理保證水源、引入魚卵和魚不帶病毒,養(yǎng)魚設(shè)施消毒等,是切實(shí)可行的防治措施。立即進(jìn)行隔離禁止運(yùn)輸和貿(mào)易密切觀察監(jiān)控馬上隔離盡快上報(bào)立即送樣品到專門實(shí)驗(yàn)室確診·銷毀整個(gè)魚群,·對(duì)養(yǎng)殖水體、工具、運(yùn)輸工具及周圍的場(chǎng)地進(jìn)行徹底消毒.。項(xiàng)目四魚類病害防治技術(shù)任務(wù)十八鯉春病毒血癥的防治2016年4月中旬鏡鯉開始發(fā)病,開始每天死亡1~2尾,到4月底每天死亡幾百斤,整個(gè)池塘總共死魚2000多斤?!ぐl(fā)病期間用過調(diào)水藥和殺菌藥,均無明顯效果?!みM(jìn)入5月份后,水溫上升,死亡量開始下降。
從病魚的肝臟和腎臟中接種,腦心浸液培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌分離、培養(yǎng)。并取病魚的鰓、肝、脾、腎分別用95%酒精和波恩氏固定液固定后做病毒檢測(cè)和組織病理切片觀察?!げ《緳z測(cè)顯示病魚錦鯉皰疹病毒(KHV)呈陰性,·鯉春病毒血癥病毒(SVCV)呈陽性。其序列與GenBank中鯉春病毒血癥病毒基因序列同源性高達(dá)99.6%。鯉春病毒血癥是由鯉春病毒血癥病毒引起鯉科魚類的一種急性、出血性傳染病?!ひ匀沓鲅?、腹水、發(fā)病急和死亡率高為特征。鯉春病毒血癥病毒(鯉彈狀病毒),病毒粒子為典型的彈狀結(jié)構(gòu),大小為(90~180)×(60~90)nm;鯉春病毒血癥病毒(鯉彈狀病毒),病毒粒子為典型的彈狀結(jié)構(gòu),大小為(90~180)×(60~90)nm;病毒基因區(qū)共包含5個(gè)開放閱讀框,編碼5種結(jié)構(gòu)蛋白,核蛋白在病毒粒子中含量最多,與RNA緊密結(jié)合形成螺旋對(duì)稱的核衣殼。
磷蛋白是核衣殼的組成部分,基質(zhì)蛋白由223個(gè)氨基酸組成,糖蛋白通過基質(zhì)蛋白與螺旋狀核衣殼相連,糖蛋白含有與免疫相關(guān)的抗原決定簇,是分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)該病毒的目的基因?!げ《驹谒wpH值為7~10時(shí)穩(wěn)定,侵染率100%;·pH值11時(shí)侵染率50%~70%。45℃1%
60℃0保存在含2%血清培養(yǎng)液中的病毒,在4次冷凍和解凍過程中侵染率在90%左右,缺乏血清時(shí)僅5%左右;冷凍干燥法感染SVCV的魚類,常聚集在池塘的進(jìn)水口附近,呼吸緩慢,行動(dòng)遲緩,食欲降低,腹水肝、脾、腎腫大腸道發(fā)炎鰾有出血斑點(diǎn)細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)空泡,細(xì)胞核溶解,細(xì)胞變性、壞死;脾臟細(xì)胞變性壞死。細(xì)胞核淡染,部分細(xì)胞核溶解;腎小管堵塞,出現(xiàn)空泡和透明化。死亡率可高達(dá)90%,主要危害一齡以上的鯉科魚類,魚苗、夏花很少感染,春季(水溫在13~20℃)時(shí)適宜流行,病魚、死魚及帶病毒魚是傳染源,以水平傳播為主。直接接觸感染通過水、生物媒介等傳播病魚癥狀病理變化發(fā)病季節(jié)水溫春季水溫低于20℃時(shí),養(yǎng)殖鯉科魚類易出現(xiàn)典型的SVC癥狀。挑選10條有代表性的臨床癥狀的病魚或者瀕死魚,有臨床癥狀的魚,體長(zhǎng)≤4cm的魚苗取整條魚。體長(zhǎng)4~6cm的魚苗取內(nèi)臟(包括腎);體長(zhǎng)大于6cm的魚則取腦、肝、腎和脾。無癥狀的魚,要取腎、脾、鰓和腦組織,成熟雌魚還需取卵巢液。用草魚卵巢細(xì)胞系(CO)鯉上皮瘤細(xì)胞系(EPC)樣品接種細(xì)胞和盲傳后無細(xì)胞病變(CPE)判為陰性;有CPE出現(xiàn)時(shí),以SVC病毒糖蛋白基因作模板,用RT-PCR檢測(cè)SVC病毒。陽性無帶或帶的大小不是714bp或606bp的均判為陰性。·有臨床癥狀細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)CPE、PCR試驗(yàn)為陽性者,判為患鯉春病毒血癥;·無臨床癥狀出現(xiàn)CPE、PCR試驗(yàn)陽性者,判為SVCV攜帶者。對(duì)苗種場(chǎng)、良種場(chǎng)實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理
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