中國胃癌HER2檢測(cè)-指南解讀-鄭杰

中國胃癌HER2檢測(cè)指南解讀

〔2022版〕第一頁，共四十頁。概述本指南推薦IHC與FISH和〔或〕DSISH相結(jié)合的檢測(cè)策略胃癌有必要進(jìn)行準(zhǔn)確的HER2檢測(cè)

HER2狀態(tài)檢測(cè)首先選用免疫組織化學(xué)法〔IHC〕

IHC3+的病例視為HER2陽性

IHC2+的病例建議進(jìn)一步行原位雜交〔ISH：FISH和或DSISH〕檢測(cè)，IHC2+/ISH+的病例視為HER2陽性

IHC1+和IHC0病例，IHC2+/ISH-病例視為HER2陰性

胃癌HER2檢測(cè)應(yīng)在有能力的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行

檢測(cè)質(zhì)量取決于標(biāo)本的采集、處理過程、IHC/ISH檢測(cè)方法和評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行第二頁，共四十頁。問題一1.請(qǐng)問您所在的醫(yī)院胃癌HER2檢測(cè)是否屬于常規(guī)檢測(cè)工程？是否不清楚第三頁，共四十頁。問題二請(qǐng)問您所在的醫(yī)院，由誰決定是否做胃癌HER2免疫組化檢測(cè)？病理科外科腫瘤內(nèi)科消化內(nèi)鏡室第四頁，共四十頁。問題三請(qǐng)您對(duì)多學(xué)科合作對(duì)胃癌HER2檢測(cè)的重要性打分〔0-5重要性逐漸遞增〕，請(qǐng)按投票器選擇012345第五頁，共四十頁。胃癌HER2檢測(cè)第六頁，共四十頁。切片脫水包埋固定HER2檢測(cè)的相關(guān)流程切片檢測(cè)判讀標(biāo)本收取第七頁，共四十頁。問題四貴單位胃癌手術(shù)標(biāo)本送到病理科處理的時(shí)間？A30分鐘內(nèi)B1小時(shí)內(nèi)C2小時(shí)內(nèi)D>2小時(shí)E不清楚

第八頁，共四十頁。問題五貴單位手術(shù)標(biāo)本固定時(shí)間？不固定直接取材固定時(shí)間在8小時(shí)內(nèi)固定時(shí)間在12小時(shí)左右〔過夜〕固定時(shí)間12-24小時(shí)不清楚第九頁，共四十頁。標(biāo)本類型原發(fā)病灶的手術(shù)切除標(biāo)本原發(fā)病灶的胃鏡活檢標(biāo)本建議取6-8塊，以獲得足夠的樣本組織，多點(diǎn)活檢對(duì)準(zhǔn)確的檢測(cè)有必要切除標(biāo)本離體后20–30分鐘內(nèi)進(jìn)行標(biāo)記、切開、固定等初步處理后，及時(shí)送病理科活檢標(biāo)本的大小≥2x2x2mm3原發(fā)灶活檢組織、手術(shù)切除組織皆有的病例，建議使用手術(shù)切除組織進(jìn)行檢測(cè)標(biāo)本采集第十頁，共四十頁。問題六貴單位送檢標(biāo)本采用何種固定液？不用固定液，直接送病理科10%福爾馬林固定液〔蒸餾水配〕10%福爾馬林固定液〔中性緩沖液配〕10%甲醛固定液不清楚第十一頁，共四十頁。標(biāo)本固定采用新鮮配制10%中性緩沖福爾馬林作為固定液固定液的量應(yīng)為組織的10倍手術(shù)切除標(biāo)本的固定時(shí)間為8–48h(至少1h/mm組織)活檢標(biāo)本的固定時(shí)間不超過24h(至少1h/mm組織)不宜使用其它固定液，非10%中性緩沖福爾馬林制劑可能會(huì)阻礙IHC和ISH檢測(cè)的可靠性不宜用微波快速固定組織標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)本固定是HER2檢測(cè)質(zhì)量的保障；保存良好的組織形態(tài)，防止細(xì)胞內(nèi)蛋白和核酸的喪失標(biāo)本準(zhǔn)備第十二頁，共四十頁。固定1小時(shí)固定52小時(shí)固定4小時(shí)固定2周固定時(shí)間影響HER2染色結(jié)果固定22小時(shí)圖片由ofAMorey,StVincent’sHospital,NSW,Australia提供第十三頁，共四十頁。固定較差例如：乳腺癌HER2IHC檢測(cè)固定較差會(huì)導(dǎo)致染色結(jié)果的異質(zhì)性胞質(zhì)染色可能是由固定較差導(dǎo)致圖片由WHanna提供第十四頁，共四十頁。固定較差例如：胃癌HER2IHC檢測(cè)固定不完全會(huì)導(dǎo)致假陽性檢查結(jié)果胞質(zhì)染色可能由于使用了不恰當(dāng)?shù)墓潭ǚ绞綀D片由TargosMolecularPathology.提供第十五頁，共四十頁。固定較差例如：HER2ISH檢測(cè)圖片由Abbott/Vysis.提供固定不完全-SISH，“空核〞固定不完全導(dǎo)致探針信號(hào)較弱或缺失過度染色會(huì)導(dǎo)致持續(xù)性自發(fā)熒光探針信號(hào)可能較弱或缺失第十六頁，共四十頁。HER2檢測(cè)HER2過表達(dá)的檢測(cè)HER2擴(kuò)增的檢測(cè)免疫組織化學(xué)染色方法〔IHC〕自動(dòng)化原位雜交方法〔ISH〕FISHDualSISH第十七頁，共四十頁。實(shí)驗(yàn)室總體要求應(yīng)當(dāng)在有條件的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，擁有試驗(yàn)所需的儀器和設(shè)備及空間條件

實(shí)驗(yàn)室掌握包括標(biāo)本的制備、抗體的選擇、抗原修復(fù)方法及其它相關(guān)技術(shù)；探針的選擇、檢測(cè)預(yù)處理方法及其它相關(guān)技術(shù)

實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過嚴(yán)格的內(nèi)部和外部質(zhì)量控制程序驗(yàn)證，建立完善的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作流程〔SOP〕

實(shí)驗(yàn)室技術(shù)員具備相關(guān)資質(zhì)及經(jīng)過合格培訓(xùn)第十八頁，共四十頁。HER2檢測(cè)-IHC

IHC方法

試驗(yàn)方法根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件可以選擇手工染色、半自動(dòng)染色和全自動(dòng)免疫組化染色建議使用全自動(dòng)染色方法建議使用我國相關(guān)部門〔SFDA〕批準(zhǔn)的試劑盒自行組配和分裝的抗體必須經(jīng)過嚴(yán)格的內(nèi)部和外部質(zhì)量控制程序驗(yàn)證，并與權(quán)威機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)的檢測(cè)試劑盒進(jìn)行比對(duì)，以保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性IHC抗體第十九頁，共四十頁。結(jié)果判讀和分析普通光學(xué)顯微鏡熒光顯微鏡病理醫(yī)生需要經(jīng)過培訓(xùn)

IHC評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)和乳腺癌有所不同樣本：活檢組織和切除組織有所不同觀察：高異質(zhì)性需要全面觀察所有腫瘤組織溝通：結(jié)果不確定時(shí)需要與腫瘤科醫(yī)生溝通第二十頁，共四十頁。IHC判讀標(biāo)準(zhǔn)

〔參照ToGA經(jīng)驗(yàn)，所有圖片來自SCC〕0無反響或腫瘤細(xì)胞膜染色<10% 1+≥10%腫瘤細(xì)胞微弱或隱約膜染色，細(xì)胞膜僅局部區(qū)域著色2+

≥10%腫瘤細(xì)胞弱到中度的完全或細(xì)胞基底部和兩側(cè)邊膜染色3+≥10%腫瘤細(xì)胞完全性或基底部和兩側(cè)邊膜強(qiáng)染色〔對(duì)3+的病例同時(shí)說明百分率，注明是否有異質(zhì)性〕IHC結(jié)果判讀時(shí)應(yīng)注意：細(xì)胞質(zhì)著色應(yīng)忽略不計(jì)，正常胃黏膜上皮細(xì)胞不應(yīng)著色

HER2檢測(cè)-IHC第二十一頁，共四十頁。原位雜交檢測(cè)方法〔ISH〕熒光原位雜交〔FISH〕雙色銀染原位雜交〔DualSISH，DSISH〕探針建議使用我國相關(guān)部門〔SFDA〕批準(zhǔn)的試劑盒第二十二頁，共四十頁。FISH，HER2紅色信號(hào)增多，局部呈簇狀，CEP17信號(hào)1-2個(gè)，比值7.2，有擴(kuò)增〔100×〕FISH，HER2和CEP17信號(hào)各1-2個(gè)，比值1.65，無擴(kuò)增〔100×〕FISH：嚴(yán)格按照試劑盒標(biāo)準(zhǔn)程序執(zhí)行HER2檢測(cè)-FISH圖片來自SCC第二十三頁，共四十頁。DSISHHER2黑色信號(hào)擴(kuò)增，呈簇狀；CEP17紅色信號(hào)1-2個(gè)；比值15，有擴(kuò)增(100×)

DSISHHER2和CEP17信號(hào)各1-2個(gè)，比值<0.8，無擴(kuò)增(100×)

DSISH：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)先進(jìn)行嚴(yán)格的比照試驗(yàn)和程序優(yōu)化

嚴(yán)格按照所用全自動(dòng)染色儀器的優(yōu)化程序和SOP執(zhí)行HER2檢測(cè)-DSISH圖片來自SCC第二十四頁，共四十頁。請(qǐng)問貴院是否有統(tǒng)一的HER2檢測(cè)病理報(bào)告格式？是否問題七第二十五頁，共四十頁。檢測(cè)報(bào)告內(nèi)容胃癌HER2IHC/ISH檢測(cè)報(bào)告臨床信息：姓名 性別年齡門診／住院號(hào) 送檢醫(yī)師 聯(lián)系方式

檢測(cè)日期年月日標(biāo)本信息：病理號(hào)/蠟塊號(hào)標(biāo)本類型：手術(shù)切除□活檢□腫瘤部位：胃食道交界處□胃底□胃體□胃竇□幽門管□轉(zhuǎn)移灶□標(biāo)本固定液種類〔10％中性緩沖福爾馬林〕是□ 否□標(biāo)本離體至固定時(shí)間(如有記錄) 分鐘標(biāo)本固定的時(shí)間(如有記錄)分鐘組織學(xué)類型/分級(jí)Laurén分型臨床分期TNM第二十六頁，共四十頁。HER2IHC檢測(cè)報(bào)告檢測(cè)信息：抗體信息(克隆號(hào)／生產(chǎn)商)檢測(cè)方法 手工/半自動(dòng)□ 全自動(dòng)□對(duì)照設(shè)置情況3+□0□樣本量是否足夠用于評(píng)估 是□ 否□具有膜著色的腫瘤細(xì)胞的百分比%著色的異質(zhì)性 有□ 無□腫瘤細(xì)胞膜染色模式完整□基底和側(cè)膜〔U-shaped)□兩者皆有□判讀結(jié)果： 0□ l+□ 2+□3+□ 無法判讀□結(jié)論：陽性□；不確定□；陰性□；無法判讀□檢測(cè)人員：技術(shù)員病理醫(yī)師第二十七頁，共四十頁。

HER2ISH檢測(cè)報(bào)告

檢測(cè)信息：探針信息(生產(chǎn)商/商品號(hào))

檢測(cè)方法

對(duì)照設(shè)置情況陽性對(duì)照□陰性對(duì)照□樣本量是否足夠用于評(píng)估 是□ 否□IHC檢測(cè)結(jié)果 0□ l+□2+□ 3+□ 無法判讀□判讀結(jié)果：

用于評(píng)估的腫瘤細(xì)胞數(shù)量

HER2信號(hào)總數(shù)／CEPl7信號(hào)總數(shù)

HER2信號(hào)數(shù)平均值／細(xì)胞核

CEPl7信號(hào)數(shù)平均值／細(xì)胞核

17號(hào)染色體是否為多體 是□ 否□結(jié)論： 陽性(擴(kuò)增)□ 陰性(無擴(kuò)增)□ 無法判讀□檢測(cè)人員： 技術(shù)員病理醫(yī)生

第二十八頁，共四十頁。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制〔1〕HER2蛋白和基因擴(kuò)增的檢測(cè)均應(yīng)在內(nèi)、外部質(zhì)量控制良好的病理實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)必須嚴(yán)格按照指南要求執(zhí)行，以保證結(jié)果可靠不具備HER2檢測(cè)條件的單位應(yīng)按照指南要求，妥善處理和準(zhǔn)備好標(biāo)本，提供給有質(zhì)量保證的病理實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)第二十九頁，共四十頁。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制〔2〕實(shí)驗(yàn)室內(nèi)、外部質(zhì)量控制和SOP的主要要求如下準(zhǔn)備開展GCHER2檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)選擇1～2家已較好開展該項(xiàng)檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行25～100例標(biāo)本的比照驗(yàn)證或通過參加有關(guān)外部質(zhì)量控制活動(dòng)來實(shí)現(xiàn)，外部質(zhì)控陽性和陰性結(jié)果的一致性應(yīng)到達(dá)90％以上，每年應(yīng)進(jìn)行1～2次從事GCHER2檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員和病理醫(yī)師應(yīng)進(jìn)行必要的培訓(xùn)和資格考核第三十頁，共四十頁。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制〔3〕實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立完善的SOP，并做好每次檢測(cè)情況的記錄和存檔工作任何改變操作程序和試劑的行為均應(yīng)重新進(jìn)行嚴(yán)格的驗(yàn)證內(nèi)部質(zhì)控應(yīng)包括同一組織不同批次染色結(jié)果的重復(fù)性分析，每次染色陽性、陰性對(duì)照的設(shè)置，如有可能還應(yīng)沒置包括低表達(dá)／低擴(kuò)增對(duì)照檢測(cè)相關(guān)的儀器和設(shè)備需定期維護(hù)、校驗(yàn)第三十一頁，共四十頁。類似乳腺癌亮視野檢測(cè)方法有優(yōu)勢(shì)Her2檢測(cè)流程樣本收集鏡下觀察異質(zhì)性高需要觀察整張切片檢測(cè)所需時(shí)間胃癌進(jìn)展快，宜及時(shí)獲得結(jié)果多學(xué)科參與結(jié)果判讀與乳腺癌有所不同胃癌HER2檢測(cè)：根本過程和特殊性數(shù)量、質(zhì)量適宜的含有腫瘤組織的活檢標(biāo)本具有代表性的手術(shù)切除標(biāo)本第三十二頁，共四十頁。多學(xué)科協(xié)作共同努力醫(yī)生和技術(shù)員

知識(shí)更新和觀念改變患者和醫(yī)生第三十三頁，共四十頁。多學(xué)科協(xié)作檢測(cè)HER2：臨床醫(yī)生之角色采樣手術(shù)和胃鏡活檢〔6-8塊組織〕固定10%中性緩沖福爾馬林樣本送檢〔離體時(shí)間〕30分鐘結(jié)果解讀HER2+IHC01+2+3+HER2陽性第三十四頁，共四十頁。多學(xué)科協(xié)作檢測(cè)HER2：病理醫(yī)生之角色WolffAC,etal.JClinOncol2007;25:118–145.檢測(cè)結(jié)果分析檢查備檢標(biāo)本是否可用正確設(shè)立內(nèi)部對(duì)照組依照國際評(píng)分系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)分檢測(cè)結(jié)果報(bào)告使用標(biāo)準(zhǔn)化HER2檢測(cè)結(jié)果報(bào)告表報(bào)告內(nèi)容應(yīng)包括標(biāo)本取樣，固定，檢測(cè)方法及評(píng)分系統(tǒng)多學(xué)科檢測(cè)治療小組(MDT)會(huì)議第三十五頁，共四十頁。學(xué)科協(xié)作檢測(cè)HER2：技術(shù)員之角色處理:防止影響檢測(cè)結(jié)果之因素--最正確答案固定時(shí)間及固定方法--石蠟包埋--組織切片的合理時(shí)間(最好于HER2檢測(cè)前切片)--標(biāo)本脫蠟方法:使用標(biāo)準(zhǔn)化/經(jīng)驗(yàn)證之檢測(cè)步驟--IHC--ISHFISHDualSISHWolffAC,etal.JClinOncol2007;25:118–145.第三十六頁，共四十頁。患者病理醫(yī)生技術(shù)人員腫瘤科/內(nèi)科醫(yī)生病理醫(yī)生外科/內(nèi)窺鏡醫(yī)生獲取腫瘤組織并按照標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行固定后轉(zhuǎn)送病理科標(biāo)本處理和制片病理診斷選取有代表性的組織按照標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)結(jié)果判讀和評(píng)分簽發(fā)報(bào)告與臨床醫(yī)生溝通并作必要的解釋評(píng)估檢測(cè)需求、提出手術(shù)或活檢以獲得標(biāo)本成功且及時(shí)的HER2檢測(cè)需要多學(xué)科合作第三十七頁，共四十頁。

建議

提高檢測(cè)率離體時(shí)間和固