潔凈區(qū)(室)沉降菌測試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

干凈區(qū)〔室〕沉降菌測試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程干凈區(qū)〔室〕沉降菌測試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程14頁干凈區(qū)〔室〕沉降菌測試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程起草人起草日期頒發(fā)人發(fā)放部門審核人審核日期生效日期藥檢室批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期修訂日期文件編號文件名稱一、目的：建立一個干凈區(qū)文件編號文件名稱二、范圍：干凈室和干凈區(qū)，無菌室或局部空氣凈化區(qū)域〔包括干凈工作臺〕的沉降菌的測試和環(huán)境的驗證。三、責(zé)任：藥檢員、藥檢室負(fù)責(zé)人?；钗⑸飻?shù)，并以此來評定干凈室〔區(qū)〕的干凈度。儀器儀器包括：a〕培育皿；b〕培育基：大豆酪蛋白瓊脂培育基；c〕恒溫培育箱；d〕高壓蒸汽滅菌器。培育皿一般承受φ90mm×15mm規(guī)格的培育皿。培育基按培育基要求加水，加熱溶化后，分裝，滅菌，冷卻至約60℃，在無菌操作要求下傾注約20mL至無菌平皿〔φ90mml))中。加蓋后在室溫放至凝固。制備好的培育基平皿宜在2℃~8℃保存，一般以一周為宜或按廠商供給的標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。恒溫培育箱必需定期對恒溫培育箱進展校驗。測試步驟測試前培育基外表必需嚴(yán)格消毒。將已制備好的培育皿按采樣點布置圖逐個放置，然后從里到外逐個翻開培育皿蓋，使培育基外表暴露在空氣中。靜態(tài)測試時，培育皿暴露時間為30min以上；動態(tài)測試時，培育皿暴露時間為不大于4h。全部采樣完畢后，將培育皿倒置于恒溫培育箱中培育。承受大豆酪蛋白瓊脂培育基〔TSA〕配制的培育皿經(jīng)采樣后，在30℃~35℃培育箱中培育，時間2d。每批培育基應(yīng)有比照試驗，檢驗培育根本身是否污染。可每批選定3只培育皿作比照培育。菌落計數(shù)用肉眼對培育皿上全部的菌落直接計數(shù)、標(biāo)記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用5~10倍放大鏡檢查，有否遺漏。2222個以上菌落計數(shù)。留意事項測試用具要作滅菌處理，以確保測試的牢靠性、正確性。實行一切措施防止人為對樣本的污染。對培育基、培育條件及其他參數(shù)作具體的記錄。由于細(xì)菌種類繁多，差異甚大，計數(shù)時一般用透射光于培育皿反面或正面認(rèn)真觀看，不要漏計培育皿邊緣生長的菌落，并須留意細(xì)菌菌落與培育基沉淀物的區(qū)分，必要時用顯微鏡鑒別。采樣前應(yīng)認(rèn)真檢查每個培育皿的質(zhì)量，如覺察變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。測試時間在空態(tài)或靜態(tài)測試時，測試宜在凈化空氣調(diào)整系統(tǒng)正常運行時間不少于30min后開頭，或在生20min自凈后開頭。在動態(tài)測試時，則須記錄生產(chǎn)開頭的時間以及測試時間。沉降菌菌落數(shù)計算采樣點數(shù)量及其布置mm2干凈度級別注：對于100級的單向流干凈室〔區(qū)，包括100級干凈工作臺benc，面積指的是送風(fēng)口外表積；對于10000級以上的非單向流干凈室〔區(qū)，面積指的是房間面積。10010000100000300000<102~3222≥10~<204222≥20~<408222≥40~<10016422≥100~<200401033≥200~<400802066≥400~<1000160401313≥1000~<20234001003232≥20238002006363采樣點的位置〕工作區(qū)采樣點位置離地0.8m~1.5m左右〔略高于工作面b〕可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加測點。c〕2兩點承受左右擺布，三點承受左中右擺布。采樣次數(shù)每個采樣點一般采樣一次。采樣留意事項對于單向流干凈室〔區(qū)〕或送風(fēng)口，采樣器采樣口朝向應(yīng)正對氣流方向；對于非單向流干凈室〔區(qū)，采樣口向上。布置采樣點時，至少應(yīng)盡量避開塵粒較集中的回風(fēng)口。采樣時，測試人員應(yīng)站在采樣口的下風(fēng)側(cè)，并盡量少走動。應(yīng)實行一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對樣本的污染。培育皿在用于檢測時，為避開培育皿運輸或搬動過程造成的影響，宜同時進展比照試驗，每次或每個區(qū)域取1箱內(nèi)培育，結(jié)果應(yīng)無菌落生長。記錄測試報告應(yīng)包含以下內(nèi)容：a〕測試者的名稱和地址，測試日期；b〕測試依據(jù)；c〕被測干凈室〔區(qū)〕的名稱；d〕測試結(jié)果；包括全部統(tǒng)計計算資料。結(jié)果計算用計數(shù)方法得出各個培育皿的菌落數(shù)。每個測點的沉降菌平均菌落數(shù)的計算，公式為：=M1+M2……M〕/式中：M—平均菌落數(shù)；M1—1號培育皿菌落數(shù)；M2—2號培育皿菌落數(shù)；Mn—n號培育菌落數(shù)；n—培育皿總數(shù)。結(jié)果評定每個測點的沉降菌平均菌落數(shù)必需低于所選定評定標(biāo)準(zhǔn)中的界限。在靜態(tài)測試時，假設(shè)某測點的沉降菌平均菌落數(shù)超過評定標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)重采樣兩次，兩次測試結(jié)果均合格才能判為符合。干凈室〔區(qū)〕沉降菌技術(shù)要求干凈度級別干凈度級別沉降菌/皿，0.5h100≤110000