2020近岸海域環(huán)境監(jiān)測技術規(guī)范第五部分近岸海域生物質量監(jiān)測

目 次前 言 Ⅱ適用范圍 1規(guī)范性引用文件 1近岸海域生物質量監(jiān)測的一般要求 1生物質量樣品采集、保存與運輸 2生物質量樣品的制備 3生物質量樣品的分析 4生物質量監(jiān)測質量控制 4附錄A（資料性附錄）生物質量監(jiān)測項目分析方法 6i近岸海域環(huán)境監(jiān)測技術規(guī)范適用范圍本標準規(guī)定了近岸海域生物質量樣品采集、保存與運輸、樣品制備、樣品分析、質量控制等方面的內容。本標準適用于近岸海域生物質量監(jiān)測。規(guī)范性引用文件本標準內容引用了下列文件中的條款。凡未注明日期的引用文件，其有效版本適用于本標準。GB17378.3 3部分：樣品采集、保存與運輸GB18421 海洋生物質量標準HJ168 環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制修訂技術導則HJ442.1 近岸海域環(huán)境監(jiān)測技術規(guī)范第一部分總則HJ442.2近岸海域環(huán)境監(jiān)測技術規(guī)范第二部分數(shù)據(jù)處理與信息管理HJ442.4近岸海域環(huán)境監(jiān)測技術規(guī)范第四部分近岸海域沉積物監(jiān)測HJ442.10近岸海域環(huán)境監(jiān)測技術規(guī)范第十部分評價及報告HJ730近岸海域環(huán)境監(jiān)測點位布設技術規(guī)范近岸海域生物質量監(jiān)測的一般要求HJ442.1HJ442.2HJ442.10要求執(zhí)行。國家確定的重要河口海灣和重點區(qū)域例行監(jiān)測的生物質量監(jiān)測頻次為每年1次，其他1217～8月或貝類成熟期。生物成熟期根據(jù)各地的具體情況確定，不同年份的采樣時間應保持一致。采集甲殼類、魚類和藻類樣品根據(jù)監(jiān)測目的確定采樣的頻次和時間，采樣一般在捕撈期；養(yǎng)殖魚蝦類監(jiān)測一般在成熟期；不同年份的采樣時間應保持一致。例行監(jiān)測的必測項目為GB18421規(guī)定的貝類污染評價項目；選測項目為監(jiān)測區(qū)內域除GB18421規(guī)定的項目外的其他貝類污染因子、其他生物（甲殼類、魚類和藻類）質量等。其他監(jiān)測任務的生物質量監(jiān)測項目、時間、頻次等依據(jù)監(jiān)測目的確定。1生物質量樣品采集、保存與運輸樣品的采集基本原則區(qū)域代表性原則。例行監(jiān)測的樣品采集，應能反映監(jiān)測海域生物受污染物影響的（避開污染源。其他專題監(jiān)測的樣品采集，應選擇符合監(jiān)測目的和適于專題評價的區(qū)域。物種代表性原則。例行監(jiān)測采集的樣品種類，應按照GB18421選擇貝類樣品；GB17378.3藻類生物質量監(jiān)測時，應采集當?shù)貎?yōu)勢種或經濟類種類。樣品種類的選擇種類應選擇產量豐富，最好是食用的經濟生物；本區(qū)域的定居者，生命周期要求為一年以上；有適當?shù)拇笮?，以提供足夠的組織樣品進行分析；對污染物有較強的積累能力；種類以貝類為主，根據(jù)海區(qū)（灘涂）特征可增選魚類、甲殼類和藻類；根據(jù)我國海洋生物鯧魚、鯔魚、鲆鰈魚等；甲殼類為梭子蟹、鱘、蝦等；藻類為海帶、紫菜、馬尾藻等。具體種類可視當?shù)貙嶋H情況確定。樣品的采集采樣方式采樣方式包括底棲拖網(wǎng)捕撈、近岸定點養(yǎng)殖采樣、漁船捕撈、沿岸海域定置網(wǎng)捕撈及垂釣或市場直接購買，獲取的樣品應為新采集且未受污染的樣品。采樣工具在采樣時應注意采樣工具對待測項目的影響，測定金屬項目不能使用一般的鐵質工具和鍍鋅、鍍鉻工具。采樣區(qū)域近岸海域環(huán)境質量監(jiān)測點位的樣品采集，可在點位及附近區(qū)域直接采集；其中臨岸近岸海域環(huán)境質量監(jiān)測點位樣品采集也可在臨近區(qū)域的潮間帶或養(yǎng)殖場等采集。對監(jiān)測點位附近不能采集到樣品時，應注明實際情況。潮間帶區(qū)域的貝類應定點采集；潮下帶和近岸海域的貝類、魚、蝦、藻類樣品在當?shù)仞B(yǎng)殖場、漁船、漁港采集。樣品數(shù)量貝類采集體長大致相似的個體約1.5kg；藻類取樣量約100g；甲殼類、魚類等生物的2取樣量約1.5kg，以保證足夠數(shù)量（一般需要100g肌肉組織）的完好樣品用于分析測定。采集到的樣品現(xiàn)場用海水沖洗干凈。用于細菌學指標檢測的樣品，采樣全過程嚴格執(zhí)行無菌操作。采用現(xiàn)場采平行樣分析生物體污染濃度分布范圍時，應采集現(xiàn)場平行樣，樣品數(shù)量應滿足分析要求的需要。樣品的保存與運輸樣品保存（-10℃～-20℃測定；用于細菌學指標檢測的樣品，放入冰瓶冷藏（0℃～4℃）24h。樣品運輸樣品采集后，若長途運輸，需把樣品放入冰箱中，始終讓其處于低溫狀態(tài)并防止沾污。生物質量樣品的制備貽貝樣的制備用塑料刀或塑料刷除去貝殼外部所有的附著物。用蒸餾水或清潔的海水漂洗每一個貽用蒸餾水或清潔的表層海水洗貝殼內的軟組織，用塑料刀和鑷子取出軟組織，讓水流盡。于勻漿器中勻化樣品，將勻漿樣放回原塑料容器，再稱重，并記錄總重量，計算勻漿重。貼上樣品標簽，待測或冷凍保存。甲殼類樣品的制備用塑料刀將腹部與頭胸部及尾部分開，小心將其內臟從腹部取出，腿全部切除。將腹部翻下，用塑料刀沿腹部外甲邊緣切開，用塑料鑷子取下內側外甲并棄去。用另一把塑料刀松動腹部肌肉，并用鑷子取出肌肉。用鑷子將肌肉移入塑料容器中，稱重并記錄鮮重。蓋緊容器，貼上樣品標簽，待測或冷凍保存。中小型魚樣制備用蒸餾水或清潔表層海水洗滌魚樣，將它放在工作臺上，用塑料刀切除胸鰭并切開背鰭附近自頭至尾部的魚皮。在鰓附近和尾部，橫過魚體各切一刀；在腹部，鰓和尾部兩側各切一刀。四刀只切在魚體一側，且不得切太深，以免切開內臟，沾污肉片。用鑷子將魚皮與肉片分離，謹防外表皮沾污肉片。用另一把塑料刀將肌肉與脊椎分離，并用鑷子取下肌肉。將組織盛于塑料容器中，稱重并記錄重量。若一側的肌肉量不能滿足分析用量，取另一側肌肉補充。用勻漿器勻化魚組織，將勻漿轉入已知重量的塑料容器中，蓋緊，并稱重，記下勻漿重和其他數(shù)據(jù)。貼上樣品標簽，待測或冷凍保存。3大型魚樣制備若必要，將冷凍的樣品放在0℃～4℃冰箱中過夜，使部分解凍以便于切片。用蒸餾水或清潔海水洗滌魚樣，置于清潔的工作臺上。剔除殘存的皮和骨，用塑料刀切去表層，再用另一把塑料刀重復操作一次，留下不受污染的均勻的肌肉組織。將肌肉組織放入塑料容器中，蓋緊，稱重，將全部數(shù)據(jù)記入記錄表，貼上樣品標簽，待測或冷凍保存。生物質量樣品的分析方法選擇監(jiān)測分析方法按照HJ442.1的相關要求選擇。常用現(xiàn)場測試和實驗室分析方法參見附錄A。方法驗證按照HJ442.1的相關要求，在初次使用方法、條件發(fā)生變化時，需要開展方法的驗證或確認并符合相關要求后，方可用于樣品測定。生物質量監(jiān)測質量控制基本要求組織機構、人員、儀器設備等基本要求按照HJ442.1相關規(guī)定執(zhí)行。樣品采集質量控制樣品采集應避免采樣工具對樣品沾污，在獲取單個樣品不足以進行分析時，應采多個生物體用于試樣的制備；運輸和保存需要避免保存容器和保存條件對樣品沾污，同時避免樣品發(fā)生質變。實驗室質量控制實驗室的分析人員自控和實驗室內部他控按以下要求進行。按照要求，開展方法的驗證和確認；生物質量樣品分析質量控制一般采用實驗室平行樣分析、標準樣品分析等方法進行，方法有加標回收率要求的可采用加標回收樣品控制，分析中應注意單個生物體和多個生物體樣品的制備、樣品前處理一致性等；分析人員自控一般采用明碼樣控制，實驗室他控可采用密碼和明碼兩種方式；HJ442.42比例隨機抽取檢查樣，分別另編樣品號，與原樣品同等測試，開展實驗室他控；生物質量樣品平行雙樣（包括抽查樣）的相對偏差允許值，分析方法有要求的按HJ442.43執(zhí)行；每批實驗室平行雙樣合90%70%～90%30%的樣品進行490%50%～70%50%90%50%時，應全部重新分析，直至結果合格為止；報送數(shù)據(jù)時，一般報送每個平行雙樣HJ442.2相關規(guī)定執(zhí)行；實驗室他控每批樣品應插入2～3個海洋生物質量標準物質/標準樣品或質控樣進行分析，用于檢驗有無系統(tǒng)誤差，樣品數(shù)量較少時，不應少于1個；一般按照采用的標準方法要求，以及標準物質/標準樣品或質控樣標準范圍判斷；HJ168和采用的分析方法，確定數(shù)據(jù)有效位數(shù)，確認數(shù)據(jù)有效位數(shù)的最后一位與檢出限有效位數(shù)的最后一位一致，有效數(shù)字位數(shù)與要求一致；HJ442.2相關規(guī)定執(zhí)行。5附錄A（資料性附錄）生物質量監(jiān)測項目分析方法近岸海域生物質量監(jiān)測各項目的分析方法如表A.1所示。表A.1 生物質量監(jiān)測項目分析方法觀測項目推薦的分析方法最多有效位數(shù)小數(shù)點后最多位數(shù)檢出限（量）（w/10-6）采用標準石油烴熒光分光光度法310.2GB17378.6-2007(13)汞冷原子吸收法320.01GB17378.6-2007(5.2)原子熒光法330.002GB17378.6-2007(5.1)測汞儀法3-5×10-6HY/T147.3銅無火焰原子吸收分光光度法310.4GB17378.6-2007(6.1)火焰原子吸收分光光度法312.0GB17378.6-2007(6.3)鎘無火焰原子吸收分光光度法330.005GB17378.6-2007(8.1)鉛無火焰原子吸收分光光度法320.04GB17378.6-2007(7.1)鉻無火焰原子吸收分光光度法320.04GB7378.6-2007(10.1)二苯碳酰二肼分光光度法320.40GB7378.6-2007(10.2)鋅火焰原子吸收分光光度法310.4GB17378.6-2007(9.1)砷氫化物-原子吸收分光光度法310.4GB17378.6-2007(11.3)原子熒光法310.2GB17378.6-2007(11.1)鐵電感耦合等離子體質譜法3-3×10-5～2.8×10-3HY/T147.3-2013（6）六六六氣相色譜法3-3pg～9pgGB17378.6-2007(14)滴滴涕氣相色譜法3-5pg～40pgGB17378.6-2007(14)酞酸酯類化合物氣相色譜/質譜聯(lián)用法3-均為5.0×10-3HY/T147.3-2013（8.1）氣相色譜法3-2.0×10-3和8.0×10-3HY/T147.3-2013（8.2）有機磷農藥氣相色譜法3-3×10-4～4.5×10-3HY/T147.3-2013（9）有機錫氣相色譜法3-3×10-4～6×10-4HY/T147.3-2013（10）6觀測項目推薦的分析方法最多有效位數(shù)小數(shù)點后最多位數(shù)檢出限（量）（w/10-6）采用標準多溴聯(lián)苯醚氣相色譜質譜法3-1×10-5～2×10-5HY/T147.3-2013（11）多氯聯(lián)苯氣相色譜法3-43.1pgGB17378.6-2007（15)氣相色譜質譜法3-0.5μg/kg（定量限）GB5009.190-2014多環(huán)芳烴高效液相色譜法-紫外檢測器3-1.0×10-3～6