醫(yī)學(xué)微生物學(xué)教學(xué)課件：病毒感染的檢查方法與防治原則

病毒感染的檢查方法

與防治原則

第七章第二節(jié)

第二節(jié)病毒感染的檢查p102標(biāo)本的采集與送檢

用于分離培養(yǎng)的標(biāo)本：

a、采集急性期標(biāo)本

b、采集感染部位標(biāo)本

c、冷藏

血清學(xué)診斷的標(biāo)本：急性期和恢復(fù)期雙份血清，-20℃保存一、形態(tài)學(xué)檢查電鏡查病毒或光鏡查細(xì)胞二、病毒的分離培養(yǎng)與鑒定

（一）病毒的分離培養(yǎng)

1.最常用組織細(xì)胞培養(yǎng)

2.雞胚接種：主要用于流感病毒的分離

3.動(dòng)物接種少用：主要用于狂犬病病毒、乙型腦炎病毒的分離常用的細(xì)胞培養(yǎng)（二）病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的指標(biāo)1.細(xì)胞病變

CPE、多核巨細(xì)胞、包涵體2.紅細(xì)胞吸附3.干擾現(xiàn)象：觀察致細(xì)胞病變消失4.中和實(shí)驗(yàn)：觀察致細(xì)胞病變消失5.細(xì)胞代謝改變病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的指標(biāo)正常細(xì)胞病變細(xì)胞①細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落1細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathiceffect,CPE)麻疹病毒感染細(xì)胞呼吸道合胞病毒感染細(xì)胞②形成多核巨細(xì)胞或稱融合細(xì)胞③形成包涵體(inclusionbody)三、病毒數(shù)量和感染性測(cè)定1、蝕斑試驗(yàn)3、ID50

或TCID50

病毒感染雞胚、動(dòng)物或細(xì)胞后，引起50%發(fā)生死亡或病變的最小量。

病毒感染單層細(xì)胞后，產(chǎn)生的局限性病灶，稱蝕斑，蝕斑是由一個(gè)感染性病毒體復(fù)制形成的，稱蝕斑形成單位，病毒懸液中的感染性病毒量以每毫升的蝕斑形成單位PFU來(lái)表示。2、血凝實(shí)驗(yàn)半定量四、病毒成分的檢測(cè)快速診斷（一）檢測(cè)病毒抗原抗體測(cè)病毒感染脫落細(xì)胞或細(xì)胞分泌物中的抗原成分

病毒小瓶快速培養(yǎng)（二）檢測(cè)病毒核酸

PCR試驗(yàn)引物核酸雜交試驗(yàn)探針

基因芯片技術(shù)基因測(cè)序

五、病毒感染的血清學(xué)診斷檢測(cè)血清中的病毒抗體已知抗原測(cè)血清中抗體測(cè)IgM，或動(dòng)態(tài)測(cè)IgG（雙份血清）中和實(shí)驗(yàn)、血凝抑制實(shí)驗(yàn)、ELISA、蛋白印跡病毒感染的檢查檢測(cè)內(nèi)容查病毒查特異性抗體

病毒顆粒病毒抗原病毒核酸病毒酶類(lèi)：如逆轉(zhuǎn)錄酶

電鏡直接觀察光鏡檢查包含體分離培養(yǎng).第八章第二節(jié)

病毒感染的特異性預(yù)防

p112滅活疫苗（inactivatedvaccine）減毒活疫苗（livingvaccine）亞單位疫苗（subunitvaccine）

化學(xué)提取或人工合成疫苗基因工程疫苗

合成肽疫苗、基因工程亞單位疫苗、基因工程載體疫苗基因缺失活疫苗、核酸疫苗（nucleicacidvaccine）遺傳重組疫苗一、人工主動(dòng)免疫常用生物制品二、人工被動(dòng)免疫常用生物制品

丙種球蛋白

血清丙種球蛋白，胎盤(pán)丙種球蛋白

特異性免疫球蛋白

人工被動(dòng)免疫（artificialpassiveimmunization）如：1.血清免疫球蛋白用于甲肝、麻疹、脊髓灰質(zhì)炎預(yù)防

2.高效價(jià)含乙肝病毒表面抗體的免疫球蛋白用于預(yù)防母嬰乙肝傳播

策略：阻斷病毒復(fù)制周期中吸附穿入、

脫殼、核酸復(fù)制、或裝配釋放任一環(huán)節(jié)，從而抑制病毒復(fù)制要求：抗病毒藥物能穿入細(xì)胞選擇性地抑制病毒復(fù)制又不損傷宿主細(xì)胞第三節(jié)病毒感染的治療一、藥物治療

（一）核苷類(lèi)藥物

1.抑制病毒基因復(fù)制碘尿苷(皰疹凈)用異常嘧啶取代胸腺嘧啶,眼皰疹病毒感染。也可滲入細(xì)胞DNA,故有毒性。

無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷(啊昔洛韋)

，競(jìng)爭(zhēng)病毒復(fù)制酶。

2.抑制病毒基因轉(zhuǎn)錄：病毒唑

（二）蛋白酶抑制劑

“雞尾酒”治療HIV，3TC加蛋白酶抑制物

（三）天然藥物：黃芪、板藍(lán)根、大青葉

二、基因治療

1.反義寡核苷酸、反義寡核脫氧核酸(反義RNA、反義DNA)與病毒DNARNA關(guān)鍵基因互補(bǔ)

2.核酶：病毒RNA結(jié)合,切割降解靶RNA

3.感染RNA

三、免疫治療

1.中和抗體（單抗）

2.治療性疫苗

3.干擾素一、藥物治療

1.核苷類(lèi)藥物

2.病毒蛋白酶抑制劑

3.天然藥物如中藥二、基因治療

1.反義寡核苷酸2.核酶3.干擾RNA三、免疫治療

1.中和抗體（單抗）2.治療性疫苗3.干擾素

核苷類(lèi)藥物

非核苷類(lèi)反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑蛋白酶抑制劑