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課題3酵母細(xì)胞的固定化一、選擇題1.酶的固定方法不包括()A.將酶吸附在載體表面上B.將酶相互連接起來C.將酶包埋在細(xì)微網(wǎng)格里D.將酶制成固體酶制劑,如加酶洗衣粉中的酶2.下列說法不正確的是()A.固定化酶和固定化細(xì)胞的方法包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法B.固定化酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法C.由于細(xì)胞個體大,而酶分子很小,因此細(xì)胞多采用物理吸附法固定D.反應(yīng)物是大分子物質(zhì)應(yīng)采用固定化酶3.關(guān)于酵母細(xì)胞活化的說法,不正確的是()A.酵母細(xì)胞活化就是由無氧呼吸變成有氧呼吸B.活化就是讓處于休眠狀態(tài)的細(xì)胞恢復(fù)正常生活狀態(tài)C.酵母細(xì)胞活化所需要的時間較短D.酵母細(xì)胞活化反應(yīng)體積增大4.下列關(guān)于對固定化酶中用到的反應(yīng)柱的理解中,正確的是()A.反應(yīng)液和酶均可自由通過反應(yīng)柱B.反應(yīng)液和酶均不能通過反應(yīng)柱C.反應(yīng)液能通過,酶不能通過D.反應(yīng)液不能通過,酶能夠通過5.下列關(guān)于配制海藻酸鈉溶液的措施,正確的是()A.用酒精燈加熱,加熱中不能攪拌B.由于海藻酸鈉溶解速度快,所以不用加熱C.海藻酸鈉在水中溶解的速度慢,需用酒精噴燈加熱D.采用小火或間斷加熱,促進(jìn)溶解,防止發(fā)生焦糊6.關(guān)于固定化酶中酶的說法,正確的是()A.酶的種類多樣,可催化一系列的酶促反應(yīng)B.酶被固定在不溶于水的載體上,可反復(fù)利用C.酶作為催化劑,反應(yīng)前后結(jié)構(gòu)不改變,所以固定化酶可永遠(yuǎn)利用下去D.固定化酶由于被固定在載體上,所以喪失了酶的高效性和專一性特點7.在制備固定化酵母細(xì)胞的實驗中,CaCl2溶液的作用是()A.用于調(diào)節(jié)溶液pH B.用于進(jìn)行離子交換C.用于膠體聚沉 D.用于為酵母菌提供Ca2+8.下列關(guān)于固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述,正確的是()A.固定化細(xì)胞技術(shù)在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢明顯B.固定化酶應(yīng)用時,要控制好pH、溫度和溶解氧C.利用固定化酶降解水體中有機(jī)磷農(nóng)藥,需提供適宜的營養(yǎng)條件D.利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵,糖類的作用只是作為反應(yīng)底物二、簡答題9.如圖為固定化酶的反應(yīng)柱示意圖,請據(jù)圖回答:(1)請在橫線上填出各標(biāo)號的名稱。①____________,②__________,③_________________________________________。(2)與一般酶制劑相比,固定化酶的突出優(yōu)點是____________________________________________________________________________________________________________;固定化細(xì)胞的優(yōu)點是________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)③的作用是____________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)制作固定化葡萄糖異構(gòu)酶所用的方式有______________或______________。(5)據(jù)圖說出反應(yīng)柱的作用原理。________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。10.根據(jù)下面的實驗原理、實驗過程分析討論相關(guān)問題。實驗原理:麥芽汁可以滲入到由海藻酸鈉和啤酒酵母制成的凝膠珠中。啤酒酵母可以利用自身細(xì)胞內(nèi)的一系列酶將可發(fā)酵的糖轉(zhuǎn)化成乙醇。實驗過程:①取斜面培養(yǎng)基上的新鮮啤酒酵母,接種于10mL麥芽汁液體培養(yǎng)基中,25℃培養(yǎng)24~30h。②取1.6g海藻酸鈉放入無菌小燒杯中,加無菌水少許調(diào)成糊狀,再加入無菌水至40mL,在98kPa條件下滅菌15min。冷卻至45℃左右后,與預(yù)熱至35℃左右的10mL酵母培養(yǎng)液混合攪拌均勻,立即倒入帶噴嘴的無菌小塑料瓶中(或裝有5號針頭的注射器外套中),以恒定的速度滴入盛有葡萄糖、氯化鈣混合液的容器中,浸泡30min制成凝膠珠。③倒去葡萄糖、氯化鈣混合液,用無菌水洗滌凝膠珠三次后,將凝膠珠放入500mL三角瓶中,加入300mL無菌麥芽汁液體培養(yǎng)基,置于25℃下封口發(fā)酵5d左右,倒出發(fā)酵后的麥芽汁即為生啤酒,品嘗其口味。(1)凝膠珠是由什么組成的?它有什么作用?________________________________________________________________________。(2)如果進(jìn)行多批次的生產(chǎn),本實驗中的啤酒酵母與普通發(fā)酵中的酶或菌種在使用上有何區(qū)別?________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)制作成功的凝膠珠應(yīng)用________,其顏色為________。將凝膠珠加入用于發(fā)酵的葡萄糖溶液后,發(fā)現(xiàn)有________產(chǎn)生,同時有________味散發(fā)。參考答案1.D2.C[由于細(xì)胞個體大,酶分子很小,個體大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合,而個小的酶分子容易從包埋材料中漏出。因此,細(xì)胞多采用包埋法固定化,酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化。]3.A6.B[固定化酶不能催化一系列酶促反應(yīng)的進(jìn)行;固定化酶被固定在不溶于水的載體上,可以重復(fù)利用,但是隨著利用次數(shù)的增加,受到外界因素的影響,其活性會逐漸降低;固定化酶具有高效性和專一性的特點。]7.C[海藻酸鈉膠體在CaCl2這種電解質(zhì)溶液的作用下,發(fā)生聚沉,形成凝膠珠,其作用機(jī)理是鹽離子的電荷與膠體微粒電荷相互吸引,形成更大的膠體顆粒,類似于人體紅細(xì)胞與抗凝集素之間的凝集反應(yīng)。]8.A[A項中,固定化細(xì)胞技術(shù)最大的用途就是連續(xù)催化反應(yīng);B項中,不需溶解氧;C項中,不需各種營養(yǎng)條件;D項中,糖類的作用不只是作為反應(yīng)底物。]9.(1)①反應(yīng)柱②固定化酶③分布著小孔的篩板(2)既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,還能被反復(fù)利用成本更低,操作更容易,且能催化一系列的反應(yīng)(3)使酶顆粒無法通過,反應(yīng)溶液卻可以自由出入(4)化學(xué)結(jié)合法物理吸附法(5)反應(yīng)液從反應(yīng)柱的上端注入,使反應(yīng)物溶液流過反應(yīng)柱,與固定化酶接觸,得到的產(chǎn)物從反應(yīng)柱下端流出解析與一般的酶制劑相比,固定化酶不僅能與反應(yīng)物充分接觸,還能與產(chǎn)物分離,并且可以反復(fù)利用;與固定酶化相比,固定化細(xì)胞能催化一系列的化學(xué)反應(yīng),并且固定化細(xì)胞成本更低,操作更容易;使用固定化酶技術(shù)往往利用一個反應(yīng)柱,反應(yīng)柱下端有一個分布著小孔
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