抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢課件

一、毒力回歸方程統(tǒng)計(jì)學(xué)基礎(chǔ)及存在總是一、毒力回歸方程統(tǒng)計(jì)學(xué)基礎(chǔ)及存在總是1死亡率，抑制率等LD50LC50KT50EC50死亡率，抑制率等2LD50統(tǒng)計(jì)分析方法濃度與死亡率的關(guān)系

濃度對數(shù)與死亡率之間的關(guān)系

濃度對數(shù)與機(jī)率值的關(guān)系LD50統(tǒng)計(jì)分析方法濃度與死亡率的關(guān)系濃度3以蜜蜂毒性試驗(yàn)為例說明：(1)

試驗(yàn)濃度設(shè)計(jì)預(yù)備試驗(yàn)：公比5～10正式試驗(yàn)：公比2以蜜蜂毒性試驗(yàn)為例說明：(1)試驗(yàn)濃度設(shè)計(jì)4(2)試驗(yàn)操作(2)試驗(yàn)操作5抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢課件6二、農(nóng)藥混配及其存在的問題分析二、農(nóng)藥混配及其存在的問題分析71、農(nóng)藥混配的目的與原因擴(kuò)大防治譜降低生產(chǎn)成本降低毒性降低農(nóng)藥殘留提高使用安全性提高藥效？1、農(nóng)藥混配的目的與原因擴(kuò)大防治譜？8深層原因：研發(fā)機(jī)構(gòu)實(shí)力：高校、企業(yè)、研究所資金投入：我國5000萬元/年，十一五攻關(guān)計(jì)劃拜耳：1998年，2.86億元孟山都：1998年，3.91億元企業(yè)：不求品牌，快速積累資金風(fēng)險(xiǎn)：成功率低，周期長8~10年，8000萬~1.5億元成功率：70，1/12000；80，1/2000；1996，1/80000深層原因：9過期專利農(nóng)藥：

世界農(nóng)藥銷售額：71%，275億美元中國農(nóng)藥市場：>70%韓國：>50%臺灣：>40%阿根延、西班牙、意大利：>20%法國和英國：>15%德國：>10%美國和加拿大：<10%日本：<5%過期專利農(nóng)藥：102、我國農(nóng)藥混配現(xiàn)狀瑞德豐：2002年，93個農(nóng)藥，73個混劑惠陽中訊：2002年，48個農(nóng)藥，32個混劑中山凱達(dá)：2002年，38個農(nóng)藥，10個原藥，11個混劑江門農(nóng)藥廠：2002年，55個農(nóng)藥，6個原藥，12個混劑2、我國農(nóng)藥混配現(xiàn)狀瑞德豐：2002年，93個農(nóng)藥，73個混11國外在我國登記農(nóng)藥(2002)：農(nóng)藥：636個原藥：83個混劑：38個殺蟲劑混劑：11個國外在我國登記農(nóng)藥(2002)：122、混配制劑的藥液配制問題千坂英雄(1973)等效線相加作用線六等分點(diǎn)設(shè)置5個配比：

5?

1、2?

1、1?

1、1?

2、1?

5

2、混配制劑的藥液配制問題千坂英雄(1973)等效線相加作用13抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢課件14在活性未知的情況下：單劑A和單劑B怎么做？怎么配最快的配制藥液？在活性未知的情況下：15藥劑對黃曲條跳甲成蟲致死毒力藥劑對黃曲條跳甲成蟲致死毒力16魚藤酮與甲維鹽混配組合對黃曲條跳甲成蟲共毒因子測定示范計(jì)算方法？魚藤酮與甲維鹽混配組合對黃曲條跳甲成蟲共毒因子測定示范計(jì)算方17共毒系數(shù)示范及存在問題分析共毒系數(shù)示范及存在問題分析18藥劑A與藥劑B不同配比對小菜蛾3齡幼蟲的增效作用注：a為藥劑A，b為藥劑B。藥劑A與藥劑B不同配比對小菜蛾3齡幼蟲的增效作用注：a為藥劑19表2藥劑A和藥劑B不同配比防治小菜蛾3齡幼蟲的成本比較注：成本數(shù)據(jù)均為同列比較；a為藥劑A，b為藥劑B；A為藥劑A成本；B為藥劑B成本。表2藥劑A和藥劑B不同配比防治小菜蛾3齡幼蟲的成本比較注：20以致死中成本(LM50)統(tǒng)計(jì)共毒系數(shù)結(jié)果注：成本數(shù)據(jù)均為同列比較；a為藥劑A，b為藥劑B；A為藥劑A成本；B為藥劑B成本。以致死中成本(LM50)統(tǒng)計(jì)共毒系數(shù)結(jié)果注：成本數(shù)據(jù)均為同列21不同評價指標(biāo)在CTC中存在的問題高效氯氰菊酯印楝素LC50AFC50CTC不同評價指標(biāo)在CTC中存在的問題高效氯氰菊酯印楝素LC50A22抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢課件23抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢課件24抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢課件25抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢課件26抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢課件27抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢課件28抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢課件29不同量綱單位在CTC中存在的問題BT的活性評價單：毒力效價如8000IU或1600IU或多少億芽孢/g不同量綱單位在CTC中存在的問題BT的活性評價單：毒力效價30三、拒食活性測定及其存在的問題三、拒食活性測定311拒食劑的定義與特點(diǎn)

昆蟲取食過程：對寄主的識別和定位、首次咀嚼、吞咽和繼續(xù)取食。

1拒食劑的定義與特點(diǎn)昆蟲取食過程：對寄主的32拒食劑：通常把能抑制昆蟲取食過程的物質(zhì)稱為拒食劑？把通過外圍神經(jīng)系統(tǒng)改變昆蟲的行為(直接作用于化學(xué)感受器)而引起取食過程受阻的物質(zhì)稱為拒食劑？將抑制昆蟲取食過程中后三個步驟(首次咀嚼吞咽和繼續(xù)取食)的物質(zhì)稱為拒食劑,將影響昆蟲取食過程第一步驟以及干擾昆蟲在寄主上的定著、產(chǎn)卵和棲息(對寄主的識別和定位)的物質(zhì)統(tǒng)稱為忌避劑。拒食劑：通常把能抑制昆蟲取食過程的物質(zhì)稱為拒食劑？33

拒食劑：作用于位于昆蟲觸角、下鄂須或下唇須上的感覺器，干擾了這些感覺器將食物的特性轉(zhuǎn)化為電信號并傳入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，而導(dǎo)致了拒食。特點(diǎn)：抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢(3~6天)低劑量下：少量多次取食高劑量下：僅取食出小刻點(diǎn)，試探性接觸葉片拒食劑：作用于位于昆蟲觸角、下鄂須或下唇須上342拒食劑與其它藥劑的區(qū)別(1)拒食劑與胃毒劑的區(qū)別如BT、有機(jī)磷、氨基甲酸酯等中毒癥狀、取食行為、對植物的保護(hù)效果。2拒食劑與其它藥劑的區(qū)別(1)拒食劑與胃毒劑的區(qū)別如B35(2)拒食劑與忌避劑的差別產(chǎn)卵忌避劑告警信息素水蓼二醛：葉碟、蚜蟲、除去觸角、錄像(2)拒食劑與忌避劑的差別產(chǎn)卵忌避劑36(3)拒食劑與觸殺劑和熏蒸劑的差別鬧花素-Ⅲ茶皂素混滅威擬除蟲菊酯(3)拒食劑與觸殺劑和熏蒸劑的差別鬧花素-Ⅲ37(4)拒食劑與生長發(fā)育調(diào)節(jié)劑的差別印楝素、川楝素幾丁質(zhì)合成抑制劑：定蟲隆昆蟲蛻皮加速劑：抑食肼、米滿(4)拒食劑與生長發(fā)育調(diào)節(jié)劑的差別印楝素、川楝素383拒食劑生物活性測定方法(1)試蟲均一性、齡期(特別如小菜蛾)饑餓處理5~10h一個培養(yǎng)皿1頭蟲，重復(fù)10次以上斜紋夜蛾、小菜蛾、菜青蟲、棉鈴蟲注意操作處理時間3拒食劑生物活性測定方法(1)試蟲均一性、齡期(特別如39抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢課件40(2)供試葉片或材料對植物材料的要求：潔凈、均一、臘質(zhì)、厚度葉碟：處理前保濕、處理后保濕、每皿幾片打孔器及其它設(shè)備(2)供試葉片或材料對植物材料的要求：潔凈、均一、臘質(zhì)、厚41(3)藥劑及試驗(yàn)方法藥液的配制，有機(jī)溶劑和水的比例藥液量、盛藥容器尖頭小鑷子浸葉時間及要求浸葉后處理方式保濕方式防逃逸方法(3)藥劑及試驗(yàn)方法藥液的配制，有機(jī)溶劑和水的比例42(4)處理后再處理方式及時換葉片和濾紙(每隔24g或48h)注意保濕(4)處理后再處理方式及時換葉片和濾紙(每隔24g或48h43(5)拒食活性結(jié)果調(diào)查坐標(biāo)紙法目測法：參照病情指數(shù)方法葉面積測定儀法數(shù)碼相機(jī)法(5)拒食活性結(jié)果調(diào)查坐標(biāo)紙法444拒食活性測定衍生可測指標(biāo)體重增長率驅(qū)避率化蛹率及蛹重羽化率生長發(fā)育抑制率血淋巴含量血細(xì)胞數(shù)量酶活性變化昆蟲免疫力等注意處理時間處理劑量調(diào)查時間癥狀觀察行為觀察4拒食活性測定衍生可測指標(biāo)體重增長率注意處理時間455

拒食率統(tǒng)計(jì)5拒食率統(tǒng)計(jì)46抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢課件47(1)AFC50統(tǒng)計(jì)方法——目測法、最小二乘法和機(jī)率值法LD-P-lineLC50

ED50

EC50

KT50

TLmLD50AFC505

AFC50統(tǒng)計(jì)及其存在的問題(1)AFC50統(tǒng)計(jì)方法——目測法、最小二乘法和機(jī)率值法L48機(jī)率值分析法機(jī)率值分析法49（2）生物學(xué)基礎(chǔ)濃度與死亡率的關(guān)系

濃度對數(shù)與死亡率之間的關(guān)系

濃度對數(shù)與機(jī)率值的關(guān)系

LD-P-line來源于劑量-死亡效應(yīng)關(guān)系（2）生物學(xué)基礎(chǔ)濃度與死亡率的關(guān)系濃度對數(shù)與死亡率之間50正態(tài)分布函數(shù)死亡率機(jī)率值=離方差+5正態(tài)分布函數(shù)死亡率機(jī)率值=離方差+551(3)死亡效應(yīng)的特點(diǎn)試蟲之間相互獨(dú)立，死亡的試蟲不對未死亡的試蟲產(chǎn)生影響；重復(fù)間相互平行，均代表整體；

試蟲死亡具有不可逆性，只存在死和活兩種反應(yīng)，必須先活后死；每重復(fù)的死亡率是群體的死亡率，該群體代表整體；

劑量有累積作用，試蟲的反應(yīng)有積累效應(yīng)。(3)死亡效應(yīng)的特點(diǎn)試蟲之間相互獨(dú)立，死52抑制昆蟲取食殺蟲效果緩慢課件53(4)拒食效應(yīng)的特點(diǎn)

供試生物一直是活體試蟲；在某濃度下，t時間的拒食率對t+

t時間的拒食率有影響；每重復(fù)1頭試蟲，該重復(fù)不代表整體，重復(fù)間拒食率分布頻率呈正態(tài)分布；群體的拒食率是由個體來反應(yīng)；試蟲有適應(yīng)反應(yīng)；由于饑餓，試蟲的取食量可能增大——效應(yīng)可逆性。(4)拒食效應(yīng)的特點(diǎn)供試生物一直是活體試54劑量不積累效應(yīng)不積累？劑量不積累效應(yīng)不積累？55(5)劑量—拒食效應(yīng)逆反實(shí)例

印楝素對斜紋夜蛾3齡幼蟲的拒食活性1)隨著時間的延長和劑量的提高，拒食率降低(5)劑量—拒食效應(yīng)逆反實(shí)例印楝素對斜紋夜蛾3齡幼蟲的拒56印楝素對斜紋夜蛾3齡幼蟲的拒食中濃度

印楝素對斜紋夜蛾3齡幼蟲的拒食中濃度57

1%紫莖澤蘭花石油醚提取物對菜粉蝶4齡幼蟲處理后24h、48h和72h的AFC50值分別為1909.5mg/L、2497mg/L、2234.9mg/L，在3750mg/L的濃度下，菜粉蝶幼蟲處理后24h和48h的取食面積分別為174.4mm2(CK的為463.8mm2)和274.5mm2(CK的為659.0mm2)，而拒食率分別為62.45%和58.3%。1%紫莖澤蘭花石油醚提取物對菜粉蝶4齡幼蟲處理后2458100mg/l的鬧羊花素-III處理菜粉蝶4齡幼蟲，處理后24h和48h，拒食率分別為82.53%和59.55%。

唐古特瑞香乙酸乙酯提取物處理菜粉蝶5齡幼蟲,處理后24h和48h的拒食率分別為90.37%和87.17%，12號茼蒿素類似物對小菜蛾3齡幼蟲處理后24h和48h的選擇性AFC50分別為97.15mg/l和192.74mg/l。

茶皂素對菜粉蝶3齡幼蟲處理后12h和24h的非選擇性AFC50值分別為130.36mg/l和218.40mg/l。100mg/l的鬧羊花素-III處理菜粉蝶459

1%金腰箭葉甲醇提取物處理小菜蛾3齡幼蟲，處理后24h和48h，拒食率分別為75.7%和73.8%。

1%金腰箭氯仿提取物處理菜粉蝶5齡幼蟲，處理后24h和48h，取食面積分別為1.01cm2和6.10cm2，拒食率卻分別為79.2%和54.2%。1%金腰箭葉甲醇提取物處理小菜蛾3齡幼蟲，處602)在同一處理時間下，隨著劑量的提高，拒食率降低

用30mg/l印楝素A浸漬處理甘藍(lán)葉，菜粉蝶幼蟲的取食量近于零并且饑餓而死，而用0.2mg/l印楝素A處理，菜粉蝶幼蟲卻有較大量的取食，雖然前者印楝素含量較高，但后者作用于蟲體的劑量更大。

用1000mg/l和100mg/l的鬧羊花素-III處理菜粉蝶4齡幼蟲，處理后24h，平均取食面積分別為0.06cm2和0.76cm2，后者作用于蟲體的劑量高于前者(0.76

100>0.06

1000)，但前者的拒食率高于后者，前者的為98.62%，而后者的為82.53%。

2)在同一處理時間下，隨著劑量的提高，拒食率降低61(6)劑量—拒食效應(yīng)逆反原因分析

劑量的不累積性

觸殺劑、胃毒劑或熏蒸劑等常規(guī)農(nóng)藥作用于試蟲體內(nèi)的某個組織和器官，如神經(jīng)系統(tǒng)，藥劑進(jìn)入蟲體后在蟲體內(nèi)累積，隨著劑量的提高，對靶標(biāo)的攻擊概率就越大，表現(xiàn)出的生物活性也越強(qiáng)，因此，在毒殺活性測定中，藥劑具有累積作用。(6)劑量—拒食效應(yīng)逆反原因分析劑量的不累積性62

拒食劑主要作用于試蟲的味覺感受器，影響的是試蟲的口感，藥劑通過口器或接觸口器時對試蟲有拒食活性，而藥劑進(jìn)入試蟲體內(nèi)就不再對味覺感受器有影響，藥劑在蟲體內(nèi)積累了，但失去了起拒食作用的靶標(biāo)，也就失去了它們應(yīng)有的拒食作用。

拒食劑主要作用于試蟲的味覺感受器，影響的是試63

如果是拒食效應(yīng)，處理后24h，試蟲體內(nèi)積累了50

g藥劑，試蟲的口器正在接觸2g藥劑，起拒食作用的是試蟲正在接觸的2g藥劑，而不是總共的52g藥劑；如果是死亡效應(yīng)，起毒殺作用的是積累在蟲體內(nèi)的50g藥劑。

如果是拒食效應(yīng)，處理后24h，試蟲體內(nèi)積累了642)拒食效應(yīng)的不累積性

拒食劑對味覺感受器上靶標(biāo)的攻擊結(jié)合是可逆的，試蟲在停止取食一段時間后，拒食劑脫離靶標(biāo)部位，試蟲口器從不適感中恢復(fù)過來，又再次取食，由于前次取食的拒食劑離開了作用靶標(biāo)，后一次取食的拒食劑造成的拒食反應(yīng)不能與前次效應(yīng)累加。這與人對甜味劑或苦味劑的口感相似，人取食黃蓮后一段時間，苦味將消失，再次取食的時候，不會覺得比上次取食更苦。

2)拒食效應(yīng)的不累積性拒食劑對味覺感受651)拒食率分布頻率不是正態(tài)分布函數(shù)

死亡率分布頻率是正態(tài)分布函數(shù)，是指增加單位劑量導(dǎo)致死亡率的增加量。死亡率是整體效應(yīng)。不同試蟲對拒食劑的耐藥性呈正態(tài)分布，然而，拒食率測定的是活蟲的拒食反應(yīng)，在測定中，所有試蟲均起反應(yīng)，拒食率的增加不是由抗性試蟲的反應(yīng)引起的，而是由被拒食劑攻擊的靶標(biāo)數(shù)增加引起的。在個體試蟲內(nèi)，不同靶標(biāo)位點(diǎn)與拒食劑的結(jié)合能力呈正態(tài)分布。以單位劑量攻擊的靶標(biāo)位點(diǎn)數(shù)為一個靶標(biāo)單位，一個靶標(biāo)單位含有眾多靶標(biāo)位點(diǎn)，從生物統(tǒng)計(jì)學(xué)上看，各靶標(biāo)單位之間的性質(zhì)是均一的，即各靶標(biāo)單位對拒食劑的反應(yīng)是一樣的。增加單位劑量引起單位靶標(biāo)位點(diǎn)數(shù)起反應(yīng)，既然各靶標(biāo)單位與拒食劑的結(jié)合能力沒有差異，那么拒食率分布頻率不呈正態(tài)分布。(7)拒食率與劑量之間的關(guān)系討論1)拒食率分布頻率不是正態(tài)分布函數(shù)死亡率662)藥劑濃度與試蟲反應(yīng)(或靶標(biāo)反應(yīng))線性相關(guān)性

與測定拒食活性相似，測定藥劑對試蟲靶標(biāo)的影響時，試蟲在調(diào)查結(jié)果前一直是活體試蟲，因此，藥劑對試蟲體內(nèi)靶標(biāo)(如酶、蛋白質(zhì)、血糖等)的影響與拒食劑對感受器靶標(biāo)的影響的性質(zhì)相似。2)藥劑濃度與試蟲反應(yīng)(或靶標(biāo)反應(yīng))線性相關(guān)性67

10

g/頭、5g/頭、3g/頭和1g/頭的鬧羊花素-III處理菜粉蝶齡幼蟲，處理后24h，試蟲血淋巴降低率為58.77%、48.62%、43.53%和39.57%，藥劑濃度與血淋巴降低率的線性相關(guān)系數(shù)為0.