腸溶型飼料添加劑甘氨酸亞鐵的制備與表征

腸溶型飼料添加劑甘氨酸亞鐵的制備與表征舒緒剛;林羽;胡洪超;付志歡;龔圣【摘要】以聚丙烯酸樹(shù)脂為腸溶衣材料,以滑石粉為抗黏劑,采用底噴法制備了腸溶型甘氨酸亞鐵微丸.利用響應(yīng)曲面法和正交實(shí)驗(yàn)探究腸溶包衣液的最佳處方和工藝參數(shù)?采用傅里葉變換紅外光譜(FTIR)、聚焦離子束-掃描電子顯微鏡(FIB-SEM)及智能溶出儀進(jìn)行表征.結(jié)果表明:當(dāng)包衣液中聚丙烯酸樹(shù)脂的質(zhì)量濃度為0.0592g/mL、抗黏劑質(zhì)量濃度為0.0313g/mL時(shí)，在模擬腸液環(huán)境下微丸的釋放率達(dá)到95.5%.在風(fēng)機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)頻率為17Hz、供液轉(zhuǎn)速為8r/min、物料溫度為43°C、包衣操作時(shí)長(zhǎng)為0.5h條件下，微丸顆粒的完整率達(dá)到96.7%.由FTIR分析可知,微丸的藥效結(jié)構(gòu)完整?由SEM、FIB-SEM觀察可知，在制備的腸溶衣微丸中,載藥衣、隔離衣、腸溶衣的厚度分別為187.8、38.8、668.6nm,且結(jié)構(gòu)規(guī)整均勻.期刊名稱】《華南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》年(卷),期】2019(051)002【總頁(yè)數(shù)】7頁(yè)(P27-33)【關(guān)鍵詞】腸溶劑型;甘氨酸亞鐵;體外釋放;結(jié)構(gòu)表征;響應(yīng)面法【作者】舒緒剛;林羽;胡洪超;付志歡;龔圣【作者單位】仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院,廣州510225;仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院,廣州510225;仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院,廣州510225;仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院,廣州510225;仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院,廣州510225【正文語(yǔ)種】中文【中圖分類】O63;TQ02鐵（Fe）是一種重要的礦物質(zhì)元素，是血紅素蛋白和神經(jīng)元氧化代謝的重要組成部分［1］.鐵元素對(duì)于幼畜的生長(zhǎng)發(fā)育很重要，例如常見(jiàn)的缺鐵性貧血在嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致死亡［2-4］.氨基酸螯合鐵具有較好的化學(xué)穩(wěn)定性和流動(dòng)性，在腸道中可被高效地吸收利用，且對(duì)改善機(jī)體貧血和增強(qiáng)免疫能力發(fā)揮作用［5-8］.甘氨酸是氨基酸中分子量最小的物質(zhì)，其結(jié)構(gòu)與血紅素相似，具有對(duì)胃腸道刺激性小以及較高的吸收利用率等優(yōu)點(diǎn)［9-10］.動(dòng)物體內(nèi)的鐵元素主要在十二指腸和空腸中被吸收［11］.微丸是一種粒徑為2.5mm的球形口服制劑［12-13］，可根據(jù)需要制備緩釋制劑［14-17］.薄膜包衣的應(yīng)用廣泛，通過(guò)霧化包衣液并均勻噴覆于制劑表面，從而形成塑性薄膜［18］，腸溶衣膜是薄膜包衣的一種，耐酸，在進(jìn)入腸道后可溶解釋放出藥物［19］.目前的研究主要是改善適口性［20］、發(fā)揮最大藥效［21］以及提高亞鐵離子穩(wěn)定性［22］.本文采用底噴法對(duì)傳統(tǒng)的甘氨酸亞鐵進(jìn)行劑型改造，探究最佳的包衣處方和工藝參數(shù)，以期提高腸溶型甘氨酸亞鐵在腸液吸收中的利用率.1實(shí)驗(yàn)部分試驗(yàn)材料甘氨酸亞鐵（質(zhì)量分?jǐn)?shù)為19.5%，廣州天科生物科技有限公司）、蔗糖丸芯（藥用級(jí)，海寧維晶藥用輔料技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司）、聚丙烯酸樹(shù)脂口（腸溶二號(hào)）與聚丙烯酸樹(shù)脂皿（腸溶三號(hào)）（藥用級(jí)，西安悅來(lái)醫(yī)藥科技有限公司）、羥丙甲基纖維素與鄰苯二甲酸丁二酯（分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠）.儀器與設(shè)備多功能制粒機(jī)（DPL，重慶精工制藥機(jī)械有限責(zé)任公司）、智能溶出儀（RC12AD,天津市天大天發(fā)科技有限公司）、傅里葉變換紅外光譜儀（Spectrum100型，美國(guó)PerkinElmer公司）、聚焦離子束掃描電子顯微鏡（AURIGACOMPACT,德國(guó)卡爾?蔡司股份公司）.實(shí)驗(yàn)方法腸溶型甘氨酸亞鐵微丸的制備在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.5%的羥丙基甲基纖維素（HPMC沖加入適量甘氨酸亞鐵，將其作為載藥衣；以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.5%的HPMC作為隔離衣；各取3g聚丙烯酸樹(shù)脂口和聚丙烯酸樹(shù)脂皿溶于100mL乙醇，再加入3mL鄰苯二甲酸丁酯（增塑劑）和3g滑石粉（抗黏劑）混合均勻，將混合液作為腸溶衣的包衣液.在包衣裝置預(yù)熱后，將300g蔗糖丸芯（粒徑為0.8~1.18mm）置入機(jī)器，啟動(dòng)排風(fēng)及吸塵裝置，預(yù)熱蔗糖丸芯，使其受熱均勻，以去除吸附的細(xì)粉；開(kāi)啟壓縮泵，調(diào)節(jié)風(fēng)機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)頻率及供液轉(zhuǎn)速，將配制好的包衣液噴漿于丸芯表面，形成平整、均勻的膜衣，出料即可獲得成品,微丸的結(jié)構(gòu)示意圖如圖1所示.圖1甘氨酸亞鐵腸溶微丸的結(jié)構(gòu)圖Figure1ThestructureofferrousentericpelletsFe2+含量的測(cè)定采用鄰菲羅啉分光光度法測(cè)定波長(zhǎng)510nm處的吸光度，計(jì)算微丸中Fe2+的質(zhì)量濃度（g/L）［23］.1.3.3體外溶出率測(cè)定［24］⑴模擬胃液釋放率的測(cè)定.分別稱取1g待測(cè)樣品加入到含750mL0.1mol/L鹽酸溶液的溶出杯中，待溶出介質(zhì)溫度恒定在（37±0.5）工后，啟動(dòng)儀器，在轉(zhuǎn)速為50r/min條件下運(yùn)行2h，在規(guī)定取樣點(diǎn)取出溶出液5mL，過(guò)濾.自取樣至過(guò)濾操作應(yīng)在30s內(nèi)完成.按照鄰菲羅啉法計(jì)算樣品在酸中的溶出率?（2）模擬腸液釋放率的測(cè)定.上述酸液中加入溫度為（37±0.5）工的250mLNa3PO4溶液（0.2mol/L，必要時(shí)用2mol/L鹽酸溶液或2mol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)pH6.8)，繼續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)45min，其余步驟與⑴同.1.3.4FIB-SEM觀察將樣品放入儀器樣品室內(nèi)，待真空度達(dá)到要求后，在放大倍數(shù)為2萬(wàn)倍、工作距離為1.8nm、電壓為3.00kV的條件下觀察.1.3.5傅里葉變換紅外光譜測(cè)定采用KBr壓片法測(cè)試紅外光譜，并分析確定樣品的結(jié)構(gòu)，以考察羥丙甲基纖維素對(duì)甘氨酸亞鐵結(jié)構(gòu)的影響.測(cè)試條件：掃描次數(shù)為50,波數(shù)分辨率為16cm-1,波數(shù)范圍500-4000cm-1,光闌延遲為10s.2結(jié)果與討論2.1響應(yīng)曲面法優(yōu)化腸溶包衣液處方由于聚丙烯酸樹(shù)脂口與聚丙烯酸樹(shù)脂皿的性質(zhì)存在差異，導(dǎo)致不同濃度條件下會(huì)影響包衣效果和內(nèi)層藥液的釋放.同時(shí)，抗粘劑的加入避免了在包被過(guò)程中微丸粘連和結(jié)塊的現(xiàn)象，但是樹(shù)脂的加入濃度會(huì)影響膜衣的機(jī)械性能及水溶性物質(zhì)的滲透速率[25].考慮這些影響因素(表1)，探究最佳的包衣處方(表2).表1因素水平Table1Factorlevels編碼水平AB/?mL-1)C/?mL-1)-10.5:10.040.0301:10.060.0412:10.080.05注：A為包衣液中聚丙烯酸樹(shù)脂口與聚丙烯酸樹(shù)脂皿的質(zhì)量比；B為包衣液質(zhì)量濃度；C為抗黏劑的質(zhì)量濃度.表2腸溶衣包衣處方試驗(yàn)設(shè)計(jì)及試驗(yàn)結(jié)果Table2Thetestdesignandresultsofentericcoatingprescriptions序號(hào)AB/(g?mL-1)C/(g?mL-1)Y1/%Y2/%120.040.043591210.060.042492310.060.042192410.060.04229450.50.080.041975610.060.042290710.080.031977810.040.032289920.060.0527871010.080.0517751120.060.0329871210.040.053490130.50.040.043791140.50.060.0327881520.080.0416771610.060.042391170.50.060.053286注：A為包衣液中聚丙烯酸樹(shù)脂口與聚丙烯酸樹(shù)脂皿的質(zhì)量比；B為包衣液質(zhì)量濃度；C為抗黏劑的質(zhì)量濃度;Y1和Y2分別微丸在模擬胃液、模擬腸液中的溶出率.以大鼠為模型的研究表明，各個(gè)消化器官對(duì)鐵的吸收能力不同，相對(duì)強(qiáng)弱為：十二指腸〉回腸〉小腸中段>胃［26］.更有研究［27］表明：機(jī)體的十二指腸是吸收Fe2+的主要部位.本實(shí)驗(yàn)通過(guò)模擬胃腸液環(huán)境檢測(cè)樣品微丸的釋放情況，依次估算動(dòng)物機(jī)體對(duì)樣品微丸的吸收情況?利用DesignExpert8.0.6統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，得到響應(yīng)面試驗(yàn)?zāi)Ｐ突貧w系數(shù)及顯著性檢驗(yàn)結(jié)果(表3)，并對(duì)各因素線性回歸以及回歸擬合，得到包衣處方的回歸方程.胃液溶出率(Y1):Y1=29.8-9B+1.5C-0.75AB-3.75AC-0.75BC-1.03A2-1.53B2-4.02C2；腸液溶出率(Y2):Y2=89.4-1.75A-8.25B-1.25C+1.25AB+2.25AC+0.25BC+0.92A2-5.58B2-1.07C2.在模擬腸液試驗(yàn)(表3)中，PvO.OOO1,失擬性P=0.1008v0.05，表3中F值越大說(shuō)明影響越顯著，從兩者分析可知其實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ途哂袠O顯著性，失擬性不顯著.結(jié)果表明，在本試驗(yàn)條件范圍內(nèi)，各因素具有較強(qiáng)的相互作用.各因素對(duì)腸液溶出率影響強(qiáng)弱順序?yàn)锽>A>C,在兩因素交互影響的分析中，BC>AB，且對(duì)腸液溶出率影響顯著(PvO.05).則AC對(duì)腸液溶出率無(wú)顯著影響(P>0.05).表3模型回歸系數(shù)顯著性檢驗(yàn)結(jié)果Table3Theanalysisofvarianceforthefittedregressionmodel方差來(lái)源各因素平方和自由度均方FP模型752.53983.7644.42v0.0001**A24.50124.5012.990.0087**B544.501544.50288.75v0.0001**C12.50112.506.630.0368*AB6.2516.253.310.1115AC20.25120.2510.740.0135*BC0.2510.250.130.7265A22.8712.871.520.2575B2135.601135.6071.91v0.0001**C25.8115.813.080.1226殘差13.2071.89--失擬10.0033.334.17-誤差3.2040.80--總和767.0616---注:*表示極顯著(PvO.01)；*表示顯著(PvO.O5).由各因素交互作用對(duì)腸液溶出率的響應(yīng)面(圖2)可知，圖中等值線圖較緊密、響應(yīng)面較陡峭的情況表明腸液溶出率對(duì)響應(yīng)面變化較靈敏.BC和AB的等高線較為緊密，響應(yīng)面較陡峭，影響顯著(P<0.05).AC的等高線較為疏松，且響應(yīng)面較平緩，無(wú)顯著影響.這些結(jié)果與模型系數(shù)顯著性檢測(cè)結(jié)果一致.最終確定最佳的工藝處方：包衣液中聚丙烯酸樹(shù)脂II和III的質(zhì)量比為1：1,聚丙烯酸樹(shù)脂的質(zhì)量濃度為0.0592g/mL,抗黏劑的質(zhì)量濃度為0.0313g/mL.圖2各個(gè)因素對(duì)腸液溶出率的等高線和響應(yīng)面圖Figure2Thecontourlineandresponsesurfaceplotofvariousfactorsonintestinaljuicedissolutionrate增塑劑用量的影響腸溶包衣液按照包衣液中聚丙烯酸樹(shù)脂II和III的質(zhì)量比為1:1、包衣液中聚丙烯酸樹(shù)脂的質(zhì)量濃度為0.0592g/mL、抗黏劑的質(zhì)量濃度為0.0313g/mL的處方配好后，分別加入不同體積的對(duì)苯二甲基二丁酯(增塑劑)，使增塑劑在總?cè)芤褐械捏w積分?jǐn)?shù)分別為2%、3%、4%、5%、6%，探究體積分?jǐn)?shù)對(duì)包衣液流動(dòng)性的影響(圖3)，進(jìn)而研究其對(duì)包衣過(guò)程的影響.在最佳的包衣液處方及工藝條件下，增塑劑的體積分?jǐn)?shù)為4%時(shí)，在較短的時(shí)間內(nèi)可制備出包衣良好的樣品.圖3增塑劑體積分?jǐn)?shù)對(duì)包衣液黏度的影響Figure3Theeffectofplasticizerdosageonviscosityofcoatingliquid包衣工藝參數(shù)對(duì)樣品完整率的影響將各層包衣液依次包被在蔗糖丸芯上，其中影響包衣效果的主要因素是物料溫度、風(fēng)機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)頻率和供液轉(zhuǎn)速.當(dāng)包衣制備條件不合適時(shí)，最明顯的現(xiàn)象是結(jié)塊現(xiàn)象.工藝條件的正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表4.表4工藝條件的正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果Table4Theorthogonaltestdesignandresultsofprocessconditions序號(hào)風(fēng)機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)頻率/Hz物料溫度/°C供液轉(zhuǎn)速/（「min-1）完整量/g包衣時(shí)間/h完整率：時(shí)間/（%巾-1）115.0037.006.002600.751.16215.0039.008.002550.701.21315.0041.0010.002450.601.36415.0043.0012.002400.551.45516.0037.008.002500.651.28616.0039.006.002650.701.26716.0041.0012.002400.451.78816.0043.0010.002600.551.58917.0037.0010.002450.551.481017.0039.0012.002650.501.771117.0041.006.002800.651.441217.0043.008.002900.501.931318.0037.0012.002500.402.081418.0039.0010.002600.451.931518.0041.008.002700.501.801618.0043.006.002850.601.58K15.186.005.44K25.906.176.22K36.626.386.35K47.396.547.08R2.210.541.64注：完整量即包被完整量（投入質(zhì)量-結(jié)塊質(zhì)量）.完整率根據(jù)包被完整率與包衣時(shí)間粗略判斷合適的工藝條件，得到最佳的工藝條件為風(fēng)機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)頻率為17Hz，供液轉(zhuǎn)速為8r/min，物料溫度為43C.在包被0.5h時(shí)，微丸的完整率可達(dá)96.7%（90g/300gx100%=96.7%）.微丸的體外溶出效果2.4.1體外溶出率的檢測(cè)結(jié)果在最佳工藝處方條件下制備了10g樣品微丸，檢測(cè)其體外溶出率，隨著時(shí)間的推進(jìn)，在模擬胃液中0~1.0h釋放質(zhì)量逐漸增加，進(jìn)入模擬腸液環(huán)境1.5h后釋放率達(dá)到88.7%，隨后其溶出速率降低，在3.0-3.5h時(shí)溶出速率趨于平穩(wěn)，釋放率達(dá)到95.5%.10g樣品溶出液中Fe2+質(zhì)量為0.214g，則290g樣品中Fe2+的總質(zhì)量為6.206g.其體外溶出率為95.5%，微丸樣品在模擬的腸液環(huán)境中得到較大程度的釋放.2.4.2包封率的測(cè)定將甘氨酸亞鐵35g投入到100mL羥丙基甲基纖維素的水溶液中，作為載藥衣溶液?其中投入的Fe元素質(zhì)量為6.825g（35x19.5%）,腸溶甘氨酸亞鐵微丸中鐵元素質(zhì)量為6.500g，則包封率為95.2%.包封率圖4腸溶甘氨酸亞鐵的體外累計(jì)溶出率Figure4Theinvitrocumulativereleaserateofentericglycineferrous紅外光譜分析甘氨酸亞鐵在包被隔離衣前后2個(gè)樣品的紅外光譜如圖5所示.甘氨酸亞鐵在1620cm-1和1404cm-1處的峰分別為羧酸鹽反對(duì)稱伸縮振動(dòng)和對(duì)稱伸縮振動(dòng)的特征峰，且均在波數(shù)517cm-1處出現(xiàn)Fe—N的伸縮振動(dòng)［28］，說(shuō)明包衣液對(duì)甘氨酸亞鐵無(wú)破壞作用?在波數(shù)3495cm-1處出現(xiàn)甘氨酸亞鐵的特征峰，在2638cm-1和2669cm-1處的峰是羧酸鹽中-OH的吸收峰，包被后的樣品在1095cm-1處的譜峰是羥丙甲基纖維素中伯醇的特征吸收峰，說(shuō)明甘氨酸亞鐵已被成功包被，并且包被后沒(méi)有破壞甘氨酸亞鐵的結(jié)構(gòu).圖5甘氨酸亞鐵與載藥微丸的紅外光譜Figure5Theinfraredspectrumofferrousglycinateanddrug-loadedpelletsFIB-SEM分析樣品通過(guò)顯微鏡觀察表觀結(jié)構(gòu)，其包被均勻，顆粒呈規(guī)則球形?由FIB-SEM的切面圖（圖6）可知，最內(nèi)層是35%甘氨酸亞鐵載藥衣（厚度為187.8nm），由于接觸蔗糖丸芯，其膜衣內(nèi)含有些許殘留的蔗糖細(xì)粉，第二層為厚度為38.8nm的隔離衣，可保護(hù)甘氨酸亞鐵不受腸溶包衣液的影響［29］.最外層是厚度為668.6nm的腸溶衣，加入滑石粉，膜衣出現(xiàn)部分空隙，改善水溶性物質(zhì)的釋放率，使甘氨酸亞鐵在模擬腸液環(huán)境下釋放率達(dá)到95.5%.微丸層次分明，包被效果好.圖6甘氨酸亞鐵腸溶微丸的FIB-SEM圖Figure6TheFIB-SEMimageofglycineferrousentericpellets3結(jié)論以蔗糖丸芯為空白丸芯、甘氨酸亞鐵和羥丙甲基纖維素溶液為載藥衣、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.5%的羥丙甲基纖維素水溶液為隔離衣、聚丙烯酸樹(shù)脂口(腸溶二號(hào))和聚丙烯酸樹(shù)脂皿(腸溶三號(hào))混合溶液為腸溶衣材料，制備了腸溶型甘氨酸亞鐵?通過(guò)對(duì)制備過(guò)程的探究表明：(1)當(dāng)包衣液中聚丙烯酸樹(shù)脂II和III的質(zhì)量比為1:1、包衣液中聚丙烯酸樹(shù)脂的質(zhì)量濃度為0.0592g/mL、抗黏劑(滑石粉)的質(zhì)量濃度為0.0313g/mL、增塑劑體積分?jǐn)?shù)為4%時(shí)，微丸的體外溶出率達(dá)95.5%.(2)工藝條件：風(fēng)機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)頻率為17Hz、供液轉(zhuǎn)速為8r/min、物料溫度為43°C時(shí)，在包被0.5h時(shí)微丸的完整率可達(dá)96.7%.(3)由體外釋放率結(jié)果可知，在模擬腸液中，微丸藥芯甘氨酸亞鐵的釋放率為95.5%.(4)由FTIR分析可知，隔離衣對(duì)甘氨酸亞鐵結(jié)構(gòu)無(wú)影響，且能保護(hù)藥芯不受腸溶衣液的影響.(5)利用FIB-SEM對(duì)微丸切面觀察可知，制備的微丸中載藥衣、隔離衣、腸溶衣的厚度分別為87.8、38.8、668.6nm，微丸的三層結(jié)構(gòu)分明.本文研究結(jié)果對(duì)補(bǔ)鐵劑的新劑型研發(fā)具有一定的參考價(jià)值，微丸的補(bǔ)鐵效果將在后續(xù)的動(dòng)物飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行考證.參考文獻(xiàn)：【相關(guān)文獻(xiàn)】OLIVEIRAF,ROCHAS,FERNANDES.IronMetabolism:fromhealthtodisease[J].JournalofClinicalLaboratoryAnalysis,2014,28(3):210-218.SVOBODAM,DRABEKJ,KREJCIJ,etal.ImpairmentoftheperipheralLymphoidcompartmentiniron-deficientpiglets[J].JournalofVeterinaryMedicineSeriesB,2004,51(5):231-237.ETTLET,SCHLEGELP,ROTHFX.Investigationsonironbioavailabilityofdifferentsourcesandsupplylevelsinpiglets[J].JournalofAnimalPhysiologyandAnimalNutrition,2008,92(1):35-43.孫效名，吳信，印遇龍，等?幼齡動(dòng)物鐵吸收及其調(diào)控[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2012,24(6):1001-1006.SUNXM,WUX,YINYL,etal.IronabsorptionanditsregulationintheNeonate[J].ChineseJournalofAnimalNutrition,2012,24(6):1001-1006.VEGARUEGE,LANGSRUDT,SVENNINGC.Mineral-bindingmilkproteinsandpeptides;occurrence,biochemicalandtechnologicalcharacteristics[J].BritishJournalofNutrition,2000,84:91-98.PETERSJC,MAHANDC.Effectsofneonatalironstatus,ironinjectionsatbirth,andweaninginyoungpigsfromsowsfedeitherorganicorinorganictraceminerals[J].JournalofAnimalScience,2008,86(9):2261-2269.HERTRAMPFE,OLIVARRESM.Ironaminoacidchelates[J].InternationalJournalforVitaminandNutritionResearch,2004,74(6):35-43.ASHMEADHD.Theabsorptionandmetabolismofironaminoacidchelate[J].ArchivosLatinoamericanosDeNutricion,2001,51:13-21.SINGHAK,GHOSHTK,HALDARS.Effectsofmethioninechelate-oryeastproteinatebasedsupplementofcopper,iron,manganeseandzinconBroilergrowthperformance,theirdistributionintheTibiaandexcretionintotheenvironment[J].BiologicalTraceElementResearch,2015,164(2):253-260.馬文強(qiáng)?甘氨酸亞鐵螯合物的腸道吸收特點(diǎn)及其生物學(xué)效應(yīng)研究[D].杭州：浙江大學(xué),2010.MAWQ.Intestinalabsorptioncharacteristicsofferrousglycinatechelateanditsbiologicaleffects[D].Hangzhou:ZhejiangUniversity,2010.錢方，蔣雪濤,王安文?微丸的進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志,1996⑴:41-46.QIANF,JIANGXT.Recentadvancesinpellets[J].ChineseJournalofPharmaceuticals,1996(1):41-46.劉元江，李高，沈靈佳，等.微丸輔料研究進(jìn)展[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2008,27(5):564-567.黃涓涓，謝俊，黃春玉，等.膜控型微丸的研究與應(yīng)用進(jìn)展[J].藥學(xué)與臨床研究,2011,19(1):42-46.HUANGJJ,XIEJ,HUANGCY,etal.Developmentoffilm-controlledPelletsinresearchandapplication[J].PharmaceuticalandClinicalResearch,2011,19(1):42-46.謝博媛，李國(guó)明，劉聰，等?拉米夫定-海藻酸鈉/殼聚糖核殼結(jié)構(gòu)微球的制備及釋藥性能[J].華南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2015,47(4):46-51.XIEBY,LIGM,LIUC,etal.PreparationofLamivudine-sodiumalginate/chitosancore-shellmicrospheresandthedrug-releaseperformance[J].JournalofSouthChinaNormalUniversity(NaturalScienceEdition),2015,47(4):46-51.馮淑瑩，李國(guó)明，侯瓊，等?金雀異黃素/殼聚糖微球的制備及其釋藥性能[J]?華南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2013,45(5):64-67.FENGSY,LIGM,HOUQ,etal.Preparationofgenistein-chitosanmicrospheresandtheirdrug-releasingperformances[J].JournalofSouthChinaNormalUniversity(NaturalScienceEdition),2013,45(5):64-67.程利霞，李國(guó)明,錢程根，等.那格列奈殼聚糖微球的制備及其釋放性能[J].華南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2013,45(3):68-72.CHENGLX,LIGM,ZHANGCG,etal.Studyonpreparationsandpropertiesofnateglinide-chitosandrug-loadingmicrospheres[J].JournalofSouthChinaNormalUniversity(NaturalScienceEdition),2013,45(3):68-72.劉聰,李國(guó)明，林躍，等.鹽酸阿米替林/殼聚糖微球的制備[J].華南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2008(4):81-86.LIUC,LIGM,LINY,etal.Preparationofamitriptylinehydrochloride-chitosanmicrospheres[J].JournalofSouthChinaNormalUniversity(NaturalScienceEdition),2008(4):81-86.李海杰.腸溶緩釋薄膜性能的研究及其應(yīng)用[D].杭州：浙江大學(xué),2014.LIHJ.Studyonpropertiesandapplicationsofenteric-coatedsustained-releasefilms[D].Hangzhou:ZhejiangUniversity,2014.THOMSONAB,SHAVERC,LEEDJ,etal.Effectofvaryingironstoresonsiteofintestinalabsorptionofcobaltandiron[J].AmericanJournalofPhysiology-LegacyContent,1971,220(3):674-678.楊軍星，王琦，王媛媛，等?雙重載藥多層海藻酸鹽-殼聚糖緩釋微球的制備及體外釋放[J].高等