液相色譜和原子吸收光譜技術(shù)及其在飼料分析中的應(yīng)用

液相色譜和原子吸收光譜技術(shù)及其在飼料分析中的應(yīng)用張麗英中國農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部飼料效價與安全監(jiān)督檢驗測試中心（北京）主要內(nèi)容飼料質(zhì)量安全監(jiān)控內(nèi)容飼料分析主要技術(shù)手段液相色譜技術(shù)及其應(yīng)用原子吸收光譜技術(shù)及其應(yīng)用飼料分析的內(nèi)容質(zhì)量指標

常規(guī)成分（水分、粗蛋白等）、微量成分（氨基酸、維生素、微量元素）加工指標等安全指標重金屬生物安全性(病原微生物,GMO及動物源性成分)生物毒素(天然毒素和次生毒素)環(huán)境污染物農(nóng)藥殘留及獸藥其他非法添加物質(zhì)飼料分析主要技術(shù)手段

常規(guī)分析技術(shù)高級分析技術(shù)

常規(guī)分析技術(shù)（1）指根據(jù)化學(xué)滴定（酸堿滴定、氧化還原滴定和電位滴定等）、比色法、重量法和酶消化法等分析原理，借助常規(guī)儀器器皿進行的分析。常規(guī)分析適合于飼料中大量成分的準確定量、定性分析，分析成本低、易操作掌握、重復(fù)性好等有點，易普及

常規(guī)分析技術(shù)及發(fā)展趨勢（2）用途飼料物理性狀常規(guī)養(yǎng)分添加劑原料加工指標發(fā)展趨勢標準與國際接軌工作效率和準確提高操作安全性高級分析技術(shù)前處理技術(shù)分離測定技術(shù)前處理技術(shù)樣品采集與制備

樣品的消解

（干法、濕法、微波）

樣品水解（酸、堿、酶）樣品提取

（液-液萃取、索氏提取法、超聲波提取、固相萃取、快速溶劑萃取等）樣品的凈化

（層析、蛋白沉淀、絡(luò)合掩蔽法、透析）濃縮與富集（旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、氮吹儀、真空離心）化學(xué)衍生化

分離測定技術(shù)色譜技術(shù)

光譜技術(shù)色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)電泳技術(shù)PCR和ELISA

液相色譜技術(shù)近代分析化學(xué)中發(fā)展最快、應(yīng)用最廣的分離技術(shù)。在動物營養(yǎng)領(lǐng)域發(fā)揮越來越重要的作用（氨基酸、維生素、抗生素、藥物、小肽、低聚糖等）具有分離效率高、分析速度快和應(yīng)用范圍廣泛的特點。適合于高沸點、大分子、強極性和熱穩(wěn)定性差的化合物的分離分析HPLC

液相色譜儀結(jié)構(gòu)類型(續(xù))流動相分離柱樣品液檢測器液相色譜儀器結(jié)構(gòu)(續(xù))

儲液器與流動相檢測器高壓輸液泵及梯度洗脫裝置進樣器色譜柱柱箱其他：脫氣裝置等檢測器紫外-可見檢測器固定波長、可變波長和光電二極管陣列。1ng。熒光檢測器激發(fā)波長和吸收波長。比紫外靈敏1-2個數(shù)量級示差折光檢測器折射率，恒溫電化學(xué)檢測器電導(dǎo)檢測器（離子測定）和安培檢測器（能氧化還原的物質(zhì)測定）蒸發(fā)光散射檢測器蒸發(fā)室散射光強度色譜柱空心柱管+濾片+螺帽固定相柱規(guī)格：柱長直徑填料類型及粒度使用注意事項

溫度和壓力樣品雜質(zhì)（可使用保護柱）流動相變化流動相適宜（100%無機相，PH）保存時氨基酸分析分析儀器

HPLC

氨基酸專用分析儀樣品前處理方法

酸水解氧化水解堿水解維生素分析維生素添加劑分析飼料中維生素的分析

原子吸收光譜技術(shù)原子吸收光譜法又稱原子吸收分光光度法，簡稱原子吸收法（AAS）原子吸收光譜法利用的信息是氣態(tài)基態(tài)原子對紫外可見區(qū)電磁波的吸收，主要用于定量分析除少數(shù)的非金屬元素外，直接或間接測定的元素達70多種原子吸收光譜法特點靈敏度高速度快干擾少AAS基本原理

被測量元素化合物在高溫下離解為基態(tài)原子，當元素燈發(fā)出與被測元素特征波長相同的光穿過一定厚度的原子蒸氣時，光的一部分被吸收，通過的光被檢測系統(tǒng)測得。根據(jù)比爾定律求得吸光度或元素含量。原子吸收的定量基礎(chǔ)郎伯-比耳定律A=lgI0/I=KC在一定濃度范圍內(nèi)和測試條件下，當火焰溫度保持不變時，原子吸光度與試液中的待測元素濃度成正比。

光源樣品室分光系統(tǒng)檢測記錄系統(tǒng)原子吸收分光光度計原子吸收光譜儀(HITACHIZ5000)火焰型原子吸收儀器結(jié)構(gòu)

石墨爐型原子吸收儀器

光源

光源應(yīng)能滿足輻射光強度大、穩(wěn)定性好、背景輻射小等

空心陰極燈：單元素燈和多元素燈高頻無極放電燈

蒸汽放電燈空心陰極燈空心陰極燈的陰極為一空心金屬管，內(nèi)壁襯或熔有待測元素的金屬，陽極為鎢、鎳或鈦等金屬，燈內(nèi)充有一定壓力的惰性氣體。

空心陰極燈的特性參數(shù)包括工作電流、預(yù)熱時間、背景、使用壽命等，參數(shù)是與不同元素種類、燈結(jié)構(gòu)及光源的調(diào)制方式有關(guān)。原子化系統(tǒng)作用

使試樣中被測元素形成比率高而十分穩(wěn)定的基態(tài)原子類型火焰原子化系統(tǒng)

樣液噴到火焰中去，在高溫下成為原子蒸汽

無火焰原子化法

在高溫石墨爐中原子化冷原子化系統(tǒng)

用還原劑將待測元素還原成原子狀態(tài)火焰類型空氣-乙炔

用于多數(shù)元素分析氧化亞氮（笑氣）-乙炔溫度高，用于難離解的元素分析如鋁和鋇等空氣-氫氣

溫度低，適合砷和錫等的測定石墨爐原子化系統(tǒng)

將試樣放置在電阻發(fā)熱體上，用