鴨急性、亞急性鎘中毒病理學觀察

鴨急性、亞急性鎘中毒病理學觀察

鎘（簡化第2頁）于1817年發(fā)現。德國f.stromeya在純磷酸樣品中發(fā)現了這種類型的鎘。生物體在水、空氣和土壤中的氮含量、積累和放大中具有重要功能。鎘進入人和畜禽體內的途徑有消化道、呼吸道和皮膚,然后經血液到組織細胞與金屬硫蛋白結合,蓄積于肝、腎中,最終導致成為危害人和畜禽健康的一種有毒的重金屬“污染”元素。1972年FAO和WHO聯(lián)合專家委員會在關于食品污染的毒性報告中,指出鎘中毒僅次于黃曲霉毒素和砷。聯(lián)合國環(huán)境規(guī)劃署1984年提出具有全球意義的12種危險物中,鎘被列為首位。家畜和家禽鎘中毒是由于飼料富含鎘和工業(yè)鎘污染及高鎘的自然環(huán)境引起的,線粒體是鎘損傷的主要細胞器。家禽鎘中毒主要表現為:貧血、生長受阻、產蛋量下降、蛋殼品質降低、孵化率下降和死亡率增加等[8,9,10,11,12,13,14,15]。迄今為止,國內外尚缺乏肉鴨鎘中毒的病理學研究,本文的目的是研究肉鴨鎘中毒的病理學,提供診斷與防制本病的依據。1材料和方法1.1理論飼料的組分3日齡天府肉鴨114只,由四川農業(yè)大學家禽試驗場提供。從家禽試驗場購置的天府肉鴨全價飼料,其營養(yǎng)組成CP(%)22～18,ME(MJ/kg)12.9,Ca(%)0.9、P(AP%)0.55～0.42,Lys(%)1.1～0.85,Met(%)0.5～0.4。1.1.3氯鎘純度98.0%，成都化學試劑廠生產，批號880509日本島津AA—646原子吸收分光光度計。1.2亞急性毒性試驗1.2.1采用濕法消化處理飼料及內臟,日本島津AA—646原子吸收分光光度計測定,基礎日糧中鎘含量為3.5mg/kg,飲水中鎘含量為0。1.2.2將氯化鎘晶體用水溶解配成溶液,給雛鴨每日灌服。1.2.3進行急性毒性試驗,求出其LD50。再用1/10、1/20、1/30LD50劑量作亞急性毒性試驗。1.2.4作亞急性毒性試驗雛鴨,于2、3、4、5周齡采血測定血紅蛋白(Hb)、紅細胞總數(RBC)和紅細胞壓積(PCV)的變化。1.2.5臨診癥狀和病理學觀察:試驗開始后,每日3次觀察臨診癥狀,每周稱重1次,調整服鎘劑量。對發(fā)病死亡和瀕死雛鴨均進行系統(tǒng)的尸體剖檢,并采取心、肝、肺、腎、脾、腦、胰、胸腺、腔上囊、甲狀腺、胃、腸等器官制作石蠟切片,H.E染色。冰凍切片作肪脂染色。亞急性試驗,取心肌、肝、腎各兩例病料,用2.5%戊二醛固定,超薄切片,醋酸雙氧鈾及檸檬酸鉛染色,作透射電鏡觀察。1.2.6對亞急性各組的試驗鴨于死亡和剖檢時,采取肝臟、腎臟烘干,用濕法消化處理,原子吸收分光光度計分別測定其鎘含量。2結果2.1氯化鎘水溶液ld50的計算經準備試驗,將70只雛鴨分為7組,每組10只,每組1次灌服不同劑量(500、417、347、289、241、201、167mg/kg)的氯化鎘水溶液,1周后,用寇氏法計算其LD50為289mg/kg體重。2.1.1死亡達應應引領灌藥20min后開始死亡,1.5～9h死亡達高峰。最急性的倒地而死,急性的表現為精神萎糜、離群、蹲臥、嗜睡,臨死前突然倒地、角弓反張、兩腿蹬踏、口吐白沫、全身抽搐而死。2.1.2其他器官變化右心擴張,病程較長的病例心外膜被覆纖維素薄膜。肺充血或有出血。肝充血,少數病例被覆纖維素薄膜。胃腸卡他。腦充血或有出血。腎充血。其他器官未見明顯異常。詳情見表2。2.1.3病例包膜及腎損害心肌變性,心外膜水腫,少數病例有纖維素及以異嗜性白細胞為主的炎性細胞滲出。肝細胞脂變,肝包膜水腫,少數病例包膜上有纖維素及以異嗜性白細胞為主的炎性細胞滲出。肺漿膜及間質水腫,血管充血,肺泡及三級支氣管內有紅細胞滲出。腸道可見腸壁充血,腸腔可見充滿剝脫的上皮細胞、淋巴細胞、單核細胞、異嗜性白細胞和斷裂的絨毛。大、小腦腦膜水腫,血管充血或有出血,神經元變性。腎充血、變性。其它器官未見顯著病變,詳情見表3。2.2灌藥劑量及時間44只雛鴨隨機分為4組,每組11只,按1/10LD50、1/20LD50、1/30LD50劑量作為試驗組和基礎日糧作為對照組,每日灌服藥一次,試驗期6周。2.1.1試驗鴨主要表現為生長受損、嚴重血血過血1/10、1/20、1/30LD50劑量組均于第5天開始發(fā)病,第9天開始死亡,第4、5、6周發(fā)病率達到高峰,試驗結束時各組的發(fā)病率、死亡率分別為11/11、11/11、3/11、0/11和10/11、7/11、3/11、0/11。中毒鴨主要表現為生長受阻,5周齡時試驗組與對照組體重比較有顯著或極顯著差異(P<0.05或P<0.01),各試驗組之間也有顯著或極顯著差異,且隨著服鎘劑量的增加,試驗的各組與對照組體重差異越明顯。嚴重貧血(Hb、RBC、PCV,試驗組與對照組比較,差異顯著或極顯著P<0.05或P<0.01),詳情見表1。部分病例鼻孔流出多量的膿性粘液,堵塞鼻孔,并可聽見拉風箱似的呼吸聲。多數病例嚴重下痢,初呈水樣稀便,后轉變?yōu)榛野咨螯S白色粘稠物。大多數病例死前有抬頭、伸頸、張口呼吸等呼吸困難癥狀。此外尚有精神沉郁、嗜睡、用翅輔助爬行或跛行等癥狀。2.1.2病例1:右心擴張,心肌變死前呼吸困難的,以肺和氣囊的病變?yōu)橹?。無呼吸困難的,則以心、肝、脾等病變?yōu)槊黠@。心臟:心包積液,心外膜被覆黃白色的纖維素膜(圖1),右心擴張,心肌變性。肝臟:腫大,棕褐色或土黃色,質易脆,表面被覆淡黃或灰白色的纖維素膜(圖1)。膽囊腫大。肺臟:漿膜上被覆厚的纖維素膜,肺紫紅色實變(圖2)。氣囊:積有淡黃色的液體,氣囊壁渾濁、增厚成為灰白色。胃腸:粘膜充血,腸腔中充滿粘稠的淡黃色粥樣物。少數病例腹腔中有較多的淡黃色微渾濁的。腎與脾腫大。大腦、小腦:充血、水腫,少數病例有針頭大的出血點。詳情見表2。2.2.3病理組織學檢測心臟:心外膜結締組織水腫增厚,有大量纖維素滲出,并有許多淋巴細胞、單核細胞、異嗜性白細胞浸潤,尚可見成纖維細胞出現與增生(圖3)。心肌纖維空泡變性、顆粒變性及脂肪變性。多數病例心肌間質中有淋巴細胞、漿細胞及巨噬細胞等浸潤。肝臟:肝包膜因有多量纖維素及淋巴細胞、單核細胞、異嗜性白細胞滲出而增厚,肝細胞顯著脂變(圖4)。肝小葉門管區(qū)浸潤大量的淋巴細胞、巨噬細胞、漿細胞等炎性細胞。并可見成纖維細胞出現與增生。肺臟:肺漿膜水腫而增厚,表面被覆大量纖維素及滲出的炎性細胞,并可見纖維素為成纖維細胞所機化(圖5)。肺泡及三級支氣管內充滿炎性細胞和紅細胞,肺小葉間質炎性水腫。氣囊:氣囊內充有大量淡黃色清亮的液體,囊壁因水腫及纖維結締組織增生而顯著增厚,部分病例發(fā)生鈣化。腎臟:曲細小管上皮空泡變性。脾臟:輕度充血,網狀結締組織大量增生。胃腸:粘膜上皮剝脫,絨毛斷裂,固有膜及粘膜下層結締組織增生,腸肌呈竹節(jié)狀透明變性與壞死。腸腔中可見剝脫的上皮細胞及炎性滲出物。腦:充血、水腫、或有出血,神經元變性。腔上囊、胸腺、甲狀腺、腎上腺、胰腺等僅見輕度充血,未見顯著異常。詳情見表3。2.2.4對透射電視監(jiān)視心肌纖維、肝細胞和腎曲細小管上皮的線粒體嚴重腫脹,其嵴斷裂、溶解(圖6)。肝細胞內糖元顆粒大量減少,脂滴顯著增多。2.2.5灌服鎘劑量與吸光度的關系取亞急性三個試驗組及對照組鴨肝臟和腎臟各10例,烘干樣品,用濕法消化,原子吸收分光光度計測定結果,試驗組和對照組之間鎘含量有極顯著差異(P<0.01)。灌服鎘劑量與之成正相關。詳情見表4。3試驗組與對照組的比較3.1雛鴨中毒的LD50的289mg/kg體重,按1/10,1/20,1/30LD50劑量設亞急性毒性試驗組,每日口服,連續(xù)6周。發(fā)病率分別為11/11、11/11、3/11,死亡率為10/11、7/11和3/11。在試驗組與對照組之間體重增長有極顯著差異,各試驗之間體重差異顯著或極顯著。3.2臨診血液學檢查,Hb(g/L)、RBC(1012/L)、PCV(%)試驗組與對照組之間均有顯著差異。3.3急性病例死亡時間短,多無明顯的特異癥狀,亞急性病例死亡前最引人注目的癥狀是呼吸困難。急性病例尸體剖檢與病理組織學病變是胃腸炎、腦充血出血,而亞急性病例則是纖維素性心外膜炎、心肌變性、間質性心肌炎,纖維素性肝周圍炎、肝細胞嚴重脂變、間質性肝炎,纖維性肺漿膜炎、支氣管肺炎、肺水腫,氣囊積液、氣囊壁水腫及鈣化,卡他性胃腸炎,腎變性,脾腫大等損害。電鏡觀察,主要是線粒體的損害,有腫脹、嵴斷裂、溶解等。3.4病理解剖鑒別診斷上,應特別與鴨傳染性漿膜炎及鴨大腸桿菌病相區(qū)別。本次試驗中死亡鴨作過細菌分離為陰性,而且對照組無一例死亡,灌服鎘的試驗組鎘含量