鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵-實(shí)驗(yàn)報(bào)告(精)

..分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)題目：鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵學(xué)院：專(zhuān)業(yè)：食品科學(xué)與工程班級(jí)：姓名：學(xué)號(hào)：同組者：實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私夥止夤舛确y(cè)定物質(zhì)含量的一般條件及其選定方法掌握鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵的方法了解722型分光光度計(jì)的構(gòu)造和使用方法實(shí)驗(yàn)原理光度法測(cè)定的條件：分光光度法測(cè)定物質(zhì)含量時(shí)應(yīng)注意的條件主要是顯色反響的條件和測(cè)量吸光度的條件。顯色反響的條件有顯色劑用量、介質(zhì)的酸度、顯色時(shí)溶液溫度、顯色時(shí)間及干擾物質(zhì)的消除方法等;測(cè)量吸光度的條件包括應(yīng)選擇的入射光波長(zhǎng)，吸光度圍和參比溶液等。在PH=2-9的條件下，F(xiàn)e2+與鄰二氮雜菲〔o-ph〕生成極穩(wěn)定的橘紅色配合物，反響式如下：此配合物的lgK穩(wěn)=21.3摩爾吸收系數(shù)ε510=1.1×104在顯色前，首先用鹽酸羥胺把Fe2+復(fù)原成Fe3+.其反響式如下：2Fe3++2NH2OH·HC1＝2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2C1-測(cè)定時(shí)，控制溶液酸度在PH=5左右較為適宜。酸度過(guò)高時(shí)，反響進(jìn)展較慢;酸度太低，那么Fe2+水解，影響顯色。實(shí)驗(yàn)儀器分光光度計(jì)、容量瓶、移液管、洗瓶四、實(shí)驗(yàn)步驟條件實(shí)驗(yàn)吸收曲線的測(cè)繪準(zhǔn)確吸取20μg·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL于50mL容量瓶中，參加5%鹽酸羥胺溶液1mL，搖勻，參加1mol·L-1NaOAc溶液5mL和0.1%鄰二氮雜菲溶液3mL。以水稀釋至刻度，搖勻。放置10min，在722型分光光度計(jì)上，用1cm比色皿，以水為參比溶液，波長(zhǎng)從570nm到430nm為止，每隔10nm測(cè)定一次吸光度。如圖1所示，其最大吸收波長(zhǎng)為510nm，故該實(shí)驗(yàn)選擇測(cè)定波長(zhǎng)為510nm。鄰二氮雜菲-亞鐵配合物的穩(wěn)定性用上面溶液繼續(xù)進(jìn)展測(cè)定，其方法是在最大吸收波長(zhǎng)510nm處，每隔一定時(shí)間測(cè)定其吸光度，及再參加顯色劑后立即測(cè)定一次吸光度，經(jīng)10、20、30、120min后，再各測(cè)一次吸光度?！?〕顯色劑濃度實(shí)驗(yàn)取50mL容量瓶7只，編號(hào)。每只容量瓶中準(zhǔn)確參加20ug·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL以及1mL5%鹽酸羥胺溶液，經(jīng)2min后。再參加5mL1mol·L-1NaOAc溶液，然后分別參加0.1%鄰二氮雜菲溶液0.3mL、0.6mL、1.0mL、1.5mL、2.00mL、3.0mL和4.0mL，用水稀釋至刻度，搖勻，在分光光度計(jì)上，用最大吸收波長(zhǎng)510nm、1cm比色皿，以水為參比，測(cè)定上述溶液的吸光度。2.鐵含量的測(cè)定〔1〕標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取50mL容量瓶6只，編號(hào)。分別吸取20μg·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液2.0mL、4.0mL、6.0mL、8.0mL和10.0mL于5只容量瓶中，另一只容量瓶中不加標(biāo)準(zhǔn)溶液〔配制空白溶液，作參比〕。然后各加5%鹽酸羥胺溶液，搖勻，經(jīng)2min后，再各加5mL1mol·L-1NaAc溶液及3mL1g·L-1鄰二氮雜菲溶液，以水稀釋至刻度線，搖勻。放置10min，在分光光度計(jì)上，用1cm比色皿，在510nm處，測(cè)定各溶液的吸光度。以鐵含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。未知液中鐵含量的測(cè)定吸取5ml未知液代替標(biāo)準(zhǔn)溶液，其他步驟均同上測(cè)定吸光度。由未知液的吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出5ml未知液中的鐵含量，然后以每毫升未知液中含鐵多少微克表示結(jié)果。五、記錄與計(jì)算吸收曲線的測(cè)繪波長(zhǎng)吸光度A5705505305205105004904704504300.0670.1520.3450.4280.4540.4400.4260.4020.3430.297討論：從曲線可以看出，在一定圍，當(dāng)波長(zhǎng)較小時(shí)，隨波長(zhǎng)增加吸光度增加。測(cè)定的適宜波長(zhǎng)是510nm?！?〕鄰二氮雜菲亞鐵配合物的穩(wěn)定性放置時(shí)間05101520穩(wěn)定性0.3890.3900.3890.3890.389討論：從曲線可以看出，配合物穩(wěn)定性較好。(3)顯色劑用量的測(cè)定容量瓶號(hào)顯色劑量/mL吸光度A12345670.30.61.01.52.03.04.00.1250.2350.3860.4180.4280.4150.424討論：當(dāng)顯色劑較小時(shí)，隨顯色劑含量增加吸光度增加，當(dāng)參加顯色劑為1.5ml吸光度最大。所以顯色劑的適宜參加的量為1.5ml標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)繪與鐵含量的測(cè)定試液編號(hào)標(biāo)準(zhǔn)溶液的量V/mL總含鐵量m/ug吸光度A12345602.04.06.08.010.0040801201802000.0000.1950.3570.4790.6780.831未知液5.0122.30.498討論；由測(cè)定的未知液吸光度為0.498通過(guò)函數(shù)關(guān)系可得鐵的含量為122.3m/μg討論：1.再用分光光度計(jì)測(cè)量顯色劑量不同時(shí)的吸光度時(shí)應(yīng)注意什么？答：再用分光光度計(jì)測(cè)量顯色劑量不同時(shí)的吸光度時(shí)，應(yīng)保持用一個(gè)比色皿測(cè)量，這樣可以減小比色皿自身對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的影響。2.如用配置已久的鹽酸羥胺溶液，對(duì)分析結(jié)果將帶來(lái)什么影響？答：鹽酸羥胺是用來(lái)將復(fù)原成的，如果配制已久，復(fù)原能力減弱，就會(huì)使局部鐵離子得不到復(fù)原，造成分析結(jié)果偏小3.鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵的適宜條件是什么？答：測(cè)定時(shí)，要控制PH=5左右較好，弱酸度