天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座

1.非極性有機(jī)溶劑提取法（一）生物堿提取五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第1頁五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第2頁若生物堿為弱堿,多以游離堿存在,則處理方法稍有不一樣:五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第3頁五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第4頁2.極性有機(jī)溶劑提取※用此法時(shí)，若有水溶性生物堿存在于水液中，可用丁醇或戊醇直接萃取。五、生物堿提取分離

天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第5頁天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第6頁3.水或酸水提取后+強(qiáng)(弱)酸型陽離子樹脂法:五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第7頁4.酸水提取液+雷氏銨鹽等沉淀法:五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第8頁五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第9頁大孔樹脂法:苯乙烯型或2-甲丙烯酸酯型大孔吸附樹脂網(wǎng)狀小孔結(jié)構(gòu)，以吸附和篩選結(jié)合方式分離生物堿水溶液上柱,適當(dāng)溶劑(含水醇，醇，丙酮等)洗脫。水蒸氣蒸餾法：

麻黃堿等揮發(fā)性生物堿可用此法提取總堿

5.其它提取生物堿方法:五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第10頁12分步結(jié)晶法：利用生物堿在不一樣溶劑中析晶速度快慢來純化溶劑:乙醇、丙酮、甲醇等分離到較純晶體能夠重結(jié)晶深入純化。衍生物制備法（成鹽，成酯等）先使其成鹽、成酯后再用分步結(jié)晶法加以分離HI酸，過氯酸，苦味酸鹽最易結(jié)晶。（二）生物堿分離純化方法五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第11頁仲胺，叔胺生物堿分離：五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第12頁酚性、非酚性生物堿分離：五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第13頁

方法1、混合生物堿溶于酸水中逐步加堿(氨水等)每調(diào)一次pH(pH由低至高)，用有機(jī)溶劑萃取一次.生物堿由弱至強(qiáng)依次被分離梯度萃取方法pH3.在不一樣pH值下萃取法

五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第14頁方法2、混合生物堿溶于氯仿中逐步加酸性緩沖液(PH由高至低)生物堿依鹽形式由強(qiáng)至弱被依次分離梯度萃取方法pH五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第15頁4.液體生物堿混合物分餾分離法

液體生物堿混合物可進(jìn)行分餾分離。如毒芹(Coniummaculatum)中毒芹堿，羥基毒芹堿。

毒芹堿(coniine)羥基毒芹堿(Conhydrin)

(m.p.166-167℃)(m.p.116℃)五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第16頁石榴皮堿異石榴皮堿甲基異石榴皮堿PunicineIsopelletrerineMethyisopelletrerine(m.p.195℃)(m.p.86℃)（m.p.114-117℃)

石榴皮(PunicagranatumL.)中石榴皮堿、異石榴皮堿和甲基異石榴皮堿。5.層析法：Al2O3(中性，堿性)，硅膠五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第17頁提取分離舉例123五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第18頁NH4OH堿化PH=9，氯仿萃取堿水層氯仿層堿水層

n-BuOH層n-BuOH萃取NaOH萃取氯仿層

堿水層NH4Cl,

氯仿萃取氯仿層堿水層（戊）（甲）（乙）（?。?/p>

（丙）1、2、3酸水提取液五、生物堿提取分離天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第19頁生物堿概述生物堿分布生物堿分類生物堿性質(zhì)生物堿提取和分離生物堿結(jié)構(gòu)判定生物堿提取分離實(shí)例24313335637第六章生物堿天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第20頁1.Hofmann降解反應(yīng)最為主要C-N鍵裂解反應(yīng)，必要條件是氮原子β-位應(yīng)有質(zhì)子。（一）化學(xué)方法

季銨堿非季銨堿碘甲烷和氧化銀進(jìn)行徹底甲基化加熱分解雙鍵化合物，胺六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第21頁Hofmann反應(yīng)每次只能使一個(gè)C-N鍵斷裂六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第22頁1）直鏈化合物六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第23頁2）N原子兩價(jià)連在環(huán)上六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第24頁3）N原子三價(jià)均連在環(huán)上六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第25頁２.Emde降解反應(yīng)（無β位H）Emde降解改進(jìn)了Hofmann降解反應(yīng)，把季胺生物堿碘化物用Na-Hg齊等還原，是C-N鍵斷裂而降解。六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第26頁六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第27頁（二）波譜法(包含UV，IR，NMR，MS等)1.UV法生色團(tuán)（羰基、雙鍵、苯基和硝基等）在生物堿整體結(jié)構(gòu)中時(shí)，UV能夠反應(yīng)其骨架類型特征。(1)生色團(tuán)在整體結(jié)構(gòu)中如：UV(CH3OH)(4.26)(4.19)309(3.78)349(3.81)400(3.81)氧化勞瑞林六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第28頁如：其它如：吡啶類、吖啶酮類、小檗堿類等。UV(CH3OH)230(3700)270(3600)314(2750)UV(CH3OH)230(sh)300-315(2×sh)喹啉類吲哚類六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第29頁(2)單生色團(tuán)接在主體結(jié)構(gòu)中：

同類還有麻黃堿、芐基四氫異喹啉類、普羅托品類、嗎啡堿類、三尖杉?jí)A類等。UV(CH3OH)230282-289UV(CH3OH)230282-290阿托品四氫原小檗堿類六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第30頁(3)雙生色團(tuán)接在主體結(jié)構(gòu)中，如：UV(CH3OH)215228-235取代苯-二烯酮UV(CH3OH)228-232278311-322取代苯-萘類前蓮堿二氫血根堿六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第31頁2.IR法

IR法在生物堿結(jié)構(gòu)測定中作用有限。其中，羰基基團(tuán)IR圖譜和Bohlmann帶吸收峰較為慣用。(1)νC=O

：

νC=O1661-1658cm-1

六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第32頁(2)Bohlmann吸收帶

N上孤對(duì)電子與兩個(gè)鄰位C上H成反式雙豎鍵關(guān)系時(shí)，在2800-2700cm-1區(qū)域出現(xiàn)兩個(gè)以上νCH峰。如：表別育亨烷3β-H，20-αH偽育亨烷3β-H，20-βH別育亨烷3α-H，20-αH正育亨烷3α-H，20-βH正、別育亨烷有Bohlmann吸收峰六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第33頁3.MS法

此法在生物堿結(jié)構(gòu)測定中多有應(yīng)用。(1)母核穩(wěn)定或因?yàn)槿〈蜻呮溋呀猱a(chǎn)生特征離子。

①主體或整體由芳香結(jié)構(gòu)組成，如：4－喹酮、吖啶酮、喹啉去氫阿樸菲等類：[M-R]+六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第34頁②取代氨基甾體、秋水仙堿、苦參堿等環(huán)系多，分子結(jié)構(gòu)緊密：(2)以N原子為中心α裂解（包括骨架裂解）,生成含N部分多為基峰或強(qiáng)峰，如金雞寧、托品、石松堿等類生物堿。m/e332(M-15)m/e72(100%)-CH3六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第35頁①②浙貝甲素m/e112(100%)金雞寧m/e153m/e136(100%)六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第36頁(3)RDA裂解：文卡明RDAα裂解m/e124(100%)六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第37頁(4)芐基裂解：多為基峰六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第38頁1H-NMR提供δ、J值、積分比、裂分圖形判斷H化學(xué)環(huán)境、個(gè)數(shù)及空間位置推測結(jié)構(gòu)骨架類型和立體構(gòu)型提供C個(gè)數(shù)，峰值大小13C-NMR4.NMR法六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第39頁表別育亨烷3β-H，20-αH偽育亨烷3β-H，20-βH別育亨烷3α-H，20-αH正育亨烷3α-H，20-βH13C-NMR數(shù)據(jù)(δ)3－C20－C表別育亨烷54.339.9偽育亨烷54.634.2別育亨烷60.436.7正育亨烷60.141.6

六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第40頁龍膽堿結(jié)構(gòu)修正最初結(jié)構(gòu)定為:IR：1719cm-1

有強(qiáng)吸收（六元內(nèi)酯環(huán)）

1634cm-1

有中強(qiáng)吸收（C=C）

1300～1400cm-1無吸收（說明無CH3）修正過程：1.鋅粉還原得吡啶2.無旋光性3.堿性條件下水解開環(huán)（說明有內(nèi)酯結(jié)構(gòu)）六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第41頁4.還原后測IR：1719cm-1，

1300～1400cm-1無吸收，1385cm-1有吸收（形成了甲基）5.高錳酸鉀氧化得COOH（有雙鍵）6.臭氧氧化得一分子RCHO和一分子HCHO(雙鍵上有三個(gè)氫)用1H-NMR驗(yàn)證修正結(jié)構(gòu)是正確：δ9.0(s),8.0(s)(吡啶環(huán)上兩個(gè)α-H)

δ5～63H（烯氫）

δ4.32HO-CH2

δ3.02HR-CH2最終修正結(jié)構(gòu)為：脂環(huán)上H六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第42頁HPLC法:檢測波長228nmTLC法:香草醛-硫酸顯色MS法:FAB或ESI-MS1H-NMR法:高分辨NMR紫杉醇分析測定和結(jié)構(gòu)判定：紫杉醇（Taxol)六、生物堿結(jié)構(gòu)判定天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第43頁生物堿概述生物堿分布生物堿分類生物堿性質(zhì)生物堿提取和分離生物堿結(jié)構(gòu)判定生物堿提取分離實(shí)例24313335637第六章生物堿天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第44頁1.延胡索[CorydalisambiguaGham.etSch.]中幾個(gè)生物堿分離七、生物堿提取分離實(shí)例天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第45頁七、生物堿提取分離實(shí)例天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第46頁寅素丙素(普托品)甲素丑素七、生物堿提取分離實(shí)例天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第47頁乙素丁素七、生物堿提取分離實(shí)例天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第48頁2.麻黃堿提取分離(1).水蒸氣蒸餾法l-麻黃堿偽麻黃堿七、生物堿提取分離實(shí)例天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第49頁(2).溶劑萃取法：七、生物堿提取分離實(shí)例天然藥化醫(yī)學(xué)知識(shí)講座第50頁3.苦參堿和氧化苦參堿提取分離

中藥苦參是豆科植物苦參（SophorsflavescensAit）干燥根，主要含有生物堿，另外還有黃酮類成份。Matrine(苦參堿)Oxymatrine(氧化