腫瘤治療進(jìn)展、免疫治療、cart課件

癌癥治療發(fā)展史及最新進(jìn)展主講：趙昕20160517癌癥治療發(fā)展史主講：趙昕1癌癥領(lǐng)域的兩位頂尖人物DouglasHanahan教授和RobertWeinberg教授在2000年出版的《Cell》雜志上聯(lián)名發(fā)表了一篇綜述文章《癌癥的標(biāo)志》（HallmarksofCancer），提出了癌癥的單克隆理論。這篇文章認(rèn)為，所有惡性腫瘤均開始于一個「叛逆細(xì)胞」（RenegadeCell），這個細(xì)胞因為基因突變而具備了6大特征，分別是刺激自己無限生長、不理會其他禁令、逃避細(xì)胞自殺機(jī)制、躲過染色體端粒長度對細(xì)胞分裂次數(shù)的限制、發(fā)展出一套血液供應(yīng)系統(tǒng)以維持自己的生長，以及具備入侵到其他組織中去的能力。背景介紹癌癥領(lǐng)域的兩位頂尖人物DouglasHanah2

但是，自這篇文章發(fā)表后不久后就有人發(fā)現(xiàn)，腫瘤里的癌細(xì)胞不都是來自同一個克隆，而是包含各種不同種類的癌細(xì)胞。這些癌細(xì)胞除了源于基因突變以外，還包括基因重組、片段缺失和DNA甲基化等各種方式。更重要的是，腫瘤當(dāng)中甚至不光有癌細(xì)胞，還混有大量健康細(xì)胞，所有這些細(xì)胞一起構(gòu)成了一個復(fù)雜的微環(huán)境，甚至體內(nèi)的微生物也會參與進(jìn)來，共同構(gòu)建了一個適合腫瘤生長的復(fù)雜的信號網(wǎng)絡(luò)。

背景介紹但是，自這篇文章發(fā)表后不久后就有人發(fā)現(xiàn)，腫瘤里3在此基礎(chǔ)上有人提出，腫瘤的發(fā)生和成長完全符合達(dá)爾文提出的自然選擇理論，是一個不斷進(jìn)化的過程。具體來說，人體內(nèi)的所有細(xì)胞就像是一個個單獨的生命，隨時發(fā)生各種基因變異，這些變異賦予這些細(xì)胞不同的性狀，這些性狀在體內(nèi)被選擇，分裂速度越快，同時又越善于逃避免疫監(jiān)督的細(xì)胞便越有機(jī)會活下來，最終成為癌細(xì)胞。與“進(jìn)化論”如出一轍，這個過程不斷地重復(fù)，癌細(xì)胞逐漸獲得了一個又一個獨特的性狀，數(shù)量越來越多，腫瘤越長越大，就像某個物種被大自然選擇一樣。對抗癌癥方法層出不窮“聰明的”癌細(xì)胞在此基礎(chǔ)上有人提出，腫瘤的發(fā)生和成長完全符合達(dá)4癌癥治療發(fā)展史早期憑經(jīng)驗做手術(shù)切除癌組織（只能用于尚未擴(kuò)散的實體腫瘤）放療、化療（見效快、殺敵一千自損八百）抗癌靶向藥物（作用位點專一，但造價高、適應(yīng)癥窄、耐藥性）免疫治療（利用人體自身的免疫系統(tǒng)去對付癌細(xì)胞）癌癥治療發(fā)展史早期憑經(jīng)驗做手術(shù)切除癌組織（只能用于尚未擴(kuò)散的5從1970年起，第一個致癌基因（Oncogene）被科學(xué)家發(fā)現(xiàn)。這個基因一旦被激活，就會讓正常細(xì)胞的分裂失去控制，成為癌細(xì)胞。在1984年，第一個腫瘤抑制基因（TumorSuppressorGene）被科學(xué)家發(fā)現(xiàn)。

自從找到了致癌基因和腫瘤抑制基因，就相當(dāng)于找到了癌細(xì)胞和健康細(xì)胞的不同之處。這對開發(fā)出只針對癌細(xì)胞，同時又不會傷害健康細(xì)胞的抗癌靶向藥物奠定了基礎(chǔ)?？拱┌邢蛩幬飶?970年起，第一個致癌基因（Oncogene）被科學(xué)家6腫瘤治療進(jìn)展、免疫治療、cartppt課件7癌癥治療發(fā)展史早期憑經(jīng)驗做手術(shù)切除癌組織（只能用于尚未擴(kuò)散的實體腫瘤）放療、化療（見效快、殺敵一千自損八百）抗癌靶向藥物（作用位點專一，但造價高、適應(yīng)癥窄、耐藥性）免疫治療（利用人體自身的免疫系統(tǒng)去對付癌細(xì)胞）癌癥治療發(fā)展史早期憑經(jīng)驗做手術(shù)切除癌組織（只能用于尚未擴(kuò)散的81.細(xì)胞因子治療（白介素、干擾素、

腫瘤壞死因子等）2.

檢查點阻斷法（CheckpointBlockade）3.過繼免疫療法免疫治療方法1.細(xì)胞因子治療（白介素、干擾素、免疫治療方法9背景：1984年，美國科學(xué)家SteveRosenberg曾用高劑量的白細(xì)胞介素激活病人的免疫系統(tǒng)，在一部分癌癥病人身上獲得了成功。與此同時也有人嘗試用干擾素來激活免疫系統(tǒng)，同樣有少數(shù)癌癥病人獲益。從此基礎(chǔ)學(xué)家進(jìn)行了各種大量實驗，發(fā)現(xiàn)了很多與癌癥相關(guān)的細(xì)胞因子，為癌癥與免疫之間的聯(lián)系奠定了基礎(chǔ)。CoussensLM,WerbZ.Inflammationandcancer.Nature,2002，420:960-867WangY,LiG,ZhengGG,etal.DetectionandsequencinganalysisofIL-18expressioninJ6-1leukemiccells.LeukRes.2001,25:273-.2741.細(xì)胞因子治療背景：1984年，美國科學(xué)家SteveRosenberg10腫瘤治療進(jìn)展、免疫治療、cartppt課件11腫瘤治療進(jìn)展、免疫治療、cartppt課件121996年，美國免疫學(xué)家JamesAllison教授發(fā)現(xiàn)CTLA-4蛋白和其他免疫活性分子不一樣，被激活后反而抑制了T細(xì)胞的活性。（1996，science）日本京都大學(xué)的本庶佑教授于1992年在T細(xì)胞表面發(fā)現(xiàn)了另一個具有剎車的蛋白質(zhì)，取名為PD-1。之后，美籍華裔科學(xué)家陳列平教授于1999年發(fā)現(xiàn)了和PD-1配對的受體蛋白，取名PD-L1。發(fā)現(xiàn)當(dāng)PD-1和PD-L1發(fā)生特異性結(jié)合后，T細(xì)胞便會啟動自殺程序。

藥物研發(fā)：雖然黑色素瘤病人極少，但名為Ipilimumab的CTLA-4抗體作為當(dāng)時治療黑色素瘤晚期唯一有效藥，在2013年一年的銷售額高達(dá)9.6億美元。另外一些制藥廠也把注意力放到了PD-1/PD-L1通路上，至少有幾十種針對這一通路的單抗藥物正在研發(fā)的過程中。（2013年底出版的《science》將這類基于「檢查點阻斷」的腫瘤免疫治療藥物評為年度十大科學(xué)突破的首位，引起了廣泛關(guān)注。）2.

檢查點阻斷（CheckpointBlockade）

1996年，美國免疫學(xué)家JamesAllison教授發(fā)現(xiàn)C13腫瘤治療進(jìn)展、免疫治療、cartppt課件14原理：adoptivecelltransfertherapy（ACT），是指從腫瘤患者中分離免疫活性細(xì)胞，在體外進(jìn)行修飾、擴(kuò)增和功能鑒定，然后向患者轉(zhuǎn)輸，從而直接殺傷腫瘤或激發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答來殺傷腫瘤細(xì)胞。

a.非特異性過繼免疫治療

b.特異性過繼免疫治療3.腫瘤過繼免疫療法原理：adoptivecelltransferther15包括淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（lymphokineactivatedkiller，LAK）療法和細(xì)胞因子介導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokineinducedkiller，CIK）療法。

LAK療法是利用白細(xì)胞介素2（IL-2）刺激外周血淋巴細(xì)胞免疫活性細(xì)胞，這些細(xì)胞主要是由很多種淋巴細(xì)胞組成的混合體，包括NK細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞，在體外對腫瘤具有HLA（humanleukocyteantigen，人類白細(xì)胞抗原）非依賴型的殺傷作用。

CIK是將人外周血單個核細(xì)胞在體外用多種細(xì)胞因子(抗CD3mcAb.IL-2,IFN-γ,IL-1a等)共同培養(yǎng)一段時間后獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞。其中CD3+和CD56+細(xì)胞是CIK細(xì)胞群體中主要的效應(yīng)細(xì)胞，被稱為NK樣T淋巴細(xì)胞，兼具有T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗瘤活性和NK細(xì)胞的非MHC(主要組織相容性復(fù)合體)限制性殺瘤優(yōu)點。a.非特異性過繼免疫治療包括淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（lymphokineactiv16包括腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞（tumorinfiltratinglymphocytes，TIL）治療，T細(xì)胞受體（Tcellreceptor，TCR）基因治療，嵌合抗原受體治療（chimericantigenreceptor，CAR）等。

TIL治療：是從腫瘤組織中分離出來的淋巴細(xì)胞，經(jīng)離體培養(yǎng)，由IL-2誘導(dǎo)而成，具有特異性腫瘤殺傷活性TCR治療：利用分子生物學(xué)的手段克隆腫瘤特異性T細(xì)胞的TCR，并通過構(gòu)建含TCR的病毒載體，把TCR轉(zhuǎn)入正常的T細(xì)胞中，使這些T細(xì)胞因攜帶腫瘤特異性TCR而成為特異性腫瘤殺傷細(xì)胞。CAR-T細(xì)胞治療：主要特點是通過基因修飾獲得攜帶識別腫瘤抗原特異性受體T細(xì)胞的個性化治療方法。

b.特異性過繼免疫治療包括腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞（tumorinfiltrating17腫瘤治療進(jìn)展、免疫治療、cartppt課件18

與傳統(tǒng)的T細(xì)胞識別抗原相比，經(jīng)CAR識別腫瘤抗原無須主要組織相容性復(fù)合體限制，同時CAR可以通過增加共刺激分子信號從而增強(qiáng)T細(xì)胞抗腫瘤的殺傷性，因此CAR-T細(xì)胞可以克服腫瘤細(xì)胞下調(diào)主要組織相容性復(fù)合體分子和減少共刺激分子表達(dá)等免疫逃逸機(jī)制。

CAR-T細(xì)胞技術(shù)已經(jīng)發(fā)展出4代，第1代CAR在胞內(nèi)只有１個Ｔ細(xì)胞CD3ζ受體的信號區(qū)；在此基礎(chǔ)上第2代增加了1個共刺激分子信號；第3代增加了2個共刺激分子信號。CAR-T細(xì)胞治療與傳統(tǒng)的T細(xì)胞識別抗原相比，經(jīng)CAR識別腫瘤抗原無19jj20腫瘤治療進(jìn)展、免疫治療、cartppt課件21將自體T細(xì)胞結(jié)合CD19靶向的嵌合抗原受體慢病毒載體(CTL019)

注入

復(fù)發(fā)或難治性ALL患者(30名患者)(0.76X10^6~20.6X10^6CTL019Cells/kg）檢

測CTL019Tcells免疫應(yīng)答毒性效應(yīng)擴(kuò)增數(shù)持久性將自體T細(xì)胞結(jié)合CD19靶向的嵌合抗原受體慢病毒載體(CTL22腫瘤治療進(jìn)展、免疫治療、cartppt課件23腫瘤治療進(jìn)展、免疫治療、cartppt課件24

Figure2.AshowstheresultsofdetectionofCTL019-positiveTcellsdetectedbymeansofflowcytometryinperipheral-bloodsamples.B.showstheKaplan–Meiercurveofthetimetothefirstconfirmednegativemeasurementinperipheralbloodandbonemarrow.Figure2.Ashowstheresults25

C.showsmeasurementsofCTL019gene-modifiedTcellsinperipheralbloodasassessedbymeansofquantitativereal-timepolymerase-chain-reaction(PCR)assay.C.showsmeasurementsofCTL026

A.showstheresultsoftestingtodetectthepercentageofCD19-positivelymphocytesinperipheral-bloodsamplesbymeansofflowcytometry.B.showsaKaplan–MeiercurveofthetimetoeitherCD19positivityorrelapse.A.showstheresultsoftesti27A.showspeaklevelsofinterleukin-6inthefirst28daysafterinfusionofCTL019cellsinpatientswithseverecytokine-releasesyndromeascomparedwithpatientswithcytokine-releasesyndromethatwasnotsevere.B.showstheseverityofcytokine-releasesyndromeaccordingtothebaselinediseaseburdeninbonemarrowafterchemotherapyandbeforeinfusion(inthepediatrictrialonly).A.showspeaklevelsofinter281.嵌合抗原受體-抗C