化妝品中的微生物課件

目錄一、認(rèn)識(shí)微生物二、化妝品中的微生物指標(biāo)三、簡(jiǎn)述化妝品極易受到微生物污染的原因四、化妝品污染后的后果五、污染途徑六、討論

1一、認(rèn)識(shí)微生物一、認(rèn)識(shí)微生物2微生物分類(lèi)(實(shí)用型)：

大腸菌群>糞(耐熱)大腸菌群（衛(wèi)生領(lǐng)域）>大腸桿菌（細(xì)菌學(xué)）種類(lèi)多微生物分類(lèi)(實(shí)用型)：大腸菌群>糞(耐熱)大腸菌群（衛(wèi)生3微生物分類(lèi)(了解)：五（六）界學(xué)說(shuō)：三域?qū)W說(shuō)：病毒界微生物分類(lèi)(了解)：五（六）界學(xué)說(shuō)：三域?qū)W說(shuō)：病毒界4體積小體積小5微生物(化妝品)定義：是廣泛存在于自然界的形體微小、數(shù)量繁多、肉眼看不見(jiàn)，需借助于光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、上千倍甚至數(shù)萬(wàn)倍才能觀察到的低等生物體。微生物(化妝品)定義：是廣泛存在于自然界的形體微小、數(shù)量繁多6微生物（狹義三大類(lèi)）及其特點(diǎn)及化妝品中檢測(cè)的微生物1）非細(xì)胞型微生物：為形體最小，僅含有一種核酸RNA或DNA，或僅為傳染性蛋白粒子，具有超級(jí)寄生性，包括病毒、朊病毒等。（只做了解）2）原核細(xì)胞型微生物：為單細(xì)胞微生物，其細(xì)胞分化不完善，無(wú)完整細(xì)胞核及核膜、核仁，擬核或稱(chēng)核質(zhì)構(gòu)成。包括細(xì)菌（化妝品有要求）、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌等6類(lèi)醫(yī)學(xué)3）真核細(xì)胞型微生物：為多細(xì)胞或單細(xì)胞微生物（真菌（化妝品中霉菌酵母菌）），有細(xì)胞核和各種細(xì)胞器，易在體外生長(zhǎng)繁殖。微生物（狹義三大類(lèi)）及其特點(diǎn)及化妝品中檢測(cè)的微生物7

微生物的特征與化妝品中相關(guān)事項(xiàng)主要特征體小面大一個(gè)體積恒定的物體，被切割的越小，其相對(duì)表面積越大。微生物體積很小，如一個(gè)典型的球菌，其體積約1mm3，可是其表面積卻很大。這個(gè)特征也是賦予微生物其他如代謝快等特性的基礎(chǔ)。吸多轉(zhuǎn)快微生物通常具有極其高效的生物化學(xué)轉(zhuǎn)化能力。據(jù)研究，乳糖菌在1個(gè)小時(shí)之內(nèi)能夠分解其自身重量1000-10000倍的乳糖，產(chǎn)朊假絲酵母菌的蛋白合成能力是大豆蛋白合成能力的100倍。極易將化妝品中的營(yíng)養(yǎng)成分代謝完，產(chǎn)生不可逆的損害。生長(zhǎng)繁殖快相比于大型動(dòng)物，微生物具有極高的生長(zhǎng)繁殖速度。大腸桿菌能夠在12.5-20分鐘內(nèi)繁殖1次。不妨計(jì)算一下，1個(gè)大腸桿菌假設(shè)20分鐘分裂1次，1小時(shí)3次，1晝夜24小時(shí)分裂24×3=72次，大概可產(chǎn)生4722366500萬(wàn)億個(gè)（2的72次方），這是非常巨大的數(shù)字。但事實(shí)上，由于各種條件的限制，如營(yíng)養(yǎng)缺失、競(jìng)爭(zhēng)加劇、生存環(huán)境惡化等原因，微生物無(wú)法完全達(dá)到這種指數(shù)級(jí)增長(zhǎng)。已知大多數(shù)微生物生長(zhǎng)的最佳pH范圍為7.0(6.6~7.5)附近，部分則低于4.0。導(dǎo)致微生物復(fù)測(cè)的意義不大，只能代表每次的測(cè)試結(jié)果。因而對(duì)檢測(cè)人員要求嚴(yán)格！微生物的這一特性使其在工業(yè)上有廣泛的應(yīng)用，如發(fā)酵、單細(xì)胞蛋白等。微生物是人類(lèi)不可或缺的好朋友。但是對(duì)化妝品生產(chǎn)而言就帶來(lái)挑戰(zhàn)。微生物的特征與化妝品中相關(guān)事項(xiàng)主要特征8如何控制微生物的污染及抑制？微生物的生長(zhǎng)條件包括物理因素和營(yíng)養(yǎng)（化學(xué)及生物）因素。物理因素包括pH值，溫度，氧濃度，濕度，靜水壓，滲透壓和輻射。營(yíng)養(yǎng)因素包括碳源，氮源，無(wú)機(jī)鹽，能源，生長(zhǎng)因子和水。如何控制微生物的污染及抑制？微生物的生長(zhǎng)條件包括物理因素和營(yíng)9物理因素：1.pH值微生物在正常生長(zhǎng)過(guò)程中，它們所需要的pH有一定的范圍，在這個(gè)pH范圍內(nèi)又有很小的適應(yīng)生長(zhǎng)繁殖的pH區(qū)域，在這個(gè)區(qū)域內(nèi)，微生物生長(zhǎng)繁殖最好，因而稱(chēng)之為最適pH。使料體pH值不處在微生物的最適pH值。物理因素：10各種微生物的最適pH和pH范圍微生物 最適pH值 pH范圍 細(xì)菌 6.5—7.5 3.8—12 放線菌 7.5—8.0 5—10 霉菌 4.0—5.8 1.5—8.5 酵母菌 3.8—6.0 2.5—8.0 從表可以看出，細(xì)菌和放線菌所需要的pH在中性偏堿，而霉菌和酵母菌所需要的pH在偏酸性。但是微生物對(duì)pH要求挺寬的。問(wèn)題1配制培養(yǎng)基注意什么？各種微生物的最適pH和pH范圍微生物 最適pH值 11氫離子濃度影響微生物生長(zhǎng)主要有以下幾個(gè)方面：（1）影響微生物細(xì)胞中原生質(zhì)膜的電荷，因而影響了微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收；（2）影響微生物酶的活性；（3）影響微生物的代謝產(chǎn)物；同時(shí)微生物的生長(zhǎng)發(fā)育也影響環(huán)境的pH變化：實(shí)驗(yàn)時(shí)：微生物在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中，產(chǎn)生酸性或堿性物質(zhì)，從而改變了環(huán)境中的PH值，所以在培養(yǎng)基中加入一些緩沖劑（CaCO3）或磷酸鹽，從而使環(huán)境中pH變化不大。培養(yǎng)基中的有機(jī)物質(zhì)如蛋白胨、氨基酸也都有一定緩沖能力。培養(yǎng)基不得變質(zhì)。抑制微生物手段：范圍較廣（5.0-9.0），產(chǎn)品的pH值沒(méi)有極酸和極堿，因此pH不能作為化妝品微生物控制條件

氫離子濃度影響微生物生長(zhǎng)主要有以下幾個(gè)方面：122.溫度（最重要因素之一）具體表現(xiàn)在：影響酶活性，溫度變化影響酶促反應(yīng)速率，最終影響細(xì)胞合成。影響細(xì)胞膜的流動(dòng)性，溫度高，流動(dòng)性大，有利于物質(zhì)的運(yùn)輸，溫度低，流動(dòng)性降低，不利于物質(zhì)運(yùn)輸，因此，溫度變化影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收與代謝產(chǎn)物的分泌。影響物質(zhì)的溶解度，對(duì)生長(zhǎng)有影響。2.溫度（最重要因素之一）具體表現(xiàn)在：13（一）微生物生長(zhǎng)的三個(gè)溫度基點(diǎn)從微生物整體來(lái)看:生長(zhǎng)的溫度范圍一般在-10℃~100℃極端下限為-30℃，極端上限為105~300℃但對(duì)于特定的某一種微生物：只能在一定溫度范圍內(nèi)生長(zhǎng)，在這個(gè)范圍內(nèi)，每種微生物都有自己的生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)，即最低、最適、最高生長(zhǎng)溫度處于最適生長(zhǎng)溫度時(shí)，生長(zhǎng)速度最快，代時(shí)最短。超過(guò)最低生長(zhǎng)溫度時(shí)，微生物不生長(zhǎng)，溫度過(guò)低，甚至?xí)劳?。超過(guò)最高生長(zhǎng)溫度時(shí)，微生物不生長(zhǎng)，溫度過(guò)高，甚至?xí)劳?。（一）微生物生長(zhǎng)的三個(gè)溫度基點(diǎn)從微生物整體來(lái)看:處于最適生長(zhǎng)14絕大多數(shù)微生物都屬于這一類(lèi)，它們最適溫度在25—37℃，

體溫性微生物中溫性微生物室溫性微生物25—30℃，主要是腐生性微生物。37℃，它們主要是哺乳動(dòng)物的寄生性微生物。

絕大多數(shù)微生物都屬于這一類(lèi)，它們最適溫度在25—37℃，

體153.氧氣：作為了解化妝品中檢測(cè)的全部為有氧環(huán)境下測(cè)試。偶爾會(huì)出現(xiàn)鼓包極有可能是存在厭氧菌。

專(zhuān)性好氧菌:

好氧菌

微好氧菌：兼性厭氧菌耐氧厭氧菌：

厭氧菌

(專(zhuān)性)厭氧菌：微生物3.氧氣：作為了解化妝品中檢測(cè)的全部為有氧環(huán)境下測(cè)試。偶爾會(huì)164.光及射線太陽(yáng)光除可見(jiàn)光線外，還有長(zhǎng)光波的紅外線和短光波的紫外線以及更短的電磁波包括X—射線和γ（Co60電子流輻照）—射線。它們都具有殺菌的作用，波長(zhǎng)越短，殺菌作用越強(qiáng)。4.光及射線太陽(yáng)光除可見(jiàn)光線外，還有長(zhǎng)光波的紅外線和短光波的174.1紫外線紫外線的波長(zhǎng)范圍在136nm—390nm，不同波長(zhǎng)的紫外線，具有不同的殺菌力，250nm（254nm）—280nm波長(zhǎng)的殺菌力最強(qiáng)。作用原理：主要是細(xì)胞中的核酸（DNA）具有吸收紫外線的能力，使核酸中的堿基配對(duì)發(fā)生錯(cuò)誤，從而影響了DNA的復(fù)制，輕則發(fā)生突變，重則造成死亡。4.1紫外線紫外線的波長(zhǎng)范圍在136nm—390nm，不同波184.2X—射線和γ—射線（了解不實(shí)用）X—射線和γ—射線具有更短波長(zhǎng)，也具有強(qiáng)的殺菌作用，作用的原理引起物質(zhì)電離，如水的電離，使水形成H和OH的自由基；自由離子與溶液中經(jīng)常存在的氧分子產(chǎn)生一些具有氧化性的過(guò)氧化物如H2O2（過(guò)氧化氫）等，而使細(xì)胞受到損傷甚至死亡。4.2X—射線和γ—射線（了解不實(shí)用）X—射線和γ—射線具19微生物細(xì)胞含水量在70—80%，因此它們需要生活在含水的培養(yǎng)基質(zhì)中或潮濕的空氣中。5.濕度（水分）微生物和其它生物一樣，必須有水才能進(jìn)行代謝活動(dòng)以及生長(zhǎng)和繁殖。微生物在干燥環(huán)境中將引起代謝活動(dòng)的停止以致死亡。日常生活中常用、烘干、曬干和熏干的方法來(lái)保存食物。倉(cāng)庫(kù)車(chē)間等溫濕度監(jiān)控的意義

微生物細(xì)胞含水量在70—80%，因此它們需要生活在含水的培養(yǎng)206.化學(xué)物質(zhì)（防腐劑研發(fā)部門(mén)比較熟悉）很多化學(xué)藥物對(duì)微生物有殺菌作用和抑制生長(zhǎng)作用。低劑量的化學(xué)藥物對(duì)微生物起抑制或防腐作用，高劑量的化學(xué)藥物對(duì)微生物起殺菌作用?；瘜W(xué)藥物殺菌劑種類(lèi)很多，現(xiàn)分如下幾大類(lèi)進(jìn)行討論。6.化學(xué)物質(zhì)（防腐劑研發(fā)部門(mén)比較熟悉）很多化學(xué)藥物對(duì)微生物有216.1重金屬鹽類(lèi)有無(wú)機(jī)和有機(jī)的重金屬鹽類(lèi)，如汞、銀、鉛、鋅、銅等重金屬元素的化合物都有很強(qiáng)的毒性殺菌作用很強(qiáng)。殺菌原理：主要使細(xì)胞中蛋白質(zhì)凝固變性或與酶以及某些活性物質(zhì)的活性基團(tuán)結(jié)合，妨礙這些基團(tuán)的正常作用，而起抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。對(duì)人皮膚和身體都有嚴(yán)重傷害，基本上不能作為化妝品常規(guī)防腐劑6.1重金屬鹽類(lèi)有無(wú)機(jī)和有機(jī)的重金屬鹽類(lèi)，如汞、銀、鉛、鋅、226.2氧化劑

過(guò)氧化氫（H2O2）、高錳酸鉀（KMnO4）次氯化鈣[Ca（OCl）Cl或Ca（OCl）2]以及齒素如游離的氯、溴、碘、氟和它們的化合物等，都是氧化劑。

殺菌原理：是破壞原生質(zhì)結(jié)構(gòu)或氧化細(xì)胞結(jié)構(gòu)中的一些活性基團(tuán)而發(fā)生殺菌作用。6.2氧化劑過(guò)氧化氫（H2O2）、高錳酸鉀（KMnO236.3還原劑硫酸亞鐵（FeSO4）、甲醛（HCHO）都是常用的還原消毒劑，甲醛是氣體，但能溶解于水中，因而市場(chǎng)售的一般都是30—40%的水溶液甲醛。

殺菌原理：主要能與蛋白質(zhì)的?；驇€基起反應(yīng)，引起蛋白質(zhì)變性，而死亡。盡量不用甲醛毒性大易造成中毒。6.3還原劑硫酸亞鐵（FeSO4）、甲醛（HCHO）都是常用246.4表面活性物質(zhì)

乙醇、甲酚、來(lái)蘇爾、石碳酸（酚）、新潔爾滅、肥皂等都是表面活性潔凈消毒劑。

殺菌原理：①降底細(xì)胞的表面張力；②能使蛋白質(zhì)變性和損傷胞壁以及質(zhì)膜的作用；③是破壞細(xì)胞膜的滲透性。最常用的消毒和滅菌的方式。6.4表面活性物質(zhì)乙醇、甲酚、來(lái)蘇爾、石碳酸（酚）、新25乙醇：

乙醇能夠滲入細(xì)菌體內(nèi)，使組成細(xì)菌的蛋白質(zhì)凝固。所以酒精在醫(yī)療衛(wèi)生上常用它作消毒殺菌劑。當(dāng)使用95%的純酒精消毒時(shí)，因?yàn)榫凭珴舛冗^(guò)高，使蛋白質(zhì)凝固的作用越強(qiáng)。當(dāng)高濃度的酒精與細(xì)菌接觸時(shí)，就能使得菌體表面迅速凝固（濃硫酸在鋼鐵表面鈍化類(lèi)似），形成一層薄膜，阻止了酒精繼續(xù)向菌體內(nèi)部滲透，細(xì)菌內(nèi)部的細(xì)胞沒(méi)能徹底殺死。有的細(xì)菌遇到高濃度酒精時(shí)，會(huì)迅速產(chǎn)生防護(hù)反應(yīng)，形成有堅(jiān)硬外殼的孢子，以對(duì)抗酒精的傷害。待到適當(dāng)時(shí)機(jī)，薄膜內(nèi)的細(xì)胞將重新復(fù)活。因此，使用濃酒精達(dá)不到消毒殺菌的目的。如果使用70％—75％的酒精，既能使組成細(xì)菌的蛋白質(zhì)凝固，又不能形成薄膜，能使酒精繼續(xù)向內(nèi)部滲透，而使其徹底消毒殺菌。若酒精的濃度低于70％，也不能徹底殺死細(xì)菌。乙醇：乙醇能夠滲入細(xì)菌體內(nèi)，使組成細(xì)菌的蛋白質(zhì)凝26乙醇濃度的影響(重點(diǎn))：乙醇濃度的影響(重點(diǎn))：276.5無(wú)機(jī)堿類(lèi)和酸類(lèi)

氫氧化鉀（KOH）、硫酸（H2SO4）、氫氧化鈉（NaOH）物質(zhì)，都能起殺菌作用。

殺菌原理：引起細(xì)胞物質(zhì)的水解和凝結(jié)，例如，1%HCl、1%NaOH起殺菌作用。為什么化學(xué)試劑不會(huì)出現(xiàn)霉變等問(wèn)題6.5無(wú)機(jī)堿類(lèi)和酸類(lèi)氫氧化鉀（KOH）、硫酸（H2S286.6毒性物質(zhì)二氧化硫（SO2）、硫化氫（H2S）、一氧化碳（CO）和氰化物（HCN）。O3

殺菌原理：對(duì)原生質(zhì)中的一些活性基團(tuán)或輔酶成分能發(fā)生專(zhuān)性結(jié)合，使其失活，降低代謝活動(dòng)或使代謝不能進(jìn)行，達(dá)到殺菌作用。空氣消毒：20mg/m3臭氧濃度（有效濃度）作用30min消毒后通風(fēng)30min（半衰退期為20~30分鐘）0.16mg/m3方可進(jìn)入。6.6毒性物質(zhì)二氧化硫（SO2）、硫化氫（H2S）、一氧化碳296.7染料

(培養(yǎng)基中較多微量物質(zhì))

結(jié)晶紫、堿性復(fù)紅、孔雀綠等染料都有一定殺菌作用。

殺菌原理：主要是染料中有發(fā)色團(tuán)和助色團(tuán)，能和原生質(zhì)中的電荷結(jié)合，使蛋白質(zhì)變性，而達(dá)到殺菌作用，低濃度可起到抑制微生物生長(zhǎng)的作用。6.7染料(培養(yǎng)基中較多微量物質(zhì))結(jié)晶紫、堿性復(fù)紅、孔30二、化妝品中的微生物指標(biāo)二、化妝品中的微生物指標(biāo)31化妝品安全技術(shù)規(guī)范中有關(guān)微生物相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的定義2016年12月1日起施行化妝品安全技術(shù)規(guī)范中有關(guān)微生物相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的定義321.菌落總數(shù)：化妝品檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下培養(yǎng)后（如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間、pH值、需氧性質(zhì)等），1g（1mL）檢樣中所含菌落的總數(shù)。所得結(jié)果只包括一群本方法規(guī)定的條件下生長(zhǎng)的嗜中溫的需氧性和兼性厭氧菌落總數(shù)。

厭氧菌可能會(huì)導(dǎo)致面膜袋鼓包面膜原液腐敗。1.菌落總數(shù)：化妝品檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下培養(yǎng)后（如培養(yǎng)332.霉菌和酵母菌總數(shù)（真菌）：化妝品檢樣在一定條件下培養(yǎng)后，1g或1mL化妝品中所污染的活的霉菌和酵母菌數(shù)量，藉以判明化妝品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般衛(wèi)生狀況。本方法根據(jù)霉菌和酵母菌特有的形態(tài)和培養(yǎng)特性，在虎紅培養(yǎng)基上，置28℃±2℃培養(yǎng)5d，計(jì)算所生長(zhǎng)的霉菌和酵母菌數(shù)（ATCC10231、ATCC16404）2.霉菌和酵母菌總數(shù)（真菌）：化妝品檢樣在一定條件下培養(yǎng)后，343.耐熱大腸菌群(糞大腸菌群):系一群需氧及兼性厭氧革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌，在44.5℃培養(yǎng)24h～48h能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣。該菌主要來(lái)自人和溫血?jiǎng)游锛S便，可作為糞便污染指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)化妝品的衛(wèi)生質(zhì)量,推斷化妝品中有否污染腸道致病菌的可能。（大腸埃希氏菌（大腸桿菌）ATCC8739）4.金黃色葡萄球菌ATCC6538：為革蘭氏陽(yáng)性球菌，呈葡萄狀排列，無(wú)芽胞，無(wú)莢膜，能分解甘露醇，血漿凝固酶陽(yáng)性。5.銅綠假單胞菌（綠膿桿菌ATCC9027）：屬于假單胞菌屬，為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶陽(yáng)性，能產(chǎn)生綠膿菌素。此外還能液化明膠，還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，在42℃±1℃條件下能生長(zhǎng)?；瘖y品中的微生物ppt課件35相應(yīng)微生物的宏觀和微觀形態(tài)細(xì)菌宏觀霉菌宏觀酵母菌宏觀接種劃線相應(yīng)微生物的宏觀和微觀形態(tài)細(xì)菌宏觀霉菌宏觀酵母菌宏