血清總蛋白測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

血清總蛋白測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1.實(shí)驗(yàn)原理：（雙縮脲法）本試劑采用雙縮脲反應(yīng)，即在堿性溶液中，蛋白質(zhì)分子中的肽鍵與兩價(jià)銅離子反應(yīng)生成藍(lán)紫色絡(luò)合物，其中每個(gè)銅離子與五至六個(gè)肽鍵絡(luò)合。雙縮脲反應(yīng)被廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)，具有簡(jiǎn)便、快速可靠的特點(diǎn)。在試劑中加入碘化物有助于防止堿性銅絡(luò)合物的自動(dòng)還原，反應(yīng)形成的藍(lán)紫色物質(zhì)與樣本中總蛋白濃度成正比，通過(guò)測(cè)定520-560nm處吸光度值的變化，即可計(jì)算出樣本中總蛋白的濃度。+蛋白質(zhì)Cu蛋白質(zhì)復(fù)合物2.試劑主要組成成分組成成分濃度R硫酸銅12mmol/L酒石酸鉀鈉64mmol/L碘化鉀6mmol/L氫氧化鈉200mmol/LSTD牛人血白蛋白70g/L3.樣本要求：新鮮無(wú)溶血血清，勿使用肝素抗凝血漿。22～25℃保存8小時(shí)，2～8℃保48小時(shí)，-20℃保存7天，樣本不可反復(fù)凍融！4.檢驗(yàn)方法：儀器法（詳見(jiàn)DF-603/DI-600標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程）5.參考范圍：樣本參考范圍（g/l）血清成年人走動(dòng)后64-83成年人靜臥時(shí)60-786.檢驗(yàn)結(jié)果的解釋6.1線性范圍：在給定的樣本/試劑比例和條件下測(cè)定時(shí)，本試劑線性范圍可達(dá)100g/L。樣本含量超出線性范圍時(shí)，建議用0.9%（W/V）的氯化鈉溶液稀釋樣本。最大稀釋5倍。6.2單位換算：g/dL=g/L×0.17檢驗(yàn)結(jié)果的局限性7.1結(jié)果的準(zhǔn)確性依賴于儀器的校正和測(cè)定溫度、時(shí)間的控制。7.2若試劑渾濁或以水空白在540nm處吸光度大于0.200時(shí)不能使用。8.產(chǎn)品性能指標(biāo)8.1試劑外觀：藍(lán)色透明液體，無(wú)懸浮物及沉淀物。8.2裝量：不低于標(biāo)識(shí)值8.3空白吸光度：在540nm處，光徑1cm時(shí)，空白吸光度A≤0.200。8.4分析靈敏度：在540nm處，光徑1cm時(shí)，測(cè)量70g/L的總蛋白，吸光度差△A≥0.1508.5線性區(qū)間：試劑的線性區(qū)間為[30.0-100.0]g/L，在此線性區(qū)間內(nèi)：a）線性相關(guān)系數(shù)r應(yīng)不小于0.995；b）線性相對(duì)偏差不超過(guò)±6.0%。8.6精密度8.6.1重復(fù)性：重復(fù)測(cè)試（70.0±10.0）g/L的樣本，所得結(jié)果的變異系數(shù)（CV）應(yīng)≤2.0%8.6.2批間差：重復(fù)測(cè)試（70.0±10.0）g/L的樣本，所得結(jié)果批間相對(duì)極差（R）應(yīng)≤5.0%8.7準(zhǔn)確性：相對(duì)偏差應(yīng)不大于±5.0%。8.8穩(wěn)定性：（2-8）℃下，原包裝存放的試劑有效期為18個(gè)月.取到期后一個(gè)月的試劑進(jìn)行測(cè)試，應(yīng)滿足1-6.1、7的要求。8.9校準(zhǔn)品8.9.1外觀：無(wú)色透明液體。8.9.2凈含量：不少于標(biāo)識(shí)值8.9.3準(zhǔn)確度：標(biāo)準(zhǔn)生化分析儀和試劑后，測(cè)定校準(zhǔn)品，相對(duì)偏差應(yīng)不大于±10%。8.9.4均一性：瓶間均一性：CV≤5%8.9.5穩(wěn)定性：（2-8）℃下，原包裝存放的試劑有效期為12個(gè)月.取到期后1個(gè)月的試劑進(jìn)行測(cè)試，應(yīng)滿足8.9.1-8.9.4的要求。9.臨床意義：血漿蛋白主要在肝臟、漿細(xì)胞、淋巴結(jié)、脾臟和骨髓中合成。在疾病過(guò)程中，總蛋白濃度和各蛋白組分的百分率均能顯著偏離正常值。由失血、炎性腹瀉、腎病綜合征、中度燒傷、鹽滯留綜合癥和加西卡?。毙缘鞍兹狈Γ┚芤鸬偷鞍籽Y。在嚴(yán)重脫水和疾病如多發(fā)性骨髓瘤會(huì)發(fā)生高蛋白血癥。由于一種血漿蛋白組分百分率的改變能引起血漿蛋白相對(duì)百分率的改變。此類(lèi)病例中總蛋白的量常無(wú)變化。A/G比例常被用作白蛋白和球蛋白組分分配的指標(biāo)。在肝硬化、腎小球性腎炎、腎病綜合征、急性肝炎、紅