林木病理學-林木病原細菌-課件

二.林木病原細菌林木病原細菌的一般性狀細菌形態(tài)和結構形態(tài)大多桿狀,個別絲狀細菌大多單生大小一般為1-3x0.5-0.8微米，要在苯酚品紅染色后在１００x１０的油鏡下才能觀察到1ppt課件大多有鞭毛極鞭－－著生在菌體的一端或兩端周鞭－－著生在菌體的四周鞭毛著生的位置是分類的依據(jù)一般要對鞭毛染色后再鏡檢2ppt課件菌體結構黏質層(較厚而固定的稱作莢膜)----細胞壁(多糖，擬脂類和甲殼質組成)----質膜（質膜下的小粒狀鞭毛穿過細胞壁和黏質層延伸到體外）----胞質（異染粒＋中性體＋氣泡＋液泡＋核糖體）----核區(qū)（DNA，無核膜）．無芽孢3ppt課件用革蘭氏染色法可反映細胞壁的差異

革蘭氏陰性菌壁厚，肽聚糖為主

革蘭氏陽性菌壁薄，有脂多糖和脂蛋白

革蘭氏染色是用結晶紫草酸銨對細菌染色，經(jīng)酒精脫色后再用番紅復染以便觀察．未能脫色的為陽性（紫色），脫色的為陰性（紅色）4ppt課件革蘭氏染色陽性——大腸桿菌

革蘭氏染色陰性——枯草桿菌

5ppt課件植物病原細菌對鏈霉素敏感，可用于防治細菌病害6ppt課件培養(yǎng)性狀，繁殖，遺傳和變異培養(yǎng)性狀：固定培養(yǎng)基上－－菌落液體培養(yǎng)基上－－混濁，絮狀物，菌膜，菌環(huán)等繁殖－－繁殖方式為裂殖，繁殖速度為１次／２０分鐘，S形生長曲線7ppt課件遺傳遺傳－－－裂殖時細胞內物質均等分配到子細胞

質粒－－－染色體DNA之外的可自我復制的環(huán)狀雙鏈DNA，常帶有與抗藥性，致病性，性結合有關的基因8ppt課件變異類有性作用接合：一個細胞的遺傳物質可以部分進入另一個細胞，接受遺傳物質的細菌在分裂繁殖時體內的兩種遺傳物質重新組合突變－－頻率低但次數(shù)多轉化：由于菌體破裂，一個細胞的遺傳物質釋放出來，進入另一個有親和力的同種或近似種的菌體內，并作為后者遺傳物質的一部分9ppt課件轉導：噬菌體侵染和在消解一種細菌時，其DNA可以攜帶寄主細胞的部分遺傳物質，在侵染另一個細菌時，就可以將遺傳物質帶到第二個細菌體內作為它的遺傳物質的一部分

10ppt課件噬菌體：細菌的病毒，專性寄生，一般蝌蚪狀，在細菌液體培養(yǎng)時使培養(yǎng)液變清，在細菌培養(yǎng)平板上形成透明斑（噬菌斑）11ppt課件寄生性：絕大多數(shù)非專性寄生,極少數(shù)專性寄生

鑒定方法:

癥狀觀察:

染色鏡檢鑒定法(革蘭氏染色法和鞭毛染色法)

培養(yǎng)性狀鑒定法(菌落性狀觀察,生理生化性狀觀察)

致病性測定:

血清學鑒定法:

核酸技術:12ppt課件植物病原細菌的主要類群薄壁菌門重要屬:野桿菌屬Agrobacterium,也叫膿桿菌桿菌屬,革蘭氏陰性菌，鞭毛周生，引起植物組織腫瘤或畸形假單胞桿菌屬Pseudomonas革蘭氏陰性菌，鞭毛數(shù)根，菌落白色，能產(chǎn)生熒光性色素，引起葉斑，潰瘍，果斑13ppt課件黃單胞桿菌屬Xanthomonas革蘭氏陰性菌，鞭毛１根，菌落黃色，能產(chǎn)生非水溶性黃色色素，柑橘潰瘍病,核桃黑斑病歐氏桿菌屬Erwina革蘭氏陰性菌，鞭毛周生，引起植物組織腐爛或萎焉

14ppt課件厚壁菌門棒桿菌屬Gorynebacterium（Clavibacter）革蘭氏陽性菌，多數(shù)無鞭毛15ppt課件軟壁菌門植原體屬（Phytomonas）引起的病狀很象病毒病的癥狀，主要是黃化叢枝癥狀．以前放在病毒病中，后來發(fā)現(xiàn)有些病可用四環(huán)素治療，在電鏡下可看到啞鈴狀類似于菌原體的生物體，改成類菌原體，近年來將其歸到植原體屬中，引起桑的萎縮病，造成節(jié)尖縮短，叢枝，縮葉，黃化；泡桐叢枝?。簠仓?，花果變枝葉，黃化，有傳染性16ppt課件螺原體屬（Spiroplasma）菌體的基本形態(tài)為螺旋形繁殖時可產(chǎn)生分支，分支也螺旋形引起柑橘僵化?。⊿.citri）節(jié)間變短，縮小，叢生枝或叢芽樹皮增厚，植株矮化，并且全年可開花，但結果小而少，多畸形，易脫落可以人工培養(yǎng)，在培養(yǎng)基上形成“荷包蛋”狀菌落17ppt課件油橄欖腫瘤病Pseudomonas假單胞桿菌屬18ppt課件楊屬柳屬山楂屬果樹冠癭病Agrobacterium

（野桿菌屬）根瘤19ppt課件根部小木瘤20ppt課件病原細菌21ppt課件柑橘潰瘍病Xanthomonas

campestri

pv.citri

(Hasse)黃單胞桿菌屬X.citri同物異名22ppt課件癥狀23ppt課件病原24ppt課件細菌病害的癥狀侵染循環(huán)和防治25ppt課件癥狀斑點潰瘍萎焉26ppt課件侵染循環(huán)植物病原細菌從傷口侵入,有的從自然孔口侵入寄生性弱的細菌一般都是從傷口侵入寄生性強的細菌從傷口和自然孔口都能侵入假單胞桿菌屬和黃單胞桿菌屬的細菌引致葉斑病,一般是從自然孔口侵入27ppt課件棒形桿菌屬、歐氏桿菌屬和土壤桿菌屬的細菌引致萎蔫、腐爛和瘤腫,多半是從傷口侵入有多次再侵染的機會在自然條件,傳播靠雨水濺灑作用,故傳播距離不會很遠帶菌的種苗是細菌病害傳染的重要來源昆蟲介體也可傳播細菌工具傳播28ppt課件侵染來源細菌在受害苗木內越冬,成為初侵染來源種子和無性繁殖器官：帶菌種苗是最重要的初侵入來源，帶菌種苗調運可遠距離傳播病殘體：植物病原細菌可以在病株殘余組織中長期存活，也是重要的初侵染來源29ppt課件土壤：主要存活于土壤中的作物殘余組織雜草和其他作物：相同寄主范圍的作物昆蟲介體：玉米細菌性萎蔫病菌可以在玉米葉甲體內越冬，成為初侵染來源30ppt課件防治方法作好種苗消毒和清除植物病死殘體用抗生素效果較好防止造成傷口和及時保護傷口,在防治上特別重要31ppt課件寄生性種子植物寄生性種子植物的種類主要有桑寄生科(Loranthaceae)菟絲子科(Cuscutaceae)列當科(Orobanchaceae)

野菰蛇菰科（Balanophoraceae）其中菟絲子和列當是對外檢疫對象32ppt課件寄生性種子植物的寄生特點寄生部位:莖寄生(地上部分的莖):桑寄生和菟絲子根寄生(地下部分的根):列當和野菰33ppt課件對寄主的依賴程度半寄生:含葉綠素,其吸盤的導管與寄主導管相連,如桑寄生全寄生:不含葉綠素,其吸盤的導管和篩管分別與寄主的導管和篩管相連,如菟絲子,列當和野菰34ppt課件35ppt課件36ppt課件菟絲子害種子萌發(fā)到纏繞寄主的過程菟絲子的莖和果實枝條被害狀寄主和菟絲子莖切面,示菟絲子吸器伸入寄主皮層37ppt課件槲寄生38ppt課件油杉寄生害列當危害番茄39ppt課件蛇菰科Balanophoraceae

雙子葉植物，19屬，約120種，分布于熱帶和亞熱帶地區(qū)，中國只有蛇菰屬Balanophora

鎖陽屬Cynomorium

雙柱蛇菰屬Rhopalocemis3屬17種，產(chǎn)中南部至西南一年生或多年生、肉質草本，寄生于根上無葉綠素和氣孔，花單性，很少兩性，密集成一個單性或兩性的花序40ppt課件野菰野菰，又名蔗寄生一年生寄生草本植物，整個列當科都是營寄生的植物，南方最常見的是這種莖基部分枝，地上不分枝。葉退化成鱗片狀，全株肉色枝頂開花，萼佛焰苞狀，冠二唇形，紫紅色，黃白色地下根常附于禾本科寄生植物全株藥用，具清熱解毒，消腫功效41ppt課件油杉矮槲寄生發(fā)育循環(huán)圖42ppt課件越冬場所菟絲子種子比寄主植物的種子成熟早、萌發(fā)晚種子在土內或與寄主種子一起越冬列當靠寄主根部分泌物刺激而萌發(fā)桑寄生直接在寄主上越冬43ppt課件傳播小的種子靠風傳播(菟絲子,列當)大的種子靠鳥類傳播(桑寄生)

44ppt課件防治方法:檢疫輪作手工拔除(砍除)噴灑除草劑45ppt課件植物病原線蟲線蟲的形態(tài)和結構低等動物，屬線蟲動物門，數(shù)量多，分布廣，受線蟲危害的癥狀與一般的病害癥狀相似，稱為線蟲病350-1000x15-35微米，蟲體細長，蠕蟲形，蟲體半透明46ppt課件生活史寄生性卵－幼蟲（１－４齡）－成蟲受精－卵專性寄生，去食時排出唾液，起到致病作用，刺激細胞分裂，腫瘤，枯萎癥狀：根結，叢根，根腐，地上部分似缺素癥松材線蟲是松褐天牛傳播47ppt課件線蟲癥狀48ppt課件49ppt課件50ppt課件51ppt課件52ppt課件53ppt課件54ppt課件雄蟲55ppt課件雌蟲56ppt課件57ppt課件檢驗及鑒定檢驗方法對應施檢疫物首先直接觀察是否存在本質干枯、木質部藍變和媒介昆蟲或它的棲居痕跡等癥狀，然后進行室內檢驗58ppt課件(1)抽樣和取樣抽取有上述癥狀的部分檢疫物，數(shù)量為每批次總件數(shù)的0.5%-5.0%，但最低不得少于5件。若無明顯癥狀時可隨機抽樣在所抽取的樣木(或樣品)上取部分樣品，或鉆取少量木屑(不得少于20g)，每樣3個重復標號后帶回實驗室檢驗。必要時可將整件樣木(或樣品)帶回備檢取樣時注意選取靠近蛀道、蛹室的部位，所取樣品不得帶有樹皮59ppt課件(2)分離線蟲將各標號樣品分別進行線蟲分離分離線蟲可采用貝爾曼漏斗法或淺盤法對媒介昆蟲進行線蟲分離時，可將其用剪刀或尖頭鑷子、解剖針等剪碎或撕碎后同樣采用上述方法進行分離時若室溫較低(不得低于7oC)可根據(jù)室溫將分離用水調至20-40oC(不得超過40oC)浸泡分離材料3-4h線蟲游離出一定數(shù)量后即可鏡檢(一般需經(jīng)24小時后鏡檢)

60ppt課件貝爾曼(Baermann)漏斗法將漏斗末端接一段長約10cm乳膠管在乳膠管上裝一止水夾剪大小適當紗布兩層鋪在漏斗上將樣段去皮劈成長約3-4cm細條,約取10g(或木屑)置于漏斗上的紗布中，紗布四角向中間蓋上分離材料，然后注入清水浸沒注入清水后要注意使水充滿漏斗和下面的乳膠管，不要產(chǎn)生空隙用培養(yǎng)皿在漏斗末端接取線蟲分離液10ml鏡檢61ppt課件貝爾曼漏斗法線蟲分離裝置圖62ppt課件淺盤法淺盤分離裝置由兩只不銹鋼淺盤組成口徑略小的一只底部為粗網(wǎng)篩，放在另一只淺盤上面將兩層紗布打濕鋪于篩盤上，把樣品劈碎(或鉆取的木屑)置于篩盤的紗布上慢饅注人清水，使水浸沒樣品63ppt課件分離結束后,移去篩盤，把大盤內的分離液集中于小燒杯內小燒杯內的線蟲分離液可通過自然沉降或離心機(1500轉/min，離心2-3min)濃縮至適宜的量，以便鏡檢64ppt課件65ppt課件(3)鏡檢將各標號盛有線蟲分離液的培養(yǎng)皿置于解剖鏡下觀察，先確認有無線蟲對有線蟲的樣品進行活體鏡檢，觀察它的一般形態(tài)結構選擇幾條成熟、特征易觀察的線蟲，用針或吸管移至載玻片上的水滴中使之沉底66ppt課件將此載玻片在酒精燈火焰上方往返幾次約5-6秒至蟲體突然伸直時停止加蓋玻片后在顯微鏡下觀察根據(jù)形態(tài)特征予以初步鑒別，以確定是否需作進一步的鑒定67ppt課件1.病原鑒定線蟲培養(yǎng):鑒定需要相當數(shù)量的雌、雄成蟲，但在檢驗時分離到的線蟲多是處于休眠階段的分散型3齡蟲（LⅢ）;有時雖可見雌雄成蟲，但數(shù)量較少從媒介昆蟲分離到的線蟲則只能是被稱為休眠幼蟲(DL)的分散型4齡蟲，因此，需將上述情況的線蟲進行培養(yǎng)，以獲得大量雌雄成蟲供鑒定68ppt課件真菌上的單異活體培養(yǎng)通常用于培養(yǎng)松材線蟲的真菌為灰葡萄孢(Botrytiscinerea)多毛孢(Pestalotia

sp.)鐮刀菌(Fusarium

sp.)培養(yǎng)松材線蟲69ppt課件將真菌菌種接至馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基(PDA)平板或試管斜面上在25oC條件下經(jīng)過4-5d待菌絲鋪滿平板或斜面后將經(jīng)過表面消毒的線蟲用吸管接到菌絲上28

oC條件下培養(yǎng)10-15d即可繁殖出大量線蟲用少量清水將線蟲充分洗至小燒杯內備用70ppt課件樣木保溫、保濕培養(yǎng)將樣木劈開、鋸成小段，置于燒杯中加少量清水，使木段下端浸在水中，木段上端用濕紗布覆蓋在26oC培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3-4d倒取杯底水液，亦可獲得較多的雌、雄成蟲

71ppt課件接種線蟲的表面消毒經(jīng)分離后獲得的線蟲懸浮液用1500轉/min離心2-3min濃縮至離心管底部吸去上清液，用無菌滴管將底部線蟲液約2ml移至另一無菌離心管內加入2ml雙倍濃度的消毒液，輕輕振蕩混勻一定