中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)

中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)第1頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月第2講中藥的質(zhì)量評(píng)價(jià)第2頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月中藥自身的特點(diǎn)三多：有效成分多，未知成分多，雜質(zhì)多含量差異大，作用十分復(fù)雜一藥多能：如山楂多種中藥含有相同成分第3頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月現(xiàn)行中藥質(zhì)量控制模式借鑒化學(xué)藥品的質(zhì)量控制模式，靠天然藥物化學(xué)的發(fā)展。建立以測(cè)定某單一成分為目標(biāo)的分析方法和既定性又定量的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。單一化學(xué)成分分析的觀點(diǎn)，與中醫(yī)理論的“整體”觀相悖?；瘜W(xué)藥──單一成分，單一靶點(diǎn)中藥──多成分，多靶點(diǎn)第4頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)構(gòu)建要素應(yīng)能體現(xiàn)中醫(yī)藥理論的特性應(yīng)能體現(xiàn)中藥的物質(zhì)基礎(chǔ)是多組分化合物群應(yīng)能體現(xiàn)中醫(yī)臨床用藥的特性逐步由指標(biāo)性成分向活性成分的測(cè)定過渡，由單一成分向多個(gè)成分測(cè)定和整體控制模式的轉(zhuǎn)化。第5頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的特點(diǎn)

權(quán)威性科學(xué)性進(jìn)展性指導(dǎo)性復(fù)雜性第6頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月

1.權(quán)威性以國家藥品標(biāo)準(zhǔn)為準(zhǔn)，具有權(quán)威性。

2.科學(xué)性方法的確定，指標(biāo)的選擇與規(guī)格的制定根據(jù)具體藥物而定，通過全面的考察和實(shí)驗(yàn)研究，在獲得充分的科學(xué)依據(jù)的基礎(chǔ)上起草出來。同一藥材在單獨(dú)及不同配方的制劑中，建立質(zhì)量指標(biāo)時(shí)方法不一定均能相通適用。第7頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月3.進(jìn)展性對(duì)某個(gè)藥品在一定階段認(rèn)識(shí)和研究的階段性小結(jié);隨著生產(chǎn)技術(shù)水平提高和測(cè)試手段的改進(jìn)，藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)必須不斷修訂和完善新藥研究中藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂：臨床試驗(yàn)用藥品標(biāo)準(zhǔn)---生產(chǎn)---二年的試行期---正式的藥品標(biāo)準(zhǔn)第8頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月品種類別1953版--2010年版我國藥典收載的中藥材及其成方制劑品種類別：涉及植物藥、動(dòng)物藥、礦物藥和少數(shù)民族藥材，還增收了中草藥的提取物、有效成分及其制劑（片劑、注射劑、沖劑、合劑、酊劑等）第9頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月藥典一部收載品種數(shù)

年版中藥材中藥成方制劑合計(jì)

195365461111963446197643197788227011521985506207713199050927578419955223989202000534458992第10頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月《中國藥典》2000年版一部收載992種中藥材、中成藥、由天然藥物提取的純品和油脂。

第11頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月《中國藥典》2005年版分三部一部包括中藥材、中藥飲片、中藥提取物、中藥成方及單味制劑二部包括化學(xué)藥、抗生素、放射性藥品、輔料等三部為生物制品“中國生物制品規(guī)程”第12頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月2005年版《中國藥典》(一部)正文部分由原來的“藥材及其制品”和“成方及單味制劑”兩大部分改為“藥材及飲片”、“植物油脂和提取物”、“成方制劑及單味制劑”3部分藥材及飲片551種，其中修訂207種，新增33種；植物油脂和提取物31種；成方制劑和單味制劑564種，新增116種；合計(jì)共收載中藥品種1146種第13頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月2010年版《中國藥典》(一部)正文部分為“藥材及飲片”、“植物油脂和提取物”、“成方制劑及單味制劑”3部分藥材及飲片616種，其中新增65種；植物油脂和提取物47種，其中新增16種；成方制劑和單味制劑1502種，其中新增938種；合計(jì)共收載中藥品種2165種，其中共新增1019種，修訂634種第14頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月品質(zhì)鑒定品質(zhì)鑒定方法：逐版提高、不斷完善的原則，顯微鑒定、理化鑒別、含量測(cè)定、浸出物測(cè)定、揮發(fā)油測(cè)定等。薄層色譜TLC鑒別始載于1985年版藥典，如人參--人參皂苷Rg1、Rbl，大黃--葸醌苷元。梔子金花丸:由八味藥組成，

1985年版:顯微鑒別、試管反應(yīng)和微量升華鑒別

1990年版:增加三項(xiàng)薄層鑒別--梔子、黃芩、大黃

1995年版:增訂黃連薄層鑒別。

2010年版：增加黃柏薄層鑒別第15頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月含量測(cè)定分析方法越來越先進(jìn)，除了重量法、容量法外，分光光度法、薄層掃描法普遍應(yīng)用于中藥有效成分質(zhì)量控制，氣相色譜法、高效液相色譜法應(yīng)用增多。1990年版藥典:首次引用儀器方法，如HPLC、GC和TLCS等----化橘紅等5種、斑蝥等2種及山茱萸等2種的含量測(cè)定。蟾酥:主要含強(qiáng)心甾體化合物，1985年版始載用氯仿提取后測(cè)定重量的方法，1995年版改用分光光度法(吸收系數(shù)法)，2000年版起改用HPLC。第16頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月4.指導(dǎo)性藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不單是為了控制最終產(chǎn)品的質(zhì)量水平以保證用藥安全有效，而是在藥品研制的各個(gè)環(huán)節(jié)及形成產(chǎn)品后的生產(chǎn)、使用、流通與貯藏、保管等各領(lǐng)域發(fā)揮其指導(dǎo)作用。第17頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月中藥新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制訂的條件質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂必須具備以下前提:中藥制劑的處方組成固定不變；所用原、輔料（藥材、飲片、提取物等）質(zhì)量穩(wěn)定；制劑的制備工藝穩(wěn)定。

第18頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月

1.處方組成固定處方藥味及份量是制訂質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的依據(jù)，直接影響評(píng)價(jià)指標(biāo)的選定和限度的制訂。在具體研究和制訂一個(gè)中藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)前，必須要求將處方毫無保留、確實(shí)無誤地告知質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究者，并在不再改動(dòng)的前提下，才可開始進(jìn)行有關(guān)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和研究。第19頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月2.原料穩(wěn)定原料藥材除藥用部位、產(chǎn)地、采收和加工炮制等方面涉及質(zhì)量?jī)?yōu)劣外，特別要注意的是藥材的真?zhèn)闻c地區(qū)習(xí)慣用藥的鑒別與應(yīng)用。在研究新藥和制訂新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)密切注意處方中各味藥材系指何品種，確定后必須取材穩(wěn)定，才能保證臨床試驗(yàn)取得應(yīng)有的療效。在批準(zhǔn)生產(chǎn)后，更應(yīng)注意藥材品種來源，以確保上市藥品的用藥安全和有效。第20頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月3.工藝穩(wěn)定

進(jìn)行制備工藝條件的研究，優(yōu)選出最佳工藝流程，應(yīng)達(dá)到適合中試生產(chǎn)規(guī)模、工藝條件穩(wěn)定后，才可正式進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究如實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及展開具體研究工作第21頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制訂的內(nèi)容

中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分為中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和中藥制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)兩部分。其中，每一部分的內(nèi)容除正文外，還應(yīng)附上質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草說明。第22頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1.內(nèi)容名稱、漢語拼音、藥材拉丁名、來源（基原、藥用部位、采收加工）、性狀、鑒別、檢查、浸出物測(cè)定、含量測(cè)定、炮制、功能與主治、用法與用量、注意、貯藏等項(xiàng)內(nèi)容。第23頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月2.有關(guān)技術(shù)要求（1）名稱、漢語拼音、藥材拉丁名（2）來源（3）性狀系指藥材的外形、顏色、質(zhì)地、表面特征、斷面及嗅味等的描述，除必須鮮用的按鮮品描述外，一般以完整的干燥藥材為主，易破碎的藥材還須描述破碎部分。

第24頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月（4）鑒別包括經(jīng)驗(yàn)鑒別，顯微鑒別（組織切片、粉末或表面制片、顯微化學(xué)），一般理化鑒別和色譜（或光譜）鑒別，以及其他方法的鑒別。（5）檢查包括雜質(zhì)、水分、灰分、酸不溶性灰分、重金屬、砷鹽、農(nóng)藥殘留量及其他必要的檢查項(xiàng)目。第25頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月鑒別法選擇的基本原則

1.方法具專屬性、靈敏性，便于推廣。

2.化學(xué)法與儀器法相結(jié)合。每種藥品一般選用2~4種方法進(jìn)行鑒別試驗(yàn)。

3.盡可能采用藥典中收載的方法。第26頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月（6）浸出物測(cè)定（7）含量測(cè)定凡已知有效成分、毒性成分及能反映藥材內(nèi)在質(zhì)量的指標(biāo)成分均應(yīng)建立含量測(cè)定，包括藥材的預(yù)處理（分離提?。?、供試液配制、測(cè)定方法及含量限（幅）度。含量限（幅）度指標(biāo)應(yīng)根據(jù)實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)制訂。第27頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月中藥質(zhì)量控制的方法

第28頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月中藥的常規(guī)檢查

1、雜質(zhì)檢查:

同一物種不同的部位；來源與規(guī)定不同的物質(zhì)，如沙石、泥塊等。第29頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月2.浸出物及總固體的測(cè)定

對(duì)于有效成分尚不明確或尚無準(zhǔn)確定量方法的藥材，可分別用水或有機(jī)溶劑（乙醇、甲醇、乙醚等）使可溶性成分浸出，來表示藥材的品質(zhì)。中藥材的流浸膏則常用測(cè)定總固體來反映其質(zhì)量。供測(cè)定的中藥樣品須粉碎，通過二號(hào)篩，并混合均勻。第30頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月水溶性浸出物測(cè)定：冷浸和熱浸①冷浸法：取樣品粉末，加水冷浸24小時(shí)，過濾，取適量濾液置蒸發(fā)皿中，水浴蒸干后稱量，計(jì)算樣品中水溶性浸出物的百分?jǐn)?shù)。②熱浸法：樣品粉末加水靜置1小時(shí)后，熱回流1小時(shí)第31頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月醇溶性浸出物測(cè)定：用不同濃度的乙醇和甲醇為溶劑?？偣腆w測(cè)定：取流浸膏適量置蒸發(fā)皿中，水浴蒸干后稱量，計(jì)算樣品中總固體含量。第32頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月3.水分測(cè)定法藥材通常含有一定量的水分，但水分過多，尤其是根、根莖、葉、花、果（肉果）等，在貯藏、運(yùn)輸?shù)冗^程中常會(huì)引起霉變或化學(xué)成分變化，因此控制一定的含水量是保證藥材質(zhì)量的一個(gè)方面。藥典方法：甲苯法和烘干法甲苯法適用于含揮發(fā)性成分的藥材，烘干法適用于不含揮發(fā)性成分或少含該類成分的藥材。減壓干燥法含揮發(fā)性的成分的貴重樣品氣相色譜法無水乙醇做提取溶劑第33頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月甲苯法：取樣品置于圓底燒瓶中，加入適量甲苯，加熱使甲苯沸騰，并和藥材中的水分一并蒸餾入水分測(cè)定管中，待水分完全餾出后，使水分與甲苯完全分離，檢讀水量，并換算成供試品中含有水分的百分?jǐn)?shù)。烘干法：取樣品適量，平鋪于恒重的扁形稱量瓶中，100105℃干燥5小時(shí)并至恒重，根據(jù)減失的重量，計(jì)算供試品中含水分的百分?jǐn)?shù)。第34頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月4干燥失重測(cè)定法干燥失重指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，以百分率表示。---控制藥物中的水分\其他揮發(fā)性物質(zhì)常壓恒溫干燥法減壓干燥法

第35頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月常壓恒溫干燥法

適用于受熱較穩(wěn)定的藥物將供試品置相同條件下已干燥至恒重的扁形稱量瓶?jī)?nèi)，精密稱定，于烘箱內(nèi)在規(guī)定溫度下干燥至恒重，根據(jù)減失的重量和取樣量計(jì)算供試品的干燥失重?！昂阒亍?--指供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后的重量差異在0.3mg以下。第36頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月5灰分測(cè)定法總灰分測(cè)定藥材灰化后的總灰分主要是無揮發(fā)性的無機(jī)鹽類，如總灰分超過限量，則表明該藥材可能摻有無機(jī)物質(zhì)。方法：將樣品粉末置于熾灼恒重的坩堝中，稱量后加熱至炭化，升高溫度至完全灰化并稱重，根據(jù)殘?jiān)亓?，?jì)算樣品中含灰分的百分?jǐn)?shù)。第37頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月酸不溶性灰分測(cè)定酸不溶性灰分：用稀酸溶解去除藥材本身所含無機(jī)鹽（鈣鹽），而剩余的殘?jiān)鼞?yīng)為來自泥沙的硅酸鹽類方法：取總灰分測(cè)定所得灰分，加入適量稀鹽酸加熱，殘?jiān)盟从跓o灰濾紙上，并洗滌至洗液無氯化物反應(yīng)，然后將殘?jiān)盀V紙放入坩堝中，灰化至恒重，根據(jù)殘?jiān)亓?，?jì)算樣品中酸不溶性灰分的百分?jǐn)?shù)。2005版藥典新增：水分178個(gè)品種，灰分135個(gè)品種，酸不溶性灰分130個(gè)品種。第38頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月甲法乙法揮發(fā)油測(cè)定器7、揮發(fā)油測(cè)定第39頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月(1)農(nóng)藥殘留量測(cè)定有機(jī)氯、有機(jī)磷、擬除蟲菊酯(2)黃曲霉素的檢查(3)重金屬檢查要檢查重金屬、砷鹽等限量。(4)內(nèi)源性有害成分控制，如防己毒素、馬兜鈴酸等有害物質(zhì)的測(cè)定/中藥限量檢查第40頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月農(nóng)藥殘留量----因使用農(nóng)藥而殘留在人類、動(dòng)植物體內(nèi)或土壤中各種物質(zhì)的總量，包括在毒理學(xué)上有意義的降解轉(zhuǎn)化產(chǎn)物、代謝物、反應(yīng)產(chǎn)物和雜質(zhì)等任何特定的衍生物。第41頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月常用農(nóng)藥的分類有機(jī)氯類：六六六、DDT、五氯硝基苯；有機(jī)磷類：磷酸酯類（敵敵畏、敵百蟲）、硫代磷酸酯類（對(duì)硫磷、馬拉硫磷）、磷酰胺及硫代磷酰胺（甲胺磷）；氨基甲酸酯類：萘基氨基甲酸酯類（西維因）、雜環(huán)甲基氨基甲酸酯類（呋喃丹）、涕滅威等；擬除蟲菊酯類：模擬天然除蟲菊素，由人工合成的廣譜殺蟲劑，常用的有丙烯菊酯、氯菊酯、氯戊菊酯

第42頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月主要污染途徑：1、在栽培過程中為防治蟲害2、在倉儲(chǔ)過程中為了防蟲蛀3、在土壤中長(zhǎng)期殘留的農(nóng)藥第43頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月特點(diǎn):中藥材中農(nóng)藥殘留污染具有普遍性農(nóng)藥殘留量的分布：種植藥材；野生藥材；中成藥；藥材炮制不易發(fā)生急性中毒，慢性蓄積不可忽視

第44頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）殘留農(nóng)藥的提取索氏提取法超聲法固相萃取法(SPE)超臨界萃取法(SFE)微波輔助提取法(MAE)

第45頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月提取溶劑的選擇(1)純度：農(nóng)藥殘留分析中所應(yīng)用的溶劑較特殊，必須經(jīng)過處理并在色譜條件下檢驗(yàn)不含雜質(zhì)峰(重蒸法)。(2)極性：相似相溶原理；極性小的農(nóng)藥應(yīng)選擇低極性溶劑提取，如666、DDT等應(yīng)選用石油醚、正己烷等溶劑；極性較強(qiáng)的農(nóng)藥，如有機(jī)磷、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥應(yīng)選擇二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮等極性較大的溶劑第46頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月附錄IXQ有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

SE-54（30mx0.32mmx0.25um）或DB-1701，63Ni-ECD電子捕獲檢測(cè)器。理論塔板數(shù)按α-BHC峰計(jì)算，不低于106，分離度應(yīng)大于1.5?；旌蠈?duì)照品溶液

BHC（α,β,γ,δ-BHC），DDT（PP’-DDE、PP’-DDD、OP’-DDT、PP’-DDT），五氯硝基苯（PCNB）按外標(biāo)法計(jì)算9種農(nóng)藥殘留量第47頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月*部分農(nóng)藥的殘留限量參考值（μg/g）DDT（2.0）、六六六（2.0）、DDV（2.0）、百菌清（0.5）、樂果（2.0）、甲胺磷（1.0）、久效磷（0.2）*我國規(guī)定糧食作物的殘留限量BHC、DDT均為0.3μg/g*聯(lián)合國糧食組織規(guī)定的加工糧食中的殘留限量

BHC：0.3μg/g，DDT：0.2μg/g第48頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月重金屬元素的毒性主要是由于它們進(jìn)入體內(nèi)并與體內(nèi)酶蛋白上的SH和S=S鍵牢固結(jié)合，從而使蛋白質(zhì)變性，酶失去活性，組織細(xì)胞出現(xiàn)結(jié)構(gòu)和功能上的損害。鉛主要損害神經(jīng)系統(tǒng)、造血系統(tǒng)、消化系統(tǒng)；汞主要損害腎臟，造成腎功能衰竭；砷主要是擴(kuò)張毛細(xì)血管，使腹腔臟器嚴(yán)重充血，引起肝、腎、心等實(shí)質(zhì)器官的損害第49頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月主要污染途徑：1、中藥材---來源于栽培地的土壤、空氣和水2、中藥制劑---來源于中藥材，輔料，提取溶媒，工藝設(shè)備，接觸器皿等3、礦物藥中含有重金屬第50頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月比色法中華人民共和國藥典附錄IXE需進(jìn)行有機(jī)破壞：干法破壞和濕法破壞干法破壞：將供試品置坩堝中，先緩緩加熱至炭化，再在500-600℃熾灼至完全灰化，加酸處理用硫代乙酰胺法檢查濕法破壞：加入強(qiáng)酸（硫酸-硝酸混合液）及其鹽加熱破壞第51頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月

紫外分光光度法利用重金屬元素與試劑反應(yīng)后顯色在紫外光下有吸收的原理來測(cè)定重金屬的含量。原子吸收分光光度法（atomicabsorptionspectrophotometry，AAS）

分為冷原子吸收法和石墨爐原子吸收法電感耦合等離子體質(zhì)譜法（inductivelycoupledplasma-massspectrometry，ICP-MS）第52頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月

黃曲霉毒素黃曲霉毒素（AFT）是一類二氫呋喃香豆素的衍生物，目前已分離鑒定出12種,包括B1,B2,G1,G2,M1,M2,P1,Q,H1,GM,B2a和毒醇

。黃曲霉毒素是主要由黃曲霉(aspergillusflavus)、寄生曲霉(a.parasiticus)產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物

第53頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月難溶于水,易溶于甲醇,丙酮和氯仿等有機(jī)溶劑,但不溶于石油醚,己烷和乙醚中一般在中性溶液中較穩(wěn)定,在強(qiáng)酸性溶液中稍有分解,在pH9-10的強(qiáng)堿溶液中分解迅速純品為無色結(jié)晶耐高溫1類致癌物，劇毒物質(zhì)，對(duì)人及動(dòng)物肝臟組織有破壞作用第54頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月附錄IXV黃曲霉毒素測(cè)定法高效液相色譜法測(cè)定適用于藥材、飲片、制劑以黃曲霉毒素B1,B2,G1,G2總量計(jì)第55頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月常見有毒中藥—內(nèi)源性毒性成分控制Cardiovasculartoxicity心血管毒性:

Ephedra(麻黃),Toadvenom(蟾酥),Aconite(烏頭),LiushenWan(六神丸),etc.Hepatotoxicity肝毒性:Triptergiumwilfordii(雷公藤),Aconitumkusnezoffii(草烏),Senecioscandens(千里光),Cremastraappendiculate(山慈姑),Crotalariasessiliflora(農(nóng)吉利)etc.Nephrotoxicity腎毒性:Aristolochiamanshuriensis(關(guān)木通),Triptergiumhypoglaucam(昆明山海棠),Crotontiglium(巴豆),Xanthiumsibiricum(蒼耳子),Aristolichiafangchi(防己)etc.Carcinogenictoxicity致癌:

Asarumheterotropoides(細(xì)辛),Foeniculumvulagre(茴香),Myristicafragrans

(肉豆蔻),Acorustatarinowii(石菖蒲),AllergicReactions過敏反應(yīng):mainlyTCMInjections(中藥注射液)第56頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月

吡咯里西啶生物堿(pyrrolizidinealkaloids，PAs)是一類從植物中得到的天然有毒物質(zhì)，可引起肝細(xì)胞出血性壞死、肝巨細(xì)胞癥及靜脈閉塞癥等而引起廣泛關(guān)注。

目前已發(fā)現(xiàn)600多個(gè)不同結(jié)構(gòu)的PAs，存在于世界各地的6000多種有花植物中，主要分布于菊科、紫草科、豆科、蘭科，少量分布于厚殼科、玄參科、夾竹桃科、毛茛科、百合科等。

第57頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月

馬兜鈴酸（aristolochicacid，AA）是一類含硝基取代的菲類化合物，主要來源于馬兜鈴科植物第58頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月中藥質(zhì)量的定量分析1.以化學(xué)成分為對(duì)象有效成分---首選總成分“指標(biāo)成分”第59頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月2.化學(xué)成分的定量分析方法

(1)含量測(cè)定方法選擇經(jīng)典分析方法(容量法、重量法)分光光度法色譜法氣相色譜法、高效液相色譜法、薄層—分光光度法、高效毛細(xì)管電泳法等。第60頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月經(jīng)典方法在中藥質(zhì)量控制中的應(yīng)用重量法為經(jīng)典的分析方法之一，是用分析天平直接稱量被測(cè)成分和反應(yīng)物；準(zhǔn)確度較高，步驟多，操作繁瑣費(fèi)時(shí)；重量法—用于浸出物測(cè)定、水分和灰分的測(cè)定、某些生物堿成分和鞣質(zhì)成分的含量測(cè)定。常用：沉淀重量法、提取重量法和揮發(fā)重量法。第61頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月提取重量法根據(jù)待測(cè)成分的特性，利用適當(dāng)溶劑將待測(cè)成分從樣品中提取或萃取出來，再經(jīng)適當(dāng)純化，蒸干溶劑，將提取物干燥至恒重，根據(jù)提取物的重量計(jì)算待測(cè)成分的百分含量的方法，稱為提取重量法。該法計(jì)算出的含量一般是某類總成分的含量第62頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月示例：姜流浸膏的含量測(cè)定姜流浸膏是干姜粗粉經(jīng)乙醇浸漬、滲漉、濃縮制成，中華人民共和國藥典1995年版一部規(guī)定其含醚溶性物質(zhì)不得少于4.5％。方法：精密量取本品20ml，置水浴上蒸去乙醇，放冷，加乙醚50ml，用玻璃棒攪拌，使醚溶性物質(zhì)溶解，傾取乙醚液，濾過，殘液繼續(xù)用乙醚提取23次，每次50ml，濾過，合并乙醚液，低溫回收乙醚，殘?jiān)昧蛩岣稍锲髦懈稍?4h，精密稱定，即得樣品中含有醚溶性物質(zhì)的重量。第63頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月容量法容量分析是根據(jù)一種已知濃度的試劑溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液和被測(cè)成分完全作用時(shí)所消耗的體積來計(jì)算被測(cè)成分含量的方法。中藥有效成分分析中常用的滴定法有酸堿滴定法和兩相滴定法。第64頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月酸堿滴定法---生物堿類成分多采用剩余滴定法，即用一定量已知濃度的酸使與生物堿中和生成鹽，剩余的酸再被已知濃度的堿滴定，根據(jù)實(shí)際消耗的酸量和生物堿之間的定量關(guān)系計(jì)算出百分含量。酸堿滴定法測(cè)定的結(jié)果是總生物堿的含量。方法：精密稱取一定量的中藥粉末，經(jīng)提取、凈化后，在水浴上蒸去溶劑，得到總生物堿。加入一定量已知濃度的硫酸，使之充分溶解，加甲基紅指示劑2滴，再以已知濃度的氫氧化鈉滴定剩余的硫酸，根據(jù)實(shí)際消耗的硫酸量計(jì)算出總生物堿的含量。第65頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月(2)含量測(cè)定方法考察提取條件的選定、分離、純化測(cè)定條件的選擇、線性關(guān)系的考察測(cè)定方法的穩(wěn)定性試驗(yàn)精密度、重復(fù)性試驗(yàn)回收率試驗(yàn)樣品測(cè)定第66頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月(3)含量限(幅)度的制定含量較低但仍可藥用者取為下限含量限度的制定應(yīng)有足夠的，具代表性的樣品數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)。毒劇藥必須規(guī)定幅度：馬錢子中士的寧1.20%-2.20%。第67頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月含量測(cè)定起草說明闡明含量測(cè)定方法的原理；確定該方法的方法學(xué)考察資料（包括方法的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性試驗(yàn)，回收率試驗(yàn)空白實(shí)驗(yàn)等）；闡明確定該含量限（幅）度的意義及依據(jù)（至少應(yīng)有10批樣品20個(gè)數(shù)據(jù)）。其他經(jīng)過實(shí)驗(yàn)而未選用含量測(cè)定方法的理由及其全部實(shí)驗(yàn)資料。第68頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月3中藥化學(xué)成分多成分監(jiān)測(cè)及指紋圖譜

中藥化學(xué)成分指紋圖譜系指中藥經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標(biāo)定該中藥特性的共有化學(xué)成分峰的圖譜。指紋圖譜全面反映了中藥所含內(nèi)在化學(xué)成分的種類與數(shù)量，更加有效地體現(xiàn)了中藥成分的復(fù)雜性，從而能更好地評(píng)價(jià)中藥的內(nèi)在質(zhì)量。

指紋圖譜必須同時(shí)具有系統(tǒng)性、特征性、重現(xiàn)性。

第69頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月貝母藥材TLC指紋圖譜第70頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月第71頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月S1S2S3S4S5S6S7S8S9S10RS11.0000.9760.9660.9830.9550.9600.9770.9740.9890.9600.981S20.9761.0000.9380.9690.9430.9540.9850.9720.9750.9810.979S30.9660.9381.0000.9750.9830.9750.9610.9750.9740.9480.979S40.9830.9690.9751.0000.9720.9720.9800.9900.9920.9790.992S50.9550.9430.9830.9721.0000.9910.9630.9840.9720.9610.984S60.9600.9540.9750.9720.9911.0000.9660.9880.9760.9690.986S70.9770.9850.9610.9800.9630.9661.0000.9840.9840.9750.989S80.9740.9720.9750.9900.9840.9880.9841.0000.9870.9860.996S90.9890.9750.9740.9920.9720.9760.9840.9871.0000.9710.992S100.9600.9810.9480.9790.9610.9690.9750.9860.9711.0000.985R0.9810.9790.9790.9920.9840.9860.9890.9960.9920.9851.00010批制劑的相似度計(jì)算結(jié)果

R對(duì)照指紋圖譜第72頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月第73頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月4.中藥生物活性測(cè)定利用生物（整體或離體）的反應(yīng)來測(cè)定各種藥物的效價(jià)、作用強(qiáng)度和毒性的一種方法。第74頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月洋地黃標(biāo)準(zhǔn)品每g含10個(gè)效價(jià)單位，用鴿子試驗(yàn)致死量為90.5mg/Kg，如檢品洋地黃致死量為100mg/kg，兩者相比標(biāo)準(zhǔn)品的強(qiáng)度是檢品的1.1倍，即檢品每g含9.05個(gè)效價(jià)單位。(中國藥典1995年版規(guī)定洋地黃葉每g的效價(jià)不少于10個(gè)效價(jià)單位。)90.5×10=100×X，x=9.05第75頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)展趨勢(shì)

從源頭做起，存真去偽進(jìn)行GAP相關(guān)探討，尋找最優(yōu)藥材、飲片、成藥的全程質(zhì)量控制加強(qiáng)基礎(chǔ)研究全方位的立體控制第76頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月中藥的鑒定基源(原植物、原動(dòng)物和礦物)鑒定性狀鑒定顯微鑒定理化鑒定

分子生物學(xué)鑒定第77頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月DNA分子鑒定（分子生物學(xué)技術(shù)）第78頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月DNA分子標(biāo)記技術(shù)的特點(diǎn)遺傳穩(wěn)定性遺傳多樣性化學(xué)穩(wěn)定性第79頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月第80頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月DNA分子標(biāo)記的技術(shù)方法與原理（1）限制性內(nèi)切酶酶切片段長(zhǎng)度多態(tài)性（restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP）原理：利用特定的限制性內(nèi)切酶識(shí)別并切割基因組DNA，得到大小不等、數(shù)量不同的DNA片段，經(jīng)過凝膠電泳分離這些限制性片段，通過Southern印跡將分子片段轉(zhuǎn)移到支持膜上，用同位素標(biāo)記的探針進(jìn)行雜交，經(jīng)過放射自顯影或酶學(xué)檢測(cè)，顯示出不同材料的RFLP譜帶。第81頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月優(yōu)點(diǎn)：RFLP標(biāo)記量大，探針可隨機(jī)選擇，可以是核糖體DNA、葉綠體DNA,也可以是總DNA。缺點(diǎn)：使用同位素；需DNA量較大、操作繁雜、費(fèi)用高。第82頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的標(biāo)記技術(shù)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymorasechainreaction,PCR）:以待擴(kuò)增的兩條DNA鏈為模板，由一對(duì)人工合成的寡核苷酸引物介導(dǎo)，通過DNA聚合酶在體外進(jìn)行DNA序列擴(kuò)增。PCR在經(jīng)過變性、復(fù)性、延伸過程的約30個(gè)循環(huán)后，能在短時(shí)間內(nèi)將痕量的靶DNA擴(kuò)增數(shù)百萬倍。

優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便、快速、特異、靈敏，不需使用同位素，對(duì)材料要求不嚴(yán)。第83頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月

隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA和任意引物PCR(randomamplifiedpolymorphicDNA,

RAPD;arbitraryprimedPCR,

AP-PCR)：適于未知序列的基因組DNA檢測(cè)

擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性（amplifiedfragmentlengthpolymorphism,

AFLP）:多態(tài)性高、檢測(cè)可靠；穩(wěn)定性好，重復(fù)性強(qiáng)；反應(yīng)遲鈍、成本高，對(duì)技術(shù)要求苛刻。

簡(jiǎn)單序列重復(fù)（simplesequencerepeat，SSR）和簡(jiǎn)單序列重復(fù)區(qū)間擴(kuò)增多態(tài)性（inter-simplesequencereoeat,

ISSR）:穩(wěn)定性強(qiáng)、位置確定第84頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）DNA測(cè)序方法（DNAsequencing）第85頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月DNA分子標(biāo)記技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用第86頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月第87頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月第88頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月

單葉蔓荊ISSR的遺傳多樣性

A為由引物881擴(kuò)增14個(gè)居群各抽樣一個(gè)植株；B為由842擴(kuò)增的隨機(jī)抽出171個(gè)植株中11個(gè)的圖譜單葉蔓荊擴(kuò)增出的163條帶的分子量位于165bp到2300bp之間第89頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月基于ISSR分析的Nei's遺傳距離的單葉蔓荊居群遺傳關(guān)系聚類圖

第90頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月遺傳分化與地理距離的關(guān)系

14個(gè)居群蔓荊的遺傳分化與地理距離的Mantal相關(guān)分析第91頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月14個(gè)居群蔓荊的化學(xué)和遺傳聚類圖

第92頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月第93頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月第94頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月基因芯片技術(shù)的應(yīng)用應(yīng)用包含擬南芥全基因組的擬南芥cDNA基因芯片，尋找差異表達(dá)基因，建立特征基因譜，實(shí)現(xiàn)其遺傳模式識(shí)別應(yīng)用生物信息處理技術(shù)，考察色譜指紋圖譜與特征基因譜的相關(guān)性，探索遺傳本質(zhì)第95頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月中藥材GAP主要內(nèi)容共包括10章57條，涵蓋產(chǎn)地生態(tài)環(huán)境、種質(zhì)和繁殖材料、栽培與種植管理、藥用動(dòng)物養(yǎng)殖管理、采收與初加工、包裝運(yùn)輸與貯藏、質(zhì)量管理、人員設(shè)備、文件管理等重要內(nèi)容第96頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月NewTCMProductDeveloped-DanQiTabletWater-solublephenolicacidsLipophilictanshinonesPhenolicacidsSaponinsFlavones,proteins,aminoacidsNotoginsenosidesSanqisaponinsSalviaNotoginseng+第97頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月丹參SalviamiltiorrhizaSalviamiltiorrhiza:LabiataeFamilyChemicalConstituents:

Phenolicacids:tanshensu,protocatechuicaldehyde,salvianolicacidsA,B,C,D,G,I,Hetc.

Tanshinones:tanshinoneIIA,IIB,etc.Pharmacologicalaction:

1.anti-PAF2.anti-oxidation3.anti-bacterial,etc.Clinicalapplication:

Coronaryheartdisease,anginapectoris第98頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月MonomerPhenolicCompoundsIsolatedfromRootsofSalviamiltiorrhizaDimerTrimertetramer第99頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月Quantitativedeterminationof6salvianolicacids

DanshensuProcatechuicaldehydeRosemaricacidLithospermicacidSalBSalADanshenRoots(丹參)DanshenDrippingpill(復(fù)方丹參滴丸)第100頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月Quantitativedeterminationof4tanshinonesRepresentativeHPLCchromatogramsof(A)standardsolutionatmediumconcentration,(B)FDT(Xianzhi,Liaoning,China),(C)Danshen(Shanxi,China)1,dihydrotanshinonⅠ;2,cryptotanshinone;3,tanshinoneⅠ;4,tanshinoneIIA.4Referencestandards(4個(gè)對(duì)照品)FufangDanshenTablets(復(fù)方丹參片)Danshenroot(丹參藥材)第101頁，課件共115頁，創(chuàng)作于2023年2月ChromatographicfingerprintsofSalviamiltiorrhizaa