酵母菌形態(tài)觀察及死活細胞的觀察課件

關于酵母菌形態(tài)觀察及死活細胞的觀察第1頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三酵母菌形態(tài)觀察及死活細胞的觀察；微生物細胞大小和數(shù)量的測定目的要求實驗材料實驗程序思考題第2頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三目的要求觀察酵母形態(tài)，加深理解酵母的形態(tài)特征美藍染色鑒定酵母的死活學習使用目鏡測微尺和鏡臺測微尺在顯微鏡下測定微生物大小的方法。學習使用血球記數(shù)板測定微生物數(shù)量的方法。第3頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三實驗材料顯微鏡、目鏡測微尺、鏡臺測微尺、血球記數(shù)板、酵母菌懸液、蓋玻片、美藍、無菌滴管、吸水紙、擦鏡紙、香柏油、擦鏡油。第4頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三實驗程序5-1:測定微生物的大小5-2:測定微生物數(shù)量5-3:酵母的形態(tài)特和美藍染色鑒定酵母的死活第5頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三實驗5-1:酵母的形態(tài)特和美藍染色鑒定酵母的死活

第6頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三實驗5-1a：Yeasts(unicellularfungi)Division:buddingDonotformfilamentsSomeformfilamentsSomecanmate.第7頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三蜉蝣體表面的酵母菌第8頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三面包酵母出芽生殖中的啤酒酵母第9頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三實驗5-1:測定微生物的大小第10頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三

測定的工具：目鏡測微尺鏡臺測微尺第11頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三實驗5-1實驗程序（測定微生物的大小）目鏡測微尺的校正：在高倍鏡下，看清鏡臺測微尺的刻度后，轉動目鏡，使目鏡測微尺與鏡臺測微尺的刻度平行，移動推動器，使目鏡測微尺的0點與鏡臺測微尺的某一刻度重合，然后，仔細尋找兩尺第二個完全重合的刻度。計算兩刻度間目鏡測微尺的格數(shù)和鏡臺測微尺的格數(shù)。由于鏡臺測微尺的刻度每格長10μm，所以可得：目鏡測微尺每格長度（μm）=（鏡臺測微尺格數(shù)×10）/目鏡測微尺格數(shù)注意：校正目鏡測微尺必須針對特定的顯微鏡和附件（特定的接物鏡、接目鏡、鏡筒長度等）進行，而且只能在這特定的情況下才可重復使用。菌體大小的測定：取下鏡臺測微尺，將細菌染色標本置于載物臺上，然后在油鏡下用目鏡測微尺測量菌體的長和寬。第12頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三第13頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三實驗5-2:測定微生物數(shù)量

第14頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三實驗5-2實驗程序（測定微生物數(shù)量）方法：活菌計數(shù)法——平板菌落計數(shù)法；總菌計數(shù)法——血球計數(shù)板或霍瑟（PeroffHausser）細菌計數(shù)板（二者原理和部件相同，只是厚薄不同而已）。

第15頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三第16頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三第17頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三實驗程序Ⅱ1（測定微生物數(shù)量）

1.

取清潔無油的血球計數(shù)板，在計數(shù)室上面加蓋玻片。

2.

取酵母菌液，搖勻，用滴管由蓋玻片邊緣滴一小滴，使菌液自行滲入，計數(shù)室內(nèi)不得有氣泡。

3.

靜止5min后，用低倍鏡觀察并將計數(shù)室移至視野中央。

4.

在高倍鏡下計數(shù)：隨機計數(shù)五個中格的平均值，然后求得每個中格的平均值。乘上16（或25）就得出一大格中的總菌數(shù)，最后再換算到每mL菌液中的含菌數(shù)。第18頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三實驗程序Ⅱ2

5.

計算方法：

6.注意事項：壓在方格線上的菌體，以壓在底線和右側線上的菌體計入本格內(nèi)；遇到有芽體的酵母時，若芽體和母體同等大，就按單個酵母計數(shù)。

7.

計數(shù)完畢后，血球計數(shù)板要立即清洗干凈，并用吸水紙吸干，最后用擦鏡紙擦干凈，并放回盒內(nèi)。

（X1+X2+X3+X4+X5）5*25（或16）*10*1000*稀釋倍數(shù)

酵母菌細胞數(shù)/mL=第19頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三實驗5-3：美藍染色死活細胞鑒定美藍為無毒染料，其氧化型呈藍色，還原型無色。通過美藍染色，檢驗細胞的還原能力?；罴毎€原能力強，在特定時間內(nèi)將美藍還原為無色。老化、死亡細胞呈藍色、淡藍色。第20頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三第21頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三第22頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三思考題為什么目鏡測微尺必