who實驗室生物安全手冊

實驗室

生物安全手冊

第三版

世界衛(wèi)生組織

日內(nèi)瓦

2004

世界衛(wèi)生組織圖書館出版物分類數(shù)據(jù)

世界衛(wèi)生組織.

實驗室生物安全手冊-第三版

1.生物危害防護(hù)-方法2.實驗室-標(biāo)準(zhǔn)3.實驗室感染-預(yù)防和控制4.手冊I.標(biāo)題

ISBN9241546506(LC/NLMclassification:QY25)WHO/CDS/CSR/LYO/2004.11

木手冊的出版得到了美國疾病控制與預(yù)防中心(CDC,Atlanta,GA,USA)MU50/CCU012445-08號資助，合作協(xié)議

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?世界衛(wèi)生組織2004

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設(shè)計：minimumgraphics

印刷：馬耳他

目錄

序..................................................................................viii

致謝................................................................................ix

第1章總則.......................................................................1

弓I言.............................................................................1

第一部分生物安全指南

第2章微生物危險度評估...........................................................7

信息有限的標(biāo)本..................................................................7

危險度評估與遺傳修飾微生物.....................................................8

第3章基礎(chǔ)實驗室——一級和二級生物安全水平......................................9

操作規(guī)范........................................................................9

實驗室的設(shè)計和設(shè)施.............................................................11

實驗室設(shè)備.....................................................................13

健康和醫(yī)學(xué)監(jiān)測................................................................15

培訓(xùn)............................................................................15

廢棄物處理.....................................................................16

化學(xué)品、火、電、輻射以及儀器設(shè)備安全.............................................17

第4章防護(hù)實驗室——三級生物安全水平...........................................18

操作規(guī)范.......................................................................18

實驗室的設(shè)計和設(shè)施.............................................................18

實驗室設(shè)備.....................................................................19

健康和醫(yī)學(xué)監(jiān)測................................................................19

第5章最高防護(hù)實驗室——四級生物安全水平.......................................22

操作規(guī)范.......................................................................22

實驗室的設(shè)計和設(shè)施............................................................22

第6章實驗動物設(shè)施..............................................................25

動物設(shè)施——一級生物安全水平..................................................26

動物設(shè)施——二級生物安全水平..................................................26

動物設(shè)施——三級生物安全水平..................................................27

動物設(shè)施——四級生物安全水平..................................................27

無脊椎動物.....................................................................28

iii

目錄

第7章實驗室/動物設(shè)施試運行指南...............................................29

第8章實驗室/動物設(shè)施認(rèn)證指南.................................................31

第二部分實驗室生物安全保障

第9章實驗室生物安全保障的概念.................................................41

第三部分實驗室設(shè)備

第10章生物安全柜................................................................45

I級生物安全柜.................................................................46

n級生物安全柜.................................................................46

in級生物安全柜.................................................................49

生物安全柜的通風(fēng)連接..........................................................49

生物安全柜的選擇............................................................49

實驗室中生物安全柜的使用......................................................50

第11章安全設(shè)備..................................................................53

負(fù)壓柔性薄膜隔離裝置..........................................................54

移液輔助器.....................................................................54

勻漿器、搖床、攪拌器和超聲處理器...............................................55

一次性接種環(huán)...................................................................55

微型加熱器.....................................................................55

個體防護(hù)裝備和防護(hù)服..........................................................55

第四部分微生物學(xué)操作技術(shù)規(guī)范

第12章實驗室技術(shù)................................................................61

實驗室中標(biāo)本的安全操作........................................................61

移液管和移液輔助器的使用......................................................61

避免感染性物質(zhì)的擴散..........................................................62

生物安全柜的使用...............................................................62

避免感染性物質(zhì)的食入以及與皮膚和眼睛的接觸...................................62

避免感染性物質(zhì)的注入..........................................................63

血清的分離.....................................................................63

離心機的使用...................................................................63

勻漿器、搖床、攪拌器和超聲處理器的使用........................................64

組織研磨器的使用...............................................................64

冰箱與冰柜的維護(hù)和使用........................................................64

裝有凍干感染性物質(zhì)安甑的開啟..................................................64

裝有感染性物質(zhì)安瓶的儲存......................................................65

iv

目錄

對血液和其他體液、組織及排泄物的標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)方法..................................65

對可能含有骯蛋白物質(zhì)的防護(hù)....................................................66

第13章意外事故應(yīng)對方案和應(yīng)急程序...............................................68

意外事故應(yīng)對方案...............................................................68

微生物實驗室應(yīng)急程序..........................................................68

第14章消毒和滅菌................................................................71

定義............................................................................71

實驗室材料的清潔...............................................................71

化學(xué)殺菌劑.....................................................................72

清除局部環(huán)境的污染.............................................................75

清除生物安全柜的污染..........................................................76

洗手/清除手部污染.............................................................76

熱力消毒和滅菌.................................................................76

焚燒............................................................................78

廢棄物處理.....................................................................78

第15章感染性物質(zhì)的運輸.........................................................79

國際運輸規(guī)定...................................................................79

基本的三層包裝系統(tǒng).............................................................79

溢出清除程序...................................................................81

第五部分生物技術(shù)介紹

第16章生物安全和重組DNA技術(shù)...................................................85

生物表達(dá)系統(tǒng)的生物安全考慮....................................................85

表達(dá)載體的生物安全考慮........................................................85

用于基因轉(zhuǎn)移的病毒載體........................................................85

轉(zhuǎn)基因動物和“基因敲除”動物...................................................86

轉(zhuǎn)基因植物.....................................................................86

遺傳修飾生物體的危險度評估....................................................86

進(jìn)一步的考慮...................................................................87

第六部分化學(xué)品、火和電的安全

第17章危害性化學(xué)品..............................................................91

暴露途徑.......................................................................91

化學(xué)品的儲存...................................................................91

關(guān)于不相容化學(xué)品的一般原則....................................................91

化學(xué)品的毒性作用...............................................................91

爆炸性化學(xué)品...................................................................92

化學(xué)品溢出.....................................................................92

目錄

壓縮氣體和液化氣...............................................................92

第18章其他實驗室危害...........................................................94

火的危害.......................................................................94

電的危害.......................................................................95

噪聲...........................................................................95

電離輻射.......................................................................95

第七部分安全組織和培訓(xùn)

第19章生物安全官員和安全委員會...............................................101

生物安全官員..................................................................101

生物安全委員會................................................................101

第20章后勤保障人員的安全......................................................103

工程和建筑物的維護(hù)保養(yǎng)........................................................103

清潔（內(nèi)務(wù)）保養(yǎng)................................................................103

第21章培訓(xùn)規(guī)劃................................................................104

第八部分安全清單

第22章安全清單................................................................109

實驗室建筑....................................................................109

儲存設(shè)施.......................................................................109

環(huán)境衛(wèi)生和工作人員設(shè)施........................................................109

暖氣和通風(fēng)....................................................................110

照明...........................................................................110

保養(yǎng)...........................................................................110

實驗室生物安全保障.............................................................110

防火與消防.....................................................................111

易燃液體的儲存................................................................111

壓縮氣體和液化氣..............................................................111

電的危害.......................................................................112

個體防護(hù).......................................................................112

工作人員的健康與安全..........................................................112

實驗室儀器設(shè)備................................................................113

感染性物質(zhì)....................................................................113

化學(xué)品和放射性物質(zhì)............................................................114

第九部分參考文獻(xiàn)、附錄和索引

參考文獻(xiàn)...........................................................................117

vi

目錄

附錄1急救......................................................................121

附錄2工作人員的免疫接種........................................................122

附錄3WHO生物安全合作中心...................................................123

附錄4設(shè)備的安全性..............................................................124

可能產(chǎn)生危害的儀器設(shè)備........................................................124

附錄5化學(xué)品:危害與預(yù)防.........................................................127

索引...............................................................................150

vii

序

世界衛(wèi)生組織(WHO)早就認(rèn)識到安全，特別是生物安全，是一個重要的國際性問題，因

此早在1983年就出版了《實驗室生物安全手冊》(LaboratoryBiosafetyManual)第1版。該手冊

鼓勵各國接受和執(zhí)行生物安全的基本概念，并鼓勵針對本國實驗室如何安全處理致病微生物制訂

操作規(guī)范。1983年以來，已經(jīng)有許多國家利用該手冊所提供的專家指導(dǎo)，制訂了生物安全操作規(guī)

范。該手冊的第2版于1993年出版。

在該手冊第3版中，WHO將繼續(xù)發(fā)揮她在國際生物安全領(lǐng)域的領(lǐng)導(dǎo)作用，闡述新千年所面

臨的生物安全和生物安全保障問題。該手冊第3版自始至終強調(diào)了工作人員個人責(zé)任心的重要作

用，并在下列幾個方面增加了新的內(nèi)容：危險度評估、重組DNA技術(shù)的安全利用以及感染性物

質(zhì)運輸。世界上最近發(fā)生的事件表明，由于蓄意濫用和排放微生物因子和毒素，公共衛(wèi)生正受到

新的威脅。因此，第3版也介紹了生物安全保障的概念——保護(hù)微生物資源免受盜竊、遺失或轉(zhuǎn)

移，以免因微生物資源的不適當(dāng)使用而危及公共衛(wèi)生。第3版中還包括了1997年WHO出版的

《衛(wèi)生保健實驗室安全》山(SafetyinHealth-CareLaboratories)中有關(guān)安全的內(nèi)容。

WHO《實驗室生物安全手冊》第3版對各個國家都是有益的參考和指南，它可以幫助制訂

并建立微生物學(xué)操作規(guī)范，確保微生物資源的安全，進(jìn)而確保其可用于臨床、研究和流行病學(xué)等

各項工作。

DrA.Asamoa-Baah

助理總干事

傳染病事務(wù)

世界衛(wèi)生組織

瑞士，日內(nèi)瓦

VIII

致謝

《實驗室生物安全手冊》第3版的完成得益于下列人員的貢獻(xiàn)，在此表示衷心的感謝：

DrW.EmmettBarkley,HowardHughesMedicalInstitute,ChevyChase,MD,USA

DrMurrayL.Cohen,CentersfbrDiseaseControlandPrevention,Atlanta,GA,USA

(retired)

DrIngegerdKallings,SwedishInstituteofInfectiousDiseaseControl,Stockholm,Sweden

MsMaryEllenKennedy,ConsultantinBiosafety,Ashton,Ontario,Canada

MsMargeryKennett,VictorianInfectiousDiseasesReferenceLaboratory,NorthMelbourne,

Australia(retired)

DrRichardKnudsen,OfficeofHealthandSafety,CentersfbrDiseaseControlandPrevention,

Atlanta,GA,USA

DrNicolettaPrcvisani,Biosafetyprogramme,WorldHealthOrganization,Geneva,

Switzerland

DrJonathanRichmond,OfficeofHealthandSafety,CentersforDiseaseControland

Prevention,Atlanta,GA,USA(retired)

DrSyedA.Sattar,FacultyofMedicine,UniversityofOttawa,Ottawa,Ontario,Canada

DrDeborahE.Wilson,DivisionofOccupationalHealthandSafety,OfficeofResearch

Services,NationalInstitutesofHealth,DepartmentofHealthandHumanServices,

Washington,DC,USA

DrRiccardoWittek,InstituteofAnimalBiology,UniversityofLausanne,Lausanne,

Switzerland

并感謝下列人員所給予的協(xié)助：

MsMaureenBest,OfficeofLaboratorySecurity,HealthCanada,Ottawa,Canada

DrMikeCatton,VictorianInfectiousDiseasesReferenceLaboratory,Melbourne,Australia

DrShannaNesby,OfficeofHealthandSafety,CentersfbrDiseaseControlandPrevention,

Atlanta,GA,USA

DrStefanWagener,CanadianScienceCentrefbrHumanandAnimalHealth,Winnipeg,

Canada

作者和審閱人還要感謝許多專業(yè)人員在《實驗室生物安全手冊》第1版和第2版以及1997

年WHO出版的《衛(wèi)生保健實驗室安全》⑴中所做出的原創(chuàng)性貢獻(xiàn)。

ix

第1章總則

引言

在本手冊中，我們根據(jù)感染性微生物的相對危害程度制訂了危險度等級的劃分標(biāo)準(zhǔn)（WHO

的危險度1級、2級、3級和4級）。該危險度等級的劃分僅適用于實驗室工作。表1敘述了不

同的危險度等級。

表1感染性微生物的危險度等級分類

危險度1級（無或極低的個體和群體危險）

不太可能引起人或動物致病的微生物。

危險度2級（個體危險中等,群體危險低）

病原體能夠?qū)θ嘶騽游镏虏?，但對實驗室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導(dǎo)致嚴(yán)重危害。

實驗室暴露也許會引起嚴(yán)重感染，但對感染有有效的預(yù)防和治療措施，并且疾病傳播的危險有限。

危險度3級（個體危險高,群體危險低）

病原體通常能引起人或動物的嚴(yán)重疾病，但般不會發(fā)生感染個體向其他個體的傳播，并且

對感染有有效的預(yù)防和治療措施。

危險度4級（個體和群體的危險均高｝

病原體通常能引起人或動物的嚴(yán)重疾病，并且很容易發(fā)生個體之間的直接或間接傳播，對感

染一般沒有有效的預(yù)防和治療措施。

實驗室可以分為基礎(chǔ)實驗室——一級生物安全水平、基礎(chǔ)實驗室——二級生物安全水平、防

護(hù)實驗室——三級生物安全水平和最高防護(hù)實驗室——四級生物安全水平。根據(jù)操作不同危險度

等級微生物所需的實驗室設(shè)計特點、建筑構(gòu)造、防護(hù)設(shè)施、儀器、操作以及操作程序來決定實驗

室的生物安全水平。表2敘述了與不同危險度等級相對應(yīng)的（而非“等同的”）各危險度等級微

生物所要求的實驗室生物安全水平。

1

第1章基本原則

表2與微生物危險度等級相對應(yīng)的生物安全水平、操作和設(shè)備

危險度

生物安全水平實驗室類型實驗室操作安全設(shè)施

等級

1級基礎(chǔ)實驗室——-基礎(chǔ)的教學(xué)、研GMT不需要；開放實驗臺

級生物安全水平究

2級基礎(chǔ)實驗室——二初級衛(wèi)生服務(wù)；GMT加防護(hù)服、生物危開放實驗臺，此外需

級生物安全水平診斷、研究害標(biāo)志BSC用于防護(hù)可能生

成的氣溶膠

3級防護(hù)實驗室——三特殊的診斷、研在二級生物安全防護(hù)水BSC和/或其他所有

級生物安全水平究平上增加特殊防護(hù)服、實驗室工作所需要的

進(jìn)入制度、定向氣流基本設(shè)備

4級最高防護(hù)實驗室危險病原體研在三級生物安全防護(hù)水III級BSC或n級BSC

——四級生物安全究平上增加氣鎖入口、出并穿著正壓服、雙開門

水平口淋浴、污染物品的特高壓滅菌器（穿過墻

殊處理體）、經(jīng)過濾的空氣

BSC：生物安全柜：GMT：微生物學(xué)操作技術(shù)規(guī)范（見本手冊第4部分）。

每個國家（地區(qū)）應(yīng)該按照危險度等級，并考慮以下因素來制訂各自的微生物分類目錄：

1、微生物的致病性。

2、微生物的傳播方式和宿主范圍。它們可能會受到當(dāng)?shù)厝巳阂延械拿庖咚?、宿主群體的

密度和流動、適宜媒介的存在以及環(huán)境衛(wèi)生水平等因素的影響。

3、當(dāng)?shù)厮邆涞挠行ьA(yù)防措施。這些措施包括：通過接種疫苗或給予抗血清的預(yù)防（被動

免疫）；衛(wèi)生措施，例如食品和飲水的衛(wèi)生；動物宿主或節(jié)肢動物媒介的控制。

4、當(dāng)?shù)厮邆涞挠行е委煷胧?。這些措施包括：被動免疫、暴露后接種疫苗以及使用抗生

素、抗病毒藥物和化學(xué)治療藥物，還應(yīng)考慮出現(xiàn)耐藥菌株的可能性。

在實驗室工作中，應(yīng)根據(jù)危險度評估結(jié)果將微生物因子歸入某一生物安全水平。在通過危險

度評估工作來確立適當(dāng)?shù)纳锇踩綍r，要考慮危險度等級以及其他一些因素。例如，歸入危

險度2級的微生物因子，進(jìn)行安全工作通常需要二級生物安全水平的設(shè)施、儀器、操作和規(guī)程。

但是，如果特定實驗需要發(fā)生高濃度的氣溶膠時，由于三級生物安全水平通過對實驗工作場所內(nèi)

氣溶膠實施更高級別的防護(hù)，所以更適于提供所必需的生物安全防護(hù)。因此，在確定所從事特定

工作的生物安全水平時，應(yīng)根據(jù)危險度評估結(jié)果來進(jìn)行專業(yè)判斷，而不應(yīng)單純根據(jù)所使用病原微

生物所屬的某一危險度等級來機械地確定所需的實驗室生物安全水平（見第2章）。

表3匯總了四種不同生物安全水平的防護(hù)要求。

2

第1章基本原則

表3不同生物安全水平對設(shè)施的要求

生物安全水平

一級二級三級四級

實驗室隔離,不需要不需要需要需要

房間能夠密閉消毒不需要不需要需要需要

通風(fēng)

—向內(nèi)的氣流不需要最好有需要需要

——通過建筑系統(tǒng)的通風(fēng)設(shè)備不需要最好有需要需要

—HEPA過濾排風(fēng)不需要不需要需要/不需要b需要

雙門入口不需要不需要需要需要

氣鎖不需要不需要不需要需要

帶淋浴設(shè)施的氣鎖不需要不需要不需要需要

通過問不需要不需要需要—

帶淋浴設(shè)施的通過問不需要不需要需要/不需要C不需要

污水處理不需要不需要需要/不需要C需要

高壓滅菌器

——現(xiàn)場不需要最好有需要需要

——實驗室內(nèi)不需要不需要最好有需要

——雙門不需要不需要最好有需要

生物安全柜不需要最好有需要需要

人員安全監(jiān)控條件d不需要不需要最好有需要

a在環(huán)境與功能上與普通流動環(huán)境隔離

b取決于排風(fēng)位置（見第4章）

,取決于實驗室中所使用的微生物因子

d例如：觀察窗、閉路電視、雙向通訊設(shè)備

因此，在選定生物安全水平時，要考慮所使用的生物體（病原因子）、可利用的實驗設(shè)施、

實驗室內(nèi)從事安全工作所需要的儀器的操作和程序。

3

第1章基本原則

4

第一部分

生物安全指南

5

第1章基本原則

6

第2章微生物危險度評估

生物安全工作的核心是危險度評估?？梢越柚S多方法來對某一個特定的操作程序或?qū)嶒炦M(jìn)

行危險度評估，其中最重要的是專業(yè)判斷。危險度評估應(yīng)當(dāng)由那些對所涉及的微生物特性、設(shè)備

和規(guī)程、動物模型以及防護(hù)設(shè)備和設(shè)施最為熟悉的人員來進(jìn)行。實驗室主任或項目負(fù)責(zé)人應(yīng)當(dāng)負(fù)

責(zé)確保進(jìn)行充分和及時的危險度評估，同時也有責(zé)任與所在機構(gòu)的安全委員會和生物安全工作人

員密切合作，以確保有適當(dāng)?shù)脑O(shè)備和設(shè)施來進(jìn)行相關(guān)的研究工作。危險度評估一旦進(jìn)行，還應(yīng)當(dāng)

考慮收集與危險程度相關(guān)的新資料以及來自科學(xué)文獻(xiàn)的其他相關(guān)的新信息，以便必要時對危險度

評估結(jié)果進(jìn)行定期檢查和修訂。

進(jìn)行微生物危險度評估最有用的工具之一就是列出微生物的危險度等級（見第1章）。然而

對于一個特定的微生物來講，在進(jìn)行危險度評估時僅僅參考其危險度等級是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，適當(dāng)時

還應(yīng)考慮其他一些因素，包括：

1、微生物的致病性和感染數(shù)量

2、暴露的潛在后果

3、自然感染途徑

4、實驗室操作所致的其他感染途徑（非消化道途徑、空氣傳播、食入）

5、微生物在環(huán)境中的穩(wěn)定性

6、所操作微生物的濃度和濃縮標(biāo)本的容量

7、適宜宿主（人或動物）的存在

8、從動物研究和實驗室感染報告或臨床報告中得到的信息

9、計劃進(jìn)行的實驗室操作（如超聲處理、氣溶膠化、離心等）

10、可能會擴大微生物的宿主范圍或改變微生物對于已知有效治療方案敏感性的所有基因技

術(shù)（見第16章）

11、當(dāng)?shù)厥欠衲苓M(jìn)行有效的預(yù)防或治療干預(yù)。

根據(jù)危險度評估過程中所明確的上述信息，可以確定所計劃開展的研究工作的生物安全水平

級別，選擇合適的個體防護(hù)裝備，并結(jié)合其他安全措施制訂標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范（standardoperating

procedure,SOP）,以確保在最安全的水平下來開展工作。

信息有限的標(biāo)本

在獲得足夠的信息以后，就能很好地進(jìn)行上述危險度評估工作。但是，也有在對相關(guān)信息了

解較少時進(jìn)行危險度評估的情況（如對于一些現(xiàn)場收集的臨床標(biāo)本或流行病學(xué)樣品），這些情況

下應(yīng)當(dāng)謹(jǐn)慎地采取一些較為保守的標(biāo)本處理方法。

1、只要標(biāo)本取自病人，均應(yīng)當(dāng)遵循標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)方法⑵，并采用隔離防護(hù)措施（如手套、防護(hù)服、

眼睛保護(hù)）。

2、基礎(chǔ)防護(hù)——處理此類標(biāo)本時最低需要二級生物安全水平。

3、標(biāo)本的運送應(yīng)當(dāng)遵循國家和/或國際的規(guī)章和規(guī)定。

下列信息可能有助于確定處理這些標(biāo)本的危險度：

1、病人的醫(yī)學(xué)資料

7

2、流行病學(xué)資料(發(fā)病率和死亡率資料、可疑的傳播途徑、其他有關(guān)暴發(fā)的調(diào)查資料)

3、有關(guān)標(biāo)本來源地的信息。

在暴發(fā)病因不明的疾病時，可能應(yīng)由國家主管部門和/或WHO制訂并在萬維網(wǎng)上公布適當(dāng)

的專門指南［如2003年發(fā)生嚴(yán)重急性呼吸綜合征(SevereAcuteRespiratorySyndrome,SARS)

時的情況］,指導(dǎo)標(biāo)本應(yīng)如何運輸以及在標(biāo)本分析忖應(yīng)按何種生物安全水平執(zhí)行。

危險度評估與遺傳修飾微生物

關(guān)于危險度評估以及遺傳修飾生物體(geneticallymodifiedorganisms,GMOs)的詳細(xì)討論見

第16章。

8

第3章基礎(chǔ)實驗室——

一級和二級生物安全水平

本手冊旨在針對危險度1?4級微生物提出不同等級生物安全水平實驗室所應(yīng)具備的最低

要求的指南和建議。雖然其中的一些建議對于某些危險度1級的生物體來說可能沒有必要，但是

這些建議對于訓(xùn)練工作人員掌握規(guī)范（安全）的微生物學(xué)操作技術(shù)（GMT）來說是必要的。

診斷和衛(wèi)生保健實驗室（以公共衛(wèi)生、臨床或醫(yī)院為基礎(chǔ)的）必須設(shè)計成二級或二級以上生

物安全水平。由于沒有一個實驗室能夠完全地控制其所接收的標(biāo)本，故實驗室的操作人員可能會

接觸比預(yù)期更高危險度的微生物，因此，在制訂生物安全計劃和政策時要注意到這種可能性。在

某些國家，臨床實驗室必須經(jīng)過認(rèn)可。全世界范圍都應(yīng)采納并實行生物安全標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)⑵。

關(guān)于一級和二級生物安全水平的基礎(chǔ)實驗室的指南，本手冊介紹得較為全面、詳盡，因為這

些指南對于各級生物安全實驗室都是最基本的。后面介紹的（第4章和第5章）三級生物安全水

平的防護(hù)實驗室和四級生物安全水平的最高防護(hù)實驗室所應(yīng)遵循的指南，則是對上述指南的修改

和補充，用于操作更危險的病原體。

操作規(guī)范

本規(guī)程中列出了最基本的實驗室操作和程序，他們是微生物學(xué)操作技術(shù)規(guī)范的基礎(chǔ)。在規(guī)劃

實驗室和國家級實驗室項目時，可以根據(jù)這些規(guī)程來制訂實驗室安全操作的書面程序。

每個實驗室都應(yīng)該采用“安全手冊”或“操作手冊”，其中定義了已知的和潛在的危害，并

規(guī)定了特殊的操作程序來避免或盡量減小這種危害。規(guī)范的微生物學(xué)操作技術(shù)是實驗室安全的基

礎(chǔ)，而專門的實驗設(shè)備僅僅是一種補充，絕不能替代正確的操作規(guī)范。下面列出了一些最重要的

概念。

進(jìn)入規(guī)定

1、在處理危險度2級或更高危險度級別的微生物時，在實驗室門上應(yīng)標(biāo)有國際通用的生物

危害警告標(biāo)志（圖1）。

2、只有經(jīng)批準(zhǔn)的人員方可進(jìn)入實驗室工作區(qū)域。

3、實驗室的門應(yīng)保持關(guān)閉。

4、兒童不應(yīng)被批準(zhǔn)或允許進(jìn)入實驗室工作區(qū)域。

5、進(jìn)入動物房應(yīng)當(dāng)經(jīng)過特別批準(zhǔn)。

6、與實驗室工作無關(guān)的動物不得帶入實驗室。

人員防護(hù)

1、在實驗室工作時，任何時候都必須穿著連體衣、隔離服或工作服。

2、在進(jìn)行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動物

的操作時，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨后必須洗手。

9

第3莫基礎(chǔ)實驗室--一級和二級生物安全水平

3、在處理完感染性實驗材料和動物后，以及在離開實驗室工作區(qū)域前，都必須洗手。

4、為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害，必須戴安全眼鏡、

面罩（面具）或其他防護(hù)設(shè)備。

5、嚴(yán)禁穿著實驗室防護(hù)服離開實驗室，（如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息

室和衛(wèi)生間）。

6、不得在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。

7、禁止在實驗室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。

8、禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。

9、在實驗室內(nèi)用過的防護(hù)服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。

生物危害

__________________________________It

授權(quán)人員方可進(jìn)入

生物安全水平：__________________

責(zé)任人，________________________

緊急聯(lián)系電話：___________________

白天電話：家庭電話：

必須得到上述責(zé)任人

的授權(quán)方可進(jìn)入

圖1張貼于實驗室門上的生物危害警告標(biāo)志

操作規(guī)范

1、嚴(yán)禁用口吸移液管。

2、嚴(yán)禁將實驗材料置于口內(nèi)。嚴(yán)禁舔標(biāo)簽。

3、所有的技術(shù)操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來進(jìn)行。

4、應(yīng)限制使用皮下注射針頭和注射器。除了進(jìn)行腸道外注射或抽取實驗動物體液，皮下注

射針頭和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。

5、出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時，必須向?qū)嶒炇抑鞴軋蟾?。實驗?/p>

應(yīng)保存這些事件或事故的書面報告。

6、必須制訂關(guān)于如何處理溢出物的書面操作程序，并予以遵守執(zhí)行。

10

第3莫基礎(chǔ)實驗室--一級和二級生物安全水平

7、污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染（采用化學(xué)或物理學(xué)方法）。根據(jù)

所處理的微生物因子的危險度評估結(jié)果，可能需要準(zhǔn)備污水處理系統(tǒng)。

8、需要帶出實驗室的手寫文件必須保證在實驗室內(nèi)沒有受到污染。

實驗室工作區(qū)

1、實驗室應(yīng)保持清潔整齊，嚴(yán)禁擺放和實驗無關(guān)的物品。

2、發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結(jié)束之后，都必須清除工作臺面的污染。

3、所有受到污染的材料、標(biāo)本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前，必須清除污染。

4、在進(jìn)行包裝和運輸時必須遵循國家和/