食用油中苯殘留量的測定　頂空-氣相色譜、質(zhì)譜法

食用油中苯殘留量的測定頂空-氣相色譜/質(zhì)譜法范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食用油中苯殘留量的頂空氣相色譜-質(zhì)譜測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于辣椒油、芝麻油、花生油、大豆油等食用油中苯殘留量的測定。規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法。術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件?？瞻谆|(zhì)與被檢測樣品同一種屬，經(jīng)脫臭脫色等精煉工序得到的精制植物油，或在室溫下經(jīng)超聲脫氣的植物油，空白基質(zhì)苯含量應(yīng)低于檢出限。原理樣品中苯在經(jīng)氣液兩相間平衡狀態(tài)下，用頂空-氣相色譜/質(zhì)譜儀進(jìn)行測定，根據(jù)保留時間與特征離子定性，內(nèi)標(biāo)法定量。試劑和材料除非另有說明，本方法所用試劑均為色譜純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。試劑甲醇（CH3OH）。N，N-二甲基乙酰胺[CH3C（O）N（CH3）2]。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)苯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：CASNo.71-43-2，分子式C6H6，100ng/μL甲醇溶液。或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。氘代苯-D6標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：CASNo.1076-43-3，分子式C6D6，純度≥99.5%?；蚪?jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制標(biāo)準(zhǔn)溶液（10μg/mL）：準(zhǔn)確移取1mL（精確至0.1mL）苯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（5.2.1）至10mL容量瓶中，使用N，N-二甲基乙酰胺稀釋并定容至10mL，避光0℃～4℃保存，有效期1個月。內(nèi)標(biāo)溶液（10μg/mL）：準(zhǔn)確稱取100mg（精確至0.1mg）氘代苯-D6標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（5.2.2）至10mL容量瓶中，使用N，N-二甲基乙酰胺稀釋并定容至10mL，避光0℃～4℃保存，有效期1個月?；|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：稱取5g（精確至0.01g）空白基質(zhì)（3.1）于頂空樣品瓶中，平行6份，分別加入苯標(biāo)準(zhǔn)溶液（5.3.1）2μL、5μL、10μL、20μL、50μL、100μL，再分別加入氘代苯內(nèi)標(biāo)溶液（5.3.2）20μL，加蓋密封，配制成含苯質(zhì)量濃度分別為4μg/kg、10μg/kg、20μg/kg、40μg/kg、100μg/kg、200μg/kg，含內(nèi)標(biāo)質(zhì)量濃度為40μg/kg的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)系列。也可根據(jù)需要配制適當(dāng)濃度范圍的標(biāo)準(zhǔn)樣品系列。保持頂空樣品瓶直立，做水平圓周振搖，使物質(zhì)充分混合。振搖過程中植物油不能接觸到密封墊，若有接觸需重新配制。儀器和設(shè)備氣相色譜-質(zhì)譜儀：配有EI源。頂空自動進(jìn)樣器：與氣相色譜-質(zhì)譜儀聯(lián)機(jī)。天平：可精確至0.0001g的精密天平，以及可精確至0.01g的稱樣分析天平。微量移液器：2μL～200μL。玻璃器皿：燒杯、容量瓶等。分析步驟試樣制備稱取植物油樣品5g（精確至0.01g）于20mL頂空樣品瓶中，加入內(nèi)標(biāo)溶液（5.3.2）20μL，加蓋密封，保持頂空樣品瓶直立，做水平圓周振搖，使物質(zhì)充分混合，作為待測試樣。振搖過程中植物油不能接觸到密封墊，如有接觸需重新制備。測定頂空進(jìn)樣器參考條件：平衡時間：30min；平衡溫度：80℃；進(jìn)樣體積：1.0mL；進(jìn)樣時間：0.5min。氣相色譜參考條件：進(jìn)樣口：200℃，分流比10：1；載氣：He，純度≥99.999%，柱流速1.0mL/min； 色譜柱：含5%苯基的甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱，柱長30m，內(nèi)徑0.25mm，膜厚0.25μm，或性能相當(dāng)者； 柱溫：40℃，保持5min，以10℃/min速率升至200℃。質(zhì)譜參考條件：溫度：接口230℃，四級桿150℃，離子源230℃；掃描方式：選擇性離子掃描（SIM）。定性與定量在相同實驗條件下進(jìn)行樣品測定時，如果檢出色譜峰的保留時間與標(biāo)準(zhǔn)樣品一致，并且在扣除空白后的樣品質(zhì)譜圖中，目標(biāo)化合物的定量與定性離子均出現(xiàn)，而且同一檢測批次，對同一化合物，樣品中目標(biāo)化合物的定性離子和定量離子的相對豐度與質(zhì)量濃度相當(dāng)?shù)幕|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)，其允許偏差不超過表1規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在目標(biāo)化合物。相對離子豐度最大允許偏差相對離子豐度＞50%20%～50%（含）10%～20%（含）≤10%最大允許偏差±10%±15%±20%±50%苯、氘代苯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的保留時間、定量離子、定性離子見附錄A，典型離子流圖見附錄C。采用內(nèi)標(biāo)-校準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量測定。將配制好的標(biāo)準(zhǔn)溶液上機(jī)分析，以苯與內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量濃度比為橫坐標(biāo)，苯峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積比為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將制備好的試樣上機(jī)分析，以其峰面積根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算出試樣中苯含量。當(dāng)試樣中苯含量超出線性范圍時，可適當(dāng)減少稱樣量，并使用N，N-二甲基乙酰胺對樣品進(jìn)行稀釋、補(bǔ)足至5g?？瞻讓嶒炇褂肗，N-二甲基乙酰胺對樣品進(jìn)行稀釋時，應(yīng)進(jìn)行空白實驗。除不稱取試樣外均按上述步驟進(jìn)行。結(jié)果計算和表述試樣中苯含量由色譜數(shù)據(jù)處理軟件或按式（1）計算獲得： （SEQ標(biāo)準(zhǔn)自動公式\*ARABIC1）式中：X——試樣中苯含量，單位為微克每千克（μg/kg）；c——從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到的試樣溶液中苯的質(zhì)量濃度，單位為微克每千克（μg/kg）；f——稀釋系數(shù)。計算結(jié)果應(yīng)扣除空白值，保留2位有效數(shù)字；含量超過100μg/kg時，保留3位有效數(shù)字。精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測XX果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。定量限和回收率檢測限和定量限本方法檢測限為1.0μg/kg，定量限為4.0μg/kg?；厥章试?μg/kg、50μg/kg、100μg/kg三個添加濃度水平下，苯在不同基質(zhì)中的添加回收率數(shù)據(jù)見附錄B。

（資料性附錄）

苯、氘代苯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定性、定量信息苯、氘代苯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的保留時間、定量離子、定性離子見表A.1。苯、氘代苯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的保留時間、定量離子、定性離子中文名稱英文名稱保留時間min定量離子m/z定性離子m/z苯Benzene2.657850，51，52氘代苯Benzene-D62.608452，54，56

（資料性附錄）

不同基質(zhì)中苯的添加回收率不同基質(zhì)中苯的添加回收率見表B.1。不同基質(zhì)中苯的添加回收率樣品基質(zhì)添加水平μg/kg回收率辣椒油489.6%5095.7%10094.9%芝麻油4106.1%5093.7%100101.5%花生油495.2%5091.0%1009