啤酒中雙乙酰的測(cè)定法

啤酒中雙乙酰的測(cè)定法第一頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期日物理性質(zhì)雙乙酰：亦稱(chēng)雙乙酰酮或2，3-丁二酮，黃色油狀液體，有苯醌氣味，稀溶液有奶油氣味，存在于茴香油和奶油中。熔點(diǎn)-3～-4℃、沸點(diǎn)88～91℃，密度（15/15℃）0.990g/cm3，溶于水，能與乙醇、乙醚混溶。當(dāng)其在啤酒中的含量超過(guò)一定濃度(0.15mg/L)時(shí)，啤酒就會(huì)出現(xiàn)一種令人不愉快的氣味，嚴(yán)重影響啤酒的風(fēng)味和口感質(zhì)量，因此在啤酒的生產(chǎn)過(guò)程中需要對(duì)其進(jìn)行控制。第二頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期日原理鄰苯二胺與聯(lián)二酮類(lèi)反應(yīng)，生成2,3-二烷喹喔啉，反應(yīng)式如下：R2C2O2+C6N2H8R2C8N2H4+2H2O2,3-二烷喹喔啉的鹽酸鹽在335nm波長(zhǎng)處有最大吸收，其吸光度與聯(lián)二酮的濃度成正比，根據(jù)測(cè)得的吸光度可換算出以雙乙酰計(jì)的聯(lián)二酮含量。第三頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期日儀器和試劑儀器電子天平（0.1mg）；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（應(yīng)符合或高于GB9721要求）；半微量凱氏定氮蒸餾裝置（100mL）。

第四頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期日儀器和試劑試劑消泡劑有機(jī)硅消泡劑或甘油聚醚。4mol/L鹽酸溶液量取34mL濃HCl，用水定容至100mL。1%鄰苯二胺溶液準(zhǔn)確稱(chēng)取0.5g鄰苯二胺，溶于4mol/LHCl溶液中，并以4mol/LHCl溶液定容至50mL，貯存于棕色瓶中（宜當(dāng)天配制）。

第五頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期日儀器和試劑0.5000mg/L雙乙酰貯備液稱(chēng)取0.5000g優(yōu)級(jí)純雙乙酰，用水稀釋定容至1000mL，貯于棕色瓶中，冰箱保存（最好現(xiàn)配現(xiàn)用）。0.2500mg/mL雙乙酰標(biāo)準(zhǔn)溶液吸取雙乙酰貯備液5.00mL于25mL具塞比色管中，用水稀釋至10.0mL。

第六頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期日測(cè)定方法蒸餾

于25mL具塞比色管內(nèi)加2.5mL水，置于冷凝器下端，使冷凝器下端浸入水中。量取未除氣的啤酒100.0mL，加2~4滴消泡劑，迅速加入到已預(yù)先加熱的蒸餾器中，用少量水沖洗加樣口，并做水封。繼續(xù)加熱蒸餾至餾出液近25mL。取下比色管，以水定容至25mL，混勻。顯色分別取10.00mL餾出液，置于兩支25mL具塞比色管中，向1號(hào)管加入0.50mL1%鄰苯二胺溶液，2號(hào)管不加（做空白）。充分搖勻，放置暗處反應(yīng)20~30min。第七頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期日測(cè)定方法向1號(hào)管中加入2.00mL4mol/LHCl溶液，2號(hào)管加入2.50mL4mol/LHCl溶液，搖勻。同時(shí)準(zhǔn)確吸取0.10mL0.2500mg/mL雙乙酰標(biāo)準(zhǔn)溶液與25mL具塞比色管中，用水稀釋至10.0mL。加入0.50mL1%鄰苯二胺溶液，充分搖勻，放置暗處反應(yīng)20~30min。加入2.00mL4mol/LHCl溶液。比色于335nm波長(zhǎng)下，用2cm的石英比色皿，以空白做參比，用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)出樣品和雙乙酰標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，比色操作需在20min內(nèi)完成。第八頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期日計(jì)算聯(lián)二酮（以雙乙酰計(jì)，mg/L）=×0.625無(wú)雙乙酰標(biāo)準(zhǔn)品，可按下式計(jì)算：聯(lián)二酮（以雙乙酰計(jì)。mg/L）=A×1.2-0.01式中A——試樣的吸光度；1.2——吸光度與雙乙酰的換算系數(shù);0.01——校正數(shù)，可略去。第九頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期日討論雙乙酰不易純化，市售雙乙酰需測(cè)定純度，然后折算。蒸餾時(shí)加入試樣要迅速，勿使成分損失，而且要盡快蒸出，最好在5min內(nèi)完成。如果蒸餾器體積小，或消泡劑效果差時(shí)，可將100mL試樣分兩次蒸餾（接收在同一支比色管內(nèi)）。調(diào)節(jié)蒸汽量，控制蒸餾速度，勿使泡沫過(guò)高而被蒸汽帶出。試樣蒸餾結(jié)束后，加入稀堿液煮沸，以除去附著在容器壁上的殘?jiān)儆脽崴疀_洗至中性（pH試紙檢驗(yàn)）。顯色反應(yīng)宜在暗處進(jìn)行，如在光亮處可導(dǎo)致結(jié)果偏高。第十頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期日補(bǔ)充改進(jìn)EBC法：用4mol/mL鹽酸鄰苯二胺溶液從啤酒中收集蒸餾物，不僅使結(jié)果具有重復(fù)性，而且可以