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文檔簡介
紅色熒光蛋白紅色熒光蛋白基因基因表達基因工程:即
。
通俗的說,就是按照
,把一種生物的某種
提取出來,加以
,然后放到另一種生物的細胞里,
地改造生物的
原理:操作水平:結(jié)果:基因重組DNA分子水平定向地改造生物的遺傳性狀,獲得人類所需要的品種。基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)定向遺傳性狀一、基因工程概念“剪刀”“運載體”“針線”DNA人們的意愿基因修飾改造二、基因工程的操作工具1、“基因剪刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(簡稱限制酶)
一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列,并在特定的切點上切割DNA分子。特點:專一性作用于:磷酸二酯鍵嘗試寫出下列序列受EcoRI限制酶作用后的黏性末端
DNA被限制酶切斷后有兩個反向互補的“黏性末端”。被同一種限制酶切斷的幾個DNA具有相同的黏性末端,堿基能夠通過互補進行配對。CTTCATGGAAGTACTTAAGGGATTAATTCCCTAAACGTGCTTAAAATTCCCATTGGGTAAGGCATCTTAAAATTCCGTAGGGCATCTTAAAATTCCGTAG目的基因
被同一種限制酶切斷的幾個DNA是否具有相同的黏性末端?要想獲得某個目的基因必須要用限制酶切幾個切口?可產(chǎn)生幾個黏性末端?一個目的基因有幾個黏性末端?要切兩個切口,產(chǎn)生四個黏性末端,兩個。
是,會產(chǎn)生相同的黏性末端。
被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口,帶有幾個伸出的核苷酸,他們之間正好互補配對,這樣的切口叫黏性末端。2、“基因針線”——DNA連接酶連接酶的作用:將脫氧核糖和磷酸交替連接的DNA骨架的缺口“縫合”。CTTCATGGAAGTACTTAAGGGATTAATTCCCTAAGGCATCTTAAAATTCCGTAG連接酶連接的部位:生成磷酸二酯鍵AATTGCCTTAAG連接磷酸二酯鍵不同點:
連接酶:將DNA片段間互補配對的兩個黏性末端連接起來,使之成為一個完整的DNA分子。DNA聚合酶和DNA連接酶有何異同點?聚合酶:以一條DNA為模板,將一個一個核苷酸連接起來相同點:都是通過形成磷酸二酯鍵連接起來思考:如何將重組DNA分子送入受體細胞呢?3、基因的“運載體”(2)種類:質(zhì)粒、噬菌體和動、植物病毒等(1)作用:將
送入受體細胞外源基因存在于許多______以及__________等生物中,是擬核或細胞核外能夠
的_____________。質(zhì)粒:細菌自主復(fù)制環(huán)狀DNA分子酵母菌(3)條件:1、具有一個或多個限制酶切位點,便于與外源基因連接2、在細胞內(nèi)能自主復(fù)制且穩(wěn)定保存3、具有標記基因便于篩選重組質(zhì)粒DNA連接酶……CTTAAGCTTAAGCTTAAGCTTAAG目的基因相同的限制酶三、基因工程的操作步驟提取目的基因1直接分離基因人工合成基因方法目的基因與運載體結(jié)合2實際上是不同來源的基因重組的過程。將目的基因?qū)胧荏w細胞3受體細胞:大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動植物細胞
原理:借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。目的基因的檢測與鑒定41.下列關(guān)于基因工程的敘述中,正確的是:A.限制酶只用于提取目的基因
B.細菌體內(nèi)的環(huán)狀DNA均可作運載體
C.DNA連接酶可用于目的基因和運載體的連接
D.重組DNA分子一旦進入受體細胞,基因工程則完成.2.以下說法正確的是:A.目的基因是指重組DNA
B.一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列
C.DNA重組所用的工具酶是限制酶、連接酶和運載體
D.只要受體細胞中含有目的基因,目的基因就一定能夠成功表達小試身手四、基因工程的應(yīng)用1、基因工程在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用四、基因工程的應(yīng)用1、基因工程在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的甜椒轉(zhuǎn)魚抗寒基因的番茄不會引起過敏的轉(zhuǎn)基因大豆2、基因工程在畜牧業(yè)上的應(yīng)用生長快、耐不良環(huán)境、肉質(zhì)好的轉(zhuǎn)基因魚(中國)乳汁中含有人生長激素的轉(zhuǎn)基因牛(阿根廷)導(dǎo)入人基因具特殊用途的豬和小鼠乳汁中分泌人凝血因子IX的轉(zhuǎn)基因山羊3、基因工程在藥物研制的應(yīng)用胰島素——治療糖尿病的特效藥干擾素——抗病毒的特效藥方法特點胰島素干擾素傳統(tǒng)方法直接從生物體的組織、細胞或血液中提取產(chǎn)量低價格昂貴4~5g/100kg胰腺1mg/300L血液基因工程“工程菌”發(fā)酵工業(yè)化生產(chǎn)高質(zhì)量低成本100g/2000L大腸桿菌培養(yǎng)液20~40mg/1kg細菌培養(yǎng)物人造血液及其生產(chǎn)我國生產(chǎn)的部分基因
工程疫苗和藥物白細胞介素、溶血栓劑、凝血因子、人造血液代用品疫苗:乙肝、狂犬病、百日咳、霍亂、傷寒、瘧疾基因工程藥品4、基因工程在環(huán)境保護中的應(yīng)用利用基因工程培育的“指示生物”能十分靈敏地反映環(huán)境污染的情況,卻不易因環(huán)境污染而大量死亡,甚至還可以吸收和轉(zhuǎn)化污染物。5、基因工程的其他應(yīng)用
1.基因工程的正確操作步驟是:①使目的基因與運載體結(jié)合②將目的基因?qū)胧荏w細胞③檢測目的基因的表達是否符合特定性狀要求④提取目的基因③②④①B.②④①
③C.④①
②③
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