生物高學(xué)林基因工程

生物高學(xué)林基因工程第一頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三基因工程知識體系第二頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三難點和考點一、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶

識別特定序列，特定位點切割

黏性末端黏性末端切點切點第三頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三【例題】已知某種限制性內(nèi)切酶在一線性DNA分子上有3個酶切位點,如下圖中箭頭所指,如果該線性DNA分子在3個酶切位點上都被該酶切斷,則會產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長度的DNA片段?，F(xiàn)有多個上述線性DNA分子,若在每個DNA分子上至少有1個酶切位點被該酶切斷,則從理論上講,經(jīng)該酶酶切后,這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長度不同的DNA片段種類數(shù)是（）

A.3B.4C.9D.12第四頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三【解析】只看一個切點，可得到a和bcd或ab和cd或abc和d（6種片段），如果看兩個切點的話，會在一個切點的基礎(chǔ)上再產(chǎn)生b或c或bc（3種片段），如果看三個切點的話，沒有新片段產(chǎn)生，因此應(yīng)選C。

【答案】C第五頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三第六頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三（1）圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是TCGA，N端伸出的核苷酸的堿基序列是TGCA，則構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒A時，應(yīng)選用限制酶▲，再對▲進(jìn)行切割。第七頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三（2）若對符合設(shè)計要求的重組質(zhì)粒A進(jìn)行酶切，假設(shè)所用的酶均可將識別位點完全切開，根據(jù)圖表中的信息分析，采用BamHⅠ和PstⅠ酶切，可得到▲種DNA片斷。第八頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三第九頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三（5）對符合設(shè)計要求的重組質(zhì)粒T進(jìn)行酶切。假設(shè)所用的酶均可將識別位點完全切開，請根據(jù)圖1中標(biāo)示的酶切位點和表2所列的識別序列，對以下酶切結(jié)果作出判斷。

①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到______種DNA片斷。

②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到______種DNA片斷。AGCCC

TCGGG第十頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三

(1)將圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反應(yīng)管中有▲種DNA片段。第十一頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三(2)圖中②表示HindⅢ與BamⅠ酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得▲種重組質(zhì)粒；如果換用BstⅠ與BamHⅠ酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得▲種重組質(zhì)粒。第十二頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三二、“分子縫合針”——DNA連接酶DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。

DNA限制酶作用于磷酸二酯鍵

DNA連接酶作用于磷酸二酯鍵

DNA聚合酶作用于磷酸二酯鍵

RNA聚合酶作用于磷酸二酯鍵

DNA解旋酶作用于氫鍵第十三頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三【例題】將抗蟲棉的基因?qū)氲绞荏w細(xì)胞后，發(fā)生了如下過程：此過程中用到的條件包括()

①解旋酶②DNA聚合酶③DNA連接酶④限制酶⑤RNA聚合酶

⑥4種核苷酸⑦5種核苷酸⑧8種核苷酸

A.②、⑤、⑥B.①、⑤、⑥

C.①、⑤、⑦D.④、⑤、⑥第十四頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三三、蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程基因工程實質(zhì)通過改造基因，以定向改造或生產(chǎn)人需要的蛋白質(zhì)，甚至是自然界不存在的蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得符合人類需要的生物類型會生物產(chǎn)品結(jié)果可以合成自然界不存在的蛋白質(zhì)只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上，延伸出的第二代基因工程第十五頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三【例題】胰島素可以用于治療糖尿病，但是胰島素被注射到人體后，會堆積在皮下，要經(jīng)過較長的時間才能進(jìn)入血液，而進(jìn)入血液的胰島素又容易分解，因此，治療效果受到影響。如圖是用蛋白質(zhì)工程設(shè)計速效胰島素的生產(chǎn)過程，請據(jù)圖回答有關(guān)問題：

（1）構(gòu)建新的蛋白質(zhì)模型是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵，圖中構(gòu)建新的胰島素模型的主要依據(jù)是

。第十六頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三四、目的基因的檢測和表達(dá)1。檢測是否插入了目的基因：DNA分子雜交

2。檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA：用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA作分子雜交

3。檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原－抗體雜交

4。個體生物學(xué)水平的鑒定：性狀鑒定，如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。第十七頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三五、基因工程與細(xì)胞工程、胚胎工程的綜合基因工程＋細(xì)胞工程＋胚胎工程第十八頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三基因工程＋植物細(xì)胞工程（植物組織培養(yǎng)）第十九頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三基因工程＋植物細(xì)胞工程（植物組織培養(yǎng)）第二十頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三植物：受體細(xì)胞一般是植物體細(xì)胞

生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因植物（如抗蟲植物）或藥物（如紫草素等）

動物：受體細(xì)胞常是受精卵或早期胚胎

生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動物（能合成人生長激素的轉(zhuǎn)基因鯉魚）或生物反應(yīng)器（轉(zhuǎn)基因小鼠尿液中提取人生長激素）或基因治療

微生物：受體細(xì)胞多為大腸桿菌

大量生產(chǎn)基因控制合成的特定蛋白質(zhì)第二十一頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期三【例題】最近，科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。請回答：

（1）基因轉(zhuǎn)移時，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入

中，原因是

。

（2）為使外源基因在后代中長期保持，可將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞的

轉(zhuǎn)入

細(xì)胞中構(gòu)成重組細(xì)胞，使其發(fā)育成與供體