胃癌標本的正確固定詳解演示文稿

胃癌標本的正確固定詳解演示文稿當前第1頁\共有32頁\編于星期四\8點（優(yōu)選）胃癌標本的正確固定當前第2頁\共有32頁\編于星期四\8點主要內容標本及時固定對生物標志物檢測的重要性胃癌手術標本固定的實踐問題當前第3頁\共有32頁\編于星期四\8點固定的意義固定是組織制片的基礎及關鍵步驟，固定是否及時、徹底，影響著整個制片過程。是標本處理過程的一個主要環(huán)節(jié)。當前第4頁\共有32頁\編于星期四\8點固定目的1、保持組織形態(tài)學特征清晰和穩(wěn)定2、阻止組織、細胞自溶與腐敗3、凝固或沉淀組織細胞內物質4、保存組織細胞抗原性5、使組織保持一定的硬度和彈性當前第5頁\共有32頁\編于星期四\8點KhouryT,etal.ModPathol2009;22:1457-1467.延遲固定導致激素受體染色減弱固定延遲時間01234567平均Q值0min10min30min1h2h4h8hERPRER、PR的平均Q值隨固定延遲時間的增加而下降當前第6頁\共有32頁\編于星期四\8點ER染色減弱的標本比例(n=58)(n=39)離體至固定時間P=0.03LiXX,etal.ModPathol2013;26,71-78.延遲固定導致激素受體染色減弱延遲2h以上時間固定，出現(xiàn)染色減弱的比例升高當前第7頁\共有32頁\編于星期四\8點+，無減弱；任一字母代表減弱，A：因細胞輪廓模糊，B：因非一致性信號；C：因核分辨不清病例編號0min10min30min1h2h4h8h過夜總的熒光減弱例數(shù)1++++A,CCA,CA,C42++++A,B,CA,B,CA,B,CA,B,C43+++++CCC34+++CCCCC55+++CB,CB,CB,CB,C56+++++CCC37++++A,BA,BA,BA,B48+++A,BA,BA,BA,BA,B59++++++++010++++++A,BA,B2總的熒光減弱例數(shù)+++3689935HER2熒光原位雜交檢測結果與固定延遲時間的關系KhouryT,etal.ModPathol2009;22:1457-1467.延遲固定導致HER2染色改變延遲1h之后，F(xiàn)ISH染色開始減弱；2h之后，統(tǒng)計學上有顯著性差異(P<0.05)當前第8頁\共有32頁\編于星期四\8點編號0min10min30min1h2h4h8h過夜1否否否否否否是是2否否否否否否否是3否否否否否否否是4否否否否否是是是5否否否否否是是是6否否否否是是是是7否否否否是是是是8否否否否否否是是9否否否否否是是是10否否否否否否否是總的受累例數(shù)00002578KhouryT,etal.ApplImmunohistochemMolMorphol2012;20:531-542.總體組織形態(tài)學改變情況延遲固定導致組織形態(tài)學改變延遲固定2h標本開始出現(xiàn)明顯的組織形態(tài)學改變，延遲固定8h和過夜的標本發(fā)生組織形態(tài)學改變的幾率最高當前第9頁\共有32頁\編于星期四\8點0min10min30min1h2h4h8hONE-cadherin230230230230208204204204EGFR202020203311與延遲固定時間相關的膜標志物的表達(中位值)ON：過夜延遲固定導致EGFR和E-cadherin表達改變KhouryT,etal.ApplImmunohistochemMolMorphol2012;20:531-542.EGFR和E-cadherin表達水平自延遲固定2h起開始下降延遲固定時間190195200205210215220225230235ON8h4h2h1H30min10min0scoreE-cadherin染色評分隨延遲固定時間的變化當前第10頁\共有32頁\編于星期四\8點延遲固定導致Ki-67表達改變彌漫性染色病例所有病例延遲固定時間延遲固定對Ki-67的影響050100150200250ON8h4h2h1h30min10min0minKi-67表達水平在延遲固定4h和8h出現(xiàn)下降KhouryT,etal.ApplImmunohistochemMolMorphol2012;20:531-542.當前第11頁\共有32頁\編于星期四\8點手術切除標本的有絲分裂象較活檢標本平均高出3倍多(20±6vs6±2有絲分裂/10個高倍視野,P=0.008)；而兩者間MIB-1免疫染色的腫瘤細胞比例則相當有絲分裂象計數(shù)采用MIB-1免疫組化檢測評估乳腺癌的增殖指數(shù)活檢標本手術切除標本有絲分裂/10HPF活檢標本手術切除標本MIB-1(占腫瘤細胞的比例)LehrHA,etal.ModernPathology2012:1-7.延遲固定導致腫瘤生物學特點改變手術切除標本有絲分裂象增加源自固定延遲：活檢標本自離體至固定的時間為15~30min，而手術切除標本則需數(shù)個小時當前第12頁\共有32頁\編于星期四\8點主要內容標本及時固定對生物標志物檢測的重要性胃癌手術標本固定的實踐問題當前第13頁\共有32頁\編于星期四\8點手術標本及時固定的時間SEOM/SEAP胃癌HER2檢測共識1手術標本應在切除后30min內固定中國胃癌HER2檢測指南2規(guī)范的標本固定是HER2檢測質量的保障，能使組織形態(tài)保存良好，防止細胞內蛋白和核酸的降解所有標本應在離體后20~30min內進行標記、切開、固定等初步處理WernerM,etal3

標本應在手術切除后30min內盡快地固定，器官和實體瘤應予以切開以確保固定液快速滲透1.Gómez-MartínC,etal.ClinTranslOncol2011;13:636-651.2.《胃癌HER2檢測指南》編寫組.ChinJPathol2011;40:553-557.3.WernerM,etal.AmJSurgPathol2000;24(7):1016-1019.SEOM/SEAP：西班牙內科腫瘤學會和西班牙病理學家學會當前第14頁\共有32頁\編于星期四\8點據(jù)報道約20％的進展期胃癌有HER2過表達或擴增。一項國際多中心隨機對照Ⅲ期臨床研究(TOGA試驗)的結果顯示，化療聯(lián)合針對HER2的曲妥珠單抗治療可顯著延長進展期胃癌患者的生存期，基于這一結果，2010年歐洲藥品管理局及美國食品和藥品管理局(FDA)先后批準化療聯(lián)合使用曲妥珠單抗治療HER2陽性胃及胃和食管交界處癌(以下統(tǒng)稱胃癌)患者。《胃癌HER2檢測指南》當前第15頁\共有32頁\編于星期四\8點準確的胃癌HER2表達和基因擴增檢測結果是進展期胃癌HER2靶向治療患者篩選和療效預測的前提《胃癌HER2檢測指南》當前第16頁\共有32頁\編于星期四\8點一、HER2檢測方法包括免疫組織化學染色(IHC)和原位雜交(inhibridization)技術，后者包括熒光原位雜交(FlSH)和雙色銀染原位雜交(DSISH)。FSH和DSISH兩種檢測方法符合率高。各有特點，其中DSISH是一種亮視野下檢測HER2基因擴增的方法，易于觀察，被認為更具有實際應用價值。本指南推薦IHC與FSH和DSISH相結合的檢測策略?！段赴〩ER2檢測指南》當前第17頁\共有32頁\編于星期四\8點二、HER2檢測適宜范圍

有可能進行曲妥珠單抗治療的進展期胃癌有必要行準確的HER2檢測?！段赴〩ER2檢測指南》當前第18頁\共有32頁\編于星期四\8點三、檢測流程和結果判斷1．HER2狀態(tài)檢測首先選用IHC法。2．IHc3+的病例判斷為HER2陽性，無需進一步做原位雜交檢測。3．IHC1+和O的病例，判斷為HER2陰性，無需進一步做原位雜交檢測。4．IHC2+的病例為不確定病例，需進一步行原位雜檢測，如原位雜交陽性，判斷為HER2陽性；如原位雜交陰性，判斷為HER2陰性?！段赴〩ER2檢測指南》當前第19頁\共有32頁\編于星期四\8點《胃癌HER2檢測指南》對固定的要求當前第20頁\共有32頁\編于星期四\8點免疫組化檢測固定較差示例：胃癌固定不完全會導致假陽性檢查結果細胞質染色可能由于使用了不適當?shù)墓潭ǚ绞綀D片由TargosMolecularPathology.提供當前第21頁\共有32頁\編于星期四\8點30分鐘內：應當完成什么？

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當前第23頁\共有32頁\編于星期四\8點組織處理不良示例未剪開固定固定液比例不足當前第24頁\共有32頁\編于星期四\8點組織處理規(guī)范示例剪開手術標本供圖：紹興市人民醫(yī)院病理科當前第25頁\共有32頁\編于星期四\8點組織處理規(guī)范示例釘于標本板上供圖：紹興市人民醫(yī)院病理科當前第26頁\共有32頁\編于星期四\8點組織處理規(guī)范示例供圖：紹興市人民醫(yī)院病理科當前第27頁\共有32頁\編于星期四\8點組織處理規(guī)范示例浸泡于足量的固定液中供圖：紹興市人民醫(yī)院病理科當前第28頁\共有32頁\編于星期四\8點組織處理規(guī)范示例準確記錄離體時間和固定(開始)時間供圖：紹興市人民醫(yī)院病理科當前第29頁\共有32頁\編于星期四\8點30分鐘內：