細(xì)胞周期即時(shí)檢測(cè)試劑盒

凱基細(xì)胞DNA含量(細(xì)胞周期)即時(shí)檢測(cè)試劑盒(CellCycleDetectionKit)Catnumber：KGA ForResearchUseOnlyStoreat4°CforoneyearExpiredate：一、試劑盒說(shuō)明細(xì)胞周期（cellcycle）是指連續(xù)分裂細(xì)胞從一次有絲分裂結(jié)束到下一次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷的整個(gè)過(guò)程，分為間期（interphase）和有絲分裂期（Mphase）,細(xì)胞間期又常劃分為休眠期（G0）,DNA合成前期（Gl）,DNA合成期（S）,DNA合成后期（G2）,整個(gè)周期可表示為G1-S-G2—M。DNA周期檢測(cè)可用來(lái)反應(yīng)細(xì)胞周期的各個(gè)期的狀況，即細(xì)胞增殖狀況。利用細(xì)胞內(nèi)DNA能夠和熒光染料（如碘化丙啶--PI）結(jié)合的特性，細(xì)胞各個(gè)時(shí)期其DNA含量不同從而結(jié)合的熒光染料不同，流式細(xì)胞儀檢測(cè)的熒光強(qiáng)度也不一樣。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，由于胞漿和染色質(zhì)濃縮、核裂解，產(chǎn)生凋亡小體，使細(xì)胞的光散射性質(zhì)發(fā)生變化。在細(xì)胞凋亡的早期，細(xì)胞對(duì)前向角光散射的能力顯著降低，對(duì)900角光散射的能力增加或沒(méi)有變化。在細(xì)胞凋亡的晚期，前向角和900角光散射的信號(hào)均降低。因此可通過(guò)流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞光散射的變化觀察凋亡細(xì)胞。用PI對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，凋亡細(xì)胞由于總DNA量降低，于正常G0/G1細(xì)胞群前出現(xiàn)一DNA低染細(xì)胞群，即G1峰前出現(xiàn)亞二倍體峰（sub-q），細(xì)胞凋亡群。本劑盒利用各個(gè)組份的作用可溶解細(xì)胞膜的脂類物質(zhì)，去除細(xì)胞碎片和核蛋白，消化細(xì)胞內(nèi)RNA，穩(wěn)定核染色質(zhì)，得到較純的細(xì)胞核。不需傳統(tǒng)固定，半小時(shí)即可上機(jī)檢測(cè)。本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞（懸浮、貼壁）的DNA含量（細(xì)胞周期）檢測(cè)。二、試劑盒組份組份KGA513(20assays)KGA514(50assays)儲(chǔ)存條件SolutionBuffer25.0mL50.0mL4CSolutionA5.0mL12.5mL4CSolutionB4.0mL10.0mL4CSolutionC4.0mL10.0mL4C避光三、試劑盒以外自備儀器和試劑流式細(xì)胞儀、低速離心機(jī)、微量移液器、1.5mLMicrotube、70%乙醇、PBS四、 使用注意事項(xiàng)微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。SolutionC中含有PropidiumIodide（PI）有毒，操作時(shí)要戴手套。五、 操作方法用適當(dāng)?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)細(xì)胞凋亡，同時(shí)設(shè)立陰性對(duì)照組，并收集細(xì)胞106個(gè)；用1mLPBS重新懸浮細(xì)胞，2000rpm，5min離心，小心移去上清液；加入0.5mLSolutionBuffer輕輕懸浮細(xì)胞（不要?jiǎng)×艺袷帲?000rpm，5min離心，小心移去上清液；再加入0.5mLSolutionBuffer輕輕懸浮細(xì)胞（不要?jiǎng)×艺袷帲?000rpm，5min離心，小心移去上清液； I 加入250口LSolutionA，輕輕懸浮細(xì)胞（不要?jiǎng)×艺袷帲?5C孵育10min；溶液中加入200口LSolutionB，輕輕懸浮細(xì)胞（不要?jiǎng)×艺袷帲?5C孵育10min；最后加入200口LSolutionC，輕輕懸浮細(xì)胞（不要?jiǎng)×艺袷帲?C避光10min；上機(jī)檢測(cè)，記錄激發(fā)波長(zhǎng)488nm處紅色熒光。

凱基相關(guān)產(chǎn)品（詳見凱基網(wǎng)站）細(xì)胞株、細(xì)胞提取物及細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品人類腫瘤細(xì)胞株 動(dòng)物腫瘤細(xì)胞株正常細(xì)胞株腫瘤耐藥細(xì)胞株細(xì)胞提取物（RNA/DNA/蛋白）細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品細(xì)胞凋亡一、細(xì)胞凋亡研究試劑盒□AnnexinV-FITC/EGFP/PE細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒□TUNEL凋亡原位檢測(cè)系列試劑盒□ Caspase（2、3、6、8、9）系列細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒□ 線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒（JC-1）□ TRAP-PCR端粒酶活性檢測(cè)試劑盒□DNALadder檢測(cè)試劑盒二、細(xì)胞凋亡相關(guān)抗體三、凋亡誘導(dǎo)劑、抑制劑四、氧化應(yīng)激損傷檢測(cè)試劑盒五、細(xì)胞凋亡研究輔助試劑細(xì)胞增殖/毒性/活力與細(xì)胞周期□ 凱基細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒□ MTT、XTT、WST-1、CCK-8、SRB等系列細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒細(xì)胞染色產(chǎn)品□活細(xì)胞/凋亡細(xì)胞/壞死細(xì)胞鑒別試劑盒（AO/EB法.熒光顯微鏡）□ 凱基細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢